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Diagnóstico de Tuberculosis: Muestras y Métodos

El diagnóstico microbiológico y molecular de la tuberculosis es esencial para confirmar la presencia de Mycobacterium tuberculosis y guiar el tratamiento. Se requieren muestras adecuadas, como esputo, lavado gástrico y líquidos corporales, que deben ser recolectadas y transportadas siguiendo estrictas normas para garantizar la viabilidad del bacilo. La baciloscopia es la técnica principal para el diagnóstico rápido y control del tratamiento, utilizando coloraciones específicas para identificar los bacilos en las muestras.

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Diagnóstico de Tuberculosis: Muestras y Métodos

El diagnóstico microbiológico y molecular de la tuberculosis es esencial para confirmar la presencia de Mycobacterium tuberculosis y guiar el tratamiento. Se requieren muestras adecuadas, como esputo, lavado gástrico y líquidos corporales, que deben ser recolectadas y transportadas siguiendo estrictas normas para garantizar la viabilidad del bacilo. La baciloscopia es la técnica principal para el diagnóstico rápido y control del tratamiento, utilizando coloraciones específicas para identificar los bacilos en las muestras.

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DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO Y MOLECULAR

El diagnóstico microbiológico y molecular de la tuberculosis (TB) es


fundamental porque permite confirmar con certeza la presencia del
Mycobacterium tuberculosis, identificar la resistencia a fármacos y guiar el
tratamiento adecuado.
Para que el laboratorio pueda obtener resultados confiables no sólo es
necesario que ejecute las técnicas correctamente. También necesita recibir una
buena muestra, entendiéndose por tal la que proviene del sitio de la lesión que
se investiga, obtenida en cantidad suficiente, colocada en un envase adecuado,
bien identificada, conservada y transportada.
MUESTRAS
EL ESPUTO
Boca ancha: de no menos de 50 mm de diámetro
Capacidad entre 30 y 50 ml: para facilitar que el paciente pueda depositar la
expectoración con facilidad dentro, sin ensuciar sus manos o las paredes del
frasco y para que en el laboratorio se pueda seleccionar y tomar la partícula
más adecuada, con comodidad, para realizar el extendido.
Cierre hermético: con tapa a rosca, para evitar derrames durante el transporte
y la producción de aerosoles cuando se abre en el laboratorio.
Material plástico transparente, resistente a roturas, para poder observar la
calidad de la muestra cuando la entrega el paciente, evitar roturas y derrames
de material infeccioso y para que pueda ser desechado.
Como la eliminación de los bacilos por el esputo no es constante, es
conveniente analizar más de una muestra de cada SR para el diagnóstico de la
tuberculosis. La primera muestra puede detectar aproximadamente el 80% de
los casos positivos, la segunda agrega un 15% y la tercera un 5% más.
Se enviarán al laboratorio 3 esputos recogidos en 3 días consecutivos por la
mañana, en ayunas, y en cantidad de 5-10 ml; volúmenes inferiores pueden
disminuir la rentabilidad de la muestra. La muestra de esputo mucopurulenta,
proveniente de árbol bronquial, es la que asegura mayor probabilidad de que
se puedan observar bacilos. Cuando el enfermo no puede expectorar se podrá
recurrir a inducir el esputo (aerosol de solución salina, durante 15-20 min) o a la
realización de una fibrobroncoscopia, que permite realizar broncoaspirados
selectivos, lavados broncoalveolares y biopsias de las lesiones bronquiales. Es
importante procesar los esputos obtenidos tras la broncoscopia, ya que tienen
una buena rentabilidad.
Lavado gástrico
Se emplea especialmente en niños que no saben expectorar para detectar
bacilos en el esputo ingerido, mientras se encuentran en el estómago.
Se debe obtener matinalmente en 3 días consecutivos Se introduce una sonda
de longitud y diámetro adecuados a la edad del paciente hasta el estómago.
