UTILIDAD: Esta tinción de Gram es una técnica muy sencilla ya que se basa en el uso de

colorantes que permiten observar a las bacterias mejor bajo el microscopio mediante la
apetencia tintorial, ya sean gram positivas o gram negativas.
PROCEDIMIENTO:

FUNDAMENTO: Esta tinción se basa primordialmente en la composición y estructura de la

pared celular de las bacterias, la cual le permite propiedades a cada microorganismo. La
tinción de Gram se basa en colocar como colorante primario CRISTAL VIOLETA como es un
colorante catiónico, se une a la pared celular bacteriana ya que tiene afinidad con el
peptidoglicano de ésta. Posteriormente, se coloca el mordiente que sería el LUGOL, el cual se
fija al cristal violeta, ya que el tiene carga positiva y el Lugol carga negativa, impidiendo la
salida del cristal violeta de algunas especies de bacterias, debido a la formación de un complejo
cristal violeta-Lugol que satura los espacios del peptidoglicano de la pared bacteriana.
Posteriormente, se coloca una mezcla de alcohol acetona, la cual deshidrata la pared
bacteriana y cierra los poros de ésta, así como también destruye la membrana externa de las
bacterias Gram negativas debido a que ésta es soluble a la acción de disolventes orgánicos,
como la mezcla de alcohol acetona. Las bacterias Gram positivas, al contener una gran
cantidad de peptidoglicano, retienen con mayor fuerza este complejo, mientras que las Gram
negativas no lo pueden retener por tener menos cantidad de peptidoglicano en su pared. Por
último, se coloca safranina, la cual funciona como colorante secundario o de contra tinción y
sirve para teñir las bacterias que no pudieron retener el complejo cristal violeta-Lugol

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Gram positivas Gram negativas
UTILIDAD: Esta tinción de Ziehl Neelsen o de ácido alcohol resistencia, es una tinción para
separar los bacilos tuberculosos y los microorganismos relacionados, permite diferenciar a las
bacterias en dos grupos: aquellos que son capaces de resistir la decoloración con alcohol-ácido
y aquellos que no lo son.
PROCEDIMIENTO:

FUNDAMENTO: Esta tinción se basa en colocar primeramente la fucsina fenicada en la

superficie del extendido a teñir, luego se pasa por debajo del portaobjeto la llama de un
mechero de Bunsen emitiendo así la generación de 3 vapores. El calentamiento permite
solubilizar las ceras, lípidos y otros ácidos grasos de la pared celular para una mayor
penetración de la fucsina fenicada, el cual tiene una gran afinidad por los ácidos micólicos
presentes en la pared y así forman complejos con el colorante. Al enfriar con agua, los
componentes de la pared vuelven a solidificar, luego se añade el alcohol acetona, los bacilos
“ácido-alcohol resistentes” (BAAR) se observan de color rojo al ser coloreados con los colorantes
para Ziehl Neelsen, mientras que otros gérmenes y células toman distintos tonos de azul debido
al azul de metileno que se utiliza como colorante de contraste

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Los bacilos ácido-alcohol
resistentes (BAAR) aparecen de
color rojo sobre un fondo azul
claro, mientras que otros
gérmenes o células toman
distintas tonalidades de azul.
UTILIDAD: Esta prueba se utiliza para comprobar la presencia de la enzima CATALA que se
encuentran en la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas que contienen
el citocromo oxidasa.
PROCEDIMIENTO:

Observar la
presencia o ausencia
Depositar en un portaobjetos de burbujas
Con un asa bacteriologico
estéril retirar una colonia limpio y homogenizarlo con
del medio una gota de peróxido de
hidrogeno.

FUNDAMENTO: El peróxido de hidrogeno que es producto final del metabolismo aerobio de

los hidratos de carbono es muy toxico para las bacterias. Las bacterias que contienen la enzima
CATALASA descomponen el peróxido de hidrogeno en oxigeno y agua. Entonces los organismos
que poseen catalasa evidencian la reacción peróxido de hidrogeno por la generación rápida
de burbuja de gas.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:

Catalasa positiva: Formación de una

efervescencia rápida con
desprendimientos de burbujas

Catalasa negativa: Ausencia de burbujas

EJEMPLOS:
Catalasa positiva: Catalasa negativa:
Staphylococcus aureus Streptococcus spp.
Micrococcus Clostridium spp.
Lysteria monocytogenes
UTILIDAD: Esta prueba es una técnica que permite poner en evidencia a la enzima coagulasa,
se realiza a los cocos gram positivos catalasa positiva permitiendo distinguir a las cepas de
Staphylococcus aureus de otro tipo de estafilococos.
PROCEDIMIENTO:

COAGULASA UNIDA COAGULASA LIBRE

Hacer una suspensión de la colonia en una

gota de solución salina en un portaobjetos de
vidrio, luego se añade una gota de plasma
limpio, luego se añade una gota
de plasma

