2025

Catálogo Medios de Cultivo.

Hernández García Alhelí IS22110064.

Instituto Tecnológico Superior de
Irapuato.
Microbiología.
19/6/25
CLAVE MEDIOS FORMULACION Y COMPONENTES MANEJO ALMACENAMIENTO
1. Disolver los
ingredientes en 1 L de
agua destilada.
(g/L): 2. Calentar con agitación Medio deshidratado:
hasta disolver almacenar en frasco bien
Triptosa: 30.0 completamente. cerrado, en lugar fresco y
Agar ASTEL: es un medio selectivo utilizado para la 3. Ajustar el pH si es seco, entre 10–25 °C.
detección y recuento de Clostridium perfringens en Lactosa: 10.0 necesario.
4. Esterilizar en autoclave Medio preparado: conservar
alimentos, aguas y muestras clínicas. Se basa en la
Sulfito de sodio: 1.0 a 121 °C por 15 minutos. en refrigeración (2–8 °C),
reducción de sulfito a sulfuro de hidrógeno (H₂S), que
5. Verter en cajas Petri protegido de la luz, máximo 2
reacciona con sales de hierro formando colonias negras Sulfato ferroso: 0.5 estériles a unos 45–50 °C. semanas
características 6. Al solidificar, conservar
AG-1 Estreptomicina: 0.1 en refrigeración.

Agar: 15.0

1. Disolver todos los

componentes en 1 litro de
agua destilada.
Agar Azul de Toluidina se utiliza comúnmente en estudios 2. Calentar con agitación
histológicos y citológicos para teñir estructuras ácidas, hasta la completa Polvo seco: almacenar en
como los glucosaminoglicanos y ácidos nucleicos. Se (g/L) disolución. frasco hermético, en lugar
emplea para observar fenómenos de metacromasia en 3. Ajustar el pH a 6.5 ± fresco y seco, entre 15 y 25
Azul de toluidina: 1.0 0.2. °C, protegido de la luz.
tejidos, útil en microbiología vegetal y estudios tumorales.
4. Esterilizar si es
Aunque no es un medio de cultivo tradicional para
Cloruro de sodio: 8.0 necesario a 121 °C Preparado: conservar en
bacterias, se puede usar para teñir mucopolisacáridos durante 15 minutos. refrigeración (2–8 °C) y
extracelulares en medios sólidos. Fosfato de sodio: 1.0 5. Verter en cajas Petri protegido de la luz; usar en un
estériles si se requiere usar máximo de 2 semanas.
Agar: 15.0 como medio de tinción de
colonias o
AG-2 Agua destilada: 1 litro mucopolisacáridos.
1. Disolver los
ingredientes básicos Polvo deshidratado: conservar
(excepto yema y telurito) en lugar seco, fresco (<25 °C)
(g/L): en 1 L de agua destilada. y protegido de la luz.
2. Calentar agitando hasta
Extracto de levadura: 5.0 disolver completamente. Medio preparado: almacenar
Agar Baird Parker es un medio selectivo y diferencial 3. Esterilizar en autoclave en refrigeración (2–8 °C) por
utilizado principalmente para el aislamiento y enumeración Glicina: 12.0 a 121 °C durante 15 un máximo de 7 días,
de Staphylococcus aureus en alimentos, agua, y muestras minutos. protegido de la luz y
clínicas. Este medio contiene telurito potásico y yema de Piruvato de sodio: 10.0 4. Enfriar el medio a 45– desecación.
huevo, que permiten la diferenciación de S. aureus 50 °C.
Cloruro de litio: 5.0 5. Agregar la emulsión de
mediante la formación de colonias negras rodeadas de un
yema de huevo estéril y la
halo claro debido a la actividad lipolítica y reductor de
Agar: 15.0 solución de telurito
telurito. potásico previamente
esterilizada por filtración.
6. Homogeneizar bien y
verter en cajas Petri
estériles.

AG-3
1. Disolver todos los
componentes en 1 litro de Polvo seco: conservar en
Agar BCYE es un medio de cultivo especializado utilizado (g/L): agua destilada. envase hermético, lugar
para el aislamiento de Legionella pneumophila y otras fresco, seco, entre 10–25 °C,
Extracto de levadura: 10.0 2. Calentar con agitación protegido de la luz.
especies del género Legionella en muestras clínicas,
moderada sin hervir
ambientales y sistemas de agua. Este medio proporciona
Carbón activado: 2.0 intensamente. Medio preparado: mantener en
nutrientes esenciales como cisteína y hierro, mientras que refrigeración (2–8 °C),
el carbón activado neutraliza compuestos tóxicos y α-Cetoglutarato: 1.0 3. Ajustar pH a 6.9 ± 0.2. protegido de la luz. Vida útil:
peróxidos. Se puede complementar con antibióticos para hasta 10 días.
mayor selectividad (por ejemplo, GVPC: glicina, L-cisteína HCl: 0.4 4. Esterilizar en autoclave
vancomicina, polimixina B, cicloheximida). a 121 °C durante 15 Recomendación: no congelar
Cloruro de hierro (FeCl₃): 0.025 minutos. ni exponer a temperaturas >25
°C.
Agar: 15.0 5. Enfriar a 45–50 °C.

Buffer (HEPES o ACES): 10.0 6. Agregar suplementos

antibióticos estériles si se
Agua destilada: 1 litro desea aumentar
selectividad (por ejemplo,
GVPC).

7. Verter en cajas Petri

estériles bajo condiciones
asépticas.

AG-4
(g/L): 1. Disolver todos los Polvo deshidratado: almacenar
ingredientes en 1 L de a temperatura ambiente (10–
Peptona: 20.0 agua destilada con 25 °C), seco y protegido de la
calentamiento. luz.
Agar de Hierro Kligler (KIA) es un medio diferencial Extracto de carne: 3.0
diseñado para la identificación preliminar de bacterias 2. Ajustar el pH si es Tubos preparados: conservar
entéricas gramnegativas, especialmente miembros de la Glucosa: 1.0 necesario. en refrigeración (2–8 °C), en
familia Enterobacteriaceae. Permite detectar la posición vertical, máximo 2
fermentación de glucosa y lactosa, así como la producción Lactosa: 10.0 3. Esterilizar en autoclave semanas
de gas y sulfuro de hidrógeno (H₂S). Se usa ampliamente en a 121 °C durante 15
microbiología clínica y alimentaria. Tiosulfato de sodio: 0.3 minutos.

Sulfato ferroso: 0.2 4. Enfriar y verter en tubos

de ensayo estériles.
AG-5 Rojo de fenol: 0.024

1
 5. Inclinar los tubos para
Agar: 13.0 formar un “slant” con
fondo profundo,
Agua destilada: 1 litro permitiendo dos
ambientes: aeróbico
(superficie) y anaeróbico
(fondo).

1. Disolver
completamente todos los
(g/L): componentes en 1 litro de
agua destilada, calentando
Agar de hierro y lisina (LIA) es un medio diferencial lisina HCl: 10.0 con agitación. Polvo deshidratado: almacenar
empleado para identificar bacterias entéricas, en lugar fresco, seco, entre
especialmente del grupo Enterobacteriaceae. Detecta la Peptona: 5.0 2. Ajustar pH a 6.8 si es 10–25 °C, protegido de la luz.
descarboxilación y desaminación de lisina, además de la necesario.
producción de sulfuro de hidrógeno (H₂S). Es útil para Glucosa: 1.0 Medio preparado: conservar
diferenciar Salmonella, Shigella y otras enterobacterias. 3. Esterilizar en autoclave en refrigeración (2–8 °C),
Tiosulfato de sodio: 0.3 a 121 °C durante 15 preferiblemente en posición
minutos. vertical. Usar en un plazo no
Sulfato ferroso: 0.2 mayor a 2 semanas.
4. Enfriar ligeramente y
Rojo de bromocresol: 0.02 verter en tubos de ensayo
estériles.
Agar: 13.0
5. Inclinar los tubos para
Agua destilada: 1 litro formar un medio inclinado
(slant) con fondo profundo
para observar reacciones
AG-6 aeróbicas y anaeróbicas.
1. Disolver
completamente los
ingredientes en 1 litro de
(g/L): agua destilada.
Medio deshidratado:
Extracto de levadura: 5.0 2. Calentar con agitación almacenar en frasco cerrado,
constante hasta ebullición en lugar seco, fresco (<25 °C),
Peptona: 12.0 leve para disolver el agar. protegido de la luz.

Bile salts (sales biliares): 9.0 3. No autoclavar para Medio preparado: refrigerar
Agar Entérico de Hektoen es un medio selectivo y evitar precipitación de entre 2–8 °C. Usar en un plazo
diferencial diseñado para el aislamiento y diferenciación de Lactosa: 10.0 sales. máximo de 7 a 10 días.
Salmonella y Shigella a partir de otras bacterias entéricas
en muestras fecales, aguas y alimentos. Inhibe la flora Sacarosa: 10.0 4. Enfriar a 45–50 °C y Importante: evitar exposición
intestinal acompañante mediante sales biliares, y verter en cajas Petri a la luz y desecación.
diferencia microorganismos basándose en la fermentación Salicina: 2.0 estériles bajo condiciones
de carbohidratos, la producción de H₂S y cambios de color asépticas.
en indicadores de pH. Tiosulfato de sodio: 5.0
5. Dejar solidificar y
Citrato férrico amónico: 1.5 almacenar en
refrigeración.
Azul de bromotimol: 0.08

Verde de bromocresol: 0.08

Agar: 15.0

AG-7 Agua destilada: 1 litro

(g/L):
1. Disolver la base Polvo seco: conservar en
Triptosa: 10.0 (excepto antibióticos) en 1 envase bien cerrado, a
litro de agua destilada con temperatura entre 10 y 25 °C,
Extracto de levadura: 5.0 agitación y calentamiento. en lugar seco y protegido de la
luz.
Celobiosa: 5.0 2. Esterilizar en autoclave
Agar modificado con Celobiosa, Polimixina B y Colistina a 121 °C por 15 minutos. Medio preparado: almacenar
(mCPC) es un medio de cultivo selectivo utilizado Cloruro de litio: 3.0 en refrigeración (2–8 °C),
principalmente para el aislamiento y enumeración de 3. Enfriar a 45–50 °C. protegido de la luz y
Listeria monocytogenes en alimentos. La celobiosa actúa Bile salts: 1.5 desecación. Usar dentro de los
como fuente de carbono diferencial, mientras que los 4. Añadir soluciones 5–7 días posteriores a su
antibióticos polimixina B y colistina inhiben el crecimiento Esculina: 1.0 filtradas estériles de preparación.
de la flora acompañante. Este medio se basa en la polimixina B y colistina.
fermentación de la celobiosa y la esculina, permitiendo la Citrato férrico amónico: 0.5
diferenciación de Listeria por coloración negra de las 5. Homogeneizar bien y
colonias. Polimixina B: 0.005 (añadir verter en cajas Petri
estéril) estériles.

Colistina: 0.005 (añadir estéril)

Agar: 15.0

AG-8 Agua destilada: 1 litro

1. Disolver
completamente los
ingredientes en 1 litro de
agua destilada con
agitación.

(g/L) 2. Ajustar el pH a 7.2 ± Polvo deshidratado: conservar

Agar Movilidad se emplea para determinar la capacidad de 0.2 si es necesario. en lugar fresco y seco (10–25
movimiento de bacterias en medios semisólidos. Es útil Triptosa: 10.0 °C), bien cerrado.
para distinguir entre microorganismos móviles y no 3. Esterilizar en autoclave
Cloruro de sodio: 5.0 a 121 °C durante 15 Medio preparado: refrigerar
móviles, como en la diferenciación de Escherichia coli
minutos. entre 2–8 °C, conservar en
(móvil) y Klebsiella pneumoniae (no móvil). También puede
Agar: 3.0 (concentración posición vertical. Usar dentro
utilizarse para evaluar el patrón de motilidad (difusa, lineal, reducida para permitir 4. Verter el medio aún de las 2 semanas posteriores a
centrada). movimiento bacteriano) caliente en tubos de su preparación.
ensayo verticales sin
Agua destilada: 1 litro inclinar, formando una
columna.

5. Inocular con aguja recta

en línea recta hacia el
AG-9 fondo.

2
 1. Disolver
completamente los
ingredientes en 1 litro de
agua destilada.

2. Calentar con agitación

Agar Nutritivo (NA, por sus siglas en inglés) es un medio de constante hasta que el agar
cultivo general utilizado para el aislamiento, cultivo y se disuelva
mantenimiento de una gran variedad de bacterias no completamente.
(g/L): Medio deshidratado: mantener
fastidiosas. Es uno de los medios más básicos y
3. Ajustar el pH a 7.0 ± en envase cerrado, en lugar
comúnmente empleados en laboratorios de microbiología
Peptona: 5.0 0.2 si es necesario. fresco y seco (10–25 °C),
para pruebas de viabilidad, conteo de colonias, cultivo puro protegido de la humedad y la
y rutinas de enseñanza. Extracto de carne: 1.0 4. Esterilizar en autoclave luz.
a 121 °C durante 15
Cloruro de sodio: 5.0 minutos. Medio preparado: conservar
en refrigeración (2–8 °C), en
Agar: 15.0 5. Verter en placas Petri contenedores cerrados, por un
estériles o en tubos según periodo máximo de 3–4
AG-10 Agua destilada: 1 litro el uso requerido. semanas.
1. Disolver los
ingredientes básicos en 1
litro de agua destilada. Medio deshidratado: mantener
bien cerrado, en lugar fresco y
(g/L):
2. Esterilizar en autoclave seco, entre 10 y 25 °C.
a 121 °C durante 15
Triptosa: 23.0 minutos. Medio preparado: conservar
en refrigeración (2–8 °C),
Cloruro de litio: 15.0 3. Enfriar a 45–50 °C. protegido de la luz. Usar
preferentemente en un plazo
Agar Oxford es un medio de cultivo selectivo y diferencial Esculina: 1.0 4. Añadir el suplemento de 5 a 7 días.
diseñado para el aislamiento de Listeria monocytogenes y Oxford (previamente
otras especies del género Listeria en alimentos y muestras Citrato férrico amónico: 0.5 esterilizado por filtración) Precaución: evitar exposición
y mezclar bien. a temperaturas elevadas o
clínicas. Su formulación permite inhibir la flora
competidora mediante la combinación de sales biliares, Bile salts: 5.0 humedad para no degradar los
5. Verter en cajas Petri antibióticos
cloruro de litio y antibióticos. Listeria puede identificarse estériles y dejar
por la hidrólisis de esculina, formando colonias negras Glucosa: 1.0
solidificar.
rodeadas de halo marrón.
Cloruro de sodio: 5.0

Agar: 15.0

Suplemento Oxford (antibióticos:

colistina, acriflavina, cefotetan,
cicloheximida): según el
fabricante

AG-11 Agua destilada: 1 litro

Triptosa: 10.0 1. Disolver los
ingredientes básicos (sin
Extracto de carne: 5.0 suplemento) en 1 litro de
agua destilada. Polvo deshidratado: almacenar
Glucosa: 1.0 en envase hermético, en lugar
2. Esterilizar en autoclave seco y fresco (10–25 °C),
Mannitol: 10.0 a 121 °C durante 15 protegido de la luz.
minutos.
Cloruro de litio: 15.0 Medio preparado: conservar
Agar PALCAM Polimixina–Acriflavina–Listeria–Cloruro de 3. Enfriar a 45–50 °C. en refrigeración (2–8 °C),
litio–Aesculina–Mannitol) es un medio selectivo utilizado Esculina: 1.0 protegido de la luz. Usar
para el aislamiento de Listeria monocytogenes y otras 4. Añadir el suplemento dentro de los 5 a 7 días
especies del género Listeria a partir de muestras Citrato férrico amónico: 0.5 PALCAM estéril por siguientes a su preparación.
alimentarias y clínicas. Combina agentes selectivos con filtración.
indicadores que permiten diferenciar Listeria por su Bile salts: 5.0 Evitar: exposición a humedad,
capacidad para hidrolizar esculina (colonias negras con 5. Homogeneizar luz directa y fluctuaciones de
halo) y por su incapacidad de fermentar manitol (el fondo Rojo fenol (indicador de pH): cuidadosamente y verter temperatura.
del medio permanece rojo). 0.08 en placas Petri estériles.

Agar: 15.0

Suplemento PALCAM (colistina,

acriflavina, cefotetan, polimixina
B, cicloheximida): según
fabricante

AG-12 Agua destilada: 1 litro

1. Preparar la base (ej.
TSA) disolviendo el
medio en agua destilada.

2. Esterilizar en autoclave Agar base deshidratado:

a 121 °C durante 15 conservar cerrado, en
β-hemólisis: destrucción minutos ambiente fresco y seco (10–25
completa (halo claro). °C).
α-hemólisis: hemólisis parcial 3. Enfriar a 45–50 °C
Agar Sangre de Cordero (halo verdoso). (nunca por debajo de 45 Medio preparado con sangre:
es un medio de cultivo enriquecido y diferencial utilizado γ-hemólisis: sin hemólisis. °C para evitar mantener refrigerado (2–8
ampliamente en microbiología clínica para el aislamiento y Fórmula e ingredientes de coagulación). °C), protegido de la luz.
preparación (por litro):
crecimiento de bacterias fastidiosas, así como para
Agar base nutritivo (TSA o 4. Añadir la sangre estéril Vida útil: 5 a 7 días desde su
observar patrones de hemólisis. Permite diferenciar
similar): 40.0 g desfibrinada de cordero, preparación.
especies bacterianas según el tipo de hemólisis que Sangre desfibrinada de cordero mezclando suavemente
provocan en los eritrocitos: estéril: 5–10% (v/v) para evitar burbujas. Precaución: desechar placas
Agua destilada: 1 litro con signos de deshidratación,
5. Verter en cajas Petri contaminación o cambio de
estériles bajo condiciones color.
asépticas.

6. Dejar solidificar
completamente a
temperatura ambiente
AG-13 antes de refrigerar.
Agar Soya Tripticaseina (g/L): 1. Disolver Medio en polvo: conservar en
AG-14 completamente los envase cerrado, seco y fresco
3
 también conocido como Tryptic Soy Agar (TSA), es un Triptosa (digestión pancreática de componentes en 1 litro de (10–25 °C), protegido de la
medio enriquecido y no selectivo ampliamente utilizado caseína): 17.0 agua destilada. luz y humedad.
para el cultivo general de bacterias aerobias y anaerobias
facultativas. Es ideal para control de calidad microbiológica, Peptona de soya (digestión Medio preparado: refrigerar
pruebas de viabilidad, mantenimiento de cepas, recuento enzimática de harina de soya): 2. Ajustar el pH a 7.3 si es (2–8 °C), protegido de la
de colonias y cultivos rutinarios de una gran variedad de 3.0 necesario. desecación y contaminación.
microorganismos no exigentes.
Cloruro de sodio: 5.0 3. Esterilizar en autoclave Vida útil: hasta 4 semanas si
a 121 °C durante 15 se conserva adecuadamente.
Glucosa: 2.5 (opcional) minutos.
Recomendación: evitar
Fosfato dipotásico: 2.5 (opcional) 4. Verter en cajas Petri o condensación excesiva y
tubos de cultivo estériles. exposición a luz intensa.
Agar: 15.0
5. Dejar solidificar a
Agua destilada: 1 litro temperatura ambiente bajo
condiciones asépticas.

1. Disolver los Medio deshidratado:

ingredientes almacenar en frasco
(g/L): completamente en 1 litro hermético, lugar seco y fresco
de agua destilada. (10–25 °C), protegido de la
Extracto de carne: 5.0 luz.
2. No autoclavar. En su
Triptosa: 5.0 lugar, calentar lentamente Medio preparado: conservar
Agar Sulfito de Bismuto con agitación constante en refrigeración (2–8 °C),
es un medio altamente selectivo para el aislamiento de Fosfato de sodio disódico: 4.0 hasta ebullición leve para protegido de la desecación.
Salmonella spp., especialmente Salmonella typhi, a partir fundir el agar y disolver el
de muestras fecales, aguas y alimentos. Inhibe eficazmente Glucosa: 5.0 medio. Vida útil: 5–7 días después de
la flora intestinal acompañante gracias al bismuto y el su preparación.
verde brillante. Salmonella produce colonias negras o Sulfito de sodio: 1.0 3. Verter inmediatamente
marrón oscuro, con o sin brillo metálico, por la reducción en cajas Petri estériles Precaución: evitar recalentar
del sulfito a sulfuro de hidrógeno (H₂S). Sulfato ferroso: 0.5 bajo condiciones el medio, ya que el calor
asépticas. excesivo degrada el bismuto y
Verde brillante: 0.025 puede volverlo tóxico para
4. Solidificar a Salmonella
Sulfito de bismuto: 8.0 temperatura ambiente.