Una vez que la sonda llega al estómago, se aspira con jeringa muy
suavemente para que la succión no provoque daño. En caso de no obtenerse
material, se inoculan 10 a 15 ml de agua destilada o solución fisiológica estéril
y se recoge el contenido gástrico inmediatamente después, en un frasco de
tamaño adecuado.
Lavado bronquial
Tomar la muestra en una sala bien ventilada y utilizando mascarillas de
bioseguridad. Utilizar un fibrobroncoscopio esterilizado no más de15 días antes
Entregar al paciente un frasco para que recoja toda la expectoración que por
estímulo de la fibrobroncoscopía se puede producir en las 24 horas siguientes.
Esterilizar rigurosamente el fibrobroncoscopio con glutaraldehido al 2%
activado con una sustancia bicarbonatada, según las indicaciones del
proveedor. Después de la esterilización, lavar el fibrobroncoscopio
enérgicamente para desprender bacilos que puedan haber quedado adheridos.
OTRAS MUESTRAS
Todas las muestras extrapulmonares deben cultivarse:
Orina
Número de muestras: mínimo tres y máximo seis.
Cantidad y momento de recolección: el paciente debe recoger no menos de 50
ml del segundo chorro de la primera micción de la mañana. Se desecha la
primera parte para disminuir la carga de gérmenes contaminantes.
Envase: de 300-500 ml, limpio y de boca suficientemente ancha para posibilitar
la recolección directa.
Conservación: la muestra debe ser procesada inmediatamente porque el pH
ácido afecta la viabilidad del bacilo, si es necesario, conservado entre 4 y 9ºC
por no más de 12 horas hasta el momento del envío.
Líquido cefalorraquídeo
Cantidad de muestras: todas las que el médico crea conveniente; cuanto mayor
es la cantidad de muestras procesadas, mayor es la posibilidad de hallazgo de
bacilos.
Envase: estéril de 10-15 ml de capacidad y con tapa a rosca de cierre
hermético.
Conservación: es conveniente procesar el material inmediatamente o
conservado a 4º C por no más de 12 horas.
Líquidos pleural, ascítico, pericárdico, articular y otros
Número de muestras: todas las que el médico considere conveniente
Envase: estéril, de capacidad adecuada para la cantidad de la muestra
Uso de anticoagulante: puede agregarse tres gotas de citrato de sodio al 10% o
EDTA (ácido etiléndiamino tetraacético) por cada 10 ml de muestra.
Conservación: enviar lo más rápido posible al laboratorio que realizará el
cultivo, eventualmente conservar en refrigeración por no más de 12 horas.
Biopsias y material resecado
En el caso de biopsia de endometrio, la muestra debe consistir
preferentemente en raspado uterino tomado durante la primera fase del ciclo
menstrual o en el período de ovulación. Envase: estéril
Conservantes: uno o dos mililitros de solución fisiológica o agua destilada
estéril para evitar la desecación. No agregar formol porque es letal para el
bacilo, la porción de la muestra reservada para el estudio histopatológico debe
ser separada para ser preservada en formol al 10%.
Conservación: el material debe ser enviado inmediatamente al laboratorio para
su cultivo o ser conservado refrigerado y al abrigo de la luz hasta su envío.
Pus
Envase: estéril Es preferible no usar hisopos para evitar la desecación. En caso
de utilizarlos, antes de la toma de muestra deben ser humedecidos con
solución fisiológica o agua destilada estéril.
Conservación: La muestra debe ser enviada inmediatamente al laboratorio que
hace el cultivo o ser conservado refrigerado y al abrigo de la luz hasta su envío.
Sangre
La investigación de sangre está indicada para pacientes con inmunosupresión
severa, como en casos con infección por HIV con bajo recuento de linfocitos
totales o CD4, y con baciloscopias de muestras respiratorias reiteradamente
negativas.
Cantidad y momento de recolección: dos muestras de 10 ml de sangre venosa
en días consecutivos. Esterilidad y bioseguridad: utilizar guantes, desinfectar
previamente la piel del área donde se efectuará la extracción con alcohol
iodado.
