Unidad 1
Bioseguridad – Concepto:
La OMS entiende por bioseguridad al conjunto de normas y medidas
destinadas a proteger la salud del personal frente a riesgos biológicos,
químicos o físicos a los que esté expuesto durante el desempeño de sus
funciones. De igual manera, el organismo también hace extensible el concepto
de bioseguridad a los pacientes y al propio medio ambiente.
Son principios, técnicas y prácticas aplicadas con el fin de evitar la exposición
no intencional a agentes patogénicos y toxinas, así como evitar su liberación
accidental.
EPI – Elementos de protección individual
Bata, mascarillas, cubrebocas, gafas, guantes, gorro, botas quirúrgicas.
Patógeno – Concepto:
Un patógeno es cualquier microorganismo capaz de producir una enfermedad
infecciosa.
Patogenicidad – Concepto:
La capacidad de un patógeno para producir enfermedad se conoce como
patogenicidad.
Virulencia – Concepto:
Capacidad de que tiene un microorganismo de causar daño.
Infectividad:
Capacidad de un patógeno para introducirse en nuestro organismo sobrevivir
en su interior, multiplicándose y ocasionando enfermedad.
La infectividad depende de:
-El tamaño de las dosis
-El sitio de invasión
-La sensibilidad individual
-La virulencia del agente (varia con el microorganismo y la cepa)
Agentes biológicos
Constituidos por conjuntos de microorganismos, toxinas, secreciones
biológicas, tejidos, órganos corporales de humanos, animales o vegetales.
Riesgos biológicos.
Presentes en determinados ambientes laborales, que al entrar en contacto con
el organismo puede desencadenar enfermedades infectocontagiosas,
reacciones alérgicas o también intoxicaciones.
Tipos de agentes infecciosos
-Virus: parásitos celulares, ya que necesitan introducirse en las células para
poder reproducirse, producen enfermedades como la gripe, el sida, las fiebres
hemorrágicas (ébola).
-Bacterias: organismos unicelulares procarióticos y pueden reproducirse sin
invadir otras células, producen enfermedades como tuberculosis, cólera o
legionelosis
-Protozoos: son unicelulares eucarióticos. Enfermedades: el paludismo
(malaria) y la enfermedad del sueño.
-Hongos: pueden ser unicelulares o pluricelulares. Enfermedades: pie de atleta
y la candidiasis.
CLASIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS SEGÚN GRUPOS DE RIESGO
AGENTES DEL GRUPO DE RIESGO I
Bajo riesgo individual y comunitario. Este grupo incluye aquellos
microorganismos, bacterias, hongos, virus y parásitos, que no causan
enfermedades a humanos y animales. (Ej: Lactobacillus sp.)
AGENTES DEL GRUPO DE RIESGO II
Moderado riesgo individual y riesgo comunitario limitado. Aquél que puede
causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los
trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y
existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. (Ej: Vírus de Zika,
Cândida Albicans, Hemiltos Nematodos, Stapgylococcus A.)
AGENTES DEL GRUPO DE RIESGO III
Alto riesgo individual y bajo riesgo comunitario. aquél que puede causar una
enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los
trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo
generalmente una profilaxis o tratamiento eficaz. (Ej: VIH, Sarscov2, Shigella
dysenteriae tipo 1)
AGENTES DEL GRUPO DE RIESGO IV
Alto riesgo individual y comunitario. Aquél que causando una enfermedad grave
en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas
probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista
generalmente una profilaxis o un tratamiento eficaz. (Ej: Virus Ébola)
Unidad 2
Envoltura celular grampositiva
La envoltura celular de las células grampositivas es relativamente simple.
Está constituida por 2 a 3 membranas:
1. La membrana citoplásmica.
2. Una capa de peptidoglucano gruesa
3. Algunas bacterias tienen una capa externa llamada cápsula (capa S)
Envoltura celular gramnegativa
Esta es una estructura sumamente compleja de múltiples capas.
La membrana citoplásmica (denominada membrana interna en las bacterias
gramnegativas), está rodeada de una capa laminar sencilla de peptidoglucano
a la cual está anclada una capa compleja denominada membrana externa.