Agar: 15.0

AG-15 Agua destilada: 1 litro

1. Disolver los
ingredientes
completamente en 1 litro
de agua destilada. Medio deshidratado:
(g/L): almacenar en frasco cerrado,
Agar T1N1 (Agar Triptona y Sal) 2. Ajustar pH a 7.0 si es seco, protegido de la
es un medio no selectivo, simple, compuesto por triptona y Triptona (digestión pancreática necesario. humedad, entre 10 y 25 °C.
cloruro de sodio, utilizado comúnmente para suspensiones de caseína): 10.0
3. Esterilizar en autoclave Medio preparado: conservar
bacterianas, preparación de inóculos, pruebas de
Cloruro de sodio: 5.0 a 121 °C durante 15 en refrigeración (2–8 °C).
sensibilidad antimicrobiana, estudios de viabilidad y
minutos.
diluciones seriadas. También sirve como base para la Agar: 15.0 Vida útil: hasta 3 semanas
preparación de medios suplementados. 4. Verter en tubos o placas bajo condiciones adecuadas.
Agua destilada: 1 litro Petri estériles según el uso
previsto.

5. Solidificar a
AG-16 temperatura ambiente.
1. Disolver los
ingredientes en 1 litro de
agua destilada con
agitación suave. Medio deshidratado: conservar
(g/L): en lugar fresco, seco,
AG-17 Agar TBX 2. Ajustar el pH a 7.2 si es protegido de la luz (10–25
es un medio selectivo y diferencial utilizado para la Triptosa: 20.0 necesario. °C).
detección y recuento de Escherichia coli β-glucuronidasa
positiva en alimentos y aguas. Se basa en la hidrólisis del Cloruro de sodio: 5.0 3. Esterilizar en autoclave Medio preparado: mantener en
sustrato cromogénico X-glucuronida, lo que da lugar a a 121 °C durante 15 refrigeración (2–8 °C),
colonias azul-verdosas específicas de E. coli. Las sales X-glucuronida (BCIG): 0.075 minutos. protegido de la luz.
biliares inhiben bacterias grampositivas y otras no
Desoxicolato de sodio: 0.15 4. Enfriar a 45–50 °C. Vida útil: usar
deseadas.
preferentemente dentro de los
Sales biliares: 1.5 5. Verter en placas Petri 7 días siguientes a la
estériles. preparación.
Agar: 15.0
6. Incubar las placas
Agua destilada: 1 litro invertidas a 44 °C durante
18–24 horas para
AG-17 favorecer selectividad.
(g/L):
1. Disolver los
Extracto de levadura: 5.0 ingredientes en 1 litro de Medio deshidratado: conservar
agua destilada sin hervir en envase cerrado, lugar
Peptona: 10.0 bruscamente. fresco y seco (10–25 °C),
protegido de la luz.
Citrato sódico: 10.0 2. No autoclavar. Calentar
solo hasta disolución Medio preparado: refrigerar
Agar Tiosulfato, Citrato, Sales Biliares y Sacarosa (TCBS) Tiosulfato de sodio: 10.0 completa. (2–8 °C), evitar exposición a
es un medio altamente selectivo y diferencial diseñado la humedad o desecación.
para el aislamiento de bacterias del género Vibrio, Sulfato férrico: 1.0 3. Enfriar a 45–50 °C.
especialmente Vibrio cholerae y Vibrio parahaemolyticus, a Vida útil: máximo 5–7 días
partir de alimentos, aguas y muestras clínicas. La sacarosa Bile salts (sales biliares): 8.0 4. Verter en placas Petri después de preparado.
estériles bajo condiciones
permite diferenciar Vibrio cholerae (colonias amarillas) de
Sacarosa: 20.0 asépticas. Importante: No recalentar una
Vibrio parahaemolyticus (colonias verdes o azul-verdosas)
vez preparado para evitar
por fermentación. Azul de bromotimol: 0.04 5. Solidificar a pérdida de selectividad.
temperatura ambiente.
Verde de bromocresol: 0.04

Agar: 15.0

AG-18 Agua destilada: 1 litro

4
 1. Disolver todos los
(g/L): ingredientes excepto la
urea en 1 litro de agua
Peptona: 1.0 destilada.
Medio deshidratado (sin urea):
Glucosa: 1.0 2. Esterilizar en autoclave mantener en lugar fresco y
a 121 °C durante 15 seco (10–25 °C).
Fosfato monosódico: 2.0 minutos.
Medio preparado (con urea):
Agar Urea de Christensen Rojo de fenol: 0.012 3. Enfriar el medio a 45– conservar refrigerado (2–8
es un medio diferencial empleado para la detección de 50 °C. °C), protegido de la luz.
bacterias capaces de producir la enzima ureasa, como Urea (esterilizada por filtración):
Proteus spp., Klebsiella spp., y Helicobacter pylori. La 20.0 4. Agregar la solución de Vida útil: 7 días tras su
ureasa hidroliza la urea en amoníaco, elevando el pH y urea estéril (filtrada, nunca preparación con urea.
Agar: 15.0 autoclavada).
cambiando el color del indicador (rojo de fenol) de
Importante: desechar si el
anaranjado a fucsia.
Agua destilada: 1 litro 5. Mezclar suavemente y medio cambia de color antes
verter en tubos inclinados de inocular
("slants") o en placas.

6. Dejar solidificar a
temperatura ambiente.

AG-19

1. Disolver los
componentes en 1 litro de
agua destilada.
(g/L): Medio en polvo: almacenar en
2. Calentar con agitación frasco bien cerrado, en lugar
Extracto de levadura: 3.0 constante hasta que el agar seco y fresco (10–25 °C),
se disuelva protegido de la luz.
L-lisina: 5.0 completamente.
Medio preparado: conservar
Agar Xilosa Lisina Desoxicolato Xilosa: 3.75 3. No autoclavar; solo en refrigeración (2–8 °C),
es un medio selectivo y diferencial ampliamente utilizado calentar hasta ebullición evitar la desecación.
para el aislamiento e identificación de Salmonella y Shigella Lactosa: 7.5 leve.
a partir de muestras fecales, aguas y alimentos. Diferencia Vida útil: 5–7 días desde su
a las enterobacterias por fermentación de xilosa, Sacarosa: 7.5 4. Enfriar a 45–50 °C. preparación.
descarboxilación de lisina y producción de sulfuro de
hidrógeno (H₂S). Citrato férrico amónico: 0.8 5. Verter en cajas Petri Nota: descartar si se observa
estériles y dejar precipitación o cambio de
Tiosulfato de sodio: 6.8 solidificar. color.
Salmonella: colonias rojas con centro negro
Rojo de fenol: 0.08
Shigella: colonias rojas
Desoxicolato de sodio: 2.5
Bacterias fermentadoras: colonias amarillas
Agar: 15.0

AG-20 Agua destilada: 1 litro

1. Disolver todos los
componentes en 1 litro de Medio en polvo: conservar en
Agar-hierro-triple azúcar (TSI) (g/L): agua destilada con lugar fresco, seco (10–25 °C),
es un medio diferencial utilizado para la identificación agitación. protegido de la luz.
preliminar de enterobacterias y otras bacterias Triptosa: 20.0
gramnegativas fermentadoras. Permite evaluar la 2. Esterilizar en autoclave Medio preparado: almacenar
fermentación de tres azúcares (glucosa, lactosa, sacarosa), Lactosa: 10.0 a 121 °C por 15 minutos. en refrigeración (2–8 °C), en
producción de gas, y producción de sulfuro de hidrógeno posición vertical.
(H₂S). Sacarosa: 10.0 3. Verter el medio caliente
Es útil para distinguir entre Salmonella, Shigella, Proteus, E. en tubos de ensayo Vida útil: máximo 2 semanas.
coli, etc. Glucosa: 1.0 estériles.
Reacciones comunes observadas: Importante: desechar si el
Tiosulfato de sodio: 0.3 4. Inclinar los tubos para medio se deseca o cambia de
Fermentación solo de glucosa: fondo ácido (amarillo), formar una pendiente con color.
Citrato férrico amónico: 0.2 fondo profundo
superficie alcalina (roja)
(slant/deep).
Rojo de fenol: 0.024
Fermentación de varios azúcares: todo amarillo 5. Inocular con aguja recta
Agar: 13.0 desde el fondo hasta la
No fermentadores: todo rojo superficie.
Agua destilada: 1 litro
Producción de gas: burbujas o agrietamientos

AG-21 Producción de H₂S: ennegrecimiento del fondo

1. Disolver los
ingredientes en 1 litro de
agua destilada con
calentamiento y agitación.

2. Ajustar pH a 5.6 ± 0.2

si es necesario. Medio deshidratado: conservar
en envase hermético, en lugar
3. Esterilizar en autoclave fresco y seco (10–25 °C),
a 121 °C durante 15 protegido de la luz.
(g/L): minutos.
Agar Dextrosa Sabouraud Medio preparado: conservar
Peptona (digestión de caseína y 4. Enfriar a 45–50 °C. en refrigeración (2–8 °C),
es un medio enriquecido y ligeramente selectivo diseñado
carne): 10.0 protegido de la luz y
para el aislamiento y cultivo de hongos filamentosos,
desecación.
levaduras y dermatofitos a partir de muestras clínicas, Dextrosa (glucosa): 40.0 5. Si se desea, agregar
ambientales, alimentos y superficies. Su bajo pH (~5.6) antibióticos estériles por Vida útil: hasta 4 semanas si
inhibe el crecimiento bacteriano sin afectar a los hongos. Agar: 15.0 filtración. se almacena correctamente.
Se puede complementar con antibióticos (cloranfenicol,
gentamicina) para aumentar la selectividad. Agua destilada: 1 litro 6. Verter en cajas Petri Nota: descartar si hay signos
estériles o tubos según la de contaminación, cambio de
AG-22 aplicación. pH o coloración.
(g/L):
Agar para antibióticos #1 1. Disolver los
es un medio estandarizado utilizado para evaluar la Caseína hidrolizada (triptosa): componentes en 1 litro de Medio deshidratado: mantener
potencia y actividad de antibióticos por el método de 17.0 agua destilada con en envase hermético, seco y
difusión en agar (Kirby-Bauer o método de cilindros). Posee agitación y calentamiento fresco (10–25 °C), protegido
una composición precisa que permite una difusión Extracto de carne de res: 3.0 suave. de la humedad y la luz.
AG-23 uniforme del antibiótico y un crecimiento controlado del

5
 microorganismo indicador, lo que garantiza resultados Cloruro de sodio: 5.0 2. Ajustar el pH a 7.3 ± Medio preparado: almacenar
reproducibles. 0.1 si es necesario. en refrigeración (2–8 °C),
Agar: 15.0 evitar la desecación.
3. Esterilizar en autoclave
Agua destilada: 1 litro a 121 °C durante 15 Vida útil: 7–10 días bajo
minutos. condiciones estériles.

4. Enfriar a 45–50 °C Recomendación: controlar

antes de verter en cajas regularmente la uniformidad
Petri estériles. del grosor del agar (aprox. 4
mm) para resultados fiables
5. Dejar solidificar
completamente antes de
aplicar discos o cilindros
con antibiótico.

1. Disolver los
ingredientes Polvo deshidratado: conservar
(g/L): completamente en 1 litro en frasco cerrado, lugar seco y
de agua destilada, fresco (10–25 °C), protegido
Caseína hidrolizada (triptosa): agitando continuamente. de la humedad.
15.0
2. Ajustar el pH a 7.3 si es Medio preparado: mantener en
Extracto de levadura: 4.0 necesario. refrigeración (2–8 °C) en
Agar para antibióticos #2 condiciones estériles.
está formulado para realizar pruebas cuantitativas y Cloruro de sodio: 5.0 3. Esterilizar en autoclave
cualitativas de actividad antibiótica, especialmente a 121 °C por 15 minutos. Vida útil: hasta 7 días sin
mediante métodos de difusión en agar. Este medio tiene Dextrosa: 1.0 pérdida significativa de
una composición estandarizada y baja en componentes 4. Enfriar a 45–50 °C. rendimiento.
Agar: 15.0
inhibidores, por lo que es ideal para pruebas de
5. Verter en placas Petri Importante: verificar que el
antibióticos menos solubles o de espectro específico.
Agua destilada: 1 litro estériles asegurando un medio no presente resequedad
grosor uniforme (~4 mm). ni contaminación antes de su
uso
6. Dejar solidificar y
proceder con la aplicación
de los antibióticos
(cilindros, discos,
AG-24 diluciones).
1. Disolver
completamente todos los
ingredientes en 1 litro de
agua destilada con
agitación.
Medio en polvo: conservar en
(g/L): 2. Ajustar pH a 7.2 si es lugar seco, fresco (10–25 °C),
necesario. en envase cerrado y protegido
Peptona (hidrolizado de caseína): de la luz.
Agar para antibióticos #4 14.0 3. Esterilizar en autoclave
es un medio estandarizado diseñado para pruebas de a 121 °C por 15 minutos. Medio preparado: mantener en
potencia y sensibilidad de antibióticos, particularmente en Extracto de levadura: 4.0 refrigeración (2–8 °C), en
sistemas que requieren un crecimiento uniforme y 4. Enfriar a 45–50 °C condiciones estériles.
controlado del microorganismo indicador. Está optimizado Cloruro de sodio: 5.0 antes de verter en cajas
Petri estériles. Vida útil: máximo 7 días tras
para evitar interferencias con la difusión del antibiótico,
Glucosa: 2.0 su preparación.
por lo que es ampliamente utilizado en laboratorios de
5. Verter capas uniformes
microbiología industrial, farmacéutica y control de calidad Agar: 15.0 de aproximadamente 4 Nota: evitar formación de
mm de espesor para condensación o resequedad
Agua destilada: 1 litro asegurar una difusión del medio antes del ensayo.
estándar.

6. Usar inmediatamente o
AG-25 . refrigerar hasta su uso.
1. Disolver
completamente todos los
componentes en 1 litro de
agua destilada, con
agitación constante.

2. Ajustar el pH a 7.2 ± Medio en polvo: conservar en

(g/L): 0.1 si es necesario. envase sellado, seco, a
temperatura entre 10 y 25 °C.
Peptona de caseína: 15.0 3. Esterilizar en autoclave
Agar para antibióticos #5 a 121 °C durante 15 Medio preparado: mantener en
es un medio formulado para la evaluación biofarmacéutica Extracto de levadura: 5.0 minutos. refrigeración (2–8 °C), evitar
de antibióticos, ideal para pruebas de inhibición y ensayos desecación y condensación.
de sensibilidad en condiciones controladas. Su composición Glucosa: 2.0 4. Enfriar el medio a 45–
50 °C. Vida útil: hasta 7 días en
favorece la difusión uniforme de antibióticos y el
Cloruro de sodio: 5.0 condiciones estériles.
crecimiento balanceado del microorganismo indicador,
5. Verter en cajas Petri
permitiendo una medición precisa de halos de inhibición. Agar: 15.0 estériles en capas Recomendación: realizar
uniformes (~4 mm). controles de calidad con cepas
Este medio es frecuentemente utilizado para pruebas de Agua destilada: 1 litro estándar para asegurar
antibióticos como penicilinas, tetraciclinas, macrólidos y 6. Una vez solidificado, resultados fiables.
aminoglucósidos, entre otros. aplicar discos o cilindros
impregnados con el
AG-26 antibiótico a evaluar.
1. Disolver
completamente los
(g/L): ingredientes en 1 litro de Medio en polvo: conservar en
agua destilada con frasco bien cerrado, en lugar
Caseína peptonizada: 14.0 agitación. seco y fresco (10–25 °C),
protegido de la luz.
Extracto de levadura: 4.0
2. Ajustar el pH a 7.2 ± Medio preparado: refrigerar
Glucosa: 1.0 0.1 si fuera necesario. (2–8 °C), mantener tapado y
Agar para antibióticos #8
estéril.
es un medio especialmente diseñado para pruebas de Cloruro de sodio: 5.0 3. Esterilizar en autoclave
sensibilidad antimicrobiana y evaluación cuantitativa de a 121 °C durante 15 Vida útil: hasta 7 días en
antibióticos por métodos de difusión. Su composición Fosfato dipotásico: 1.0 minutos. condiciones óptimas.
favorece una distribución homogénea del antibiótico y
crecimiento uniforme del microorganismo indicador. Está Agar: 15.0 4. Enfriar a 45–50 °C y Recomendación: evitar
indicado para pruebas farmacéuticas y microbiológicas en verter en placas Petri congelar o exponer a humedad
AG-27 el análisis de antibióticos de uso veterinario y humano. Agua destilada: 1 litro estériles. excesiva.

6
 5. Solidificar a
temperatura ambiente,
asegurando un espesor
uniforme (~4 mm).

6. Usar para ensayos de

difusión con discos o
cilindros impregnados con
el antibiótico.

1. Disolver
completamente los
ingredientes en 1 litro de medio en polvo: conservar en
agua destilada, agitando envase cerrado, en lugar
constantemente. fresco, seco (10–25 °C),
protegido de la luz y humedad.
(g/L): 2. Ajustar el pH si es
necesario. Medio preparado: refrigerar
Caseína hidrolizada (triptosa): (2–8 °C), utilizar dentro de los
16.0 3. Esterilizar en autoclave 5 a 7 días posteriores a su
Agar para antibióticos #9 a 121 °C durante 15 preparación.
es un medio estandarizado para ensayos de actividad Extracto de levadura: 4.0 minutos.
antibiótica, diseñado para ofrecer condiciones óptimas de Precaución: evitar
crecimiento del microorganismo indicador y permitir una Glucosa: 2.0 4. Enfriar a 45–50 °C contaminación, condensación
difusión precisa y reproducible del antibiótico. Es antes de verter en cajas o desecación antes del uso.
ampliamente usado en laboratorios de control de calidad Cloruro de sodio: 5.0 Petri estériles.
para antibióticos como cefalosporinas, macrólidos y
Fosfato monopotásico: 1.0 5. Verter uniformemente
carbapenémicos, tanto en análisis de potencia como en
(~4 mm de espesor) para
pruebas de equivalencia farmacéutica.
Agar: 15.0 asegurar homogeneidad en
la difusión.
Agua destilada: 1 litro
6. Una vez solidificado,
utilizar para pruebas con
discos, cilindros o pozos

AG-28 .
1. Disolver
completamente todos los Medio en polvo: conservar en
ingredientes en 1 litro de envase bien cerrado, lugar
agua destilada, agitando seco y fresco (10–25 °C),
continuamente. protegido de la humedad y la
luz.
2. Ajustar el pH a 7.3 si es
(g/L): necesario. Medio preparado: conservar
en refrigeración (2–8 °C),
Agar para antibióticos #10 Caseína peptonizada: 15.0 3. Esterilizar en autoclave protegido de la desecación y
está formulado para pruebas de actividad antimicrobiana a 121 °C durante 15 contaminación.
estandarizada, empleadas principalmente en ensayos de Extracto de levadura: 3.0 minutos.
Vida útil: hasta 7 días desde su
control de calidad y evaluación farmacológica de
Cloruro de sodio: 5.0 4. Enfriar a 45–50 °C y preparación en condiciones
antibióticos. Está diseñado para permitir una difusión
verter en cajas Petri estériles.
uniforme del agente antimicrobiano y un crecimiento Glucosa: 1.0 estériles en capas
reproducible del microorganismo indicador. uniformes de ~4 mm. Recomendación: utilizar
Fosfato dipotásico: 1.0 controles positivos y negativos
5. Solidificar para verificar consistencia de
Agar: 15.0 completamente antes de resultados.
aplicar discos, cilindros o
AG-29 Agua destilada: 1 litro pozos con antibiótico.
1. Disolver Medio en polvo: conservar en
completamente los lugar seco, fresco (10–25 °C),
ingredientes en 1 litro de en envase cerrado, protegido
(g/L): agua destilada, con de la luz.
agitación constante.
Caseína peptonizada: 15.0 Medio preparado: refrigerar
Agar para antibióticos #11 2. Ajustar el pH a 7.2 ± (2–8 °C) y mantener en
es un medio estandarizado para evaluar la potencia, Extracto de levadura: 5.0 0.1 si es necesario. condiciones estériles.
eficacia y espectro de acción de antibióticos por métodos
de difusión (discos, cilindros o pozos). Está formulado para Cloruro de sodio: 5.0 3. Esterilizar en autoclave Vida útil: hasta 7 días si se
a 121 °C por 15 minutos. almacena adecuadamente.
proporcionar un crecimiento uniforme de bacterias
Glucosa: 1.0
indicadores y una difusión controlada y reproducible del
4. Enfriar a 45–50 °C y Recomendación: evitar
antibiótico. Fosfato monopotásico: 1.0 verter en cajas Petri condensación en la superficie
estériles, formando una antes del ensayo
Agar: 15.0 capa de 4 mm de espesor.

Agua destilada: 1 litro 5. Dejar solidificar

completamente antes de
AG-30 aplicar el antibiótico
1. Disolver
completamente los
ingredientes en 1 litro de
agua destilada, con
agitación constante.