Observar si forma
aglutinación o no. limpio,
luego se añade una
gota de plasma
FUNDAMENTO: Tenemos que saber que el Staphylococcus aureus es un microorganismo que
produce dos tipos de coagulasa, libre y unida. La coagulasa libre es una enzima extracelular
producida cuando se cultiva el organismo en caldo. La coagulasa unida, conocida también
como factor de aglutinación, permanece fijada a la pared celular del organismo. La prueba
en tubo consiste en la adición de S. aureus de un cultivo en caldo realizado durante una noche
o de una placa de agar no inhibidora a un tubo de plasma de coagulasa rehidratado e
incubación a 37°C.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
COAGULASA LIBRE:
Cuando hay la formación
de coagulo se denomina
positivo.

POSITIVO NEGATIVO
COAGULASA UNIDA:
Formación de
aglutinación es positivo
POSITIVO NEGATIVO
TIPO DE MEDIO: Selectivo y Diferencial
UTILIDAD: Es un medio utilizado para el aislamiento y diferenciación de Estafilococos apartir
de diversas muestras.
COMPONENTES:
 Extracto de carne
 Peptona de carne
 Tripteina
 Manitol pH final= 7.1 +/- 0.2
 Cloruro de sodio
 Rojo fenol
 Agar
FUNDAMENTO: En este medio la función de la peptona, el extracto de carne y tripteina
aportan los nutrientes necesarios como carbono, nitrógeno y vitaminas para el desarrollo
bacteriano, El manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio es el agente
selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompañante y el agar será el agente solidificante.
Este medio contiene una alta concentración salina, debido a la capacidad de fermentación
de manitol por los organismos. Las bacterias que crecen en un medio con una alta
concentración de sal y fermentan el manitol, producen ACIDO con lo que se modifica el pH
del medio y el indicador de pH vira de color rosa al amarillo.

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Microorganismos fermentadores de
manitol: Son colonias de color amarillo
rodeadas o no de un halo amarill.

Microorganismos no fermentadores de
manitol: Son colonias del color del medio
de cultivo, rosas a veces incoloras

EJEMPLOS:
Staphylococcus aureus Colonias amarillas
Staphylococcus epidermidis Colonias incoloras o
amarillas
TIPO DE MEDIO: Diferencial
UTILIDAD: Es un medio utilizado para la detección de la enzima Desoxirribonucleasa,
también es útil para diferenciar especies de estafilococos, así también para diferenciar Serratia
de especies de Klebsiella.
COMPONENTES:
 Tripteina
 Acido desoxirribonucleico
 Cloruro de sodio
 Agar
FUNDAMENTO: En este medio la tripteina actúa como la fuente de nitrógeno y aminoácidos
que aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano. El ácido desoxirribonucleico
se encuentra en grado altamente polimerizada y es el sustrato de la enzima ACIDO
DESOXIRRIBONUCLEASA (DNasa) , la cual lo hidroliza. El cloruro de sodio mantiene el
balance osmótico el agar es el agente solidificante.
El ácido ribonucleico hidrolizado presenta transparencia, mientras que el acido
desoxirribonucleico polimerizado precipita y toma una opacidad en el medio de cultivo

REACTIVO REVELADOR: Ácido clorhídrico al 1N

INTERPRETACION DE RESULTADOS:

DNAsa POSITIVO DNasa NEGATIVO

Formación de halo
claro transparente El medio se observa
alrededor del opaco
crecimiento
bacteriano

EJEMPLOS:
DNAsa POSITIVO DNasa NEGATIVO
Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis
Serratia marcencens Klebsiella pneumoniae
TIPO DE MEDIO: Diferencial
UTILIDAD: Es una prueba para la diferenciación de Enterobacterias en base a la capacidad
de usar citrato como única fuente de carbono y energía.
COMPONENTES:
 Citrato de sodio
 Cloruro de sodio
 fosfato dipotásico
 Fosfato monoamónico
pH final= 6.9 +/- 0.2
 Sulfato de magnesio
 Azul de bromotimol
 Agar
FUNDAMENTO: En este medio el fosfato monoamónico es la fuente de nitrógeno y el citrato
de sodio es la única fuente de carbono, ambos componentes son necesarios para el desarrollo
bacteriano. Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio actúa como el cofactor
enzimático, el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, el azul de bromotimol es el
indicador de pH que vira al color azul en medio alcalino y el agar es el agente solidificante.
El metabolismo del citrato se realiza en aquellas bacterias que poseen el CITRATO PERMEASA
a través del ciclo del acido tricarboxilico, el desdoblamiento del citrato genera progresivamente
oxalacetato y piruvato. Entonces el, medio vira a una coloración azul y esto es indicativo de la
producción de citrato permeasa.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Citrato positivo: Crecimiento bacteriano
con intenso color azul en el pico de flauta.

