Agua, soluciones, disoluciones y fotocolorimetria

Univ. Genesis Briseika Cruz Ticona

Carrera de Medicina

Bioquímica

Facultad de Medicina, Enfermería, Nutrición y Tecnología Médica

Universidad Mayor de San Andrés

Aux. Abel Tintaya Chuquimia Dra. Lily Salcedo Ortiz

1. Introducción:

La bioquímica es una ciencia fundamental que se encarga del estudio de los procesos químicos que
ocurren dentro de los seres vivos. A través de esta disciplina, se pueden comprender mejor los
mecanismos celulares, metabólicos y moleculares que permiten la vida. Dentro de los temas más
básicos, pero al mismo tiempo más importantes, se encuentran el agua, las soluciones, las
disoluciones y la fotocolorimetría. Estos conceptos, aunque pueden parecer simples a primera
vista, tienen una gran relevancia tanto teórica como práctica, ya que permiten la comprensión de
fenómenos esenciales para el estudio de los sistemas biológicos.
En este informe me propongo desarrollar una introducción a estos temas, ya que forman parte del
contenido inicial de muchos cursos de bioquímica. Como estudiante, estoy empezando a entender
la importancia de dominar estos fundamentos para poder avanzar en el análisis y comprensión de
sistemas más complejos. El propósito de esta práctica y de este informe es comenzar a aplicar los
conocimientos teóricos en un contexto experimental, lo cual es clave en la formación científica.
El agua es una de las sustancias más importantes para la vida. Representa una gran parte de la
masa corporal de los seres vivos, y es el medio en el cual ocurren la mayoría de las reacciones
bioquímicas. Sus propiedades únicas, como su capacidad de disolver muchas sustancias, su
elevado calor específico, su capacidad para formar puentes de hidrógeno, entre otras, la convierten
en una molécula fundamental. En bioquímica, es imposible hablar de reacciones o procesos sin
considerar la presencia y el papel del agua. Durante la práctica se observó cómo el agua se
comporta como disolvente y cómo este comportamiento es crucial para la preparación de
soluciones y disoluciones.
Las soluciones y disoluciones son mezclas homogéneas de dos o más componentes. El
componente que se encuentra en mayor cantidad se llama disolvente (por lo general, el agua), y el
componente en menor cantidad se llama soluto. En bioquímica, trabajar con soluciones es algo
muy común, ya que muchas veces se preparan soluciones de sales, azúcares, aminoácidos,
proteínas, etc., para estudiar su comportamiento o realizar diferentes reacciones. La preparación
adecuada de soluciones requiere conocimientos sobre unidades de concentración como la
molaridad, la normalidad, y también sobre diluciones, lo cual fue parte del trabajo realizado en la
práctica. Entender cómo calcular y preparar soluciones correctamente es fundamental para obtener
resultados confiables en los experimentos.
Además de preparar soluciones, en la práctica también se introdujo el uso de una técnica
instrumental muy utilizada en bioquímica: la fotocolorimetría. Esta técnica se basa en la medición
de la absorbancia de una sustancia disuelta en solución, cuando se expone a luz de una longitud de
onda específica. La cantidad de luz absorbida es proporcional a la concentración del soluto, según
la ley de Beer-Lambert. Esto permite determinar la concentración de una sustancia en solución de
forma precisa y rápida. En la práctica se utilizó el colorímetro o espectrofotómetro para medir la
 absorbancia de diferentes soluciones, lo cual permitió construir una curva de calibración y aplicar
los conceptos aprendidos en clase.
El objetivo de esta práctica fue, por tanto, familiarizarnos con conceptos básicos pero esenciales:
comprender la importancia del agua como disolvente universal, aprender a preparar soluciones y
disoluciones con distintas concentraciones, y aplicar la fotocolorimetría para la medición de
concentraciones. Todo esto se realizó en un contexto de laboratorio, lo que permitió reforzar los
conocimientos teóricos mediante la experiencia práctica. Además, se buscó desarrollar habilidades
como el trabajo en equipo, el manejo de instrumentos básicos de laboratorio (pipetas, probetas,
colorímetros), y la interpretación de datos experimentales.
Como estudiante que está iniciando en el campo de la bioquímica, esta práctica representa un
primer acercamiento al trabajo experimental. Es importante destacar que cada concepto estudiado
aquí tiene implicancias en procesos más complejos. Por ejemplo, entender cómo se comportan las
soluciones es esencial para comprender cómo funcionan los fluidos corporales como la sangre o el
plasma. La fotocolorimetría, por su parte, es una técnica que se utiliza ampliamente en análisis
clínicos, como la determinación de glucosa o colesterol en sangre. Por eso, aunque estos temas
puedan parecer simples al principio, constituyen la base sobre la cual se construyen conocimientos
más avanzados.
En conclusión, esta introducción pretende enmarcar el contenido del informe y justificar la
relevancia del trabajo práctico realizado. Los temas de agua, soluciones, disoluciones y
fotocolorimetría son fundamentales en bioquímica, y su comprensión es clave para el desarrollo
académico y profesional de cualquier estudiante en el área de las ciencias biológicas y de la salud.
A través del estudio y la práctica de estos conceptos, es posible fortalecer las bases necesarias para
enfrentar los retos que plantea la bioquímica experimental en cursos posteriores.