(g/L): 2. Ajustar el pH a 7.2 ± Medio en polvo: conservar en

0.1 si es necesario. lugar seco, fresco (10–25 °C),
Caseína peptonizada: 15.0 en envase cerrado, protegido
Agar para antibióticos #19 3. Esterilizar en autoclave de la luz.
es un medio estandarizado para evaluar la potencia, Extracto de levadura: 5.0 a 121 °C por 15 minutos.
Medio preparado: refrigerar
eficacia y espectro de acción de antibióticos por métodos
Cloruro de sodio: 5.0 (2–8 °C) y mantener en
de difusión (discos, cilindros o pozos). Está formulado para
4. Enfriar a 45–50 °C y condiciones estériles.
proporcionar un crecimiento uniforme de bacterias Glucosa: 1.0 verter en cajas Petri
indicadores y una difusión controlada y reproducible del estériles, formando una Vida útil: hasta 7 días si se
antibiótico. Fosfato monopotásico: 1.0 capa de 4 mm de espesor. almacena adecuadamente.
Es especialmente útil en el análisis de antibióticos como
eritromicina, rifampicina, penicilinas y derivados Agar: 15.0 5. Dejar solidificar Recomendación: evitar
semisintéticos, en pruebas de control de calidad y completamente antes de condensación en la superficie
AG-31 bioequivalencia. Agua destilada: 1 litro aplicar el antibiótico. antes del ensayo.
Agar para antibióticos #32 (g/L): 1. Disolver Medio deshidratado: conservar
está formulado para ensayos de actividad antibiótica por completamente los en envase cerrado, en lugar
AG-32 difusión, específicamente optimizado para antibióticos que Caseína hidrolizada: 14.0 ingredientes en 1 litro de seco, entre 10–25 °C,
7
 requieren una mayor precisión en su evaluación agua destilada, con protegido de la humedad y la
cuantitativa, como ciertos antibióticos glicopéptidos, Extracto de levadura: 4.0 agitación constante. luz.
oxazolidinonas y lipopeptídicos. Su composición permite
una difusión uniforme y crecimiento constante del Glucosa: 2.0 2. Ajustar el pH si es Medio preparado: mantener en
microorganismo indicador, garantizando resultados necesario a 7.2 ± 0.1. refrigeración (2–8 °C), usar
reproducibles. Cloruro de sodio: 5.0 dentro de 5–7 días.
3. Esterilizar en autoclave
Fosfato monopotásico: 1.0 a 121 °C durante 15 Precaución: evitar desecación,
minutos. formación de condensación o
Agar: 15.0 contaminación.
4. Enfriar a 45–50 °C.
Agua destilada: 1 litro
5. Verter en placas Petri
estériles asegurando un
espesor homogéneo de ~4
mm.

6. Una vez solidificado,

aplicar los métodos de
ensayo: discos, pozos o
cilindros con antibiótico.
1. Disolver
completamente todos los
componentes en 1 litro de
agua destilada con
agitación constante Medio en polvo: conservar en
envase hermético, seco,
(g/L): 2. Ajustar el pH si es protegido de la luz, entre 10 y
necesario a 7.3. 25 °C.
Agar para antibióticos #35 Peptona de caseína: 15.0
es un medio estandarizado para pruebas de potencia y 3. Esterilizar en autoclave Medio preparado: refrigerar
sensibilidad de antibióticos, diseñado para minimizar la Extracto de levadura: 4.0 a 121 °C durante 15 (2–8 °C), protegido de la
interferencia en la difusión del compuesto activo y minutos. desecación y la
asegurar un crecimiento óptimo del microorganismo Glucosa: 2.0 contaminación.
indicador. Es especialmente útil en ensayos con 4. Enfriar a 45–50 °C.
Cloruro de sodio: 5.0 Vida útil: hasta 7 días desde su
betalactámicos, aminoglucósidos y glicopéptidos, usados
5. Verter en placas Petri preparación.
en productos farmacéuticos de control de calidad y
Fosfato dipotásico: 1.0 estériles, asegurando una
bioequivalencia. capa uniforme de 4 mm. Precaución: evitar
Agar: 15.0 condensación excesiva y
6. Dejar solidificar a validar con cepas control antes
Agua destilada: 1 litro temperatura ambiente del uso
antes de aplicar los
agentes antibióticos.
AG-33
1. Disolver
completamente los
ingredientes en 1 litro de
agua destilada con Medio en polvo: conservar en
agitación continua. envase hermético, lugar fresco
y seco (10–25 °C), protegido
(g/L): 2. Ajustar pH si es de la luz y la humedad.
necesario a 7.3 ± 0.1.
Caseína peptonizada: 15.0 Medio preparado: mantener en
Agar para antibióticos #36 3. Esterilizar en autoclave refrigeración (2–8 °C), en
es un medio especializado para pruebas de actividad Extracto de levadura: 4.0 a 121 °C durante 15 condiciones estériles.
antimicrobiana por difusión y evaluación de potencia de minutos.
antibióticos. Su formulación precisa garantiza una difusión Glucosa: 2.0 Vida útil: hasta 7 días tras su
4. Enfriar a 45–50 °C. preparación.
controlada y reproducible, siendo ideal para ensayos
Cloruro de sodio: 5.0
farmacéuticos con antibióticos de espectro amplio como
5. Verter en placas Petri Importante: controlar la
tetraciclinas, cefalosporinas, fluoroquinolonas y Fosfato monopotásico: 1.0 estériles en capas de ~4 calidad mediante cepas
macrólidos. mm de espesor. estándar y evitar
Agar: 15.0 condensación.
6. Solidificar
Agua destilada: 1 litro completamente antes de
aplicar discos o soluciones
AG-34 de antibióticos.
1. Disolver
completamente todos los
componentes en 1 litro de
agua destilada, con
agitación constante.
(g/L): Medio en polvo: mantener en
2. Ajustar el pH a 7.3 si es envase bien cerrado, en lugar
Caseína hidrolizada (triptosa): necesario. seco y fresco (10–25 °C),
Agar para antibióticos #40 14.0 protegido de la luz.
está diseñado para pruebas de difusión de antibióticos y 3. Esterilizar en autoclave
evaluación de su potencia bioactiva en formulaciones Extracto de levadura: 5.0 a 121 °C durante 15 Medio preparado: conservar
farmacéuticas. Este medio permite una difusión minutos. en refrigeración (2–8 °C), en
homogénea del antibiótico y promueve un crecimiento Glucosa: 1.0 condiciones estériles.
4. Enfriar a 45–50 °C.
uniforme del microorganismo indicador. Es especialmente
Cloruro de sodio: 5.0 Vida útil: hasta 7 días desde la
útil para pruebas con quinolonas, betalactámicos y
5. Verter en placas Petri preparación.
macrólidos, entre otros. Fosfato dipotásico: 1.0 estériles con un espesor
uniforme (~4 mm). Precaución: evitar exposición
Agar: 15.0 a humedad o condensación
6. Solidificar a antes del ensayo
Agua destilada: 1 litro temperatura ambiente
antes de aplicar discos o
AG-35 soluciones de antibióticos.
Agar Papa Dextrosa (g/L):
es un medio enriquecido y no selectivo, ampliamente 1. Preparar la infusión de Medio en polvo o preparado
utilizado para el cultivo de hongos filamentosos, levaduras Infusión de papa (equivalente a papa cocida filtrada (o casero: conservar en lugar
200 g de papas peladas y usar extracto de papa en seco, fresco (10–25 °C),
y otros microorganismos acidófilos. Es ideal para el
cocidas): 4.0 polvo comercial). protegido de la luz.
aislamiento de mohos y levaduras en alimentos, agua,
productos farmacéuticos y cosméticos, así como para Dextrosa (glucosa): 20.0 2. Disolver la dextrosa y el Medio preparado: refrigerar a
estudios de morfología y esporulación de hongos. También agar en la infusión 2–8 °C en condiciones
se utiliza para pruebas de sensibilidad a fungicidas. Agar: 15.0 caliente. estériles.

Agua destilada: 1 litro 3. Ajustar pH a 5.6 ± 0.2 Vida útil: hasta 2 semanas
si es necesario. para placas preparadas.
AG-36

8
 4. Esterilizar en autoclave Opcional: puede
a 121 °C durante 15 suplementarse con antibióticos
minutos. (cloranfenicol, estreptomicina)
para inhibir bacterias
5. Enfriar a 45–50 °C y
verter en cajas Petri
estériles. .

6. Solidificar
completamente antes de
incubar
(g/L): 1. Disolver
completamente todos los Medio en polvo: mantener en
Triptosa: 3.0 ingredientes en 1 litro de envase hermético, en lugar
agua destilada. fresco y seco (10–25 °C),
Glucosa: 10.0 protegido de la luz.
2. Calentar hasta que el
Agar Glucosa Rojo Violeta Billis (RVBAG) Lactosa: 10.0 agar se disuelva por Medio preparado: refrigerar a
es un medio selectivo y diferencial diseñado para el completo. 2–8 °C, evitar desecación y
aislamiento y recuento de coliformes totales y fecales en Sales biliares: 1.5 condensación.
alimentos y aguas. Las sales biliares y los colorantes (rojo 3. No autoclavar. Calentar
violeta y cristal violeta) inhiben a los microorganismos Rojo violeta: 0.002 hasta ebullición suave y Vida útil: máximo 5–7 días en
retirar. condiciones estériles.
grampositivos. Las bacterias coliformes fermentan la
Cristal violeta: 0.001
glucosa y producen ácidos, lo que provoca un cambio de
4. Enfriar a 45–50 °C. Precaución: desechar si
color en el indicador Cloruro de sodio: 5.0 cambia de color antes de
inocular.
Fosfato disódico: 3.0 5. Verter en placas Petri
estériles bajo condiciones
Agar: 15.0 asépticas.

AG-37 Agua destilada: 1 litro

1. Disolver todos los
ingredientes en 1 litro de
(g/L): agua destilada con
agitación. Medio en polvo: conservar en
Peptona: 17.0 envase cerrado, seco,
2. Calentar hasta protegido de la humedad y la
Agar MacConkey Lactosa: 10.0 ebullición suave para luz, a 10–25 °C.
es un medio selectivo y diferencial utilizado ampliamente disolver el agar por
para el aislamiento de bacterias gramnegativas entéricas, Sales biliares: 1.5 completo. Medio preparado: refrigerar
(2–8 °C) y mantener protegido
especialmente de la familia Enterobacteriaceae. Contiene
Cloruro de sodio: 5.0 3. Esterilizar en autoclave de la desecación.
sales biliares y cristal violeta que inhiben a las bacterias
a 121 °C por 15 minutos.
grampositivas, y lactosa con rojo neutro como indicador Rojo neutro: 0.03 Vida útil: hasta 2 semanas
para diferenciar fermentadoras de lactosa (colonias 4. Enfriar a 45–50 °C. bajo condiciones estériles.
rosas/rojas) de no fermentadoras (colonias incoloras o Cristal violeta: 0.001
pálidas). 5. Verter en cajas Petri Importante: descartar placas
Agar: 15.0 estériles bajo condiciones que cambien de color o
asépticas presenten resequedad.
AG-38 Agua destilada: 1 litro .
1. Disolver todos los
componentes en 1 litro de
(g/L): agua destilada. Medio en polvo: conservar en
envase cerrado, seco, entre
Peptona: 20.0 2. Calentar con agitación 10–25 °C, protegido de la luz.
Agar Cetrimida hasta disolver
es un medio selectivo diseñado específicamente para el Magnesio cloruro: 1.4 completamente. Medio preparado: refrigerar
aislamiento e identificación de Pseudomonas aeruginosa (2–8 °C), evitar condensación
en muestras clínicas, farmacéuticas, ambientales y Sulfato de potasio: 10.0 3. Esterilizar en autoclave y desecación.
cosméticas. Contiene cetrimida (cloruro de a 121 °C por 15 minutos.
Cetrimida: 0.3 Vida útil: hasta 7 días tras la
cetiltrimetilamonio), un agente inhibidor que suprime el
4. Enfriar a 45–50 °C y preparación.
crecimiento de la mayoría de bacterias excepto P.
Agar: 13.6 verter en cajas Petri
aeruginosa, la cual produce pigmentos característicos estériles. Importante: verificar
como piocianina (azul verdoso) y fluoresceína. Agua destilada: 1 litro pigmentación característica de
5. Solidificar a P. aeruginosa para
temperatura ambiente. Las confirmación preliminar
colonias de P. aeruginosa
mostrarán pigmentación
AG-39 típica tras incubación.
1. Disolver todos los Medio en polvo: conservar en
ingredientes en 1 litro de envase hermético, lugar fresco
(g/L): agua destilada con y seco (10–25 °C), protegido
agitación. de la luz.
Peptona: 10.0
2. Calentar hasta disolver Medio preparado: mantener en
Extracto de carne: 1.0 por completo. refrigeración (2–8 °C), evitar
la desecación y la
Agar Sal Manitol
Cloruro de sodio: 75.0 3. Esterilizar en autoclave condensación.
es un medio selectivo y diferencial diseñado
a 121 °C por 15 minutos.
principalmente para el aislamiento e identificación de Manitol: 10.0 Vida útil: hasta 2 semanas
Staphylococcus aureus y otros estafilococos. Su alta 4. Enfriar a 45–50 °C y bajo condiciones estériles.
concentración de cloruro de sodio (7.5%) inhibe la mayoría Rojo de fenol: 0.025 verter en cajas Petri
de bacterias no halotolerantes. El manitol permite estériles. Nota: S. aureus fermenta
diferenciar fermentadores (colonias amarillas con halo) de Agar: 15.0 manitol → halo amarillo; S.
no fermentadores (colonias rosadas o rojas), gracias al rojo 5. Solidificar y almacenar epidermidis → sin cambio de
AG-40 fenol como indicador de PH Agua destilada: 1 litro a temperatura adecuada. color.

AG-41 Medio de enriquecimiento para Clostrodios

(g/L): 1. Disolver
completamente los Medio en polvo: conservar en
Extracto de levadura: 5.0 ingredientes básicos en 1 envase cerrado, en lugar seco
litro de agua destilada. y fresco (10–25 °C), protegido
Triptosa: 15.0 de la luz.
Agar Columbia
2. Esterilizar en autoclave
Este medio está diseñado para el enriquecimiento selectivo
Glucosa: 5.0 a 121 °C durante 15 Medio preparado sin sangre:
y crecimiento de bacterias anaerobias estrictas del género minutos. refrigerar (2–8 °C), proteger
Clostridium, incluyendo especies patógenas como C. Cloruro de sodio: 5.0 de desecación
perfringens, C. botulinum y C. difficile. Se utiliza en el 3. Enfriar a 45–50 °C. Medio preparado con
análisis microbiológico de alimentos, aguas, suelos y Sulfito de sodio: 0.5 sangre: conservar en
muestras clínicas. Puede contener agentes reductores que 4. Si se requiere, agregar refrigeración (2–8 °C), usar en
eliminan el oxígeno disuelto, creando condiciones Sulfato ferroso: 0.2 sangre estéril (filtrada) un máximo de 5–7 días.
AG-42 favorables para el desarrollo de anaerobios. para medios con sangre.
9
 Cisteína HCl: 0.5 (agente Importante: evitar
reductor) 5. Verter en cajas Petri condensación en la superficie
estériles bajo condiciones y exposición a fluctuaciones
Resazurina: 0.001 (indicador de asépticas. de temperatura
anaerobiosis, rosa en presencia de
O₂)

Agar (opcional para medio

semisólido): 0–15.0

Agua destilada: 1 litro

Medio deshidratado:
1. Disolver todos los conservar en envase
ingredientes en 1 litro de hermético, en lugar fresco y
agua destilada, agitando seco (10–25 °C), protegido de
(g/L): constantemente. la luz.
Peptona: 10.0
2. Calentar hasta disolver Medio preparado: almacenar
Lactosa: 10.0 completamente sin hervir en refrigeración (2–8 °C), usar
Agar EMB-L (Eosin Methylene Blue Agar - Lactosa) en exceso en un plazo máximo de 7 días.
es un medio selectivo y diferencial utilizado para el Eosina Y: 0.4 .
aislamiento y diferenciación de bacterias gramnegativas 3. Esterilizar en autoclave Nota: descartar si el medio se
Azul de metileno: 0.065 a 121 °C durante 15 decolora, se seca o presenta
entéricas, especialmente Escherichia coli y Enterobacter.
minutos. signos de contaminación.
Contiene eosina Y y azul de metileno como colorantes
Cloruro de sodio: 5.0
inhibidores de bacterias grampositivas. La fermentación de 4. Enfriar a 45–50 °C.
lactosa produce ácidos que interactúan con los colorantes, Agar: 15.0
generando colonias de distintos colores: 5. Verter en placas Petri
• E. coli: colonias negras con brillo metálico verdoso. Agua destilada: 1 litro estériles.
• Otros fermentadores: colonias púrpuras.
• No fermentadores: colonias incoloras. 6. Incubar a 35–37 °C
AG-43 durante 18–24 horas.
Medio deshidratado:
1. Disolver todos los conservar en envase bien
ingredientes en 1 litro de cerrado, lugar fresco y seco
agua destilada con (10–25 °C), protegido de la
agitación constante. luz.
(g/L):
Citrato de sodio: 2.0 2. Esterilizar en autoclave Medio preparado: refrigerar
a 121 °C durante 15 (2–8 °C), en posición vertical,
Fosfato disódico: 1.0 minutos protegido de la desecación.
Agar Citrato de Simmon .
es un medio diferencial y mínimo utilizado para evaluar la Fosfato monopotásico: 3. Enfriar a 45–50 °C. Vida útil: hasta 2 semanas
capacidad de una bacteria para utilizar el citrato como 1.0 .
única fuente de carbono y el ion amonio como única fuente 4. Verter en tubos de Nota: el medio debe
de nitrógeno. Es una prueba clave para diferenciar Cloruro de amonio: 1.0 ensayo y colocarlos en permanecer
miembros de la familia Enterobacteriaceae como posición inclinada verde antes de su uso; el
Salmonella, Enterobacter, y Citrobacter de Escherichia coli Cloruro de sodio: 5.0 ("slant") mientras se cambio a azul sin inocular
solidifican. indica contaminación o
(que normalmente no lo utiliza).
Azul de bromotimol: 0.08 alcalinización por el ambiente.
Reacción positiva: cambio de color de verde a azul por
5. Inocular por estría en
alcalinización (utilización de citrato y producción de Agar: 15.0 superficie e incisión en el
amoníaco) fondo
Agua destilada: 1 litro .
6. Incubar a 35–37 °C
durante 24–48 horas.

AG-44 .
1. Disolver
(g/L): completamente los
Peptona: 5.0 ingredientes en 1 L de
agua destilada Medio en polvo: conservar
Extracto de levadura: 2.5 . en lugar seco, fresco (10–25
2. Esterilizar en autoclave °C), protegido de la humedad
Cloruro de sodio: 5.0 a 121 °C durante 15 y la luz.
Agar Neutralizante minutos.
es un medio selectivo y de recuperación utilizado para el Polisorbato 80 (Tween Medio preparado: almacenar
cultivo de microorganismos que han estado expuestos a 80): 5.0 3. Enfriar a 45–50 °C y en refrigeración (2–8 °C),
verter en cajas Petri evitar desecación.
desinfectantes químicos o antisépticos. Contiene agentes
Lecitina: 1.0 estériles.
neutralizantes que inactivan compuestos como fenoles,
Vida útil: hasta 7 días en
cloro, compuestos amoniacales cuaternarios y aldehídos, Tiosulfato de sodio: 0.5 4. Solidificar bajo condiciones estériles.
permitiendo recuperar organismos viables en estudios de condiciones asépticas.
validación de limpieza y control de desinfección ambiental. Histidina: 1.0 Nota: útil en monitoreo
ambiental y análisis
Agar: 15.0 microbiológico de superficies
desinfectadas.
AG-45 Agua destilada: 1 litro
1. Disolver
completamente los
ingredientes en 1 litro de Medio en polvo: conservar en
(g/L): agua destilada. lugar seco y fresco (10–25
Peptona: 7.0 °C), protegido de la luz.
2. Calentar con agitación
Glucosa: 10.0 constante hasta que el agar Medio preparado: refrigerar
se disuelva (2–8 °C), evitar desecación.
Sales biliares: 1.5 .
Agar Glucosa Rojo Violeta Billis (RVBA) 3. No autoclavar. Vida útil: hasta 5–7 días tras
es un medio selectivo y diferencial diseñado para el Rojo violeta: 0.002 Calentar solo hasta su preparación.
ebullición leve.
aislamiento y enumeración de bacterias coliformes en
Cristal violeta: 0.001 Reacción positiva: formación
productos alimentarios, aguas y superficies. Contiene sales
4. Enfriar a 45–50 °C y de colonias rojas o púrpuras
biliares y colorantes que inhiben bacterias grampositivas, Fosfato disódico: 3.0 verter en placas Petri en caso de fermentación
mientras que la glucosa permite observar la fermentación estériles.
mediante acidificación, que cambia el color del indicador Cloruro de sodio: 5.0
pH (rojo violeta). 5. Incubar a 35–37 °C por
Agar: 15.0 24 horas.

AG-46 Agua destilada: 1 litro .

(g/L): 1. Disolver
Agar Cuenta Estándar Peptona de caseína: 5.0 completamente todos los Medio en polvo: conservar en
es un medio no selectivo y general utilizado para el ingredientes en 1 litro de frasco hermético, en lugar
recuento total de microorganismos mesófilos aerobios Extracto de levadura: 2.5 agua destilada fresco y seco (10–25 °C).
AG-47 viables en alimentos, aguas, productos farmacéuticos y .

