TRANSCRIPCIÓN
Transcripción
Transcripción Traducción
Replicación ADN ARN PROTEÍNAS
Unidad de transcripción
En eucariotas un gen, en procariotas pueden ser varios juntos (comparten promotor).
Transcripción vs. Replicación
•Asimétrica: solo una hebra se transcribe
•Es independiente para cada gen
•Ocurre en sentido contrario a cada hebra (sentido 5´-3´)
no requiere cebador
rio arriba
rio abajo
Procariotas vs. Eucariotas
Procariotas Eucariotas
El proceso es mas simple El proceso es mas complejo
Se puede transcribir todo el DNA en Solo se puede transcribir el DNA que
cualquier momento constituye la eucromatina
Se transcribe la mayor parte del DNA La mayor parte de DNA genómico no se
genómico transcribe (solo se transcribe el 35%)
El RNA transcrito primario es funcional. El RNA transcrito primario sufre en el
(no precisa maduración núcleo el proceso de maduración o
postranscripcional) procesamiento postranscripcional
Los mRNA se utilizan inmediatamente Los mRNA maduros deben ser
como molde para la traducción transportados al citosol para participar
de la traducción.
Interviene un solo tipo de RNApol Intervienen 3 tipos de RNApol (I II III)
que sintetizan los distintos tipos de RNA
Procariotas vs. Eucariotas
Transcripción
Las secuencias de ADN son copiadas a ARN mediante una enzima llamada ARN
polimerasa que sintetiza un ARN mensajero que mantiene la información de la secuencia
del ADN.
ETAPAS:
Iniciación
Elongación
Terminación
Transcripción
INICIACIÓN
➢ Se necesitan factores de transcripción: unen a secuencias específicas de ADN para
reconocer el sitio donde la transcripción comenzará.
➢ Helicasa separa las hebras de ADN
➢ Acceso de la ARN polimerasa al molde de ADN de cadena simple
ELONGACIÓN
➢ La ARN polimerasa cataliza la elongación de cadena del ARN
TERMINACIÓN
➢ Señalizada por la información contenida en sitios de la secuencia del ADN que se está
transcribiendo.
ARN polimerasas
PROCARIOTAS (E. coli) EUCARIOTAS
RNA
ESTRUCTURA:
polimerasas Genes transcriptos
RNA pol I rRNA (28S, 5,8S y 18S)
•α ensambla la enzima mínima y se une a proteínas reguladoras RNA pol II mRNA, snRNA, hnRNA
tRNA, rRNA(5S) y otros
•β polimerasa (sitio catalítico) RNA polIII snRNA
•β´se une al DNA molde
•ω (posible, no confirmado)
•σ reconoce al promotor e inicia la síntesis
Iniciación
Factor sigma
Los factores sigma o factores σ son proteínas que se
encuentran en procariontes como subunidades de la ARN
polimerasa. Le permiten reconocer las secuencias
promotoras del ADN para iniciar la transcripción.
Reconocen un promotor con secuencias conservadas en
posiciones -10 y -35
Iniciación
Eucariotas
La ARN polimerasa en las células no se une directamente a los
promotores como la ARN polimerasa de bacterias, sino que
proteínas auxiliares llamadas factores basales de la transcripción
se unen primero al promotor y ayudan a la ARN polimerasa de las
células a sujetarse del ADN.
Muchos promotores eucariontes tienen una secuencia llamada
caja TATA que juega un papel muy parecido al elemento
en las bacterias. La reconoce uno de los factores generales de
transcripción, y esto permite que se unan otros factores de
transcripción y finalmente la ARN polimerasa. Contiene además
muchas As y Ts, lo que facilita la separación de las hebras de ADN.
Elongación
Una vez colocada la ARN polimerasa en su posición sobre el
promotor, puede comenzar el siguiente paso de la trascripción: la
elongación. La elongación básicamente es la etapa donde la
hebra de ARN se alarga al agregar nuevos nucleótidos.
Durante la elongación, la ARN polimerasa "camina" sobre una
hebra del ADN, conocida como la hebra molde, en la dirección 3' a
5'. Por cada nucleótido en el molde, la ARN polimerasa agrega un
nucleótido de ARN correspondiente (complementario) al extremo
3' de la hebra de ARN.
Terminación
Bacterias
Rho-depediente: el ARN contiene un sitio de unión para una proteína llamada factor rho. El factor rho se une a esta secuencia
y comienza a "desplazarse" por el transcrito hacia la ARN polimerasa.
Cuando alcanza a la polimerasa en la burbuja de transcripción, rho separa el transcrito de ARN del molde de ADN y libera la
molécula de ARN, de tal forma que termina la transcripción. Otra secuencia que se encuentra más adelante en el ADN,
conocida como el punto de terminación de la transcripción, provoca que la ARN polimerasa haga una pausa y así ayuda a que
rho la alcance
Terminación
Rho-independiente: depende de secuencias específicas en la hebra molde del ADN. Conforme la ARN polimerasa se acerca al
final del gen que se está transcribiendo, llega a una región rica en nucleótidos C y G. El ARN transcrito de esta región se dobla
sobre sí mismo y los nucleótidos G y C complementarios se unen entre sí. Esto da como resultado una horquilla estable que
causa que la polimerasa se detenga.
-Hairpin
rico en CG:
disminuye o
detiene la
actividad de
la ARN pol
-Región rica
en U al final:
desestabiliza
el híbrido
En un terminador, a la horquilla le sigue un tramo de nucleótidos U en el ARN, que se
ADN-ARN
emparejan con nucleótidos A en la plantilla de ADN. La región complementaria de U-A del
transcrito de ARN forma solo una débil interacción con la plantilla de ADN. Esto, junto con
-7-9 pb entre cada
la polimerasa detenida, produce suficiente inestabilidad para que la enzima caiga y se
estructura
libere el nuevo transcrito de ARN
Gen Eucariota
Maduración del ARNm
• Splicing
• Capping 5´
• Poliadenilación 3´
Maduración del ARNm
Bacterias
Maduración del ARNm
El cap 5' y la cola de poli-A
Ambos extremos de un pre-ARNm se modifican con la adición de grupos químicos. El grupo del inicio (extremo 5') se llama
cap y el grupo del final (extremo 3') se llama cola. El cap y la cola protegen el transcrito, ayudan a que sea exportado del
núcleo y traducido en los ribosomas que se encuentran en el citosol.
El cap 5' se agrega al primer nucleótido del transcrito durante la transcripción. El cap es un nucleótido modificado de
guanina (G) que protege al transcrito de la degradación. También ayuda al ribosoma a unirse al ARNm y a comenzar a leerlo
para hacer una proteína. Se añade cuando el transcripto alcanza una longitud de 30 bases.
Cuando durante la transcripción aparece una secuencia llamada señal de poliadenilación en la molécula del ARN , una
enzima corta el ARN en dos en ese sitio. Otra enzima añade nucleótidos de adenina (A) en el extremo cortado para formar
una cola de poli-A. La cola le brinda al transcrito mayor estabilidad y lo ayuda a ser exportado del núcleo hacia el citosol
Maduración del ARNm
El splicing consiste en la eliminación de intrones, interviene el espliceosoma.
Maduración del ARNm
Splicing alternativo
Maduración del ARNm