Anticoagulantes: utilizar jeringas con heparina. Envase: transferir la sangre a un
tubo plástico seco estéril con tapa a rosca de cierre hermético. Conservación:
Si no puede ser enviada la muestra inmediatamente al laboratorio que la
procesará, colocar la sangre recién extraída en un frasco ampolla conteniendo
50 ml de medio de cultivo para sangre (caldo cerebro-corazón (BHI) con
anticoagulante). Incubar a 37º C hasta el momento del envío al laboratorio.
En el momento de recibir la muestra, se deben completar los siguientes
procedimientos:
 Comprobar que los envases de las muestras estén claramente
identificados en la pared y no en la tapa y cerrados herméticamente.
 Verificar que estén acompañados por el formulario de solicitud de
baciloscopia.
 Observar la calidad de la muestra a través de las paredes del envase,
sin abrirlo. Si se trata de saliva o secreción nasal es conveniente
recibirla porque, aun cuando no sea una muestra de buena calidad,
puede contener bacilos. Registrar que es saliva en el formulario. Insistir
en las instrucciones indicando al paciente que recoja otra muestra.
 Ubicar los envases dentro de cajas de plástico con tapa que pueda ser
descontaminadas con solución de hipoclorito de sodio.
La conservación y transporte de las muestras para el diagnóstico de
tuberculosis deben realizarse con estrictas normas para garantizar la viabilidad
del Mycobacterium tuberculosis y la confiabilidad de los resultados. Si la
muestra (especialmente esputo) se analiza en menos de 3 horas, puede
mantenerse a temperatura ambiente; si no, debe refrigerarse entre 2 y 8 °C
hasta su procesamiento, evitando la congelación o el calor excesivo. Para el
transporte, se utiliza el sistema de embalaje triple: recipiente primario (frasco
hermético), contenedor secundario con material absorbente, y caja externa
rotulada como "material biológico". El envío debe hacerse idealmente en
menos de 24 horas, siempre con cadena de frío y medidas de bioseguridad
adecuadas.
BACILOSCOPIA
La baciloscopia es la técnica de elección para el diagnóstico rápido y el control
del tratamiento de la tuberculosis pulmonar del adulto. Es simple, económica y
eficiente para detectar los casos infecciosos. Por eso es la herramienta
fundamental de un programa de control de la tuberculosis.
La ácido-alcohol resistencia es la propiedad que tienen las micobacterias de
captar en su pared fucsina fenicada (de color fucsia) o auramina (amarillo
fluorescente) y retenerla aun con la acción de decolorantes, como la mezcla de
ácido y alcohol. Esta característica se debe al alto contenido en lípidos,
particularmente a los ácidos micólicos, que poseen en la pared celular. Así,
utilizando una técnica adecuada es posible identificar al bacilo de la
tuberculosis en la muestra del enfermo como un bastoncito rojo fucsia o
fluorescente sobre una coloración de fondo que facilita su visualización.
Esta propiedad no es específica del bacilo de la tuberculosis, sino que la tienen
todos los bacilos del género Mycobacterium, aun las micobacterias ambientales
y otros pocos microorganismos. De todas formas, en los países de alta
endemia de tuberculosis, una baciloscopia positiva en una muestra respiratoria
de un paciente inmunocompetente tiene muy alto valor predictivo para el
diagnóstico de tuberculosis. Es decir, es muy bajo el riesgo de equivocarse al
diagnosticar tuberculosis por baciloscopia. La coloración de Ziehl-Neelsen es la
técnica más apropiada para ser utilizada en todos los laboratorios de los países
de América Latina.
LUGAR DE TRABAJO Y MATERIALES
Ubicación: Puede realizarse en laboratorios simples con microscopio
adecuado. Área preferentemente exclusiva, ventilada y bien iluminada.
Condiciones mínimas: Mesada lavable (mín. 1 x 0,5 m), lavabo con agua,
repisas y armarios para materiales. Mesas separadas para microscopio y para
registros.
Equipo básico: Microscopio con objetivo de inmersión (o fluorescencia si
aplica).
Batas exclusivas, portaobjetos nuevos, frascos ámbar, soportes para láminas,
lápiz marcador, mechero, pinza, hisopo. Aceite de inmersión sintético (no de
cedro). Soluciones antisépticas (hipoclorito 1%, fenol 5%), alcohol 70% o xilol.
Desecho seguro: Recipiente resistente con tapa o bolsa roja para residuos
patológicos. Preparación de reactivos (si aplica): Balanza, recipientes aforados,
embudo, reactivos de calidad analítica.
Preparación y fijación del extendido para baciloscopia
 Ordenar las muestras
 Marcar los portaobjetos
 Partir el aplicador
 Seleccionar la partícula más purulenta
 Depositar en el portaobjetos
 Extender la muestra uniformemente
 Fijar el extendido cuando esté totalmente seco
 Los extendidos deben ser coloreados de inmediato, ya que algunos
bacilos pueden permanecer vivos después de fijados con calor hasta
que incorporan la fucsina.
TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN
 Cubrir Con Fucsina Filtrada
 Calentar Hasta Emisión De Vapores Tres Veces Durante 5
 Minutos
 Lavar Con Agua
 Cubrir Con Decolorante Durante 3 Minutos
 Lavar Con Agua
 Cubrir Con Azul De Metileno Durante 1 Minuto
 Lavar Con Agua
 Secar Al Aire
Tinción fluorescente
Utiliza microscopios de fluorescencia (objetivo 40x) para detectar BAAR como
bastones amarillos fluorescentes. Permite observar más área en menos tiempo,
pero genera más artefactos. Baciloscopias positivas deben confirmarse con
Ziehl-Neelsen; no se puede hacer a la inversa.
Pasos para la tinción:
 Preparar extendidos finos, no más de 12 por tanda.
 Aplicar auramina-O por 15 minutos (sin calentar).
 Enjuagar con agua destilada, escurrir.
 Decolorar con alcohol-ácido por 2 minutos.
 Enjuagar con agua destilada.
 Aplicar permanganato de potasio o naranja de acridina por 2 minutos.
 Enjuagar, escurrir y dejar secar al aire y en oscuridad.
 Observar lo antes posible para evitar pérdida de fluorescencia.
OBSERVACION MICROSCÓPICA Y LECTURA DE EXTENDIDOS
La observación microscópica debe cumplir principalmente dos objetivos:
 Determinar si en el extendido hay BAAR
 Si los hay, cuantificar aproximadamente la riqueza en bacilos. Para leer

Lectura de extendidos coloreados por Ziehl-Neelsen


Los extendidos coloreados por Ziehl-Neelsen, se debe colocar una gota de
aceite de inmersión en el frotis, usar el microscopio con lente 100x y examinar
sistemáticamente cada campo, moviendo el tornillo micrométrico. Se debe
verificar la calidad del extendido y, si es necesario, repetir la baciloscopia.
Identificación de anormalidades: Verificar si los BAAR se mueven
anormalmente o si hay artefactos (restos de alimentos o suciedad) y limpiar los
equipos según sea necesario.
Conteo de campos y BAAR: Utilizar una cuadrícula de 10x10 para registrar el
número de BAAR observados en cada campo. Si no se observa BAAR en un
campo, anotarlo como 0. Número de campos a examinar según la cantidad de
BAAR:
Sumar el total de BAAR observados y dividir por el número de campos
examinados. Para cúmulos de bacilos, estimar el número de bacilos presentes.
Un campo útil debe contener células bronquiales (leucocitos, células ciliadas) o
fibras mucosas teñidas de azul. Los campos sin estos elementos no deben
considerarse a menos que contengan BAAR. Leer 100 campos microscópicos
en línea recta. Si no se encuentran los 100 campos útiles, leer una segunda
línea. Registrar los resultados, limpiar la lente de inmersión y evitar la
transferencia de material al siguiente frotis.
Lectura de frotis coloreados con fluorocromos
Los frotis fluorescentes deben leerse pronto porque la fluorescencia se
desvanece. Se observan con lente de 40x, se cuentan campos igual que en
Ziehl-Neelsen y si el resultado es positivo, se divide el promedio de bacilos
entre 4 y se confirma con la técnica Ziehl-Neelsen usando el lente 100x. Si se
observan menos de 5 BAAR en 100 campos, se debe ampliar la lectura a 200
campos. Si no se encuentran más bacilos, se hace un nuevo extendido. Si el
resultado se mantiene, se informa el número exacto de BAAR, se registra, se
solicita una nueva muestra y se envía para cultivo.
Una tinción negativa nunca excluye una tuberculosis. Para que una tinción sea
positiva es necesario que el número de BAAR en el esputo sea de 5.000-
10.000/ml.
Informe de los resultados

CULTIVO
El cultivo es más sensible que la microscopía porque detecta tan solo 10
bacilos por mL, por lo que es útil para confirmar el diagnóstico, controlar el
tratamiento y estudiar resistencias.
Las muestras se dividen en dos tipos:
 De zonas estériles (como líquido pleural o cefalorraquídeo): se siembran
directamente en el medio de cultivo.
 De zonas con bacterias normales (como esputo u orina): deben
descontaminarse antes del cultivo para evitar que otras bacterias
interfieran.
Se usan medios sólidos y líquidos. Usar ambos mejora la detección. Los
cultivos se incuban a 35–37 °C por 6 a 8 semanas. La contaminación aceptable
en cultivos sólidos es del 3–5%. Más del 5% indica mala descontaminación;
menos del 3%, que fue muy agresiva y puede haber dañado la muestra. En
cultivos líquidos no hay un rango estándar de contaminación.
1. Medios de cultivo sólidos
 Usan huevo coagulado (Löwenstein-Jensen, Coletsos) o agar
(Middlebrook 7H10/7H11).
 Permiten ver la morfología de las colonias (forma, color, rugosidad), lo
que ayuda a identificar la especie.
 Las colonias de M. tuberculosis aparecen a las 2–3 semanas.
 Se recomienda incubar a 35–37 °C y revisar los tubos 1–2 veces por
semana.
 Desventaja: crecimiento lento.
2. Medios de cultivo líquidos
Ventaja: detectan bacilos 2–3 semanas antes que los sólidos. Mayor costo.
Requiere equipamiento automatizado. Necesita condiciones más estrictas de
control de calidad.
Los sistemas automatizados como el MGIT (Mycobacteria Growth Indicator
Tube) permiten un crecimiento más rápido de las micobacterias en un medio
líquido, reduciendo el tiempo necesario para obtener resultados. Los cultivos en
medios líquidos pueden detectar Mycobacterium tuberculosis en 10-14 días.
Crecimiento positivo: Señal fluorescente que indica metabolismo activo de
micobacterias. Requiere confirmación con pruebas específicas (como tinción de
Ziehl-Neelsen y pruebas moleculares). Negativo: Si no hay señal después del
periodo de incubación completo.
PCR EN TIEMPO REAL (GENEXPERT)
La prueba de PCR en Tiempo Real es una prueba diagnóstica in vitro de PCR
semicuantitativa, integrada y en tiempo real que se utiliza para:
1) la detección de compuestos de ADN de Mycobacterium tuberculosis en
muestras de esputo o en sedimentos concentrados preparados a partir de
esputos expectorados cuyas extensiones sean tanto positivas como negativas
para bacilos ácido-alcohol resistentes (BAAR).
2) la detección de mutaciones asociadas a la resistencia a la rifampicina del
gen rpoB en muestras de pacientes susceptibles de presentar resistencia a la
rifampicina.
Es decir, nos permite la obtención de dos resultados fundamentales que son el
diagnóstico de MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS, y el diagnóstico de TB
RESISTENTE A RIFAMPICNIA.
Tipo de muestra permitida
Solo se aceptan muestras de origen broncopulmonar: Esputo, Esputo inducido,
Aspirado bronquial, Lavado broncoalveolar.
No se aceptan: sangre, orina, heces, LCR u otras muestras no respiratorias
(podrían ser consideradas en futuras versiones).
Cantidad de muestra requerida Mínimo: 3 ml Óptimo: 5 ml
Muestras no adecuadas No se aceptan: Muestras salivales Muestras con más
del 5% de sangre. Muestras con restos de alimentos o partículas sólidas
(pueden dañar el equipo) Recomendación: el paciente debe enjuagarse la boca
con agua antes de la recolección.
Educación al paciente Instruir al paciente para que proporcione una muestra:
De buena calidad (proveniente de vía aérea profunda, no saliva). En cantidad
suficiente. Cerrar bien el frasco para evitar derrames en el transporte.
Conservación y transporte Mantener la muestra entre 2–8 °C (cadena de frío).
Válida hasta por 3 días si se mantiene refrigerada. No exponer al sol ni dejar a
temperatura ambiente. Bioseguridad Lavado de manos obligatorio después de
manipular muestras (para personal y pacientes).
Transporte y logística Las muestras deben enviarse: A los laboratorios
provinciales de TB si se dispone de GeneXpert local. Al Instituto Nacional de
Higiene (Guayaquil) mediante coordinación con los INH provinciales. Asegurar
transporte con cadena de frío y medidas de bioseguridad.
INDICACIONES DE USO DEL GENEXPERT
Diagnóstico de TB (independientemente del resultado de baciloscopía):
Pacientes VIH positivos con sospecha de TB (sugerir 2 muestras). Pediátricos
con muestra broncopulmonar (sugerir 3 muestras). Sospecha de TB con BK
negativo. Otros inmunodeprimidos sintomáticos respiratorios con BK negativo.
Detección de resistencia a rifampicina (si hay baciloscopia positiva previa):
Contactos de TB resistente. Fracaso a esquema 1 o 2. Re-tratamiento:
recaídas, abandonos, tratamientos particulares. Personal de salud con TB. PPL
(personas privadas de libertad) con síntomas de TB.
Interpretación de resultados
Detecta Mycobacterium tuberculosis (MTB) mediante PCR en tiempo real,
reportando niveles semicuantitativos (alto, medio, bajo, muy bajo) según la
carga bacteriana, evaluada por el número de ciclos (Ct) (según el valor de Ct =
número de ciclos de amplificación).): a menor Ct, mayor concentración de ADN.
Todos los niveles implican diagnóstico de tuberculosis activa. Si MTB es
detectado, también puede identificar resistencia a rifampicina mediante la
detección de mutaciones en el gen rpoB, lo que sugiere tuberculosis
multirresistente (MDR-TB). Este método no diferencia entre bacilos vivos o
muertos, por lo que no es útil para evaluar la respuesta al tratamiento, ya que
puede amplificar ADN residual. Además, no detecta micobacterias no
tuberculosas (MNT) ni se ve afectado por flora bucal u otros contaminantes.
Los resultados deben ser interpretados junto con la evaluación clínica,
radiológica y otros estudios complementarios.
PRUEBAS DE SENSIBILIDAD
Identificar la presencia de resistencia a los medicamentos antituberculosos de
primera línea (Isoniazida, Rifampicina, Etambutol y Pirazinamida) y, en casos
específicos, a medicamentos de segunda línea (fluoroquinolonas,
aminoglucósidos, entre otros). Estas pruebas permiten confirmar el diagnóstico
de tuberculosis resistente (TB-R), multirresistente (TB-MDR) o extensamente
resistente (TB-XDR).
Método de las proporciones en medio sólido (Canetti)
Se basa en la observación de la proporción de colonias que crecen en
presencia de diferentes concentraciones de un antibiótico.
Proceso:
Se inocula una muestra de cultivo micobacteriano en medios sólidos que
contienen diferentes concentraciones de un antibiótico. Se compara el número
de colonias que crecen en cada medio con el número de colonias que crecen
en un medio sin antibiótico. Evalúa resistencia a drogas de primera línea:
isoniacida, rifampicina, etambutol, estreptomicina. Se realiza en cultivo de
Löwenstein-Jensen, tarda de 6 a 8 semanas.