10
 cosméticos. Permite evaluar la carga microbiana total Glucosa: 1.0 2. Calentar con agitación Medio preparado: refrigerar
como indicador de calidad e higiene. Es el medio hasta disolver (2–8 °C), protegido de la luz y
recomendado por normas internacionales como ISO, AOAC Agar: 15.0 completamente la desecación.
y FDA para métodos de vertido en placa y siembra en .
profundidad. Agua destilada: 1 litro 3. Esterilizar en autoclave Vida útil: hasta 2 semanas
a 121 °C durante 15 después de preparado.
minutos.
Nota: en condiciones ideales,
4. Enfriar a 45–50 °C y se observa una gran variedad
verter en placas Petri de colonias de diferentes
estériles (o usar en técnica formas, colores y tamaños.
de vertido en placa).

5. Incubar a 30–37 °C
durante 24–72 horas según
el protocolo aplicado.
1. Disolver todos los Medio en polvo: conservar en
ingredientes en 1 litro de recipiente hermético, seco y
(g/L): agua destilada. protegido de la luz (10–
Triptosa: 10.0 25 °C).
2. Calentar con agitación
Agar Indicador PM Cloruro de sodio: 5.0 hasta completa disolución. Medio preparado: almacenar
es un medio diferencial utilizado para evaluar la capacidad en refrigeración (2–8 °C),
Manitol: 10.0 3. Esterilizar en autoclave evitando la desecación y
de las bacterias para fermentar manitol con producción de
a 121 °C durante 15 contaminación.
ácido. Es útil en la identificación de ciertos grampositivos y
Rojo de fenol: 0.025 minutos
gramnegativos, especialmente Staphylococcus aureus y . Vida útil: hasta 7 días
otros estafilococos. Contiene rojo de fenol como indicador Agar: 15.0 4. Enfriar a 45–50 °C y después de preparado.
de pH, que vira de rojo a amarillo en presencia de ácidos. verter en cajas Petri
Agua destilada: 1 litro estériles Resultado positivo: viraje
. del medio a amarillo por
5. Solidificar a fermentación de manitol (pH
AG-48 temperatura ambiente. <6.8).
1. Disolver todos los
ingredientes en 1 litro de
agua destilada con
agitación.
(g/L):
Triptosa: 10.0 2. Calentar hasta disolver Medio en polvo: conservar en
completamente. frasco bien cerrado, seco, en
Agar Swarm Extracto de carne: 3.0 lugar fresco (10–25 °C).
es un medio especializado no selectivo formulado para 3. Esterilizar en autoclave
observar y estudiar el fenómeno de motilidad en enjambre Cloruro de sodio: 5.0 a 121 °C durante 15 Medio preparado: refrigerar
("swarming"), característico de algunas especies minutos. (2–8 °C), en cajas cerradas
Agar: 3.5 – 5.0 (menor para evitar desecación
bacterianas como Proteus mirabilis, Proteus vulgaris y otras
concentración que otros 4. Enfriar a 45–50 °C. .
bacterias móviles. Este comportamiento se manifiesta
medios para facilitar la Vida útil: hasta 5–7 días si se
como una expansión en olas concéntricas sobre la movilidad) 5. Verter en cajas Petri mantiene estéril.
superficie del medio. delgadas (baja altura de
Agua destilada: 1 litro medio) para facilitar la Nota: no se recomienda
movilidad invertir las placas; manipular
. con cuidado para evitar
6. Incubar a 35–37 °C por condensación que afecte la
AG-49 24–48 horas. motilidad.
1. Disolver
completamente los
componentes en 1 litro de Medio en polvo: conservar en
(g/L): agua destilada. lugar seco y fresco (10–25
Extracto de carne: 2.0 °C), protegido de la luz.
2. Calentar agitando hasta
Agar Mueller-Hinton Hidrolizado de caseína disolver completamente. Medio preparado: refrigerar
es el medio estándar internacional para realizar pruebas de (2–8 °C) en condiciones
susceptibilidad antimicrobiana (antibiogramas) mediante la (triptosa): 17.5 3. Esterilizar en autoclave estériles
a 121 °C por 15 minutos. .
técnica de difusión en disco (Kirby-Bauer). Es un medio no
Almidón: 1.5 Vida útil: hasta 7 días.
selectivo y no diferencial, con composición controlada para
4. Enfriar a 45–50 °C y
una difusión óptima de antibióticos. Se recomienda Agar: 17.0 verter en placas Petri Importante: el grosor del
también para pruebas con cepas exigentes como estériles con espesor de 4 medio afecta la difusión del
Haemophilus y Neisseria (con suplemento). Agua destilada: 1 litro mm. antibiótico; controlar volumen
por placa (aprox. 25 mL)
5. Solidificar y mantener
en refrigeración hasta su
AG-50 uso.
(g/L): 1. Disolver todos los
Triptosa: 10.0 ingredientes, excepto la Medio deshidratado:
yema y la telurita, en 1 conservar en lugar seco,
Extracto de levadura: 5.0 litro de agua destilada. oscuro, a 10–25 °C.

Manitol: 10.0 2. Esterilizar en autoclave Medio preparado: refrigerar

a 121 °C por 15 minutos. (2–8 °C), evitar luz directa.
Agar Vogel Jhonson Cloruro de sodio: 5.0
es un medio selectivo y diferencial diseñado 3. Enfriar a 45–50 °C. Vida útil: hasta 5 días tras su
específicamente para el aislamiento e identificación Fosfato disódico: 3.0 preparación con suplementos.
presuntiva de Staphylococcus aureus a partir de muestras 4. Agregar asépticamente 
clínicas, alimentarias o ambientales. La selectividad es Rojo fenol: 0.025 la yema de huevo y la Resultados esperados:
solución de telurita • S. aureus: colonias
conferida por la telurita potásica y la yema de huevo,
Yema de huevo (adición potásica estéril. negras rodeadas de
mientras que la fermentación de manitol se detecta por el
posterior): 20 mL (aprox.) halo opaco (lecitinasa
cambio de color del indicador pH. Solución de telurita 5. Mezclar suavemente y +, manitol +).
potásica al 1%: 10 mL verter en placas Petri • Otros estafilococos: sin
(adición posterior) estériles. halo o sin coloración
negra.
Agar: 15.0 6. Incubar a 35–37 °C por
24–48 h.
AG-51 Agua destilada: 1 litro
Agar Hígado de Ternera
(g/L): Medio en polvo o base
es un medio enriquecido y especializado utilizado Extracto de hígado de 1. Disolver todos los preparada sin suplemento:
principalmente para el aislamiento y cultivo de bacterias ternera: 30.0 componentes en 1 litro de conservar en lugar fresco y
anaerobias y otros microorganismos exigentes agua destilada. seco (10–25 °C).
provenientes de muestras clínicas, alimenticias o Triptosa o peptona: 10.0
ambientales. Su alto contenido de nutrientes provenientes 2. Calentar hasta disolver Medio preparado: refrigerar
del extracto de hígado lo hace ideal para bacterias como Glucosa: 5.0 completamente el agar. a 2–8 °C, evitar exposición al
AG-52 Clostridium spp., Fusobacterium spp., y otros anaerobios. oxígeno.

11
 Cloruro de sodio: 5.0 3. Esterilizar en autoclave
a 121 °C durante 15 Vida útil: 5–7 días bajo
minutos. condiciones anaeróbicas.
Cisteína HCl: 0.5 (agente
reductor) 4. Enfriar en condiciones Nota: el color rosado indica
anaeróbicas si se usará exposición al oxígeno (por
Resazurina: 0.001 para bacterias resazurina), debe mantenerse
(indicador redox) estrictamente anaerobias. incoloro antes de uso.

Agar: 15.0 5. Verter en tubos o cajas

Petri estériles, sellar si es
Agua destilada: 1 litro necesario.

(g/L aprox.):
Extracto de levadura: 10.0

Extracto de carne: 10.0

Cloruro de cisteína HCl: 1. Disolver la base BCYE

0.4 en agua destilada.
Base en polvo: conservar
2. Esterilizar en autoclave entre 10–25 °C en envase
Pirofosfato férrico: 0.25 a 121 °C durante 15 hermético y seco.
minutos
Ácido alfa-cetoglutárico: . Medio preparado con
1.0 3. Enfriar a 45–50 °C. suplementos: refrigerar (2–
Agar GVPC 8 °C), protegido de la luz.
es un medio selectivo utilizado para el aislamiento de Carbón activado: 2.0 4. Agregar asépticamente
Legionella spp., especialmente Legionella pneumophila, a los suplementos Vida útil: hasta 5 días una vez
partir de muestras clínicas, aguas y ambientes acuáticos. Se Agar: 12.0 antibióticos estériles preparado con antibióticos.
basa en el medio BCYE (Agar Extracto de Levadura con Suplementos (GVPC)
Carbón y L-cisteína), suplementado con antibióticos como antimicrobianos: . Nota: Colonias de Legionella
o Glicina: 3.0 5. Verter en cajas Petri pueden requerir tinción y
glicina, vancomicina, polimixina B y cicloheximida, para
o Vancomicina: estériles bajo condiciones confirmación bioquímica.
inhibir el crecimiento de otros microorganismos.
0.001 asépticas
o Polimixina B: .
0.0005 6. Incubar a 35–37 °C en
o Cicloheximida: atmósfera húmeda con
0.0008 2.5% CO₂ por 3–10 días

Agua destilada: 1 litro

AG-53
1. Disolver
completamente los Medio en polvo: conservar en
(g/L): ingredientes en 1 litro de envase hermético, seco y
Peptona: 5.0 agua destilada. protegido de la luz (10–25
°C).
Extracto de levadura: 2.5 2. Calentar hasta disolver
Agar Letheen modificado por completo. Medio preparado: mantener
es un medio selectivo y neutralizante empleado para el Cloruro de sodio: 5.0 en refrigeración (2–8 °C),
3. Esterilizar en autoclave protegido de la desecación.
recuento de bacterias viables en presencia de residuos de
Lecitina: 1.0 a 121 °C durante 15
antisépticos y desinfectantes, especialmente en productos
minutos Vida útil: hasta 7 días tras su
cosméticos, farmacéuticos y superficies ambientales. Polisorbato 80 (Tween . preparación.
Contiene lecitina y polisorbato 80, que neutralizan 80): 7.0 4. Enfriar a 45–50 °C y
compuestos como amonios cuaternarios, alcoholes y verter en placas Petri Nota: permite evaluar el
fenoles. Agar: 15.0 estériles. efecto residual de productos
antisépticos en muestras
Agua destilada: 1 litro 5. Solidificar bajo tratadas o superficies.
AG-54 condiciones asépticas.
1. Disolver los Medio en polvo: conservar en
ingredientes en 1 litro de lugar fresco, seco y oscuro
agua destilada (10–25 °C).
(g/L): .
Extracto de malta: 20.0 2. Calentar con agitación Medio preparado: refrigerar
Agar Extracto de Malta hasta disolución completa. (2–8 °C), evitando la
es un medio no selectivo y nutritivo, ampliamente utilizado Peptona: 1.0 (opcional) desecación.
3. Esterilizar en autoclave
para el cultivo, aislamiento y enumeración de hongos
Dextrosa (glucosa): 20.0 a 121 °C por 15 minutos Vida útil: hasta 2 semanas
filamentosos y levaduras, especialmente en alimentos,
. tras su preparación.
bebidas, productos farmacéuticos y ambientales. Favorece Agar: 15.0 4. Enfriar a 45–50 °C y
el crecimiento de especies como Aspergillus, Penicillium, verter en placas Petri Nota: el bajo pH inhibe
Saccharomyces y Candida. Puede ser ajustado en pH para Agua destilada: 1 litro estériles. bacterias; puede
favorecer hongos y limitar el crecimiento bacteriano. suplementarse con antibióticos
5. Incubar a 25–30 °C (cloranfenicol, etc.) si se
durante 3–7 días requiere mayor selectividad.
AG-55 (dependiendo del hongo).
Medio deshidratado:
conservar en envase
(g/L): 1. Disolver hermético, seco y protegido de
Peptona de caseína: 10.0 completamente los la luz (10–25 °C).
Extracto de carne: 5.0 ingredientes en 1 litro de
agua destilada. Medio preparado: almacenar
Lactosa: 10.0 en refrigeración (2–8 °C),
2. Calentar suavemente evitar desecación y
Sacarosa: 10.0 hasta disolución completa. condensación.

Fosfato disódico: 1.0 3. No esterilizar en Vida útil: hasta 5 días tras su

Agar Verde Brillante
autoclave. Calentar solo preparación.
es un medio selectivo y diferencial utilizado principalmente
Verde brillante: 0.0125 hasta ebullición suave.
para el aislamiento de Salmonella spp. (excepto Salmonella Resultados típicos:
Typhi) a partir de alimentos, aguas y muestras clínicas. El Rojo fenol (indicador 4. Enfriar a 45–50 °C y salmonella spp.: colonias rojas
colorante verde brillante inhibe el crecimiento de la pH): 0.08 verter en cajas Petri a rosadas, translúcidas.
mayoría de las bacterias grampositivas y muchas estériles. Fermentadores de
gramnegativas, mientras que la fermentación de lactosa y Agar: 15.0 lactosa/sacarosa: colonias
sacarosa permite la diferenciación de especies. 5. Incubar a 35–37 °C por amarillas rodeadas de medio
AG-56 Agua destilada: 1 litro 24–48 h. amarillo.
(g/L): 1. Disolver todos los
Agar Eosina Azul de Metileno (AEMB) ingredientes en 1 litro de Medio deshidratado:
es un medio selectivo y diferencial utilizado principalmente Peptona: 10.0 agua destilada con conservar entre 10–25 °C en
para el aislamiento y diferenciación de bacterias agitación constante. lugar seco y oscuro.
AG-57 gramnegativas entéricas, en especial Escherichia coli, a Lactosa: 10.0

12
 partir de muestras clínicas, aguas y alimentos. Contiene 2. Calentar hasta disolver Medio preparado: almacenar
eosina Y y azul de metileno que inhiben grampositivos y Sacarosa (opcional en completamente, sin hervir en refrigeración (2–8 °C),
permiten la detección de fermentación de lactosa. algunas fórmulas): 10.0 en exceso. protegido de la desecación y la
Fermentación positiva (ácida): colonias de color púrpura o luz.
negras, algunas con brillo metálico. Eosina Y: 0.4 3. Esterilizar en autoclave
No fermentadores: colonias incoloras o ligeramente a 121 °C por 15 minutos. Vida útil: hasta 7 días tras su
rosadas Azul de metileno: 0.065 preparación.
4. Enfriar a 45–50 °C.
Cloruro de sodio: 5.0 Nota: ideal para distinguir E.
5. Verter en cajas Petri coli (colonias oscuras con
Agar: 15.0 estériles y dejar brillo verde metálico) de otras
solidificar. enterobacterias.
Agua destilada: 1 litro
6. Incubar a 35–37 °C por
18–24 horas.

1. Disolver los Medio en polvo: conservar en

(g/L): ingredientes en 1 litro de frasco hermético, seco,
agua destilada protegido de la luz (10–25
Triptosa: 20.0 . °C).
2. Calentar hasta disolver
Extracto de carne: 3.0 completamente. Medio preparado: refrigerar
Agar SIM a 2–8 °C, en posición vertical.
es un medio diferencial multifuncional utilizado para Tiosulfato de sodio: 0.025 3. Esterilizar en autoclave
evaluar tres características bioquímicas clave en bacterias, a 121 °C por 15 minutos Vida útil: hasta 7 días tras
especialmente de la familia Enterobacteriaceae: Sulfato ferroso . preparación.
amoniacal: 0.2 4. Enfriar a 45–50 °C.
• Producción de sulfuro de hidrógeno (H₂S): se
Resultados esperados:
observa por el ennegrecimiento del medio.
Agar: 3.0 (baja 5. Verter en tubos de • H₂S (+): precipitado
• Producción de indol: se detecta al agregar reactivo
concentración para ensayo en forma vertical negro.
de Kovacs, produciendo una capa roja si es positivo. facilitar movilidad) (no inclinar), formando • Indol (+): capa roja
• Motilidad: se interpreta a partir de la difusión del una columna sólida. tras adición de Kovacs.
crecimiento desde la línea de inoculación. Agua destilada: 1 litro • Motilidad (+):
6. Inocular con una turbidez difusa fuera
punción en el centro del de la línea de
AG-58 tubo. inoculación.
1. Disolver
completamente los
ingredientes en agua
destilada.

(g/L): 2. Esterilizar en autoclave

Triptosa: 4.1 a 121 °C durante 15 Medio en polvo: conservar en
minutos. lugar seco, oscuro, entre 10–
Cloruro de sodio: 7.2 25 °C.
3. Enfriar a 45–50 °C.
Malato de sodio: 5.4 Medio preparado: mantener
4. Agregar novobiocina refrigerado (2–8 °C), evitar
Fosfato de sodio: 1.6 estéril si se desea mayor congelación y desecación.
Agar modificado semi-solido Rappaport – Vassiliadis selectividad.
(MSRV) Cloruro de magnesio: Vida útil: hasta 5 días tras su
es un medio semisólido, altamente selectivo, diseñado 13.5 5. Verter en cajas Petri preparación
específicamente para la detección e identificación estériles o tubos de .
Novobiocina (opcional, ensayo. Resultado positivo: halo
presuntiva de Salmonella spp., incluyendo cepas móviles y
suplemento): 0.01 blanco/lechoso alrededor del
no móviles, a partir de muestras alimentarias, ambientales
6. Inocular con 0.1 mL del punto de inoculación por
o clínicas. Su baja concentración de agar permite evaluar la Sales biliares: 1.5 cultivo pre-enriquecido diseminación radial de
motilidad de Salmonella en un entorno selectivo gracias a (como Selenito o BPW) y Salmonella móvil.
la presencia de malato, sales biliares y antibióticos Agar: 3.0 (semisólido) no estriar.

Agua destilada: 1 litro 7. Incubar a 41.5 ± 1 °C

por 24 ± 4 h (condición
AG-59 . óptima para Salmonella).
1. Disolver la base
ALOA en agua
(g/L aprox.): destilada.
Peptona de caseína: 15.0
2. Esterilizar por
Extracto de levadura: 5.0 autoclave a 121 °C
durante 15
Cloruro de sodio: 5.0 minutos.
Medio deshidratado:
Glucosa: 2.0 3. Enfriar a 45–50 almacenar en lugar seco y
°C. oscuro (10–25 °C).
Cloruro de litio: 10.0
4. Agregar Medio preparado: refrigerar
Nalidíxico, ceftazidima y asépticamente los (2–8 °C), proteger de la luz.
Agar Listeria acorde a Ottaviani otros antibióticos (mezcla suplementos
es un agar cromogénico y diferencial altamente selectivo, selectiva) selectivos Vida útil: hasta 7 días.
diseñado para el aislamiento y la identificación presuntiva (antibióticos y
de Listeria monocytogenes y otras especies del género Sustrato cromogénico cromógenos). Resultados
(para PI-PLC): cantidad esperados:Listeria
Listeria a partir de alimentos, aguas y muestras clínicas.
específica monocytogenes: colonias azul
Utiliza un sustrato cromogénico específico de la enzima 5. Verter en placas
Petri estériles. verdoso con halo opaco
fosfatidilinositol fosfolipasa C (PI-PLC) que solo L. Ácido nalidíxico y blanco.
monocytogenes puede metabolizar, lo que permite su cicloheximida (opcional) Otras Listeria spp.: colonias
distinción por coloración y halo opaco característico 6. Incubar a 35–37
°C durante 24–48 azul verdoso sin halo.
Agar: 12.0 horas. Bacterias no Listeria:
inhibidas o colonias atípicas.
Agua destilada: 1 litro
AG-60

13
 CL- 1. Caldo Carbohidratos (Ramnosa y Xilosa).
Información práctica.
Tipo del medio: Medio diferencial.
Principios y usos.
Detectar y determinar la capacidad de los microorganismos de fermentar Ramnosa y Xilosa
como fuentes de carbono.
Diferenciación de especies bacterianas.
Estudio del metabolismo de azucares desoxigenados y pentosas.
Evaluaciones bioquímicas en microbiología clínica y ambiental.
Formula en g/L.
• EXTRACTO DE CARNE………………………………………………………………….
3.0
• PEPTONA……………………………………………………………………………………
5.0
• CLORURO DE SODIO (NACL)…………………………………………………………
5.0
• L – RAMNOSA………………………………………………………………………………
5.0
• D – XILOSA………………………………………………………………………………….
5.0
• ROJO FENOL (INDICADOR DE PH) ………………………………………………….
0.018
• AGUA DESTILADA…………………………………………………………………………
1L.
Preparación.
Disolver todos los componentes en agua destilada. Ajustar el pH a 7.4 ± 0.2. Dispensar
en tubos con campana de Durham (si se requiere gas). Esterilizar en autoclave a 121 °C
durante 15 minutos.
Instrucciones de uso.
Dejar enfriar y almacenar a 2 – 8 °C si no se usa de inmediato. Inocular con el cultivo
bacteriano a probar. Incubar a 35 – 37 °C durante 24 – 48 horas. Observar cambios de
color y formación de gas.
Control de Calidad.
Aspecto: polvo homogéneo, color claro.
pH: 7.4 ± 0.2 a 25 °C.
Solubilidad: completa en agua destilada.
El medio debe permanecer rojo.
No debe presentar turbidez antes de inocular.
Test Microbiológico.
Microorganismo. Resultado esperado.
• Escherichia Coli ATCC 25922. • Amarillo con o sin gas.
• Salmonella entérica. • Cambio parcial.
• Pseudomonas aeruginosa. • Permanece rojo.
 • Klebsiella pneumoniae. • Amarillo + gas.