Morfología bacteriana
Introducción a casos clínicos
Concepto: En el entorno médico y sanitario, un caso clínico es la presentación
comentada de la situación sanitaria de un paciente (o grupo de pacientes), que
es mostrada a modo de ejemplo individual de un fenómeno más o menos
general (de ahí el calificativo de “caso”).
El caso clínico consiste en una descripción ordenada, tanto de los síntomas y
acontecimientos que le ocurren a un paciente en ele curso de la enfermedad
como de los datos complementarios proporcionados por los procedimientos
diagnósticos, el curso del razonamiento clínico, la conclusión diagnostica, el
tratamiento empleado y la evolución del enfermo.
Presentación del caso
Un caso clínico debe redactarse en orden cronológico, Es aconsejable
comenzar describiendo con detalle, o al menos con el detalle que permitan los
límites del propio texto, la información referente a:
-la sintomatología
-la historia clínica relevante
-los dados de interés relativos a la exploración física
-los resultados de exámenes o pruebas diagnosticas
-la información correspondiente a las intervenciones terapéuticas
-el desenlace (curación o mejoría, falta de respuesta o muerte).
Unidad 3
Medio de cultivo
Llamamos a Medio de cultivo al Conjunto de sustancias necesarias para el
crecimiento y la multiplicación de microorganismos.
Clasificación de medios de cultivo
Según su origen:
SINTÉTICOS O QUÍMICAMENTE DEFINIDOS: Medios compuestos por
productos químicos conocidos y se utilizan para realizar estudios metabólicos,
por ejemplo: agar blando, caldo nutritivo, agar eosina azul de metileno, etc.
NATURALES O QUÍMICAMENTE NO DEFINIDOS: Aquellos medios que se
preparan a partir de sustancias naturales animales o vegetales, por ejemplo:
suero, leche, papa, etc.
Según su consistencia (estado físico)
Líquido: conocido como caldos por lo general se utiliza para el mantenimiento
de los microorganismos. No tiene Agar Ej. caldo nutritivo infusión cerebro-
corazón (BHI).
Sólido: Contiene Agar (sustancia de tipo polisacárido, se obtiene de algas
marinas) agregado a un medio líquido. Nos facilita obtener colonias bacterianas
aisladas.
Semisólido: similar a medios sólidos, la diferencia es que se disminuye la
cantidad de agar, permite conservar cepas bacterianas, la observación y
registro de bacterias móviles.
Según su utilización
MEDIOS SIMPLES O COMUNES: Son aquellos que poseen los componentes
mínimos para el crecimiento de microorganismos no exigentes. El más común
es el agar nutritivo o agar común que se le agrega el caldo nutritivo.
MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTOS: Aumenta la posibilidad de crecimiento de
las especies deseadas, se añaden sustancias de enriquecimiento al medio,
como sangre, suero, huevo, extracto de levadura, extracto de carne, vitaminas,
etc. Ej. Agar sangre.
MEDIOS SELECTIVOS: Inhiben ciertos M.O, mientras favorece el crecimiento
de otros que si son de interés. Se logra con químicos nocivos para bacterias
que no son de interés o mediante alteración de las condiciones físicas. EJ.
Agar Thayer-Martin selectivo para Neisseria, este posee ATB como
Vancomicina Colistina y Nistatina.
MEDIOS DIFERENCIALES: Revelan una propiedad bioquímica particular de
bacterias semejantes, que permite la identificación presunta. EJ: Agar eosina
azul de metileno (EMB), diferencia E. coli de colonias de Enterobacter
aerogenes
MEDIOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES: Se utilizan para seleccionar e
diferenciar a ciertos microorganismos. Ej: Agar MacConkey (selectivo porque
evita el crecimiento de Gram POSITIVOS y diferencial porque nos permite
identificar aquellas que son fermentadoras de lactosa)
MEDIOS DEFINIDOS QUÍMICAMENTE: Es un medio en el que se conoce la
composición exacta. EJ: Agar Manitol (Las bacterias que crecen en altas
concentraciones de sal y fermentan el manitol, producen ácidos, modificando el
PH, por lo que el rojo se vuelve amarillo)
MEDIOS REDUCTORES: Utilizados para el crecimiento de bacterias
anaerobias obligatorias, ya que tienen sustancias capaces de combinarse con
oxígeno disuelto, eliminándolo del medio de cultivo. Ej. BHI con L-cistina
MEDIOS DE TRANSPORTE: Aseguran la viabilidad de los microorganismos
desde el momento de la toma hasta su procesamiento en el laboratorio. Se
trata de medios poco nutritivos, líquidos o semisólidos que no deben potenciar
el crecimiento microbiano. Ej: Medio Stuart
Medios de cultivo más utilizados
AGAR NUTRITIVO: Este medio es bastante bueno para el cultivo de gérmenes
que no presentan exigencias particulares, no es diferencial.