Citrato negativo: Ausencia de crecimiento

y permanencia del color del medio de
cultivo verde

EJEMPLOS:
Citrato positivo Citrato negativo
Salmonella typhimurium Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae Shigella flexneri
Citrobacter
Pseudomona aeruginosa
TIPO DE MEDIO: Diferencial
UTILIDAD: Es una prueba para la diferenciación de Enterobacterias en base a la fermentación
de hidratos de carbono y a la producción de acido sulfhídrico.
COMPONENTES:
 Peptona de carne
 Cloruro de sodio
 Lactosa
 Tripteina
 Glucosa pH final= 7.3 +/- 0.2
 Citrato de hierro y amonio
 Tiosulfato de sodio
 Rojo de fenol
 Agar
FUNDAMENTO: En el medio de cultivo la peptona de carne y la tripteina, aportan los
nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son los hidratos de
carbono fermentables, el tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de acido
sulfhídrico, el citrato de hierro y amonio es la fuente de iones de Fe+3, los cuales se combinan
con el acido sulfhídrico y producen el sulfuro de hierro de color negro. El rojo de fenol es el
indicador de pH y el cloruro de sodio mantienen el balance osmótico y por último el agar es el
agente solidificante.
Por fermentación de azucares se producen ácidos que se detectan por medio del indicador rojo
de fenol, el cual vira al color amarillo en medio acido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro
de hidrogeno el que reacciona luego con una sal de hierro de color negro.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
MICROORGANISMO MICROORGANISMO MICROORGANISMOS PRESENCIA DE MEL ENEGRECIMIENTO
FERMENTADOR DE FERMENTADOR DE NO BURBUJAS INDICAN INDICAN PRODUCCION
GLUCOSA GLUCOSA Y FERMENTADORES PRODUCCION DE DE ACIDO
LACTOSA DE AZUCARES GAS SULFHIDRICO

K/A A/A K/K

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS Superficie/Profundidad Producción de gas Producción de SH2
E. coli A/A + -
K. pneumoniae A/A + -
P. aeruginosa K/K - -
S. typhii K/A - +
TIPO DE MEDIO: Diferencial
UTILIDAD: Para la diferenciación de microorganismos especialmente Salmonella spp. Basado
en la descarboxilación y desaminación de la Lisina y en la producción de ácido sulfhídrico.
COMPONENTES:
 Peptona de gelatina
 Extracto de levadura
 Glucosa
 Lisina pH final= 6.7 +/- 0.2
 Citrato de hierro y amonio
 Tiosulfato de sodio
 Purpura de bromocresol
 Agar
FUNDAMENTO: En el medio de cultivo la peptona y el extracto de levadura aportan
nutrientes para el desarrollo bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable y la
LISINA es el sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas DESCARBOXILASAS y
DESAMINASAS. El citrato de hierro y amonio y el tiosulfato de sodio son los indicadores de
producción de SH2, el purpura de bromocresol es el indicador de pH, el agar es el agente
solidificante.
Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican el medio y provocan el viraje de color
purpura a amarillo, este ambiente acido favorece la actividad enzimática descarboxilasa y se
metaboliza la lisina a CADAVERINA elevando el pH del medio de cultivo y tornándolo a color
purpura o violeta.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
DESCARBOXILACION DE LISINA DESAMINACION DE LISINA PRODUCCION DE SH2

(+) (-) (+)

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS Descarboxilación de Desaminación de Producción de
Lisina (FONDO) Lisina (SUPERFICIE) SH2
E. coli + - -
K. pneumoniae + - -
P. mirabilis - + -
S. typhii + - +
UTILIDAD: Destinado a verificar la motilidad, producción de indol y sulfuro de hidrogeno de
los microorganismos.
COMPONENTES:
 Peptona
 Tripteina
 Sulfato de hierro y amonio pH final= 7.3 +/- 0.2
 Tiosulfato de sodio
 Agar
FUNDAMENTO: la tripteina y la peptona aportan nutrientes para el desarrollo bacteriano,
el TRIPTOFANO es un aminoácido constituyente de muchas peptonas y en particular de la
TRIPTEINA y puede ser metabolizado por algunas bacterias para formar indol.
En el proceso intervienen un conjunto de enzimas llamadas TRIPTOFANASAS. el indol
producido se combina con el aldehído del reactivo de Ehrlich o de Kovacs para originar el
compuesto de color rojo. A partir del tiosulfato de sodio los microorganismos pueden generar
SH2 que reacciona con el hierro presente formando un compuesto de color negro, el agar es el
agente solidificante y a esta concentración le otorga al medio la propiedad de ser semisólida,
la cual es una condición necesaria para determinar la movilidad que se evidencia por la
turbidez del medio o por el crecimiento que se difunde mas allá de la línea de siembra del
microorganismo en estudio.
REACTIVOS REVELADORES: Para indol se utiliza el REACTIVO DE EHRLICH O REACTIVO
DE KOVACS.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:

MOVILIDAD PRUEBA DE INDOL PRODUCCION DE SH2

(+) (-) (+) (-) (+) (-)

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS Movilidad INDOL Producción de SH2
E. coli + + -
K. pneumoniae - - -
P. mirabilis + - +
S. typhii + - +
TIPO DE MEDIO: Diferencial

UTILIDAD: Para la diferenciación de bacilos gram negativos entéricos, sobre la base de

producción de indol, la actividad enzimática de ornitina descarboxilasa y la capacidad de
motilidad.
COMPONENTES:
 Extracto de levadura
 Peptona de caseína
 Tripteina
 Dextrosa
 L – ornitina
 Purpura de bromocresol
 Agar
FUNDAMENTO: las peptonas y el extracto de levadura aportan aminoácidos nutrientes
esenciales, la dextrosa constituye una fuente de energía es el hidrato de carbono fermentable.
La tripteina aporta gran cantidad de TRIPTOFANO, sustrato de la enzima TRITOFANASA a
partir del cual se forma indol. La ORNITINA es el sustrato para la detección de la enzima
ORNITINA DESCARBOXILASA, el purpura de bromocresol es el indicador de pH que en medio
alcalino es de color purpura y en medio acido de color amarillo, el agar es el agente solidificante
y a esta concentración le otorga al medio la propiedad semisólida la cual es la condición
necesaria para detectar la movilidad.
Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican el medio de cultivo y producen viraje
de color purpura al amarillo, las condiciones de acidez son favorables para la actividad
enzimática ORNITINA DESCARBOXILASA, que actúa sobre la ornitina generando PUTRECINA
con la consecuente alcalinidad del medio de cultivo y viraje al color purpura.
REACTIVOS REVELADORES: Para indol se utiliza el REACTIVO DE KOVACS.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
MOVILIDAD PRODUCCION DE INDOL PRODUCCION DE ORNITINA
DESCARBOXILASA

(+) (-) (+) (-) (+) (-)

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS Movilidad INDOL Ornitina
E. coli + + +
K. pneumoniae - - -
P. mirabilis + - +
S. typhii + - -
TIPO DE MEDIO: Diferencial
UTILIDAD: Para diferenciar Morganella, Proteus spp. Y Providencia de la materia de otros
miembros de la familia Enterobacteriácea, en base a la presencia de la enzima fenilalanina
deaminas.
COMPONENTES:
 Extracto de levadura
 D - fenilalanina
 fosfato sódico
 Cloruro de sodio
 Agar
FUNDAMENTO: Los nutrientes para el desarrollo bacteriano los aportan el extracto de
levadura. La FENILALANINA es desaminada por la enzima FENILALANINA DEAMINASA
para producir FENILPIRUVICO y AMONIACO. La presencia del acido fenilpiruvico se lo
demuestra con el agregado de CLORURO FERRICO en medio acido con el cual se forma un
quelato de color verdoso entre el ácido fenilpiruvico y los iones Fe+3, el agar es el agente
solidificante, en este medio se suele poner a evidencia la producción de pigmentos metálicos
como ser el caso de Pseudomona aeruginosa.
REACTIVOS REVELADORES: Se utiliza el REACTIVO DE FENILALANINA O CLORURO
FERRICO

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
POSITIVO: Desarrollo de color verde pálido a intenso en el NEGATIVO: sin ningún cambio de color en el medio
pico de flauta y el líquido de condensación

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS Fenilalanina deaminasa
E. coli -
K. pneumoniae -
P. mirabilis +
Morganella morganii +
TIPO DE MEDIO: Diferencial
UTILIDAD: Para diferenciar microorganismos en base a la actividad ureasa. Se utiliza para
identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteus spp. Y otras enterobacterias y
también algunos estafilococos.
COMPONENTES:
 Tripteina
 Glucosa
 Fosfato mono potásico pH final= 6.8 +/- 0.2
 Rojo de fenol
 Cloruro de sodio
 Agar
FUNDAMENTO: En el medio de cultivo la tripteina y la glucosa aportan nutrientes para el
desarrollo de microorganismo. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el rojo de
fenol es el indicador de pH el agar es el agente solidificante.