Almacenamiento.
Generalmente entre 2 – 8 °C para el medio preparado y entre 10 – 35 °C para el
deshidratado.

CL – 2. Caldo Cerebro Corazón.

Información práctica.
Medio sólido apropiado para el cultivo de bacterias y hongos, incluyendo los de difícil
desarrollo.
Principios y usos.
Detectar y determinar la capacidad de los microorganismos de fermentar Ramnosa y
Xilosa como fuentes de carbono.
Diferenciación de especies bacterianas.
Estudio del metabolismo de azucares desoxigenados y pentosas.
Evaluaciones bioquímicas en microbiología clínica y ambiental.
Formula en g/L.
• INFUSIÓN DE CEREBRO DE TERNERA..................................................200.0
• INFUSIÓN DE CORAZÓN .....................................................................250.0
• PEPTONA ............................................................................................10.0
• CLORURO DE SODIO ...........................................................................5.0
• GLUCOSA ............................................................................................2.0
• FOSFATO DISÓDICO .............................................................................2.5
• AGAR....................................................................................................15.0
• pH FINAL: 7.4 ± 0.2
Preparación.
Disolver todos los componentes en agua destilada. Ajustar el pH a 7.4 ± 0.2.
Dispensar en tubos con campana de Durham (si se requiere gas).
Esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos.

Instrucciones de uso.
Disolver 52 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar con agitación frecuente y
llevar a ebullición hasta su disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar
en autoclave durante 15 minutos a 121°C. Distribuir en placas de Petri estériles.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Suplementado con sangre: color rojo.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Crecimiento.
Escherichia coli Satisfactorio
Staphylococcus aureus Satisfactorio
Candida albicans Satisfactorio
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC

CL – 3. Caldo Fraser Completo.

Información práctica.
Medio de enriquecimiento para la detección y enumeración de Listeria en muestras de
alimentos y medioambientales
Principios y usos.
La Base de Caldo Listeria Fraser se utiliza para la detección rápida de Listeria a partir de
muestras de alimentos y medioambientales. Los antibióticos ya están incluidos en la
fórmula por lo que solo es necesario agregar el Suplemento Citrato Ferroamónico (Cat.
6050).
Formula en g/L.
• DIGERIDO ENZIMÁTICO DE
CASEÍNA……………………………………………………… 5.0
• ESCULINA
………………………………………………………………………………………….. 1.0
• ÁCIDO NALIDÍXICO
……………………………………………………………………………… 0.02
• CLORURO SÓDICO
……………………………………………………………….…………….. 20
• DIGERIDO ENZIMÁTICO DE TEJIDO ANIMAL
……………………………….……………. 5.0
• HIDRÓGENO FOSFATO DISÓDICO DIHIDRATADO
………………….………………… 12
• ACRIFLAVINA
……………………………………………………………………………………… 0.025
• EXTRACTO DE CARNE
……………………………………………………………….…………. 5
• DIHIDROGENOFOSFATO DE POTASIO
…………………………………..……………….. 1.35
• EXTRACTO DE LEVADURA
…………………………………………………………..………… 5
• CLORURO DE LITIO
……………………………………………………………………...……... 3
Preparación.
Suspender 28.7 gramos del medio en 500 ml de agua destilada. Mezclar bien y disolver
por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta disolver por
completo. Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 ºC y
agregar asépticamente un vial de Suplemento Citrato Ferroamónico, previamente
reconstituido en 5 ml de agua destilada estéril. Homogenizar suavemente y dispensar en
envases estériles.
Instrucciones de uso.
Para diagnóstico clínico, el tipo de muestra es líquido amniótico. Inocular los tubos de Caldo
Fraser. Incubar a 37 ºC durante 24±2 horas en condiciones aeróbicas
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Especificación.
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibición total en TSA
Enterococcus faecalis ATCC 29212 <100 colonias en TSA
Listeria monocytogenes ATCC 13932 > 10 colonias en Agar Listeria
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 4. Caldo Fraser Medio.

Información práctica.
Medio de enriquecimiento para la detección y enumeración de Listeria en muestras de
alimentos y medioambientales.
Principios y usos.
Base de Caldo Listeria 1/2 Fraser es una modificación en la cual las concentraciones de
ácido nalidíxico y acriflavina se han reducido a 10 mg/L y 12,5 mg/L respectivamente. Los
antibióticos ya están incluidos en la fórmula por lo que solo es necesario agregar el
Suplemento de citrato de amonio férrico.
Formula en g/L.
• DIGERIDO ENZIMÁTICO DE
CASEÍNA……………………………………………………… 5.0
• ESCULINA
………………………………………………………………………………………….. 1.0
• ÁCIDO NALIDÍXICO
……………………………………………………………………………… 0.01
• CLORURO SÓDICO
……………………………………………………………….…………….. 20
• DIGERIDO ENZIMÁTICO DE TEJIDO ANIMAL
……………………………….……………. 5.0
• HIDRÓGENO FOSFATO DISÓDICO DIHIDRATADO
………………….………………… 12
• CLORHIDRATO DE
ACRIFLAVINA………………………………………………………… … 0.0125
• EXTRACTO DE CARNE
……………………………………………………………….…………. 5
 • DIHIDROGENOFOSFATO DE POTASIO
…………………………………..……………….. 1.35
• EXTRACTO DE LEVADURA
…………………………………………………………..………… 5
• CLORURO DE LITIO
……………………………………………………………………...……... 3
Preparación.
Suspender 28,7 gramos del medio en 500 ml de agua destilada. Mezclar bien y disolver
con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo.
Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 ºC y agregar
asépticamente un vial de Suplemento de Citrato de Amonio Férrico. Homogenizar
suavemente y dispensar en envases estériles.
Instrucciones de uso.
Enriquecimiento primario: Pesar 25 g/ml de la muestra y agregar 225 ml de Base de Caldo
Listeria ½ Fraser junto con el Suplemento Citrato Ferroamónico. Homogeneizar e incubar
a 30 °C durante 25±1 horas.
Enriquecimiento secundario: Inocular 0,1 ml del medio anterior incubado en 10 ml de Caldo
Fraser.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Especificación.
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibición total en TSA
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 5. Caldo Glutamato con Minerales Modificado (MMGB).

Información práctica.
Para la enumeración de Escherichia coliß-glucuronidasa positiva. Recuento y
enriquecimiento selectivo.
Principios y usos.
Es recomendado para la enumeración de E. coli usando el método de numero mas
probable (MPN). También es un caldo alternativo utilizado para la identificación presuntiva
de coliformes en agua.
Formula en g/L.
• PÚRPURA DE BROMOCRESOL…………….… • FORMIATO SÓDICO
0.01 0.25
• CITRATO DE AMONIO FÉRRICO……………… • CLORURO CÁLCICO
0.01 DIHIDRATADO 0.01
• L – ARGININA………..…………………………….. • ÁCIDO NICOTÍNICO
0.02 0.001
 • SULFATO MAGNESIO HEPTAHIDRATADO …
0.1
• GLUTAMATO SÓDICO …………………………..
6.35
• ÁCIDO L (-) ASPÁRTICO ………………….……..
0.024
• ÁCIDO PANTOTÉNICO ……………..……………
0.001
• FOSFATO DIPOTÁSICO ………………………….
0.9
• LACTOSA …………………………………………...
10
• L – CISTÍNA …………………………………………
0.2
• TIAMINA
……………………………………………… 0.001
Preparación.
Suspender 17.7 gramos del medio en un litro de agua destilada. Agregar 2.5 gramos de
cloruro de amonio. Mezclar bien y disolver con calor y con agitación frecuente. Hervir
durante un minuto hasta disolver por completo. Distribuir en recipientes apropiados y
esterilizar en autoclave a116 °C durante 10 minutos.
Instrucciones de uso.
Inocular tres tubos de concentración simple y tres tubos de un medio de doble
concentración.
Los volúmenes más grandes de muestra (10 ml) se agregan a volúmenes iguales de medio
de doble concentración, mientras que los volúmenes de 1 ml se agregan a 5 ml de medio
de concentración única. Incubar los tubos a 37+/-1 °C y examinar después de 24 +/- 2
horas, para la producción de ácido (fermentación de lactosa).
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: blanco con pintas negras.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Especificación.
Escherichia coli ATCC 25922 Producción de ácido – cambio a color amarillo.
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhibición total.
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 6. Caldo L – lisina Descarboxilasa.

Información práctica.
Medio líquido para la diferenciación de bacterias entéricas con los ensayos de
descarboxilación de la L-Lisina de acuerdo a las normas ISO y FIL-IDF.
Principios y usos.
Para la clasificación de las enterobacteriáceas se ha utilizado ampliamente la capacidad
para descarboxilar ciertos aminoácidos. La formulación de Taylor con la lisina ya
incorporada ha sido adoptada por diversas normativas de difusión internacional para la
identificación de salmonelas. La modificación de Taylor muestra un rendimiento mejorado
sobre la formulación descrita inicialmente por Falkow.
Formula en g/L.
• EXTRACTO DE LEVADURA................................................................3.000
• DEXTROSA..................................................................................... 1.000
• PÚRPURA BROMOCRESOL..............................................................0.015
• L-LISINA......................................................................................... 5.000
Preparación.
Se recomienda la utilización de un cierre de vaselina para evitar la oxidación espontánea
del medio preparado. La utilización de la glucosa en condiciones anaeróbicas determina
una acidificación del medio que virará a amarillo siempre que exista crecimiento, pero la
progresiva utilización del aminoácido volverá a alcalinizar el medio, que paulatinamente
vira a gris y finalmente a violeta, indicando la reacción positiva. La lectura de estas pruebas
bioquímicas se realiza después de un periodo de incubación de 24 horas a 37°C.
Control de Calidad.
Control Físico/Químico
Color: violeta, pH: 6,1 ± 0,2 a 25ºC
Control de Fertilidad
Inóculo 100-1.000 UFC, Aerobiosis. Incubación a 37ºC±1, lectura a las 24-48±2h
Test Microbiológico.
Microorganismo. Desarrollo.
Proteus mirabilis ATCC® 12453 Bueno - Amarillo
Salmonella typhimurium ATCC® 14028, Bueno – Violeta
WDCM 00031
Escherichia coli ATCC® 25922, WDCM Bueno- Reacción variable
00013
Almacenamiento.
Incubación 48 horas a 30-35ºC y 48 horas a 20-25ºC: SIN CRECIMIENTO
Verificación a 7 días tras incubación en las mismas condiciones

CL – 7. Caldo Muller Kauffmann Tetrationato.

Información práctica.
Medio de enriquecimiento selectivo para salmonelas, según la norma ISO 6579.
Principios y usos.
El Caldo de Tetrationato es un medio clásico para el enriquecimiento de patógenos
intestinales, sobre todo los miembros de género Salmonella, a partir de materiales muy
contaminados con otras bacterias, como heces, orina, aguas fecales, etc. Durante la
preparación, al añadir el yodo al medio de cultivo se forma tetrationato a partir del sulfato y
esta sal, junto con las sales biliares provoca una fuerte inhibición de la mayoría de bacterias
intestinales, excepto aquellas capaces de reducir el tetrationato, como las salmonelas. Esta
reducción libera ácido sulfúrico, que queda neutralizado por el carbonato presente,
impidiéndose así un fuerte descenso del pH, que sería perjudicial incluso para las
salmonelas.
Formula en g/L.
• SALES BILIARES N.º 3........................................................................ 4.7800
• EXTRACTO DE CARNE........................................................................ 4.3000
• PEPTONA DE CASEÍNA....................................................................... 8.6000
• CLORURO SÓDICO............................................................................ 2.6000
• CARBONATO CÁLCICO...................................................................... 38.700
• TIOSULFATO SÓDICO. 5 H2O.............................................................. 47.800
• VERDE BRILLANTE.............................................................................. 0.0096
• NOVOBIOCINA................................................................................... 0.0400
Preparación.
El precipitado blanco es de carbonato cálcico y debe considerarse normal. Recoger, diluir
y preparar muestras y volúmenes según sea necesario de acuerdo a las especificaciones
y/o resultados esperados. Proceder inoculando las muestras de acuerdo a sus
especificaciones. Inmediatamente antes de inocular el medio Muller-Kauffmann
Tetrathionate, suplementar los tubos con la solución Yoduro. Yodurada a razón de: 2 ml de
Sol. Yodo/Yoduro por cada 100 ml de medio base. 0.2 ml de Sol. Yodo/Yoduro por cada
10 ml de medio base. Inocular asépticamente tubos con la muestra previamente preparada.
Incubar 24 ± 3h a 37±1 ºC. Proceder a subcultivo para confirmar aislamiento de Salmonella
en medios selectivos.
Control de Calidad.
Control Físico/Químico
Color: Verde Azulado - Turbidez
Control de Fertilidad
pH: 8 ± 0,2 a 25ºC, Añadir suplementos c.s.p. funcionalidad - rango práctico 100±20 UFC;
Min. 50 UFC (Productividad)/ 104-106 UFC (Selectividad).
Test Microbiológico.
S. typhimurium (14028) + E. coli (8739) + Ps. (27853) - Coln. caract. de Salmonella ≥ 10
Almacenamiento.
Incubación 48 horas a 30-35ºC y 48 horas a 20-25ºC: SIN CRECIMIENTO
Verificación a 7 días tras incubación en las mismas condiciones.

CL – 8. Caldo Rappaport – Vassiliadis.

Información práctica.
Medio utilizado para enriquecimiento selectivo de especies de Salmonella spp. (excepto
Salmonella typhi y Salmonella paratyphi A) a partir de alimentos, medicamentos y otros
materiales de importancia sanitaria.
Principios y usos.
Es un medio de cultivo nutritivo que contiene un sistema buffer de fosfatos, alta
concentración de sales de magnesio y sodio y la presencia del colorante verde de
malaquita (oxalato). El enriquecimiento selectivo de especies de salmonella se debe a la
capacidad de estos microorganismos de sobrevivir y multiplicarse a presiones osmóticas
relativamente altas (debido a la elevada concentración de cloruro de magnesio en el
medio), a pH relativamente bajos, y porque se suprime el efecto tóxico del verde de
malaquita hacia las salmonellas debido a la presencia de cloruro de magnesio.
Formula en g/L.
• PEPTONA DE SOJA ............................................................................... 4.5
• CLORURO DE MAGNESIO.6H2O........................................................... 29.0
• CLORURO DE SODIO ........................................................................... 8.0
• FOSFATO DIPOTÁSICO ..........................................................................0.4
• FOSFATO MONOPOTÁSICO ...................................................................0.6
• VERDE DE MALAQUITA ..........................................................................0.036
• pH FINAL: 5,2 ± 0,2
Preparación.
Generalmente una muestra preenriquecida (1:10) debe preceder al enriquecimiento en
Rappaport Vassiliadis Caldo. La relación entre el inóculo de la muestra y el medio de cultivo
queda finalmente 1:100. Incubación: Durante 24-48 horas a 41-42 ºC. Luego de la
incubación, subcultivar en medios selectivos para el crecimiento de Salmonella: Salmonella
Shigella Agar, Hektoen Entérico Agar, Verde Brillante Agar, Mac Conkey Agar.
Instrucciones de uso.
Suspender 42,5 gramos del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos y
mezclar hasta uniformar. Calentar agitando frecuentemente hasta disolución total. Distribuir
en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 115ºC.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color beige verdoso, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color verde azulado.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Crecimiento.
Salmonella enteritidis Bueno
Escherichia coli Inhibido
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

CL – 9. Caldo Rojo de Fenol.

Información práctica.
Para el estudio de fermentaciones de carbohidratos
Principios y usos.
Detectar y determinar la capacidad de los microorganismos de fermentar Ramnosa y Xilosa
como fuentes de carbono.
Diferenciación de especies bacterianas.
Estudio del metabolismo de azucares desoxigenados y pentosas.
Evaluaciones bioquímicas en microbiología clínica y ambiental.
Formula en g/L.
• PEPTONA DE CASEÍNA
………………………………………………………………….. 10
• CLORURO DE SODIO (NACL)…………………………………………………………..
5
• ROJO FENOL
………………………………………………………………………………… 0.018
Preparación.
Suspender 15 gramos de medio en un litro de agua destilada. Añadir 5-10gramos/litro del
carbohidrato deseado. Si el medio es para cultivo de anaerobios, agregar 0,5-1gramos de
agar. Mezclar bien y disolver por calentamiento con agitación frecuente. Hervir durante un
minuto hasta disolver por completo. Dispensar en tubos colectores de gas Dunham para la
detección de gas. Esterilizar en autoclave a116-118 °C durante 15 minutos. NO
SOBRECALENTAR.
Instrucciones de uso.
Inocular los tubos con el organismo de prueba.
Incubar a 35±2 °C durante18-48 horas.
Interpretación de los resultados.
Observar el cambio de color. La aparición de un color amarillo es el indicador de
fermentación, con o sin producción de gas
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige.
Test Microbiológico.
Microorganismo. Especificación.
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Buen crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Buen crecimiento
Proteus vulgaris ATCC 6380 Buen crecimiento
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 10. Caldo Triptona y Caldos Triptona sal T1N0, T1N1, T1N3, T1N6,
T1N8 y T1N10.
Información práctica.
Medio utilizado para el crecimiento y aislamiento de bacterias, levaduras y hongos.

Principios y usos.
Medio general altamente nutritivo para el crecimiento de bacterias
y hongos. Sólo para uso profesional.

Formula en g/L.
• DIGERIDO PANCREÁTICO DE
CASEÍNA…………………………………………………. 17.0
• DIGERIDO PAPAÍNICO DE PROTEÍNA DE
SOJA…………………………………………. 3.0
• CLORURO
SÓDICO…………………………………………………………………………... 5.0
• FOSFATO POTÁSICO
DIBÁSICO……………………………………………………………. 2.5
• GLUCOSA……………………………………………………………………………………
.. 2.5
Preparación.
Disuelva los ingredientes en agua destilada.
Dispensar en tubos con tapa de rosca de 16 × 125 mm. Apretar bien las tapas para
mantener la concentración correcta de sal en el tubo. Esterilizar en autoclave durante 15
minutos a 121 °C. pH final: 7,2 ± 0,2.
Instrucciones de uso.
Depende de los diferentes métodos.
Control de Calidad.
1. Control de las características generales: etiquetado e impresión.
2. Control de esterilidad:72 h, 25 ± 1°C, aerobio – 72 h, 36 ± 1°C, aerobio
3. Control biológico: Densidad del inóculo para productividad: 10 – 100 ufc por tubo
4. Condiciones de incubación:
Bacterias aerobias: Hasta 3 días, 32 ± 1°C
Hongos: Hasta 5 días, 22 + 1ºC, aerobia
Geobacillus stearothermophillus ATCC 7953 : Hasta 2 días @ 56 + 1ªC, aerobia
Test Microbiológico.
Microorganismo. Crecimiento.
Bacillus subtilis ATCC 6633 Crecimiento turbio.
Candida albicans ATCC 10231 Crecimiento turbio, flocular.
Aspergillus niger ATCC 16404 Micelios blancos.
Bacillus stearothermophilus ATCC 7953 Crecimiento turbio.
Almacenamiento.
2 – 25 °C, en oscuridad.
 CL – 11. Caldo Tioglicolato.
Información práctica.
Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios,
facultativos y anaerobios en muestras clínicas. También es usado en ensayos de control
de
esterilidad de diversos productos biológicos.
Principios y usos.
El medio de cultivo enriquecido que permite el desarrollo de una amplia variedad de
microorganismos, incluidos los nutricionalmente exigentes. Los agentes reductores como
tioglicolato de sodio y cisteína proporcionan una anaerobiosis suficiente y los grupos -SH-
de estos compuestos, mantienen un bajo potencial de redox, neutralizan los efectos
bacteriostáticos de los derivados mercuriales, arsenicales y de otros metales pesados. La
presencia de una baja cantidad de agar retarda la dispersión de CO2 y O2. La resazurina
es un indicador de óxido reducción, es rosada cuando es oxidada e incolora cuando es
reducida.
Formula en g/L.
• CASEÍNA DIGERIDA POR ENZIMAS
…………………………………………………….. 15.0
• L – CISTINA
………………………………………………………………………………………. 0.5
• DEXTROSA (ANHIDRIDA)
……………………………………………………………………. 5.0
• EXTRACTO DE LEVADURA
…………………………………………………………………... 5.0
• CLORURO DE SODIO
…………………………………………………………………………. 2.5
• TIOGLICOLATO DE SODIO
…………………………………………………………………... 0.5
• RESAZURINA
…………………………………………………………………………………….. 0.001
• AGAR
………………………………………………………………………………………………..
0.75
Preparación.
Muestras líquidas: agregar 1 o 2 gotas de la muestra a tubos conteniendo medio de cultivo.
Tejidos y otras muestras sólidas: macerar en caldo estéril. Luego sembrar de la misma
manera
que para muestras líquidas. Hisopos o tórulas: insertarlos en el medio de cultivo, luego de
haber sembrado el medio sólido apropiado. Para el cultivo de anaerobios, antes de
sembrar, eliminar el oxígeno presente, mediante el hervido de los tubos con las tapas flojas,
y luego enfriarlos a temperatura ambiente con las tapas bien cerradas.
Control de Calidad.
Incubación: El tiempo, temperatura y condiciones de incubación dependerán del
microorganismo. Control de esterilidad: Incubado a 35°C por 48 horas: No hubo desarrollo
bacteriano, Incubado a 20°C por 96 horas: No hubo desarrollo bacteriano
Test Microbiológico.
Microorganismo. Crecimiento.
Staphylococcus aureus Bueno.
Streptococcus pyogenes Bueno.
Clostridium perfringes Bueno.
Almacenamiento.
8 a 12°C, hasta su vencimiento.

CL – 12. Caldo Soya Tripticaseína.

Información práctica.
Caldo Soya Tripticaseína es un medio de cultivo para uso general en el laboratorio y para
el cultivo de microorganismos exigentes.
Principios y usos.
Este medio es compatible con el crecimiento de una gran variedad de microorganismos,
incluidos aerobios y anaerobios exigentes. La Peptona de Soya también contiene azúcares
naturales que promueven el crecimiento bacteriano. La dextrosa es una fuente de
carbohidratos y carbono. El cloruro de sodio suministra electrolitos esenciales para el
transporte y el equilibrio osmótico, y el fosfato de dibásico es un agente buffer.
Formula en g/L.
• DIGERIDO PANCREÁTICO DE CASEÍNA (PEPTONA DE CASEÍNA)……………...
17.0
• DIGERIDO PAPAÍNICO DE SOYA (PEPTONA DE SOYA)
………………………..……. 3.0
• CLORURO DE SODIO
(NACL)…………………………………………………………….…. 5.0
• FOSFATO DIBÁSICO DE POTASIO
…………………………………………………………. 2.5
• DEXTROSA
…………………………………………………..…………………………………… 2.5
Preparación.
Suspender 30 gramos del medio en un litro de agua purificada. Mezclar bien y calentar con
agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Esterilizar en
autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50°C y
vaciar en tubos estériles.
Instrucciones de uso.
Sembrar las muestras de acuerdo con los procedimientos internos de laboratorio o normas
aplicables.
Considerar los lineamientos descritos en las Farmacopeas.
Incubar de 30 a 35 °C de 18 a 24 h o hasta 5 días.
Control de Calidad.
El tiempo, temperatura y condiciones de incubación dependerán del microorganismo que
se quiera recuperar.
Test Microbiológico.
Microorganismo. Crecimiento.
Staphylococcus aureus Bueno
Pseudomonas aeruginosa Bueno
Escherichia coli Bueno
Bacillus subtilis Bueno
Almacenamiento.
A 10-35 ºC.

CL – 13. Caldo para Antibióticos #3.

Información práctica.
Medio estándar para uso en ensayos antibióticos.
Principios y usos.
Este medio se puede utilizar en la determinación turbidimétrica. El método turbidimétrico
se basa en la inhibición del crecimiento de un cultivo microbiano en un medio fluido que
contiene una solución uniforme de un antibiótico. El uso de este método es apropiado solo
cuando las muestras de prueba son claras. La peptona, el extracto de levadura y el extracto
de carne proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el
crecimiento. Los fosfatos de potasio actúan como un sistema tampón. La glucosa es el
carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía. El agar bacteriológico es el
agente solidificante.
Formula en g/L.
• EXTRACTO DE
CARNE………………………………………………………………………….. 1.5
• GLUCOSA
MONOHIDRATADO……………………………………………………………….. 1.0
• PEPTONA
………………………………………………………………………………………..…. 6.0
• EXTRACTO DE
LEVADURA…………………………………………………………………..…. 3.0
• FOSFATO
DIPOTÁSICO………………………………………………………………………..…
3.68
• FOSFATO
MONOPOTÁSICO……………………………………………………………………. 1.32
• CLORURO
SÓDICO……………………………………………………………………………….. 3.5
Preparación.
Suspender 20 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por
calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta su completa
disolución. Esterilizar a 121 ºC durante 15 minutos. Distribuir en recipientes adecuados.
Instrucciones de uso.
Lavar un agar fresco inclinado con crecimiento empleando el Medio Nº 3 para Antibióticos.
Diluir el caldo según sea necesario. Siguiendo los procedimientos de referencia, preparar
diluciones estándar de antibióticos en concentraciones específicas. Incubar los tubos a 35
ºC durante 3-4 horas y luego detener el crecimiento con 0,5 ml de formalina diluida 1:3.
Leer con un espectrofómetro adecuado y comparar el crecimiento con las soluciones
estándar de referencia dadas
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos. Condiciones de incubación: (35-37 ºC /
24-48 h).
Apariencia: polvo fino. Color: beige.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Especificación.
Staphylococcus aureus ATCC 9144 Buen crecimiento
Klebsiella pneumoniae ATCC 10031 Buen crecimiento
Escherichia coli ATCC 10536 Buen crecimiento
Enterococcus hirae ATCC 10541 Buen crecimiento
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 14. Caldo para Antibióticos #13.

Información práctica.
Medio de cultivo líquido utilizado para la detección de contaminación microbiológica
(especialmente hongos y levaduras) en productos farmacéuticos y biológicos,
principalmente en estudios de esterilidad y pruebas de antibióticos. No selectivo.
Principios y usos.
Este tipo de caldo usualmente es un caldo nutritivo, como el caldo Mueller-Hinton, y sirve
para cultivar bacterias y evaluar su respuesta a diferentes antibióticos. El objetivo es
determinar la concentración inhibitoria mínima (CIM) del antibiótico, es decir, la
concentración más baja que inhibe el crecimiento visible de la bacteria.
Formula en g/L.
• PEPTONA DE
CASEÍNA…………………………………………………………………….. 10.0
• EXTRACTO DE
CARNE………………………………………………………………………. 5.0
• DEXTROSA (GLUCOSA)
……………………………………………………………………. 40.0
• AGUA
DESTILADA…………………………………………………………………………….. 1
LITRO
 • PH FINAL (A 25 GRADOS C) 5.6 ± 0.

Preparación.
Suspender 55 g de medio en 1 litro de agua destilada. Calentar agitando suavemente hasta
disolución completa. Distribuir en tubos o frascos según necesidad. Esterilizar en autoclave
a 121 °C por 15 minutos. Enfriar a temperatura ambiente.
Instrucciones de uso.
Suspender la cantidad especificada de polvo de Caldo en agua purificada. Calentar el
medio con agitación frecuente hasta que hierva para asegurar la completa disolución del
polvo. Distribuir el caldo en tubos de ensayo o recipientes adecuados, esterilizados
previamente. Esterilizar el medio en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Una vez
enfriado el medio, inocular con la bacteria a estudiar. Incubar el medio inoculado a la
temperatura óptima. Observar el crecimiento bacteriano para determinar la sensibilidad o
resistencia a los antibióticos.
Control de Calidad.
Aspecto del polvo: Beige claro, homogéneo. Solubilidad: Completa en agua
destilada
pH final: 5.6 ± 0.2. Prueba de esterilidad:
Negativa.
Capacidad de crecimiento: Crecimiento visible de hongos y levaduras en 24-72 h.
Test Microbiológico.
Microorganismo. Resultado esperado.
Candida albicans ATCC 10231 Crecimiento visible
Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 Crecimiento visible
Saccharomyces cerevisiae (opcional) Crecimiento visible
Almacenamiento.
Temperatura: 15 °C a 30 °C. Mantener el envase bien cerrado en lugar seco. Proteger de
la luz y fuentes de calor

CL – 15. Caldo para Antibióticos #34.

Información práctica.
Medio comercializado para la preparación de suspensión de Mycobacterium smegmatis,
usada como cepa patrón en el ensayo microbiológico de bleomicina.
Principios y usos.
Detectar y determinar la capacidad de los microorganismos de fermentar Ramnosa y Xilosa
como fuentes de carbono.
Diferenciación de especies bacterianas.
Estudio del metabolismo de azucares desoxigenados y pentosas.
Evaluaciones bioquímicas en microbiología clínica y ambiental.
Formula en g/L.
• PEPTONA ANIMAL (DIGESTIÓN PANCREÁTICA)……………………………………. 10
• EXTRACTO DE CARNE:
▪ BEEF EXTRACT SEGÚN HIMEDIA……………………………………………….10
 ▪ SEGÚN USP…………………………………………………………………………..
10
• CLORURO DE SODIO (NACL)…………………………………………………………….. 3
• GLICEROL……………………………………………………………………………………….
10
• AGUA
DESTILADA………………………………………………………………………………1 L
• PH FINAL (25 °C): 7.0 ± 0.2
Preparación.
Disolver 23 g de polvo en 1 L de agua destilada junto con 10 g de glicerol. Calentar con
agitación para lograr completa disolución. Esterilizar en autoclave a 121 °C (15 psi) durante
15 min. Enfriar y dispensar asépticamente. Almacenar preparados en 2–8 °C y proteger del
calor.
Control de Calidad.
Apariencia del polvo: Crema a amarillo, homogéneo, de fácil fluidez.
Aspecto del medio preparado: Solución clara, amarilla, sin precipitados.
pH (25 °C): 7.0 ± 0.2 (rango 6.8–7.2 aceptable).
Crecimiento: Se observa crecimiento abundante de M. smegmatis ATCC 607 tras incubación
18–48 h a 35–37 °C.
Test Microbiológico.
Mycobacterium smegmatis ATCC® 607 – Crecimiento visible.
Almacenamiento.
Polvo deshidratado: Debe conservarse por debajo de 30 °C en envase hermético. Medio
preparado: Conservar en refrigeración (2–8 °C). Vida útil: Revisar fecha en etiqueta;
almacenamiento adecuado conserva sus propiedades por meses o años según fabricante.

CL – 16. Caldo para Antibióticos #39.

Información práctica.
Medio formulado según USP/FDA para el ensayo microbiológico de antibióticos:
neomicina (con Klebsiella pneumoniae) y tylosina (con Staphylococcus aureus).
Principios y usos.
Sirve como soporte en el ensayo de neomicina y tylosina, ofreciendo nutrientes (peptona,
extractos) y un sistema amortiguador mediante fosfatos para mantener condiciones
óptimas de crecimiento.
Formula en g/L.
• PEPTONA ANIMAL (PEPTIC
DIGEST)……………………………………………………. 5.0
• EXTRACTO DE CARNE (BEEF
EXTRACT)…………………………………………………1.5
• EXTRACTO DE LEVADURA (YEAST
EXTRACT)…………………………………………. 1.5
 • DEXTROSA…………………………………………………………………………………
……. 1.0
• CLORURO DE SODIO
(NACL)……………………………………………………………… 3.5
• FOSFATO DIBÁSICO DE
POTASIO………………………………………………………… 3.68
• FOSFATO MONOBÁSICO DE
POTASIO…………………………………………………. 1.32
• PH FINAL (25 °C): ~7.9 ± 0.2 (DESPUÉS DE LA ESTERILIZACIÓN).
Preparación.
Disolver 17.5 g de polvo en 1 L de agua destilada. Calentar con agitación hasta disolución
completa. Esterilizar en autoclave a 121 °C (15 psi) durante 15 minutos. Enfriar y dispensar
bajo condiciones asépticas. Almacenar a 2–8 °C si se prepara con antelación, evitando
exposición al calor y luz.
Control de Calidad.
Polvo: Crema claro a amarillo, homogéneo, libre de grumos.
Medio preparado: Solución clara, amarillo claro, sin precipitados.
pH: 7.9 ± 0.2 (25 °C).
Crecimiento tubidimétrico: Con K. pneumoniae ATCC 10031 y S. aureus ATCC 9144 tras
incubación a 36‑37.5 °C, 16‑24 h (Klebsiella) y 16‑18 h (Staphylococcus)
Test Microbiológico.
Microorganismo. Resultado esperado.
Klebsiella pneumoniae Crecimiento abundante
Staphylococcus aureus Crecimiento abundante
Almacenamiento.
Polvo: Conservar en envase hermético, en lugar seco, a < 30 °C (hasta 4 años si se guarda
adecuadamente).
Medio en solución: Refrigerar (2–8 °C); usar preferentemente el mismo día de preparación
o según protocolos internos.

CL – 17. Caldo para Antibióticos #41.

Información práctica.
Medio líquido para ensayo microbiológico (turbidimétrico), utilizado especialmente para la
cuantificación de Thiostrepton con Streptococcus faecium según métodos USP.
Principios y usos.
Suministra nutrientes (aminoácidos, vitaminas), fuente de carbono (glucosa, citrato) y
sistema amortiguador (fosfatos), ideal para el crecimiento bacteriano y la evaluación
turbidimétrica de antibióticos.
Formula en g/L.
• TRYPTONE 9.0

• DEXTROSA (GLUCOSA) 20.0

• EXTRACTO DE LEVADURA 5.0 G

• CITRATO DE SODIO 10.0

• FOSFATO DIH. DE POTASIO 1.0

• FOSFATO MONOBÁSICO DE
1.0
POTASIO

• PH FINAL (A 25 °C): 6.8 ± 0.2

Preparación.
Disolver todos los componentes en agua destilada. Ajustar el pH a 7.4 ± 0.2.
Dispensar en tubos con campana de Durham (si se requiere gas).
Esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos.

Control de Calidad.
Polvo: Crema a amarillo, homogéneo, libre de grumos
Medio preparado: Solución clara, amarillo pálido.
pH: 6.8 ± 0.2 (a 25 °C).
Crecimiento estándar: Se observa crecimiento con Enterococcus hirae (ATCC 10541) en
18–24 h a 35–37 °C.
Test Microbiológico.
Enterococcus hirae – Crecimiento turbio visible.
Almacenamiento.
Polvo: Almacenar en envase hermético en lugar seco a 25–30 °C, protegido de humedad.
Medio preparado: Refrigerado (2–8 °C), utilizar preferiblemente el mismo día o según
protocolos de laboratorio.

CL- 18. Caldo Dextrosa Sabouraud.

Información práctica.
Es un medio utilizado para el cultivo de hongos y levaduras.
Principios y usos.
La alta concentración de dextrosa y la acidez del pH hacen a éste un medio selectivo para
hongos. En este medio las peptonas proveen la fuente de carbono y nitrógeno para el
crecimiento de los microorganismos, la dextrosa actúa como fuente de energía.
Formula en g/L.
• DIGERIDO PANCREÁTICO DE CASEÍNA (PEPTONA DE
CASEÍNA)……………….. 5.0
 • DIGERIDO PÉPTICO DE TEJIDO ANIMAL (PEPTONA DE
CARNE)…………………. 5.0
• DEXTROSA…………………………………………………………………………………
……… 20.0
• PH 5.6 ± 0.2 A 25°C
Preparación.
Suspender 30 gramos del medio en un litro de agua purificada. Mezclar bien y calentar
con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Esterilizar
en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50°C
y vaciar en tubos estériles.
Instrucciones de uso.
Inocular de acuerdo con los procedimientos establecidos.
Incubar de 30±2°C de 18 a 48 horas, en caso necesario hasta 7 días.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Test Microbiológico.
Microorganismo. Crecimiento.
Candida albicans Bueno
Saccharomyces cerevisiae Bueno
Aspergillus brasiliensis Bueno
Trichophyton mentagrophytes Bueno
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

CL- 19. Caldo Mossel de Enriquecimiento para Enterobacterias.

Información práctica.
Medio utilizado para el enriquecimiento selectivo de todas las enterobacterias a partir de
alimentos, productos farmacéuticos y otros materiales de importancia sanitaria.
Principios y usos.
En el medio de cultivo la peptona de gelatina y la glucosa son la fuente nutritiva para el
desarrollo de los microorganismos. La bilis de buey y el verde brillante son los agentes
selectivos que inhiben el crecimiento de microorganismos Gram positivos que pudieran
estar presentes en la muestra en estudio. El fosfato disódico y el fosfato monopotásico
forman un sistema buffer, que impide que los productos ácidos originados por la
fermentación de la glucosa afecten el crecimiento de los microorganismos.
Formula en g/L.
• PEPTONA DE GELATINA ...........................................................................10.0
• GLUCOSA .............................................................................................. 5.0
• BILIS DE BUEY .........................................................................................20.0
• VERDE BRILLANTE .................................................................................. 0.015
• FOSFATO DISÓDICO ............................................................................... 8.0
• FOSFATO MONOPOTÁSICO ..................................................................... 2.0
• pH FINAL: 7.2 ± 0.2
Preparación.
Disolver todos los componentes en agua destilada. Ajustar el pH a 7.4 ± 0.2.
Dispensar en tubos con campana de Durham (si se requiere gas).
Esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos.

Instrucciones de uso.
Suspender 45 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar reposar 5 minutos. Calentar
con agitación frecuente y llevar a ebullición para disolución total. Distribuir en recipientes
apropiados y calentar a 100º C durante 30 minutos. Enfriar rápidamente en agua corriente.
No esterilizar por autoclave.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color verde, homogéneo, libre deslizamiento. Medio de
cultivo preparado: color verde.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Crecimiento.
Escherichia coli Satisfactorio
Salmonella typhimurium Satisfactorio
Shigella flexneri Satisfactorio
Proteus mirabilis Satisfactorio
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

CL – 20. Caldo MacConkey.

Información práctica.
Medio de cultivo selectivo, utilizado para la investigación presuntiva de microorganismos
coliformes en aguas, alimentos, productos farmacéuticos y otros materiales de importancia
sanitaria.
Principios y usos.
En el medio de cultivo, la peptona es la fuente de aminoácidos y de otros factores de
crecimiento, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, la bilis de buey estimula el
crecimiento de las bacterias coliformes e inhibe a gran parte de la flora gram positiva, y el
púrpura de bromocresol es el indicador de pH.
Formula en g/L.
• PEPTONA DE GELATINA
....................................................................................20.0
• LACTOSA..........................................................................................................10.0
• PÚRPURA DE BROMOCRESOL
...........................................................................0.01
• BILIS DE BUEY................................................................................................... 5.0
• pH FINAL: 7.3 ± 0.2
Preparación.
Suspender 35 g de polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar con agitación frecuente y
llevar a ebullición para disolución total. Distribuir 10 ml por tubo con campanita de Durham.
Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color beige verdoso, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color púrpura
Test Microbiológico.
Microorganismo. Crecimiento.
Escherichia coli ATCC 25922 Satisfactorio
Escherichia coli ATCC 8739 Satisfactorio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Satisfactorio
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Satisfactorio
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhibido
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

CL – 21. Caldo A1.

Información práctica.
Para la detección de coliformes en aguas y alimentos.
Principios y usos.
La enumeración de coliformes, específicamente Escherichia coli, se ha utilizado para
determinar la pureza del agua por el método del número más probable. Este medio fue
creado para acelerar el tiempo de recuperación de E. coli y para reducir el número de falsos
positivos. El Medio A-1 no requiere un previo enriquecimiento de la muestra, incluso en
muestras de alimentos. La triptona proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y
aminoácidos. La lactosa es la fuente de carbono y, en combinación con la salicina,
proporcionan energía para el crecimiento del organismo. Ecosurf es un tensioactivo y el
cloruro de sodio suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio
osmótico. La producción de gas es una reacción positiva que indica la presencia de
coliformes. Puede producirse gas en las campanas Durham, o puede aparecer como gas
disuelto formando burbujas cuando el medio es agitado ligeramente.
Formula en g/L.
• LACTOSA
………………………………………………………………………………………. 5
• CLORURO SÓDICO
………………………………………………………………………… 5
• ECOSURF – EH9
…………………………………………………………………………….. 1
• SALICINA
………………………………………………………………………………………. 0.5
• TRIPTONA
………………………………………………………………………………………. 20
Preparación.
Suspender 31.5 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con
calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo.
Dispensar en tubos con campanas Durham para la detección de gas, y esterilizar en
autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
Instrucciones de uso.
Inocular la muestra en tubos e incubar a 35 ºC durante 3 horas.
Después, incubar a 44,5 ºC otras 21±2 horas.
Calcular las densidades utilizando los métodos estándar de MPN.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige claro.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Especificación.
Klebsiella aerogenes ATCC 13048 Buen crecimiento.
Enterococcus faecalis ATCC 19433 Inhibición parcial.
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC Temp. Max.:25 ºC

CL – 22. Caldo Lauril Triptosa.

Información práctica.
Para la detección de coliformes en agua.
Principios y usos.
Es un medio selectivo recomendado para la enumeración de coliformes en agua y
productos lácteos, así como para pruebas de confirmación de fermentación de lactosa con
producción de gas por coliformes en alimentos. Otra ventaja de este medio es que la
prueba de indol se puede realizar directamente en el tubo. APHA recomienda el uso de
Caldo Lauril Sulfato para la prueba presuntiva de número más probable de coliformes en
aguas, efluentes o aguas residuales, también como una prueba confirmatoria de
fermentación de lactosa con producción de gas para muestras de leche y para la detección
de coliformes en alimentos. Este caldo fue elaborado para promover un crecimiento
abundante y una alta producción de gas a partir de pequeños inóculos de organismos
coliformes.
Formula en g/L.
• LACTOSA
…………………………………………………………………………………………… 5.0
• CLORURO SÓDICO
…………………………………………………………………………….. 5.0
• DIGERIDO ENZIMÁTICO DE PLANTAS Y TEJIDO ANIMAL
……………………………. 20.0
• DIHIDROGENOFOSFATO DE POTASIO
……………………………………………………. 2.75
• LAURIL SULFATO DE SODIO
………………………………………………………………….. 0.1
• HIDROGENOFOSFATO DIPOTÁSICO
………………………………………………………. 2.75
Preparación.
Suspender 35,6 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver
con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo.
Dispensar en tubos con tubos colectores de gas Durham para la detección de gases.
Esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
Instrucciones de uso.
Inocular los tubos de caldo de enriquecimiento selectivo con la muestra.
Para inóculo de 1 ml o menos, usar el medio LST con concentración simple.
Para inóculo de 10 ml o más, utilizar el medio LST con doble concentración.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige claro.
Test Microbiológico.
Microorganismo. Especificación.
Enterococcus faecalis ATCC 19433 Sin crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Turbidez (2) y gas en tubos Durham
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Sin crecimiento
Citrobacter freundii ATCC 43864 Turbidez (2) y gas en tubos Durham
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC
 CL – 23. Caldo EC.
Información práctica.
Medio utilizado para el recuento de coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli
en agua, alimentos y otros materiales.
Principios y usos.
En el medio de cultivo la tripteína es la fuente de péptidos, aminoácidos y nitrógeno. La
lactosa es el hidrato de carbono fermentable y favorece el desarrollo de bacterias
coliformes, las sales biliares inhiben el crecimiento de la flora acompañante Gram positiva,
las sales fosfato constituyen un sistema buffer que impide que los productos ácidos
originados por la fermentación de lactosa afecten el crecimiento microbiano y el cloruro de
sodio mantiene el balance osmótico.
Formula en g/L.
• TRIPTEÍNA ...................................................................................................20.0
• LACTOSA ..................................................................................................... 5.0
• SALES BILIARES N° 3 .....................................................................................1.5
• FOSFATO DIPOTÁSICO .................................................................................. 4.0
• FOSFATO MONOPOTÁSICO ........................................................................... 1.5
• CLORURO DE SODIO .................................................................................... 5.0
• pH FINAL: 6.9 ± 0.2
Preparación.
Suspender 37 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar reposar 5 minutos. Calentar
con agitación frecuente y llevar a ebullición para su total disolución. Distribuir en tubos de
ensayo que contengan campanitas de Durham. Esterilizar en autoclave a 121°C durante
15 minutos.
Instrucciones de uso.
Para recuento de coliformes totales, técnica del Número Mas Probable: Para el análisis de
muestras fluidas como el agua, sembrar por triplicado: 10 ml en caldo doble concentración
y 1ml y 0,1 ml en caldo simple concentración. Para muestras sólidas (alimentos,
cosméticos, fármacos), efectuar diluciones seriadas 10-1, 10-2 y 10-3 y sembrar cada
dilución por triplicado en medio de cultivo simple concentración. Para el recuento de
coliformes totales: en aerobiosis, a 33-37 °C durante 24 - 48 horas. Para el análisis de
coliformes fecales y Escherichia coli: en aerobiosis, a 44,5 - 45,5 °C durante 24 horas.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre deslizamiento.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Crecimiento.
Escherichia coli ATCC 8739 Satisfactorio
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Satisfactorio
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibido
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
 CL – 24. Caldo Triptona 1%.
Información práctica.
Medio nutritivo líquido para el cultivo general de bacterias no exigentes. Contiene triptona
al 1% como fuente de nitrógeno y aminoácidos. Es útil para el crecimiento y mantenimiento
de microorganismos en laboratorio.
Principios y usos.
Medio de cultivo microbiológico utilizado para diversos propósitos, principalmente para el
cultivo general de bacterias y para pruebas de producción de indol. Se basa en la digestión
enzimática de la caseína (triptona), que proporciona aminoácidos y otros nutrientes
esenciales para el crecimiento microbiano.
Formula en g/L.
• TRIPTONA (DIGESTIÓN PANCREÁTICA DE CASEÍNA)
……………………………… 10 (1%)
• CLORURO DE SODIO
…………………………………………………………………………. 5
• AGUA DESTILADA
………………………………………………………………………………. 1 LITRO
• PH FINAL: 7.0 ± 0.2 (A 25 °C)
Preparación.
Disolver 15 g de polvo (triptona + NaCl) en 1 litro de agua destilada.
Calentar con agitación para disolver completamente.
Esterilizar en autoclave a 121 °C, 15 psi durante 15 minutos.
Dejar enfriar y usar o almacenar a 2–8 °C.
Control de Calidad.
Polvo: homogéneo, color beige claro.
Medio preparado: solución clara, ligeramente amarilla.
Test Microbiológico.
Escherichia Coli – Crecimiento abundante.

Almacenamiento.
Polvo: en envase cerrado, lugar seco y fresco (<30 °C).
Medio líquido: refrigerado (2–8 °C), protegido de la luz.
 CL – 25. Caldo MR – VP.
Información práctica.
Medio utilizado para la realización del ensayo de Rojo de Metilo y Voges Proskauer. Es
particularmente útil para la clasificación de enterobacterias.
Principios y usos.
La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a través de distintas vías
metabólicas. Según la vía utilizada, se originarán productos finales ácidos (ácido láctico,
ácido acético, ácido fórmico), o productos finales neutros (acetil metil carbinol). Esta
diferencia en el metabolismo bacteriano, podría ser reconocida por la adición de un
indicador como rojo de metilo, para revelar la presencia de productos ácidos, y por la
adición de alfa naftol e hidróxido de potasio para evidenciar la presencia de productos
finales neutros.
Formula en g/L.
• PLURIPEPTONA ........................................................................................ 7.0
• GLUCOSA ................................................................................................ 5.0
• FOSFATO DIPOTÁSICO .............................................................................. 5.0
• pH FINAL: 6.9 ± 0.2
Preparación.
Suspender 17 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos. Calentar con
agitación frecuente y llevar a ebullición para disolución total. Distribuir en tubos y esterilizar
en autoclave a 118 121°C durante 15 minutos.
Instrucciones de uso.
Siembra por inoculación directa a partir del cultivo en estudio.
Incubación En aerobiosis, a 33-37°C durante 48 a 72 horas.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro, transparente sin precipitado.
Test Microbiológico.
Microorganismo Especificación.
Escherichia coli ATCC 25922 Satisfactorio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Satisfactorio
Proteus mirabilis ATCC 43071 Satisfactorio
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Satisfactorio
Enterobacter cloacae ATCC 13047 Satisfactorio
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
 CL – 26. Caldo Citrato de Koser.
Información práctica.
Para la diferenciación de Escherichia coli y Enterobacter en base al uso de citrato.
Principios y usos.
Son citrato negativo) y organismos de la suciedad que son el 90% citrato positivo según
Wilson y Miles. Estos mismos autores informan que solo el 6.7% de los coliformes aislados
de heces humanas o animales son citrato positivo. Enterobacter aerogenes y Enterobacter
cloacae utilizan citrato de sodio como fuente de carbono y la sal de fosfato de amonio
inorgánico como fuente de nitrógeno. Escherichia coli no puede usar citrato de sodio como
fuente de carbono y no crece en este medio. Los métodos de identificación bioquímica para
identificar E. coli incluyen frecuentemente el citrato Koser. El sulfato de magnesio
proporciona iones requeridos en una gran variedad de reacciones enzimáticas, incluida la
replicación de ADN. El fosfato monopotásico actúa como tampón.
Formula en g/L.
• SULFATO MAGNÉSICO
………………………………………………………………………….. 0.2
• CITRTO DE SODIO
………………………………………………………………………………… 3.0
• FOSFATO MONOPOTÁSICO
……………………………………………………………………. 1.0
• FOSFATO DE SODIO Y AMONIO
………………………………………………………………. 1.5
Preparación.
Suspender 5,7 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por
calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta su completa
disolución. Dispensar en tubos con tapón de rosca y esterilizar en autoclave a 121 ºC
durante 15 minutos. Ajustar bien las tapas después de la esterilización.
Instrucciones de uso.
Inocular e incubar a una temperatura de 35±2 ºC durante 18-24 horas.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Especificación.
Enterobacter cloacae ATCC 13047 Buen crecimiento
Klebsiella aerogenes ATCC 13048 Buen crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento nulo
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC
 CL – 27. Caldo Lactosa Bilis Verde Brillante.
Información práctica.
Este medio esta recomendado para el recuento de coliformes totales y fecales, por la
técnica del numero mas probable.
Principios y usos.
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado
desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante son los agentes selectivos que inhiben el
desarrollo de bacterias Gram positivas y Gram negativas a excepción de coliformes, y la
lactosa es el hidrato de carbono fermentable. Es una propiedad del grupo coliforme, la
fermentación de la lactosa con producción de ácido y gas.
Formula en g/L.
• BILIS DE BUEY DESHIDRATADA
…………………………………………………………… 20.0
• LACTOSA
…………………………………………………………………………………………. 10.0
• ΡΕΡΤΟΝΑ
…………………………………………………………………………………………..10.0
• VERDE BRILLANTE
…………………………………………………………………………….. 0.0133
• PH FINAL: 72 ± 0.2
Preparación.
Suspender 40 g del polvo en 1 litro de agua purificada.
Disolver y distribuir 10 ml por tubo con campanita de Durham.
Calentar a 100° C durante 30 minutos. No esterilizar en autoclave.
Instrucciones de uso.
Para el análisis de coliformes totales en muestras fluidas, sembrar por triplicado: 10 ml en
caldo doble concentración y 1ml y 0,1 ml en caldo simple concentración. Para el análisis
de coliformes totales en muestras sólidas (alimentos, cosméticos, fármacos), efectuar
diluciones seriadas 101, 10 y 10 y sembrar cada dilución por triplicado en medio de cultivo
simple concentración. Para análisis de coliformes fecales, a partir de cada tubo positivo en
la prueba presuntiva de coliformes totales utilizando la técnica del NMP, o a partir de
colonias presentes en diferentes medios, que se presume sean coliformes, transferir una
ansada a un tubo con Verde Brillante y Bilis al 2%, incubando a 44.5 °C y otra en Agua
Triptona.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color verde, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color verde.
Test Microbiológico.
Microorganismo. Especificación.
Salmonella typhimurium Satisfactorio
Staphylococcus aureus Inibicion parcial o total.
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 °C.
Medio de cultivo preparado a 2-8 "С.

CL – 28. Caldo Lauril Triptosa con MUG.

Información práctica.
Se utiliza para la detección de coliformes y la detección fluorogénica de Escherichia coli en
un entorno de laboratorio. Lauryl Sulfate Broth W/ MUG no está diseñado para su uso en
el diagnóstico de enfermedades o otras condiciones en los seres humanos.
Principios y usos.
El grupo de bacterias coliformes incluye bacilos aerobios y anaerobios facultativos, Gram
negativos, no formadores de esporas que fermentan la lactosa y forman ácido y gas a 35°C
en 48 horas. Los miembros de Enterobacteriacae constituyen la mayoría de este grupo,
pero también pueden incluirse organismos como Aeromonas spp. Los procedimientos para
detectar y confirmar coliformes se utilizan en el análisis de agua, alimentos, productos
lácteos y otros materiales.
Formula en g/L.
• DIGESTIÓN ENZIMÁTICA DE CASEÍNA
…………………………………………………. 20.0
• LACTOSA
………………………………………………………………………………………… 5.0
• FOSFATO MONOPOTÁSICO
……………………………………………………………….. 2.75
• FOSFATO DISÓDICO
…………………………………………………………………………. 2.75
• CLORURO SÓDICO
…………………………………………………………………………… 5.0
• LAURIL SULFATO SÓDICO
………………………………………………………………….. 0.1
• 4-METILUMBELIFERIL-D-GLUCURÓNIDO
…………………………………………….. 0.05
• pH final: 6,8 ± 0,2 a 25°C
Preparación.
1. Disolver 35.7 g del medio en un litro de agua purificada.
2. Mezclar bien.
3. Distribuir en tubos Durham invertidos.
4. Autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Instrucciones de uso.
Control de Calidad.
Deshidratado Aspecto: El polvo es homogéneo, de flujo libre y de color blanco a
blanquecino.
Aspecto preparado: El medio preparado es de color amarillo a dorado y de transparente a
ligeramente turbio. Respuesta cultural esperada: Respuesta cultural en caldo de Lauril
Sulfato con MUG incubado aeróbicamente a 35 ± 2°C y examinado para producción de gas
de crecimiento y fluorescencia después de 24 ± 2 horas de incubación.
Test Microbiológico.
Microorganismo Crecimiento
Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Crecimiento
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibido
Almacenamiento.
Almacenar el frasco cerrado que contiene el medio deshidratado a 2 - 30°C.

CL – 29. Caldo Neutralizante.

Información práctica.
Medio líquido para cultivos de enriquecimiento en productos cosméticos de acuerdo con
las normas ISO.
Principios y usos.
Inicialmente Dey & Engley describieron este medio de cultivo para recuperar estafilococos
dañados por los agentes químicos y en la actualidad su uso se ha diversificado para
verificar diferentes aspectos del uso de desinfectantes y conservadores de distintos
productos. En su composición se encuentran inactivadores y neutralizantes para la mayoría
de las sustancias activas que se emplean como conservadores en productos farmacéuticos
o cosméticos. La lecitina neutraliza los amonios cuaternarios, el polisorbato los fenoles y
formol; el tioglicolato los órganos mercuriales; el tiosulfato-sulfito los halógenos, la
asociación lecitina + polisorbato neutraliza el etanol y otros alcoholes.
Formula en g/L.
• TRIPTONA.................................................................... 5.00
• EXTRACTO DE LEVADURA............................................. 2.50
• DEXTROSA.................................................................. 10.00
• LECITINA..................................................................... 7.00
• POLISORBATO 80.........................................................5.00
• TIOSULFATO SÓDICO.................................................. 6.00
• BI-SULFITO SÓDICO.................................................... 2.50
• TIOGLICOLATO SÓDICO................................................1.00
• PÚRPURA DE BROMOCRESOL....................................... 0.02
Preparación.
Utilizar el medio según fines previstos, muestras y métodos validados. Se recomienda 1 g
o 1 mL de muestra que se transfiere directamente a 9 mL del Caldo D/E estéril si la muestra
es soluble. Si la muestra no es miscible en agua, previamente se deberá solubilizar. El
Caldo D/E con la muestra se incuba a 32,5ºC ± 2,5ºC durante un período mínimo de 20
horas y máximo de 72 antes de pasar a un subcultivo sobre un medio sólido adecuado para
obtener colonias separadas.
Control de Calidad.
Control Físico/Químico: Color : Violeta, Control de Fertilidad, pH: 7,6 ± 0,2 a 25ºC
Inocular con 103 - 104 UFC (Cualitativo) Aerobiosis. Incubación a 30-35 ºC.
Lectura a las 24-48 h
Test Microbiológico.
Microorganismo. Desarrollo
Escherichia coli ATCC® 8739, WDCM Bueno. Recuperar en D/E neutralizing A.
00012 Bacillus subtilis ATCC® 6633, Bueno. Recuperar en D/E neutralizing A.
WDCM 00003
Almacenamiento.
8-25 ºC.

CL – 30. Caldo Soya Tripticaseína sin Dextrosa.

Información práctica.
Para uso general de laboratorio y para el cultivo de microorganismos fastidiosos.
Principios y usos.
El Caldo Soja y Treipticaseína sin Dextrosa es un medio muy rico en nutrientes para uso
general en laboratorios microbiológicos. El medio se usa frecuentemente en muchos
procedimientos de microbiología. Por ejemplo, se utiliza para las pruebas de aislamiento y
sensibilidad de todos los tipos de patógenos, y para la producción de antígenos para
pruebas de aglutinación y serología.
Formula en g/L.
• FOSFATO DIPOTÁSICO
…………………………………………………………………………. 2.5
• DIGERIDO PANCREÁTICO DE CASEÍNA
…………………………………………………… 17
• CLORURO SÓDICO
………………………………………………………………………………. 5
• DIGERIDO PAPAICO DE SOJA
…………………………………………………………………. 3
Preparación.
Suspender 27.5 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver
por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta su completa
disolución. Dispensar en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 °C durante
15 minutos. Cantidades más grandes pueden requerir un tiempo de esterilización más
largo, pero la temperatura no debe incrementarse.
Instrucciones de uso.
Inocular e incubar a 35±2 ºC durante 18-24 horas.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige claro.
Test Microbiológico.
Microorganismos Especificación.
Candida albicans ATCC 10231 Buen crecimiento
Klebsiella aerogenes ATCC 13048 Buen crecimiento
Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Buen crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Buen crecimiento
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC Temp. Max.:25 ºC

CL – 31. Caldo Urea.

Información práctica.
Medio de cultivo utilizado para identificar Enterobacterias con base a la hidrólisis de urea
a partir de muestras clínicas y otros materiales.
Principios y usos.
Este medio permite determinar la capacidad de un microorganismo para degradar la urea
formando dos moléculas de amoniaco por acción de la enzima ureasa. Esta actividad
enzimática es característica de todas las especies de Proteus y se usa sobre todo para
diferenciar este género de otras Enterobacterias que dan negativo o positivo retardado. Las
especies de Enterobacter pueden utilizar la urea como única fuente de nitrógeno. La urea
es la fuente de nitrógeno y permite la detección de la hidrólisis de la urea, el extracto de
levadura aporta vitaminas necesarias para el desarrollo de microorganismos, los fosfatos
mantienen el balance osmótico y el rojo de fenol es el indicador de pH.
Formula en g/L.
• EXTRACTO DE LEVADURA ……………………………………………………………..
0.10
• FOSFATO MONOPOTÁSICO …………………………………………………………..
9.10
• ROJO DE FENOL ………………………………………………………………………….
0.01
• UREA ………………………………………………………………………………………..
20.0
• FOSFATO DIPOTÁSICO …………………………………………………………………
9.50
• PH 6.8 ± 0.2 A 25 °C
Preparación.
Suspender 38.7 gramos del medio en un litro de agua destilada sin calentar, cuando el
polvo este disuelto esterilizar por filtración. Vaciar en tubos estériles.
Instrucciones de uso.
A partir de un cultivo puro de 18-24 horas sembrar los tubos de caldo urea.
Incubar condiciones aeróbicas a 35±0.2°C durante 24h.
Algunos microorganismos pueden requerir mayor tiempo de incubación.
Test Microbiológico.
Microorganismo Crecimiento
Escherichia Coli 25922 Bueno
roteus mirabilis 12453 Bueno
Proteus vulgaris 13315 Bueno
Salmonella enterica serotipo Typhimurium Bueno
14028
Almacenamiento.
2 – 8 °C.

CL – 32. Caldo Carne Cocida.

Información práctica.
Es un medio de enriquecimiento utilizado para el cultivo de microorganismos anaerobios,
especialmente los pertenecientes al género Clostridium.
Principios y usos.
Este medio de cultivo contiene sustancias reductoras que favorecen el crecimiento de
microorganismos anaerobios estrictos. La disponibilidad de los grupos sulfidrilos que
aumentan el efecto reductor es mayor en la proteína desnaturalizada, por ello en este
medio se utiliza carne cocida.
Formula en g/L.
• CARNE DE CORAZÓN (DE 454 G)
………………………………………………………. 98.0
• PROTEOSA PEPTONA
………………………………………………………………………. 20.0
• DEXTROSA
……………………………………………………………………………………… 2.0
• CLORURO DE SODIO
……………………………………………………………………….. 5.0
• AGUA DESTILADA C.S.P.
……………………………………………………………………. 1000
Preparación.
Suspender 12.5 g de las partículas de medio en 100 mL de agua destilada. Permitir que
todas las partículas del medio se humedezcan y formen una suspensión. Esterilizar a
121°C durante 15 minutos. Reducir la presión de la autoclave lentamente y dejar enfriar sin
agitar. Si el medio no se utiliza dentro de las siguientes 24 horas de su preparación,
recalentar a 100 °C antes de su uso para eliminar todo el oxígeno que pueda haber
absorbido el medio.

CL – 33. Caldo Glucosa Púrpura de Bromocresol.