AGAR SANGRE: Es un medio enriquecido que se utiliza además para la
investigación de los diversos tipos de hemólisis. Se utiliza para el crecimiento
de estreptococos.
AGAR CHOCOLATE SUPLEMENTADO: Este medio permite el crecimiento de
microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales, por ejemplo,
especies de Streptococcus, Haemophilus y Neisserias patógenas. El medio de
cultivo es ampliamente nutritivo por la presencia de peptona, tripteína, extracto
de levadura, extracto de corazón y almidón.
Agar MacConkey: Es un medio diferencial y selectivo muy utilizado para
aislamiento e identificación de enterobacterias. Llevan en su composición sales
biliares y cristal violeta que inhiben el crecimiento de gram+ y hongos.
Contienen también lactosa y rojo neutro como indicador de pH.
TÉCNICAS DE SIEMBRA
Siembra en medios sólidos
Siembra en tubos de ensayo:
1) Por picadura
2) Por Agotamiento
TÉCNICA DE SIEMBRA EN TUBO
PROCEDIMIENTO
1. Con el asa de siembra esterilizada, tomamos una pequeña cantidad de
muestra.
[Link] el tubo, flameamos su cuello e introducimos el asa de siembra
hasta el final de este, pero sin llegar a tocar el agua que se forma en la parte
inferior.
3.Y, ahora, desde el final hacia arriba, se siembra haciendo zig-zag sobre la
superficie del agar solidificado.
[Link] vez acabada la siembra, esterilizamos el asa de siembra y la dejamos
descansando
SIEMBRA EN PLACA DE PETRI
Alternativamente, para obtener una capa uniforme de crecimiento microbiano, o
colonias aisladas (después de la dilución), se utiliza el método de
"diseminación" en placa.
SIEMBRA POR ESTRÍA MÚLTIPLE
-Se tomará la muestra con el asa de siembra previamente estéril y dicha
muestra se depositará en el extremo superior de la placa, extendiéndola de un
extremo a otro, pero solo en la parte superior.
-Flameamos el asa de siembra y giramos levemente la placa, repitiendo el
proceso anterior, arrastrando una cantidad de muestra de la siembra anterior.
-Este proceso se repetirá un total de 4 o 5 veces hasta acabar la superficie de
la placa.
SIEMBRA POR AGOTAMIENTO
Primeramente, encendemos el mechero Bunsen para crear un ambiente de
esterilidad. Con cuidado, destapamos uno de los tubos con medio líquido,
flameamos su cuello, flameamos el asa de siembra e introducimos está en el
tubo, para coger el inoculo. Continuación, flameamos el cuello del tubo y lo
volvemos a tapar antes de dejarlo en la gradilla de nuevo.
Después, con sumo cuidado, abrimos la placa Petri cerca del mechero Bunsen
y sembramos el inóculo de arriba hacia abajo, sin parar hasta que nos
quedemos sin espacio. La siembra debe ser muy superficial y debe hacerse
lenta y suavemente para no dañar el agar.
Una vez acabada la siembra, cerramos la placa Petri y la apartamos para
continuar con la siguiente técnica.
Unidad 4
Esterilización – Concepto:
Destrucción total de MO, incluyendo las formas más resistentes, como las
esporas bacterianas, las micobacterias, los virus sin envoltura y los hongos.
Esterilizantes Físicos:
CALOR: Fundamento de la esterilización por calor:
-El calor actúa desnaturalizando (coagulando) las proteínas.
-El calor es uno de los agentes físicos más usados. Su acción depende de la
temperatura alcanzada y del tiempo de aplicación
FORMAS POSIBLES DE LA UTILIZACIÓN DEL CALOR COMO AGENTE
ESTERILIZANTE
1) Calor Seco:
a) Fuego directo: asas, agujas, flameado de bocas de tubos u otros recipientes
b) Horno de Pasteur: (160°-180°) durante un tiempo prolongado (1.5 a 3 horas).
Vidrios y metales.
La efectividad depende de la difusión del calor, se logra a:
-121°C por 6 horas
-140°C por 3 horas
-160°C por 2 horas
-180°C por 1 hora
c) Incineración en hornos crematorios.
2) Calor húmedo: El vapor de agua es uno de los métodos más eficaces para
destruir microorganismos y a igualdad de temperatura, es mucho más eficaz
que el calor seco (aire). etc.
a) Agua a ebullición: jeringas, agujas, ampollas, etc.
Precaución: Los gérmenes esporulados y ciertos virus no mueren con 15
minutos de ebullición.
b) Autoclave: Es el equipo más utilizado. Se realiza en a la autoclave durante
15 o 20 min a 115°C o 121°C.
-Formas de uso: La autoclave sirve para descontaminar instrumental metálico y
material de vidrio contaminado y para esterilizar material lavado y
acondicionado.
Material contaminado, ropa de uso hospitalario, material quirúrgico, catéteres,
guantes de goma, soluciones salinas, medios de cultivos.
T° 134° C a 3 atm. x 10 minutos: Para textiles de algodón.
T° 121° C a 2 atm. x 20 minutos: Instrumentos quirúrgicos, acero inoxidable,
aluminio.
-Limitaciones: No es apto para polvos, líquidos oleosos, material sensible al
calor o humedad (dispositivos eléctricos), ni instrumentos cromados.
-Envoltorios para el instrumental: Papel o Bolsas
RADIACIONES
1) Rayos gama-ionizante:
Actúan lesionando los ácidos nucleicos. Es una radiación ionizante con alto
poder de penetración, emitida por una fuente de Cobalto 60. No produce
radioactividad en los objetos esterilizados. Este proceso se realiza en plantas
de radioesterilización.
-Ventaja: No requiere monitoreo de rutina con controles biológicos
-Aplicación: Vacunas, dispositivos desechables de plástico, antibióticos,
hormonas, suturas.
2) Rayos ultravioletas– No ionizantes: no se considera esterilizante, por
excelencia.
Interfiere en el metabolismo de los organismos induciendo ionización de los
componentes vitales de la célula.
-Escasa penetración esta radiación es producida por una lámpara de Mercurio.
-Aplicación: Purificación del agua. Se utiliza en los techos de las habitaciones
(cirugía, área blanca, cabinas de bioseguridad, materiales descartables).
Esterilizantes Mecánicos
FILTRACIÓN:
-Útil para eliminar bacterias y hongos del aire.
-Filtros de alta eficiencia (HEPA).
-Estos filtros no eliminan virus y bacterias pequeñas.
CONTROLES DEL PROCESO DE ESTERILIZACIÓN
-Controles físicos
-Controles químicos
-Controles fisicoquímicos o integradores
-Controles biológicos (La cepa utilizada para autoclaves de vapor de agua es
Bacillus stearothermophilus, para el calor seco se utiliza una cepa de Bacillus
subtilis variedad niger)
“Todos los controles físicos, químicos, y biológicos son obligatorios”
CAUSAS DE FALLAS EN LA ESTERILIZACIÓN Y SUS POSIBLES
CONSECUENCIAS
1- Limpieza inadecuada del material
2- Empaquetamiento inapropiado del material
3- Carga inapropiada del esterilizador
4- Tiempo inapropiado
5- Temperatura inapropiada
6- Método inapropiado de esterilización
DESINFECCIÓN
1- Desinfectantes de alto nivel: Endoscopios, instrumentos quirúrgicos con
plásticos.
Usan: Glutaraldehído, peróxido de hidrogeno y compuestos de cloro.
2- Desinfectantes de nivel intermedio: Alcoholes, compuestos con Yodóforos,
compuestos fenólicos.
3- Desinfectantes de bajo nivel: Manguitos de presión arterial, estetoscopios
Usan: Compuestos de amonio cuaternario.
ANTISEPSIA
Uso de productos químicos sobre piel u otro tejido vivo para inhibir o eliminar
los MO.
Los antisépticos se seleccionan en base a su seguridad y eficacia.