Las bacterias hidrolizan la UREA por medio de la enzima UREASA liberando AMONIACO Y
DIOXIDO DE CARBONO. Estos productos alcalinizan el medio del cultivo haciendo virar el
indicador rojo de fenol de color amarillo al rojo o rosa.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
POSITIVO: MICROORGANISMOS QUE HIDROLIZAN LA NEGATIVO: EL MEDIO PERMANECE DE COLOR
UREA AMARILLO

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS UREA
E. coli -
K. pneumoniae +
P. mirabilis +
Salmonella typhimurium -
UTILIDAD: Para determinar la capacidad de un microorganismo de fermentar la glucosa con
producción de acido por la vía acida mixta o con producción final neutra por la vía
butanodiolica útil para la clasificación de Enterobacterias.
COMPONENTES:
 Pluripeptona
 Glucosa pH final= 6.9 +/- 0.2
 Fosfato dipotásico
 Rojo de metilo
FUNDAMENTO: En el medio de cultivo la pluripeptona aportan los nutrientes necesarios para
el desarrollo bacteriano y la glucosa es el hidrato de carbono fermentable. La glucosa puede
ser metabolizada por los microorganismos atreves de distintas vías metabólicas. Según la vía
metabólica se originan productos finales ácidos (acido láctico, acido acético, acido fórmico) o
productos finales neutros (acetil, metil, carbinol).
Esta diferencia en el metabolismo bacteriano podría ser reconocido por la adición de un
indicador como rojo de metilo para revelar la presencia de productos ácidos.
REACTIVOS REVELADORES: Se utiliza el REACTIVO ROJO DE METILO

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
POSITIVO: MICROORGANISMOS QUE HIDROLIZAN LA NEGATIVO: EL MEDIO PERMANECE DE COLOR
UREA AMARILLO

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS PRUEBA ROJO DE METILO
E. coli +
K. pneumoniae -
P. mirabilis +
Salmonella typhimurium +
Enterobacter cloacae -
UTILIDAD: Es utilizado para determinar la capacidad de un microorganismo de fermentar la
glucosa con producción de ácido por la vía acida mixta o con producción final neutra por la
vía butanodiolica útil para la clasificación de Enterobacterias.
COMPONENTES:
 Pluripeptona
 Glucosa pH final= 6.9 +/- 0.2
 Fosfato dipotásico
FUNDAMENTO: En el medio de cultivo la pluripeptona aportan los nutrientes necesarios para
el desarrollo bacteriano y la glucosa es el hidrato de carbono fermentable. La glucosa puede
ser metabolizada por los microorganismos atreves de distintas vías metabólicas. Según la vía
metabólica se originan productos finales ácidos (ácido láctico, ácido acético, acido fórmico) o
productos finales neutros (acetil-metil-carbinol).
Esta diferencia en el metabolismo bacteriano podría ser reconocido por la adición de un
indicador como rojo de metilo para revelar la presencia de productos ácidos.
Voges y Proskauer describieron una coloración rojiza que aparecería después de colocar
hidróxido de potasio en el medio, esta coloración se debe a la oxidación del acetil-metil-
carbinol a Diacetilo el cual reacciona con la peptona del medio para dar un color rojo.
REACTIVOS REVELADORES: Se añade 0,6 ml de ALFA NAFTOL al 5% en alcohol etilico
absoluto y 0.2ml de KOH al 40%.

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
POSITIVO: Desarrollo de un color rojo después de añadir NEGATIVO: ausencia de color rojo
el revelador

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS PRUEBA VOGES
PROSKAUER
E. coli -
K. pneumoniae +
P. mirabilis -
Salmonella typhimurium -
Enterobacter cloacae +
TIPO DE MEDIO: Selectivo y Diferencial
UTILIDAD: Para el aislamiento e identificación de Estreptococos del grupo D, mediante la
tolerancia a la bilis y la degradación de la esculina.
COMPONENTES:
 Extracto de carne
 Peptona de carne
 Bilis de buey
 Esculina
 Citrato férrico
 Agar
FUNDAMENTO: El extracto de carne y la peptona aportan nutrientes para el desarrollo
bacteriano. Los Estreptococos del grupo D crecen rápidamente en agar bilis esculina e
hidrolizan la ESCULINA, que en presencia de iones Fe3+ forman un compuesto de color verde
oliva hasta negro.
La bilis de buey inhibe el desarrollo de la flora acompañante y el agar es el agente solidificante
para el medio de cultivo.

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
POSITIVO: Ennegrecimiento del medio NEGATIVO: ausencia de oscurecimiento del medio

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS PRUEBA BILIS ESCULINA
E. coli --
P. mirabilis -
Streptococcus pyogenes -
Enterococcus faecalis +
UTILIDAD: Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción
de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromo oxidasa. La prueba de la oxidasa
se usa sobre todo para identificar todas las especies de Neisseria (+), y diferenciar Pseudomonas
de los miembros oxidasa negativos de las enterobacterias.
PROCEDIMIENTO:
Puede realizarse cualquiera de estas 2 metodologías:
• Prueba en tubo

a partir de un cultivo puro del microorganismo

en estudio, hacer una suspensión densa en 0.2
ml de agua destilada estéril y agregar un disco
de Oxidasa.