2. Objetivo:

- Preparar soluciones acuosas de diferentes concentraciones (por ejemplo, sacarosa al 6%, NaCl al
0,9% y NaCl al 5%) en un volumen específico (como 80 mL), realizando los cálculos necesarios
para determinar su osmolalidad, milimoles y miliosmoles por litro.
- Extraer pigmentos naturales (como los presentes en la flor de Jamaica) y analizar su absorbancia
mediante el fotocolorímetro, identificando la longitud de onda de máxima absorción para cada
solución diluida.
- Preparar diluciones seriadas de un colorante (como el azul de metileno) en volúmenes específicos
(por ejemplo, 5 mL con proporciones 1:2, 1:4, 1:6, 1:8, 1:10), calcular sus concentraciones
basándose en un estándar conocido (como 10 ppm) y medir su absorbancia en un fotocolorímetro
para determinar la relación entre concentración y absorbancia a la longitud de onda óptima.

3. Parte experimental:
3.1. Soluciones de diferentes concentraciones y diferente osmolaridad
- Se preparó una solución al 0.9% con NaCl (80mL) y se calculó la osmolaridad
- Se preparó una solución al 5% con NaCl (80mL) y se realizó el cálculo de la osmolaridad
- Se preparó una solución al 6% con sacarosa (80mL) y se realizó el cálculo de la
osmolaridad

mOms/L
1. 0.9g/100mL x 1mol/58.5 x 1000/1mol x 1000/1 L x 2 = 307.7
2. 5g/100mL x 1 mol/58.5 x 1000/1mol x 1000/1 L x 2 = 1.709
3. 6g/100mL x 1mol/342 x 1000/1mol x 1000/1 L x 2 = 175
 Milimoles:
Mmol/80ml
1. 80mL x 0.9g/100mL x 1mol/58.5 x 1000mmol/1mol = 12.3mmol/mL
2. 80mL x 5g/100mL x 1mol/58.5 x 1000mmol/1mol = 68.37 mmol/mL
3. 80mL x 6g/100mL x 1mol/ 342 x 1000mol/1mol = 14.03 mmol/mL
Miliosmoles
mOsm/80mL
1. 80mL x 0.9g/100mL x 1 mol/58.5g x 1000 mmol/1mol x 2 osm/1mol = 24.6 mOms/mL
2. 80mL x 5g/100mL x 1 mol/58.5g x 1000 mmol/1mol x 2 osm/1mol = 136.75mOsm/mL
3. 80mL x 6g/100mL x 1 mol/342g x 1000 mmol/1mol x 1 osm/1mol = 14.03 mOms/mL

3.2. Fotocolorimetría y Ley de Lambert Beer

- Se preparó una solución de una unidad de material biológico con 300 mL de agua hervida
- Se realizó diluciones 5 mL de 1.5 %, 1.2%, 0.9%, 0.6%, 0.3%
- Se realizó la lectura de absorbancia de fotocolorímetro de las soluciones diluidas de
acuerdo a la longitud de mayor absorción
- Se preparó 10ppm de solución de azul de metileno (1 L)
- Se realizó diluciones de la solución azul de metileno 5 mL ( 1:2, 1:4, 1:6, 1:8, 1:10)
- De ambos se realizó la lectura de absorbancia en fotocolorímetro de las soluciones diluidas
de acuerdo a la longitud de mayor absorción

4. Cálculos y resultados:
Tabla 1: Calcilo de la osmolaridad, milimoles y miliosmoles de diferentes soluciones a diferentes
concentraciones
Soluciones Osmolaridad Milimoles en 80 mL mOsm/80 mL
(80mL) (mOsm/L)