Resultado:
 Sensible: Si el crecimiento de colonias en el medio con droga es menor
al 1% en comparación con el medio control sin droga.
 Resistente: Si el crecimiento es igual o mayor al 1%.
Método colorimétrico GRIESS (nitrato reductasa)
 La prueba se basa en la actividad de la enzima nitrato reductasa, que M.
tuberculosis utiliza para reducir el nitrato a nitrito.
 Detecta resistencia a isoniacida y rifampicina.
 Más rápido que el método de proporciones (resultados en 7–14 días).
 Utilizado para casos sospechosos de resistencia o cuando se necesita
agilizar el diagnóstico.
 Requiere laboratorio con condiciones especiales de bioseguridad.
 Detecta crecimiento bacteriano por cambio de color (rojo indica
reducción de nitrato).
Resultado:
 Sensible: No hay cambio de color o leve.
 Resistente: Cambio de color notable en el pozo con antibiótico, igual al
pozo control.
GeneXpert (Rifampicina)
La prueba GeneXpert MTB/RIF se realiza utilizando una muestra respiratoria
del paciente, generalmente esputo, que se recolecta siguiendo normas de
bioseguridad y calidad. Esta muestra se mezcla con un reactivo especial que
inactiva al bacilo y libera su material genético. Luego, se coloca en un cartucho
cerrado que contiene todos los reactivos necesarios y se introduce en el equipo
GeneXpert. El sistema automatizado realiza una reacción en cadena de la
polimerasa (PCR) en tiempo real que amplifica el ADN del Mycobacterium
tuberculosis y detecta mutaciones en el gen rpoB, responsable de la resistencia
a la rifampicina. El resultado se obtiene en aproximadamente dos horas,
indicando si hay presencia del bacilo y si es resistente o no a la rifampicina.
Esta prueba es rápida, sensible, y especialmente útil en casos de pacientes
con VIH, tuberculosis paucibacilar o sospecha de tuberculosis resistente.
Se solicitan en Casos de fracaso al tratamiento (esquema 1 o 2). Recaídas,
abandonos recuperados o pacientes retratamiento. Contactos de pacientes con
TB resistente. Personas con sospecha clínica de MDR-TB. PPL (personas
privadas de libertad) y personal de salud con TB. Pacientes con coinfección
VIH-TB con alta sospecha de resistencia. Siempre que GeneXpert reporte
resistencia a rifampicina. Muestras deben enviarse en cadena de frío (2–8 °C).
La PSD permite elegir el esquema de tratamiento adecuado y evitar fallos
terapéuticos.
PRUEBA DE LA TUBERCULINA
Para el diagnóstico de la INFECCIÓN TUBERCULOSA LATENTE por
Mycobacterium tuberculosis.
Procedimiento:
Se inyecta por vía intradérmica, en la cara interna del antebrazo, una pequeña
cantidad (0.1 ml) de derivado proteico purificado (PPD). Luego, entre 48 y 72
horas, se mide el diámetro de la induración (endurecimiento, no enrojecimiento)
en milímetros.
INDURACIÓN DE 5MM O MÁS, ES POSITIVA SI:
 Persona con VIH.
 Contacto reciente con persona con enfermedad de tuberculosis.
 RX con sospecha de enfermedad anterior.
 Transplante de órgano.
 Inmunodeprimidos.
INDURACIÓN DE 10MM O MÁS, ES POSITIVA SI:
 Nacimiento en países donde la TBC es común.
 Abuso de drogas.
 Trabajo en laboratorios de microbiología.
 Menores de 5 años de edad.
INDURACIÓN DE 15MM O MÁS, ES POSITIVA SI:
-No tienen factores de riesgo de tuberculosis conocidos.
Se considera prueba negativa cuando la induración tiene un diámetro inferior a
los indicados.

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