Observar la coloración

• Prueba en placa directa: Agregar directamente 2-3 gotas de reactivo a algunas colonias.
No inundar toda la placa y no invertirla. Observar los cambios de color. Con el reactivo de
Kovacs la reacción se produce en unos 10-15 segundos
FUNDAMENTO: Los microorganismos que contienen la enzima citocromo-c-oxidasa en su
cadena respiratoria se evidencian porque, en presencia de oxígeno atmosférico y citocromo c,
se oxida el sustrato presente en los discos o tira reactiva a un compuesto de color rosado a
fucsia.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
OXIDASA POSITIVA:
Observación de color
rosado a Purpura en el
disco y/o solución.

OXIDASA NEGATIVA:
Ausencia de color
UTILIDAD: Esta prueba sirve para determinar la presencia de Streptococcus pneumoniae de
otras especies de estreptococos alfa hemolíticos por ejemplo Streptococcus grupo viridans.
PROCEDIMIENTO:

A partir de un cultivo puro del microorganismo en

estudio, utilizando un hisopo o un asa estéril, inocular a Luego colocar un disco de
una placa de Agar Sangre en las cuatro direcciones Optoquina sobre la superficie del
para cubrir toda la superficie del medio de cultivo agar, incubar por 24hr a 37ªC

FUNDAMENTO: El Streptococcus pneumoniae y Streptococcus grupo viridans son cocos Gram

positivos que presentan colonias alfa hemolíticas cuando crecen en medios sólidos
suplementados con 5-10 % de sangre de carnero. Se pueden diferenciar mediante la realización
de pruebas bioquímicas como ser la prueba de sensibilidad a la optoquina y la prueba de
solubilidad en bilis. La optoquina inhibe el desarrollo de Streptococcus pneumoniae mientras
que otros estreptococos no son inhibidos o presentan una zona pequeña de inhibición alrededor
del disco. La correlación entre la sensibilidad a la optoquina y la prueba de solubilidad en bilis
ha sido demostrada por varios autores.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
OPTOQUINA SENSIBLE.

OPTOQUINA RESISTENTE

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS SENSIBILIDAD A LA OPTOQUINA
Streptococcus pyogenes ˂ a 14 mm
ATCC 10389
Streptococcus pyogenes ˂ a 14 mm
ATCC 27762
UTILIDAD: La prueba de la sensibilidad a la polimixina B y Novobiocina son utilizadas para
la identificación del Genero de estafilococos, permitiendo diferenciar al Staphylococcus aureus
de los Estafilococos coagulasa negativa.
PROCEDIMIENTO:

Medir el diámetro
del halo

Usando colonias puras recién aisladas, inocule medio de Luego colocar un disco de
agar de Mueller-Hinton usando el mismo Novobiocina y Polimixina B sobre la
procedimiento que se usó para las pruebas de superficie del agar, incubar de 18-
sensibilidad a los antibióticos 24hr a 37ªC

FUNDAMENTO: La novobiocina permite diferenciar Staphylococcus saprophiticus que es

resistente, de Staphylococcus epidermidis que es sensible, específicamente son discos de
identificación , ya que la sensibilidad a novobiocina facilita la identificación de los estafilococos
patógenos, del mismo modo los discos de polimixina b permiten diferenciar a la especie de
Estafilococos

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
POLIMIXINA B RESISTENTE.
NOVOBIOCINA SENSIBLE

POLIMIXINA B RESISTENTE.
NOVOBIOCINA RESISTENTE

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA
Diámetro de la inhibición (mm)
Staphylococcus saprophyticus < 14 mm
Staphylococcus aureus ≥ 14 mm
Staphylococcus epidermidis ≥ 14 mm
UTILIDAD: Esta prueba se utiliza para la identificación presuntiva de estreptococos del grupo
B (Streptococcus agalactiae), que se basa en la formación de una sustancia que amplía el área
de hemolisis con la ayuda de Staphylococcus aureus
PROCEDIMIENTO:

1. Una cepa hemolítica de S. aureus se raya en el centro de la placa

de agar sangre de carnero.
2. El inóculo de prueba (estreptococo beta hemolítico) se raya en
línea perpendicular a S. aureus con una longitud de 3cm.
3. La placa se incuba a 37°C por 18 a 24 horas.

FUNDAMENTO: Los estreptococos del grupo B (S. agalactiae) producen una proteína
difusible y termoestable (factor CAMP) que aumenta la beta-hemólisis de Staphylococcus
aureus.
S. aureus (sembrado desde la parte superior hasta la parte inferior de la placa) produce
esfingomielinasa C que se puede unir a las membranas de los eritrocitos. Cuando son expuestas
al factor CAMP del grupo B, las células sufren hemólisis

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Test de CAMP (+): Una prueba
positiva para el factor CAMP
aparece como "hemólisis punta de
flecha" entre la unión de crecimiento
de S. aureus y Streptococcus del
grupo B. No habrá "hemólisis punta
de flecha” si la prueba no es
realizada por un estreptococo del
grupo B.