Información práctica.
Para la diferenciación de Enterobacterias.
Principios y usos.
Se utiliza para la diferenciación de Enterobacteriaceae en agua y alimentos. Diferenciación
de especies según la fermentación con dextrosa.
Formula en g/L.
• GLUCOSA
……………………………………………………………………………………………
10.0
• CLORURO SÓDICO
………………………………………………………………………………. 5.0
• EXTRACTO DE LEVADURA
………………………………………………………………………. 1.5
• PÚRPURA DE BROMOCRESOL
………………………………………………………………… 0.05
• TRIPTONA
…………………………………………………………………………………..……….
10.0
Preparación.
Suspender 26.5 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver
por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un minuto hasta su completa
disolución. Dispensar en recipientes apropiados y esterilizar en auto clave a 121 ºC durante
15 minutos.
Instrucciones de uso.
Inocular e incubar a 35 ± 2 ºC durante18-24horas.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige.
Test Microbiológico.
Microorganismo Especificación.
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Buen crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Buen crecimiento
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Buen crecimiento
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 34. Caldo Extracto de Malta.

Información práctica.
Para el aislamiento y enumeración de hongos y levaduras.
Principios y usos.
El extracto de malta proporciona las fuentes de carbono, proteínas y nutrientes necesarias
para el crecimiento de microorganismos. Es especialmente adecuado para levaduras y
hongos, ya que contiene una alta concentración de maltosa y otros sacáridos como fuentes
de energía.
Formula en g/L.
• PEPTONA DE GELATINA
……………………………………………………………………… 5.5
• EXTRACTO DE LEVADURA
…………………………………………………………………… 0.5
• EXTRACTO DE MALTA
…………………………………………………………………………. 13.0
Preparación.
Suspender 19 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver
calentando con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta disolver por completo.
Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 118 ºC durante 15 minutos.
NO SOBRECALENTAR.
Instrucciones de uso.
Utilizar procedimientos estándar para inocular el material de la muestra en los tubos de
Caldo Extracto de Malta.
Incubar lostubosa30±2°Cdurante18-72horas.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Especificación.
Candida albicans ATCC10231 Buen crecimiento
Aspergillus brasiliensis ATCC16404 Buen crecimiento
Sacharomyces cerevisiae ATCC9080 Buen crecimiento
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 35. Caldo Ácido.

Información práctica.
Cultivo y recuperación de microorganismos acidófilos, especialmente en alimentos
enlatados y ambientes con pH bajo.
Principios y usos.
Detectar y determinar la capacidad de los microorganismos de fermentar Ramnosa y
Xilosa como fuentes de carbono.
Diferenciación de especies bacterianas.
Estudio del metabolismo de azucares desoxigenados y pentosas.
Evaluaciones bioquímicas en microbiología clínica y ambiental.
Formula en g/L.
• EXTRACTO DE LEVADURA
………………………………………………………………………… 8
• PEPTONA
………………………………………………………………………………………………
10
• SACAROSA (O AZÚCAR INVERTIDA)
…………………………………………………………. 10
• AGUA DESTILADA
………………………………………………………………………………….. 1 L
 • PH FINAL: ÁCIDO, TÍPICAMENTE ALREDEDOR DE 4.0 – 5.0 (DEPENDIENDO
DEL PROTOCOLO Y USO).
Preparación.
Disolver los componentes en 1 litro de agua destilada.
Calentar con agitación hasta disolución total.
Esterilizar en autoclave a 121 °C por 15 minutos.
Enfriar y usar bajo condiciones asépticas.
Almacenar a 2–8 °C protegido de la luz.
Control de Calidad.
Polvo: Color crema claro, libre de grumos.
Solución: Clara, sin precipitados.
Prueba de fertilidad: crecimiento de cepas como Lactobacillus acidophilus o
Saccharomyces cerevisiae.
Esterilidad: sin turbidez en tubos no inoculados tras 14 días a 25 °C.
Test Microbiológico.
Lactobacillus acidophilus
crecimiento visible.
Almacenamiento.
≤ 30 °C

CL – 36. Caldo CSTEL.

Información práctica.
Medio de cultivo general no selectivo, utilizado en microbiología de alimentos,
farmacéutica, aguas y superficies.
Principios y usos.
El Caldo CSTEL es un medio no selectivo y nutritivo que favorece el crecimiento de una
gran variedad de microorganismos, incluyendo bacterias grampositivas, gramnegativas y
algunas levaduras. Se basa en tres componentes esenciales.
Formula en g/L.
• TRIPTONA DE
CASEÍNA ………………………………………………………………….15.0

• PEPTONA DE ………………………………………………………………………..
SOYA 5.0
 • EXTRACTO DE LEVADURA 3.0–
………………………………………………………………. 5.0

• CLORURO DE SODIO (NACL) 5.0

…………………………………………………… (OPCIONAL)

• AGUA DESTILADA 1000 ML

• PH FINAL (25 °C): 7.2 ± 0.2

•
Preparación.
Disolver ~25–28 g del medio en 1 litro de agua destilada.
Calentar con agitación hasta completa disolución.
Esterilizar en autoclave a 121 °C, 15 psi, por 15 minutos.
Enfriar a temperatura ambiente y distribuir en condiciones estériles.
Almacenar en refrigeración si no se utiliza de inmediato.
Control de Calidad.
Aspecto del polvo : Beige claro, fino, homogéneo
Solubilidad: Disolución completa sin grumos
Test Microbiológico.
Escherichia coli ATCC 25922 - crecimiento visible
Staphylococcus aureus ATCC 6538 - crecimiento Visible
- Salmonella Typhimurium ATCC 14028 – crecimiento visible
Almacenamiento.
<30 °C

CL – 37. Caldo Letheen modificado.

Información práctica.
Para el análisis microbiológico en cosmética.
Principios y usos.
Caldo Letheen Modificado se basa en la fórmula descrita en el Manual analítico
bacteriológico de la FDA y es una modificación de la Base de Caldo Letheen. Es un medio
líquido altamente nutritivo recomendado para su uso en las pruebas microbiológicas de
cosméticos.
Formula en g/L.
• PEPTONA DE CASEÍNA
…………………………………………………………………… 5.0
• EXTRACTO DE CARNE
……………………………………………………………………. 5.0
 • LECITINA PEPTONA DE CARNE ………………………………………………………..
0.7
• POLISORBATO
……………………………………………………………………………… 5.0
• BISULFITO SÓDICO
………………………………………………………………………. 0.1
• CLORURO SÓDICO ……………………………………………………………………….
5.0
• EXTRACTO DE LEVADURA
……………………………………………………………… 2.0
Preparación.
Suspender 42,8 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver
por calentamiento con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta su completa
disolución. Dispensar en recipientes apropiados y esterilizar a 121 ºC durante 15 minutos.
Instrucciones de uso.
Para el enriquecimiento de bacterias aeróbicas presentes en productos cosméticos:
Preparar la suspensión inicial y dispersar en el caldo.
Incubar a 35±2 ºC durante 18-24 horas.
Subcultivar una cantidad definida de la solución anterior en los medios apropiados en
función del microorganismo a detectar.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: Beige.
Test Microbiológico.
Microorganismo Especificación.
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 Buen crecimiento
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Buen crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Buen crecimiento
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Buen crecimiento
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Buen crecimiento
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 38. Caldo Nitrato.

Información práctica.
Confirmación de enterobacterias.
Principios y usos.
El Caldo Nitrato, combinado con los reactivos apropiados, se utiliza para confirmar la
utilización de nitrato. El Caldo Nitrato, combinado con los reactivos apropiados, se utiliza
para confirmar la utilización de nitrato. La desnitrificación elimina el nitrato del suelo, una
fuente de nitrógeno accesible para las plantas, y lo convierte en N2, una fuente de nitrógeno
mucho menos manejable que la mayoría de las plantas no pueden usar. . Algunas
bacterias, como el grupo Enterobacteriaceae, son capaces de usar nitrato como su aceptor
de electrones terminal.
Formula en g/L.
• EXTRACTO DE CARNE
…………………………………………………………………… 5.0
• NITRATO POTÁSICO
……………………………………………………………………… 1.0
• PEPTONA DE CARNE …………………………………………………………………….
10.0
• CLORURO SÓDICO ……………………………………………………………………….
5.0
Preparación.
Suspender 21 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por
calentamiento con agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta su completa
disolución. Dispensar en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 °C durante
15 minutos.
Instrucciones de uso.
Este medio se utiliza a partir de cultivos puros. Inocular e incubar a 37±2 ºC durante 24
horas y agregar el reactivo de Griess-ilosvay para observar la producción de nitritos. El
nitrito reacciona con el reactivo de Griess-ilosvay produciendo un color rojo. Se puede
observar la producción de gas agregando a cada tubo untubo Durham.
Control de Calidad.
Solubilidad: sin restos.
Apariencia: polvo fino. Color: beige.
Test Microbiológico.
Microorganismos Especificación.
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Buen crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Buen crecimiento
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Buen crecimiento
Almacenamiento.
Temp. Min.:2 ºC. Temp. Max.:25 ºC

CL – 39. Caldo Lactosado.

Información práctica.
Medio recomendado como prueba presuntiva de la presencia de bacterias del grupo
coliforme en aguas y alimentos. También está indicado para el preenriquecimiento no
selectivo en
los protocolos de investigación de Salmonella spp. a partir de alimentos.
Principios y usos.
Es un medio rico en nutrientes y no contiene inhibidores del crecimiento bacteriano. Permite
recuperar células injuriadas, diluye sustancias tóxicas o inhibitorias y favorece el desarrollo
de Salmonella con respecto a otras bacterias. El extracto de carne y la peptona son la
fuente de carbono y nitrógeno mientras que la lactosa es el hidrato de carbono fermentable.
Por la fermentación de la lactosa se produce ácido y gas (el cual se evidencia al utilizar las
campanas Durham).
Formula en g/L.
• EXTRACTO DE CARNE .................................................................................... 3.0
• PEPTONA ...................................................................................................... 5.0
• LACTOSA....................................................................................................... 5.0
• pH FINAL: 6.9 ± 0.2
Preparación.
Suspender 13 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar reposar 5 minutos. Calentar
con agitación frecuente y llevar a ebullición para disolución total. Distribuir en recipientes
apropiados. Si se debe observar la producción de gas, agregar 1 campana de Durham a
cada recipiente conteniendo medio de cultivo. Esterilizar en auto clave a 121 ºC durante 15
minutos.
Instrucciones de uso.
En general Para investigar la presencia de bacterias coliformes, si se trata de volúmenes
pequeños de muestra (1ml) inocular en caldo simple concentración y si se trata de
volúmenes mayores (10 ml) inocular en caldo doble concentración.
Cuando se emplea como preenriquecimiento no selectivo en la búsqueda de Salmonella
spp., usualmente se siembran 25 g o 25 ml de muestra en 225 ml de caldo.
Incubación: En aerobiosis, a 33-37 ºC durante 18-48 horas. En el caso de utilizarse para
el preenriquecimiento de especies de Salmonella, incubar durante 18-24 horas y luego
subcultivar.
Control de Calidad.
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro, transparente sin precipitado.
Test Microbiológico.
Microorganismos. Crecimiento.
Escherichia coli ATCC 25922 Satisfactorio
Almacenamiento.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
SOLUCIÓN INFORMACIÓN USOS. FORMUL PREPARACIÓ INSTRUCCIONE ALMACENAMIENTO. SEGURIDAD.
. PRÁCTICA. A EN g/L. N. S DE USO.
SOL – 1
SOL – 2 Concentración: Riego, lavado de NaCl: 9.0 Disolver en Usar 4-25 °C hasta 30 días No toxica. Uso
0.9% NaCl heridas, transporte g 900 mL, directamente o estéril. seguro con guantes
Osmolaridad: de muestras, Agua ajustar pH y esterilizar si se
~308 mOsm/L disolvente. destilada: completar a 1 requiere.
pH: ~5.5 a 7.0 1L L. Esterilizar si
es necesario
SOL – 3 Medio nutritivo Preenriquecimiento Peptona: Disolver Usar para cultivo Refrigerar hasta 1 mes No peligrosa. Usar
para bacterias microbiológico 10g Ajustar pH a microbiológico. estéril. protección básica.
Extracto 7.0
de Esterilizar.
carne:3g
Polisorbat
o 80: 1 g
SOL – 4 Solución buffer Ensayos de Acido Disolver Usar directo Hasta 3 meses Bajo riesgo
de acido estabilidad acetico:1 Ajustar pH a 6 Evitar contacto.
acético/acetato Cosmetica mL, Completar a 1
Acetato de L.
sodio:
ajustar pH
SOL – 5 Tris-HCl buffer Cultivos celulares Tris base: Disolver Tris, Refrigerado, protegido Leve irritante
Biología molecular 12.11 g ajustar Ph de luz
HCl para Completar a 1
pH 8 L
SOL – 6 Acido Ensayos químicos Acido acético: Refrigerar o ambiente Irritante
acético/acetato 100 mL + 3 meses Usar protección
10% Acetato ajustar
pH
SOL – 7 Buffer básico Electroforesis Na2B4O7 Disolver, Básica
(borato) Proteínas 10H2O: ajustar pH Protección ocular/pie
7.63 g + Completar a 1
L.
 NaOH
para pH
SOL – 8 Fosfato o Tris- NaH2PO4 Disolver, No peligrosa
HCl H2O: ~6.9 ajustar pH,
g- completar.
Na2HPO4
2H2O:
~8.9 g
SOL – 9 Versión diluida( Tomar 200 mL Cultivos sensibles Mismo perfil que
0.05 M) de la solución Lavado solución madre
madre 0.25 M y
completar a 1
L.
SOL – 10 Solución ácida Control de pH en Ácido Disolver los Diluir según 2-8 °C, protegido de la Manejar con guantes
empleada para medios de cultivo. acético y componentes necesidad luz y gafas
estabilizar el pH acetato de en agua
de medios o sodio destilada
reacciones Ajustar pH a
enzimáticas que 4.5
requieren
entorno
ligeramente
ácido.
SOL – 11 Amortiguador Control de pH. Mezcla de Ajustar con Refrigerar. Irritante leve
con pH ácido NaOH/HCl
ligeramente cítrico y
ácido, útil para fosfato
ensayos
enzimáticos,
control de pH en
fermentaciones
o
pretratamientos.
SOL – 12 Solución básica, Aplicaciones Carbonato Mezclar y T. ambiente Corrosivo
usada en básicas y ajustar pH.
reacciones en bicarbonat
condiciones o de sodio
alcalinas o para
lavado de
materiales
sensibles.
SOL – 13 Amortiguador Solución tampón Fosfato Ajustar a pH 2-8 °C Baja toxicidad.
neutro universal, general. disódico y 7.0
común en monopotá
biología sico
molecular,
microbiología y
ensayos de
rutina.
SOL – 14 Mezcla de Enzimología, Monofosfa Diluir 10x en Refrigerar.
fosfatos para biología molecular to y agua estéril.
mantener el pH difosfato
estable sódico
(usualmente
entre 6–8),
usada en
diluciones,
lavados o
buffers
enzimáticos.
SOL – 15 Contiene Neutralizar Lecitina, Según En controles de 2-8 °C
agentes como desinfectantes. polisorbat fabricante superficies.
lecitina y o,
polisorbato para tiosulfato.
inactivar
residuos de
desinfectantes
 en muestras
superficiales o
utensilios.
SOL – 16 Versión lista Aplicación directa Dilución Diluir con agua Refrigeración.
para uso de la 1:10 de la estéril.
solución concentra
anterior, da
aplicable
directamente
sobre
superficies tras
sanitización.
SOL – 17 Medio simple Preenriquecimiento Peptona 1 Disolver y 2-8 °C.
para el microbiológico. g/L, NaCl esterilizar.
preenriquecimie 5 g/L.
nto de bacterias
en alimentos o
aguas; contiene
peptona y sal
para mantener
la viabilidad
celular.
SOL – 18 Buffer Ensayos Fosfato Ajustar a pH Refrigerar.
ligeramente bioquímicos. disódico y 6.0.
ácido, ideal para fosfato
procesos monopotá
enzimáticos o de sico
conservación
donde se
requiere
mantener pH
estable cercano
a 6.
SOL – 19 Solución Ruptura celular y Variable Según 4 °C
utilizada para liberación de (Triton, protocolo.
romper células y ADN/ARN NaCl,
liberar ADN, EDTA).
ARN o
proteínas; su
composición
puede incluir
detergentes y
agentes
quelantes.
SOL – 20 Solución Lavado celular, NaCl 8 g, Disolver, 2-8 °C.
isotónica y diluciones. KCl 0.2 g, ajustar pH.
tamponada (pH Na2HPO4
7.4) para 1.44 g,
mantener KH2PO4
células viables y 0.24 g/L.
lavar sin alterar pH: 7.4
su integridad.
SOL – 21 Detergente no Lisis celular, Solución Diluir en T. ambiente.
iónico utilizado extracción de al 1% de tampón.
para lisis celular proteínas Triton X-
suave y 100
permeabilizació
n de membranas
en técnicas
inmunológicas o
de extracción.
SOL – 22 Medio sintético Cultivo de Asparagin Esterilizar por Refrigeración
diluido utilizado micobacterias a, glicerol, filtración.
principalmente citrato
para el cultivo de férrico,
micobacterias, fosfato
como
Mycobacterium
tuberculosis.
 REACTIVO. INFORMACIÓN FÓRMULA. PREPARACIÓ USO. ALMACENAMIENT SEGURIDAD
PRÁCTICA. N. O. .

Utilizado en p- Disolver el Detecta la Refrigerado, ambar, Inflamable y

pruebas dimetilaminobe aldehido en producción bien cerrado. toxico. Usar
Reactivo de kovacs.

bioquímicas nzaldehido: 5 g alcohol. de indol por guantes,

(Indol). Acido Anadir acido bacterias a gafas y
REC – 1.

Incoloro o clorhídrico clorhidrico partir de campana.

ligeramente concentrado: 75 lentamente. triptófano.
amarillento. mL Homogeneizar. Parte del
Contiene aldehído Alcohol amilico metodo
y ácido clorhídrico. (isoamilico): IMViC
100 mL (Indol, MR,
VP, Citrato).
Prueba ONPG (Orto- Inocular el Confirmació 2–8 °C, protegido de Usar guantes
colorimétrica nitrofenil-β-D- microorganism n bioquímica la luz. y gafas de
rápida para galactopiranósi o en caldo de protección.
Reactivo de β – galactosidasa

detectar la do) 400 mg. lactosado o Escherichia Evitar el

actividad de la Tampón fosfato agua coli. contacto con
enzima β– pH 7.0100 mL. peptonada. Detección ojos y piel.
galactosidasa. Incubar a 35– de actividad
REC – 2 .

37 °C por 24 enzimática
horas. de β–
Añadir 0.1–0.2 galactosidas
mL del reactivo a.
ONPG a 1 mL
del cultivo.
Incubar
nuevamente
por 15–30
minutos.
 Dos reactivos: alfa- Reactivo A: Preparar Detecta Refrigerado, Corrosivo
Reactivo para la
prueba de VP.
naftol y KOH. alfa-naftol: 5 g ambos producción protegido de luz. (KOH),
Etanol absoluto: reactivos por de acetona inflamable
REC – 3.

100 mL separado. (acetilmetilc (etanol).

Reactivo B: Agregar en arbinol).- Protección
Hidroxido de orden (A, luego Parte del completa.
potasio (KOH) B) al cultivo. IMViC.
al 40%
Detectar la p- Inocular el Identificació T. ambiente DMAB es
Reactivos para la reacción de indol.

producción de indol Dimetilaminobe microorganism n de E. coli, (<25 °C), seco y tóxico: usar
a partir del nzaldehído o en caldo Proteus oscuro. con guantes
triptófano por (DMAB) 5.0 g triptona al 1% o vulgaris, y gafas.
acción de la Ácido SIM. Morganella Manipular
triptofanasa clorhídrico Incubar a 35– morganii, HCl
bacteriana. concentrado 37 °C por 18– etc. concentrado
REC – 4.

(HCl) 7.5 Ml 24 h. Diferenciaci bajo

Alcohol amílico Añadir con ón dentro de campana.
(isoamil alcoholcuidado 10 la familia Reactivos
o butanol) 75 gotas (0.5 mL) Enterobacte inflamables:
mL del reactivo. riaceae. mantener
Agua destilada Observar la lejos de
Completar a
formación de fuentes de
100 mL anillo rojo en la calor.
superficie.
Soluciones: cristal Cristal violeta: Cada solución Diferenciaci Temperatura Manchan
tinción de Gram.
Reactivo para la

violeta, lugol, 1%- Lugol: yodo se prepara por ón entre ambiente, en frascos ropa y piel.
alcohol, safranina. + yoduro de separado. bacterias ámbar. Usar guantes
REC – 5.

potasio Usar en el Gram y bata.

Alcohol orden: violeta - positivas y
acetona: > Lugol -> negativas.
decolorante alcohol ->
Safranina: 0.51 safranina.
 REC – 6. Indicador de pH- Azul de Disolver el Detecta Ámbar, temperatura Irritante leve.
Reactivo azul de
bromotimol
0.04%.
Azul en medio bromotimol: 0.4 colorante en cambios de ambiente. Usar
básico, amarillo en g agua. pH en protección
acido. Agua destilada: Ajustar pH si es medios de básica.
1L necesario cultivo y
Disolver con (alrededor de soluciones
ligera base si 7.1). buffer.
necesario.
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