UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA .
QUIMICA FARMACEUTICA BIOLOGICA
Laboratorio de Microbiología General 1
Práctica 7: Morfología microscópica (Tinciones)
EQUIPO 4:
● Lemus Mendoza Lesly
● Lopez Hernández Ximena
● Machuca Jiménez Kevin
● Martínez Fabián Fernanda
GRUPO: 2652
PROFESORA: Beatriz Elena Arellano Pimentel
Ciudad de México a 24 de Febrero de 2025
OBJETIVOS
● Conocer los diferentes tipos de tinciones y colorantes para realizar el análisis
microscópico de una muestra, observando la morfología microscópica del
microorganismo y sus afinidades tintoriales.
INTRODUCCIÓN
El estudio de la morfología microscópica de los microorganismos es una herramienta
esencial en microbiología, ya que permite su identificación y clasificación con base en
sus características estructurales y tintoriales. Para ello, se emplean diversas técnicas de
tinción que resaltan la forma, el tamaño y otras estructuras celulares específicas, lo que
facilita su observación bajo el microscopio. Estas tinciones se basan en la interacción de
colorantes con los componentes celulares de los microorganismos, lo que permite
diferenciar entre distintas especies y agruparlas según sus características.
Las tinciones pueden clasificarse en simples, diferenciales y especiales. La tinción
simple emplea un único colorante para destacar la morfología general de las bacterias,
facilitando la observación de su forma y agrupación. Por otro lado, la tinción diferencial
utiliza más de un colorante para discriminar entre distintos tipos de microorganismos.
Un ejemplo clásico es la tinción de Gram, desarrollada por Hans Christian Gram en 1884,
que separa a las bacterias en Gram positivas y Gram negativas según la composición de
su pared celular. Este método se basa en la retención del cristal violeta en la pared
celular bacteriana, con la ayuda del lugol, y su decoloración con alcohol-acetona,
seguida de la aplicación de un colorante de contraste, como la safranina. Otra tinción
diferencial importante es la tinción de Ziehl-Neelsen, utilizada para la identificación de
bacterias ácido-alcohol resistentes, como Mycobacterium tuberculosis, debido a la alta
cantidad de ácidos micólicos en su pared celular.
Además de estas tinciones, existen las tinciones especiales, diseñadas para resaltar
estructuras específicas de los microorganismos. Por ejemplo, la tinción de esporas con
verde de malaquita permite identificar estructuras de resistencia en bacterias del
género Bacillus y Clostridium, mientras que la tinción de cápsulas con rojo Congo o la
tinción negativa con tinta china permiten visualizar la cápsula bacteriana, una
estructura que contribuye a la virulencia de algunos patógenos. Otras tinciones
especiales incluyen aquellas destinadas a la observación de flagelos y gránulos
metacromáticos, importantes en la caracterización de ciertas bacterias.
El uso adecuado de estas técnicas no solo facilita la identificación de microorganismos,
sino que también es fundamental en el diagnóstico microbiológico en laboratorios
clínicos, ambientales e industriales. La correcta aplicación de los métodos de tinción
permite la detección de agentes patógenos, la evaluación de muestras clínicas y la
realización de estudios epidemiológicos, contribuyendo así al control de enfermedades
infecciosas y al desarrollo de estrategias de prevención y tratamiento.
METODOLOGÍA
RESULTADOS
➢Tinciones Diferenciales:
● TINCIÓN DE GRAM
MICROORGANISMO FORMA GRAM AGRUPACIÓN EVIDENCIAS
R. equi Cocobacilar Positiva Empalizado en
letras chinas
[Link] Bacilos Negativa Cápsulas
[Link] Bacilos Negativo Racimos
B. cereus Bacilos Positivo Cadenas
P. aeruginosa Bacilos Negativo No agrupados
P. vulgaris Bacilo Negativo No agrupadas
S. aureus Cocos Positivos Racimos
E. coli Bacilo Negativo Aislados
S. flexneri Bacilo Negativo Aislados
● TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN
MICROORGANISMO IMAGEN
Mycobacterium phlei
TINCIONES ESPECIALES
TINCIÓN MICROORGANISMO IMAGEN
Tinción de Albert para R. equi
granulos metacromaticos
Tinción negativa (rojo K. pneumoniae
congo)
Shaefer Fulton B. cereus
Tinción gránulos R. equi
metacromáticos azul de
metileno de Loeefler
Tinción negativa (rojo [Link]
congo)
Tinción de Shaefer Fulton B. cereus
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Durante esta práctica se pudieron visualizar diferentes cepas de bacterias en tinciones
diferenciales y especiales. Tomando en cuenta las tinciones diferenciales que utiliza más de
un colorante para discriminar entre distintos tipos de microorganismos, primeramente
tenemos la tinción gram. Para este tipo de tinción se utilizaron bacterias de nuestro cepario,
como R. equi, [Link], [Link], B. cereus, P. aeruginosa, P. vulgaris, S. aureus, E.
coli y S. flexneri, estos dieron positivo a bacilos, cocos y cocobacilos, también se logra
diferenciar si son gram positivos o negativos, por otro lado, la tinción Ziehl Neelsen, se
utilizó Mycobacterium phlei.
Las tinciones especiales son diferentes debido a que cada una tiene un propósito distinto;
se utilizó una tinción de Albert la cual se basa en la propiedad de los gránulos
metacromáticos. El colorante utilizado en esta tinción se combina con los gránulos de
polifosfato presentes en el interior de la célula, dando lugar a un color diferente, mientras
que las demás partes de la célula no se tiñen con tanta intensidad o se tiñen de forma
diferente, para esta tinción se usó R. equi. Se realizó la tinción negativa (rojo congo), un
colorante ácido, tiñe el fondo de la preparación, mientras que la cápsula, por su carácter
hidrofóbico o pobremente teñible, permanece sin teñir o incolora, generando un contraste
visual, se utilizó para K. pneumoniae y [Link]. La tinción de Shaefer Fulton el colorante se
fija en la esporas debido a su naturaleza resistente al calor, mientras que las células
vegetativas, que son menos resistentes, se tiñen de manera más común con rojo safranina,
un colorante que tiñe las células vegetativas, utilizamos B. cereus. Finalmente la tinción
gránulos metacromáticos azul de metileno de Loeffler, se basa en el principio de
metacromasia, que es la capacidad de ciertos compuestos, como los gránulos, para
cambiar el color del colorante aplicado. El azul de metileno, un colorante básico, tiene la
propiedad de teñir el fondo de la preparación de un color azul, mientras que los gránulos de
volutin presentes en algunas bacterias se tiñen de rojo o violeta debido a la interacción
específica entre el colorante y los polifosfatos contenidos en los gránulos, para esta se
utilizó R. equi.
CONCLUSIONES
REFERENCIAS
[1] Madigan MT, Martinko JM, Parker J. Brock Biología de los microorganismos. 10ª ed.
Prentice Hall; 2003.
[2] Tortora GJ, Funke B, Case C. Microbiology, an introduction. 10th ed. Pearson-Benjamin
Cummings; 2008.
[3] Koneman EW. Diagnóstico microbiológico. 5ª ed. Médica Panamericana; 2008.