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS TEST DE CAMP
Streptococcus agalactiae +
Streptococcus pyogenes -
UTILIDAD: Esta prueba de los Discos diferenciales ONPG se utilizan para determinar, en
forma cualitativa, la presencia o ausencia de la enzima beta galactosidasa, utilizando el
reactivo o-nitrofenil-D-galactopiranósido (ONPG); para poder diferenciar, de esta manera,
entre los microorganismos con reacción retardada a la lactosa de los lactosa negativos.
PROCEDIMIENTO:
1. Dejar que los discos tomen temperatura ambiente.
2. Tomar un tubo de hemólisis estéril, agregar 0,2 ml de agua destilada estéril y realizar
una suspensión bien densa, tomando 3 ó más colonias provenientes de cultivo puro.
3. Colocar en baño María a 37ºC y agregar 1 disco de ONPG.
4. Agitar el tubo teniendo la precaución de que el disco quede sumergido en la
suspensión.
5. Observar el cambio de color de la suspensión al cabo de 4 horas.
FUNDAMENTO: Esta prueba demuestra la presencia de la enzima βgalactosidasa. Hay
bacterias que a pesar de poseer enzimas que hidrolizan la lactosa (β galactosidasas), no pueden
actuar sobre ella porque les faltan las enzimas extracelulares apropiadas (permeasas). Para
conocer si un microorganismo es productor de β-galactosidasa, basta añadir el compuesto
orgánico O-nitrofenil- β-D-galactopiranósido (ONPG) que es incoloro. Si la bacteria posee las
enzimas hidrolizantes (β -galactosidasa), el compuesto se transforma en ortonitrofenol, un
derivado cromogénico de color amarillo. Todas las bacterias fermentadoras lentas de la lactosa
son β -galactosidasa positivas

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
ONPG POSITIVO ONPG NEGATIVO

EJEMPLOS:
MICROORGANISMOS ONPG
Escherichia coli +
Pseudomona aeruginosa -
TIPO DE MEDIO: Selectivo y Diferencial
UTILIDAD: Es un medio de diferenciación selectivo para el aislamiento y diferenciación de
enterobacterias y también de otros bacilos gram negativos a partir de muestras clínicas.
Diferencia mas que todo a bacilos gram negativos fermentadores y no fermentadores de
lactosa.
COMPONENTES:
 Digerido pancreatico de gelatina
 Digerido pancreatico de Caseina
 Digerido péptico de tejido animal
 Lactosa
 Sales biliares pH final= 7.1 +/- 0.2
 Cloruro de sodio
 Rojo neutro
 Cristal violeta
 Agar
FUNDAMENTO: En este medio la función de la peptona es aportar los nutrientes necesarios
para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el carbohidrato que va a ser fermentado, las mezclas
de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de la flora
de los gram positivos, el agar será el agente solidificante.
Por fermentación de la lactosa va disminuir el pH alrededor de la colonia, esto es lo que
produce un viraje de color del indicador de pH que es el rojo neutro, la absorción de las colonias
y la precipitación de sales biliares.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Microorganismos fermentadores de
lactosa: Son colonias rosadas o rojizas,
también pueden observarse halos de
precipitación biliar.
Microorganismos no fermentadores de
lactosa: Son colonias del color del medio
de cultivo a veces incoloras

EJEMPLOS:
Escherichia coli Colonias rosado-rojizo
Klebsiella pneumoniae Colonias rosado-rojizo
Salmonella typhimurium Colonias incoloras
Shigella flexneri Colonias incoloras
Proteus mirabilis Colonias incoloras
TIPO DE MEDIO: Enriquecido y Diferencial
UTILIDAD: Es un medio preparado para la recuperación y el aislamiento de toda clase de
microorganismos, ya sea gram positivos o gram negativos, así también para hongos. El medio
es adicionado con sangre de cordero con el fin de establecer en los microorganismos
características de hemolisis como ser alfa, beta, gamma, esto es lo que ayuda a su identificación.
COMPONENTES:
 Hidrolizado pancreático de caseína
 Hidrolizado péptido de tejido animal
 Cloruro de sodio pH final= 7.3 +/- 0.2
 Levadura
 Agar
 Sangre de cordero desfibrinado al 5%
FUNDAMENTO: En este medio la función de la peptona de caseina y el extracto de levadura
son los que proveen nitrógeno, carbono, aminoácidos y vitaminas. El cloruro de sodio
proporciona un equilibrio osmótico que mantiene la concentración del medio y el agar es
utilizado como el agente solidificante.
También esta complementado con sangre ovina desfibrinada al 5% lo que promueve el
desarrollo de bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación
de las reacciones de hemolisis
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Hemolisis alfa: Se observa un halo color
verdoso, lo que indica una lisis parcial de los
eritrocitos.
Hemolisis beta: Se observa un halo claro
brillante alrededor de las colonias, lo que
indica una lisis total de los eritrocitos.