NaCl 0.9% 307.7 mosm/L 12.3mmol/mL 24.6mosm/mL

NaCl 5% 1.709 mosm/L 68.37mmol/mL 136.75mosm/mL
Sacarosa 6% 175 mosm/L 14,03mmol/mL 14.03mosm/mL

Tabla 2: Obtención de la absorbancia en Flor de Jamaica a diferentes concentraciones

Solución Concentración (%) Absorvancia
(muestra = 0.025)
Material biológico 1.5 0.154
1.2 0.120
0.9 0.072
0.6 0.052
0.3 0.009
Gráfica 2: relación entre la absorbancia y la concentración de diferente disolución

Tabla 3: Obtención de la absorbancia del azul de metileno en diferentes diluciones

Solución Dilución (5mL) Concentración Absorción
Azul de metileno 1:2 5 0.099
10ppm 1:4 2.5 0.062
1:6 1.66 0.043
1:8 1.25 0.022
1:10 1 0.016

Gráfica 3: obtención de la relación entre la absorbancia y concentración a diferentes diluciones

5. Discusión de resultados:

La tabla1 muestra los resultados del cálculo de la osmolaridad, milimoles y miliosmoles de

diferentes soluciones (NaCl al 0.9%, NaCl al 5% y sacarosa al 6%) en un volumen de 80 mL. Se
observa una relación directa entre la concentración de la solución y su osmolaridad y la cantidad
de miliosmoles. La solución de NaCl al 5% presenta una osmolaridad y una cantidad de
miliosmoles significativamente mayor que la solución de NaCl al 0.9% y la solución de sacarosa al
6%. Esto se debe a que la concentración de solutos es mayor en la solución de NaCl al 5%. La
solución de sacarosa al 6%, a pesar de tener una concentración similar a la de NaCl al 0.9% en
términos de porcentaje, muestra una osmolaridad y miliosmoles menores. Esto se debe a que la
sacarosa es un soluto no electrolito, mientras que el NaCl es un electrolito que se disocia en iones
(Na+ y Cl-), contribuyendo a una mayor osmolaridad.(1)

En la Tabla 2 se observa que, conforme aumenta la concentración del extracto de flor de Jamaica
(de 0.3% a 1.5%), la absorbancia también incrementa (de 0.009 a 0.154). Esta relación lineal
indica que los compuestos responsables de la coloración —principalmente antocianinas— están
presentes en mayor cantidad conforme se concentra la solución, aumentando así su capacidad de
absorber luz a una determinada longitud de [Link] gráfica generada refuerza esta tendencia,
mostrando una curva ascendente suave, lo que sugiere un comportamiento óptico predecible del
extracto dentro del rango analizado. Es importante destacar que la absorbancia no supera 0.2, lo
que indica que las mediciones se realizaron en un rango donde los espectrofotómetros suelen
mantener una buena precisión.

De manera similar, los datos de la Tabla 3 muestran que al diluir el azul de metileno (de 5 ppm a 1
ppm), la absorbancia disminuye progresivamente (de 0.099 a 0.016). El azul de metileno, un
colorante comúnmente utilizado en estudios espectrofotométricos, también sigue la ley de Beer-
Lambert, permitiendo una relación clara entre concentración y absorción.(2)

6. Conclusiones:

En base a los datos de las imágenes, podemos concluir lo siguiente:

Objetivo 1: Se lograron preparar y calcular las propiedades osmóticas de soluciones acuosas de

NaCl al 0.9% y 5%, y sacarosa al 6%. Los resultados muestran las osmolalidades, milimoles y
miliosmoles por litro de cada solución, tal como se muestra en la Tabla 1.

Objetivo 2: Se determinó la absorbancia de extractos de flor de Jamaica a diferentes

concentraciones (Tabla 2).

Objetivo 3: Se prepararon diluciones seriadas de azul de metileno y se midió su absorbancia

(Tabla 3). Los datos muestran una relación directa entre la concentración y la absorbancia,
confirmando la ley de Beer-Lambert. A menor concentración, menor absorbancia. La precisión de
la ley de Beer-Lambert se puede evaluar mediante un análisis de regresión lineal de los datos.

7. Bibliografia:
1. [Link]
2. [Link]
8. Procedimiento en mapa conceptual:
9. Anexo: