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3⃣
1⃣
BACTERIA GRAM POSITIVA (forma esferas (cocos)) a menudo causan infecciones en la piel, pero
> pueden causar neumonía, infecciones de las válvulas cardíacas e infecciones óseas.
La infección que se contrae en un hospital se trata con antibióticos que son eficaces contra SARM.
Staphylococcus aureus Estos antibióticos son linezolid, tedizolid(oxazolidinonas), quinupristina más dalfopristina,
ceftarolina, telavancina, daptomicina y otros antibióticos
Resistente a los medicamentos Vancomicina Antibiótico glicopeptido. 2Inhiben la síntesis de la pared celular bacteriana
%
:
7
Indicada para infecciones causadas por bacterias gram positivas
staphylococcus aureus resistente a la meticilina
Causas clostridium difficile que causan infección intestinal grave como colitis pseudo
.. 2
membranas (inflamación del colon)
La mayoría de los ¿cómo funciona la vancomicina?
estafilococos se propagan por
contacto de piel con piel
(tocarse). Un médico, una La vancomicina bloquea la construcción de la pared celular de la bacteria. Se une a una parte del
enfermera, otros proveedores peptidoglicano (específicamente al extremo D-Ala-D-Ala) e impide que la bacteria termine de
de atención médica o los armar su pared → así muere.
visitantes al hospital pueden
-
tener estafilococos en su SComo se da la resistencia con [Link]
cuerpo que se pueden la pared de la bacter
+ extremo de
1
propagar a un paciente. Vancomicina se une a D-Ala-D-Ala → mata a la bacteria
4 alanina aminaci
otra bacteria resistente
: .
La bacteria adquiere un gen (como vanA) > que -
viene de .
Cambia D-Ala-D-Ala por D-Ala-D-Lac ac lactico no
4 .
es aa
Vancomicina ya no se puede unir → no hace efecto
La bacteria sobrevive = resistencia
Meticilina >
& Antibiótico b-lactámico Penicilina ,
& Mecanismo de acción de la meticilina
La meticilina actúa inhibiendo la síntesis de la pared celular bacteriana. Meticilina matan bacterias
como Staphylococcus aureus porque bloquean una proteína que la bacteria necesita para construir su
pared (esa proteína se llama PBP) proteínas de union a la penicilina o enzimas transpetidasas
Sin pared → la bacteria se rompe y muere.
Mecanismo de resistencia s. Aureus
2
La bacteria se vuelve resistente a la meticilina porque obtiene un gen (mecA) que le permite usar una
proteína diferente (PBP2a) que la meticilina no puede bloquear, así que la bacteria sobrevive feliz.
. TITULO modificado para la tesis
Potencial antibacteriano de extractos de Annona muricata y Guazuma ulmifolia frente a
Redcolsi Escherichia coli y validación de la actividad reportada contra Staphylococcus aureus.
. TITULO.
Potencial antibacteriano de extractos de Annona muricata y Guazuma ulmifolia contra Escherichia
coli y validación frente a Staphylococcus aureus.
Esta investigación nace como respuesta al creciente problema de la resistencia a los antimicrobianos (RAM) una de las diez principales
amenazas de salud publica, ya que genera un incremento en los gastos de salud, prolonga los periodos de hospitalización y aumenta la tasa de
mortalidad. Según la Lista de patógenos prioritarios de la Organización Mundial de la Salud las bacterias staphylococcus aureus (gam positiva) y
echerichia coli (gram negativa) hacen parte de los patogenos que causan mayor inquietud por su resistencia a medicamentos comunes como la
vancomicina (staphylococcus) y las fluoroquinolonas y cefalosporinas de tercera generacion en el caso de la echerichia coli. Ante esta situación,
se hace necesario investigar nuevas alternativas terapéuticas con énfasis en aquellas basadas en recursos
naturales con capacidad antibacteriana, como las plantas medicinales, las cuales ofrecen una opción
accesible y sostenible. Annona muricata (Guanábana) y Guazuma ulmifolia (Guácimo) resaltan por su
contenido de metabolitos secundarios con actividad contra cepas resistentes de Escherichia coli y
Staphylococcus aureus. Sin embargo, a pesar de los reportes existentes sobre las propiedades farmacológicas de estas especies, aún se requiere
mayor evidencia científica que respalde su eficacia, en especial frente a cepas resistentes de E. coli, para las cuales la información es escasa. Esta
necesidad justifica el desarrollo del presente estudio, ya que permitiría determinar el potencial antibacteriano de los extractos de hoja de G.
ulmifolia y A. muricata frente al crecimiento de E. coli, al tiempo que se valida la actividad previamente reportada frente a S. aureus.
PREGUNTA PROBLEMA:
¿Qué potencial antibacteriano se puede obtener a partir de los
extractos de la hoja de Annona muricata y Guazuma ulmifolia
frente al crecimiento de Escherichia coli y validación de la
actividad contra Staphylococcus aureus?
(Modificación para la tesis:
¿Cuál es el potencial antibacteriano de los extractos de hoja de Annona muricata y Guazuma ulmifolia frente al crecimiento de Escherichia coli y cómo se
valida su actividad contra Staphylococcus aureus?)
OBJETIVOS.
GENERAL: Evaluar el potencial antibacteriano in vitro de extractos de la hoja de Annona muricata y
Guazuma ulmifolia frente al crecimiento de Escherichia coli y validar la actividad reportada contra
Staphylococcus aureus.
ESPECÍFICOS:
●
Identificar por marcha fitoquímica los metabolitos presentes en los extractos etanólicos de las hojas
de Annona muricata y Guazuma ulmifolia.
●
Realizar pruebas de difusión en agar (Kirby-Bauer) para medir la sensibilidad de Escherichia coli y
Staphylococcus aureus frente a los extractos.
●
Determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI), de los extractos totales frente a la cepa que
haya mostrado susceptibilidad.
Metodología
La población esta constituida por cepas bacterianas de Escherichia coli y Staphylococcus aureus. En cuanto
a la muestra corresponde a los extractos etanólicos obtenidos de hojas secas de A. muricata y G. ulmifolia
recolectadas en el Atlántico, Colombia.
Para las técnicas de recolección de datos se tiene: preparación de extractos (secado y trituración del
material vegetal, maceración en etanol al 96% y concentración a sequedad en baño María a temperaturas
inferiores de 40ºC); la marcha fitoquímica; determinación del porcentaje de toxicidad y concentración letal
50 (Cl50) y 90 (Cl90) sobre nauplios de Artemia salina; cultivo bacteriano e inóculos; curvas de crecimiento;
evaluación de la sensibilidad y determinación de la concentración mínima inhibitoria
✅ ✅
Un diseño cuasi experimental de laboratorio es un tipo de investigación que se realiza en condiciones controladas, como un
laboratorio, pero sin cumplir completamente con los criterios de un experimento verdadero, especialmente en cuanto a la
asignación aleatoria de los tratamientos o grupos.
¿En qué consiste?
Es un estudio donde:
• Se manipula una variable independiente (por ejemplo, aplicar un extracto vegetal sobre una bacteria).
• Se observa su efecto sobre una variable dependiente (por ejemplo, si inhibe el crecimiento bacteriano).
• No hay asignación aleatoria estricta a los tratamientos o grupos, o no hay un grupo control perfectamente equiparable.
• Se usan condiciones controladas de laboratorio para asegurar validez interna (temperatura, medios de cultivo, etc.).
La Artemia salina (un pequeño crustáceo marino) se utiliza comúnmente en bioensayos para determinar la toxicidad de extractos
naturales, fármacos o sustancias químicas
¿Por qué se usa Artemia salina?
Es fácil de criar y mantener en el laboratorio.
Rápida eclosión: sus quistes (huevos secos) eclosionan en 24–48 horas.
Bajo costo y disponibilidad comercial.
Alta sensibilidad a sustancias tóxicas → responde bien a diferentes concentraciones.
Sirve como modelo preliminar de toxicidad general para organismos más complejos (antes de pasar a estudios en animales o humanos).
Métodos estandarizados y comparables internacionalmente.
Qué es CL50 y CL90?
CL50 (Concentración Letal 50%):
Es la concentración del extracto (o sustancia) que mata al 50% de los nauplios de Artemia salina en un tiempo determinado (por lo general, 24 h).
CL90 (Concentración Letal 90%):
Es la concentración que mata al 90%.
Estas mediciones ayudan a determinar qué tan tóxico es un extracto y desde qué dosis empieza a ser peligroso.
⸻
Control de calidad : 3. Ensayo de actividad antibacteriana
1. Control de la materia prima (plantas) • Pruebas por duplicado o triplicado.
• Identificación botánica correcta (nombre científico, familia). • Uso de controles positivos (antibióticos conocidos) y
negativos (solvente puro).
• Recolección en condiciones adecuadas. • Condiciones de cultivo bacteriano controladas.
• Parte de la planta utilizada bien especificada (hojas, en tu caso). ⸻
• Secado y almacenamiento controlado (temperatura, luz, humedad). 4. Ensayo de toxicidad (Artemia salina)
• Uso de concentraciones estandarizadas.
⸻ • Número de nauplios por réplica.
• Tiempo definido (24 h).
2. Control del extracto vegetal
• Análisis estadístico de resultados (para CL50 y CL90).
• Método de extracción estandarizado (tipo de solvente, tiempo,
temperatura). ⸻
• Rendimiento del extracto (% de masa obtenida). 5. Documentación y reproducibilidad
• Registrar detalladamente métodos y condiciones.
• Análisis preliminar de fitoquímicos (si lo incluyes). • Asegurar que otros puedan replicar tu estudio
(reproducibilidad).