Hemolisis gamma: Se observa la ausencia

de los eritrocitos, no presenta modificación
de color.

EJEMPLOS:
Streptococcus pyogenes Beta hemolisis
Streptococcus pneumoniae Alfa hemolisis
Staphylococcus aureus Beta hemolisis
Streptococcus viridans Alfa hemolisis
TIPO DE MEDIO: Diferencial, cromógeno
UTILIDAD: Es un medio indicado principalmente para el procesamiento de urocultivos y es
utilizado para el aislamiento, recuento e identificación presuntiva de microrganismos, el
recuento se lo hace en UFC/ml presentes en una muestra de orina. También permite diferenciar
microrganismos lactosa positivos y lactosa negativos. Este medio como es deficiente de
electrolitos ayuda a la inhibición del fenómeno de swarming producido por diferentes tipos de
Proteus.
COMPONENTES:
 Digerido pancreatico de gelatina
 Digerido pancreatico de Caseina
 Extracto de carne bovina
 Lactosa pH final= 7.3 +/- 0.2
 L-Cistina
 Azul de bromotimol
 Agar
FUNDAMENTO: En este medio la gelatina, peptona de caseina y el extracto de carne aportan
los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de
carbono que va ser fermentado, la L-cistina es el agente reductor, el azul de bromotimol actúa
como el indicador de pH para diferenciar a los microorganismos fermentadores de lactosa y los
no fermentadores. Los que fermentan lactosa reducen el pH y modifican el color del medio
pasando este de verde a amarillo, la cistina permite el crecimiento de colonias enanas
coliformes. Se reduce la fuente de electrolitos con el objetivo de minimizar la proliferación de
las especies de Proteus.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Microorganismos fermentadores de
lactosa: Son colonias amarillas.

Microorganismos no fermentadores de
lactosa: Son colonias del color del medio
de cultivo a veces azuladas.

EJEMPLOS:
Escherichia coli Colonias amarillas, opacas con un centro
ligeramente mas oscuro
Klebsiella pneumoniae Colonias amarillas muy mucoides
Proteus mirabilis Colonias azules, translucidas generalmente mas
pequeñas
TIPO DE MEDIO: Selectivo y Diferencial
UTILIDAD: Es utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. Y de algunas especies de
Shigella spp a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche la presencia
de estos microrganismos.
COMPONENTES:
 Pluripeptona
 Extracto de carne
 Lactosa
 Mezcla de sales biliares
 Citrato de sodio pH final= 7.0 +/- 0.2
 Tiosulfato de sodio
 Citrato ferrico
 Verde brillante
 Rojo neutro
 Agar
FUNDAMENTO: En este medio la función de la peptona es aportar los nutrientes necesarios
para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el carbohidrato que va a ser fermentado, las mezclas
de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de la flora
de los gram positivos, el agar será el agente solidificante.
Por fermentación de la lactosa va disminuir el pH alrededor de la colonia, esto es lo que
produce un viraje de color del indicador de pH que es el rojo neutro, la absorción de las colonias
y la precipitación de sales biliares.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Microorganismos fermentadores de
lactosa: Son colonias rosadas o rojizas.

Microorganismos no fermentadores de
lactosa: Son colonias del color del medio
de cultivo a veces incoloras

Microorganismos productores de SH2:

Son colonias con centros negros

EJEMPLOS:
Escherichia coli Colonias rosado-rojizo
Salmonella typhimurium Colonias incoloras, transparentes con centro negro
Shigella flexneri Colonias incoloras
Proteus mirabilis Colonias incoloras con centros blancos
TIPO DE MEDIO: Enriquecido y Selectivo
UTILIDAD: Este medio es útil para poder aislar principalmente a Neiseria gonorrhoeae y
Neiseria meningitidis de muestras clínicas.
COMPONENTES:
 Mezcla de peptona
 Cloruro de sodio
 Almidón de maíz
 VCNT
 Poli enriquecimiento pH final= 7.2 +/- 0.2
 Fosfato di potásico
 Fosfato mono potásico
 Hemoglobina
 Agar
 Isovitalex
FUNDAMENTO: La base GC contiene nutrientes nitrogenados en forma de caseína y peptonas
de carne, el tampón fosfato será para mantener el pH, el almidón de maíz va a neutralizar los
ácidos grasos tóxicos que pueden estar presente en el agar, la hemoglobina favorece el
crecimiento de este tipo de microorganismos del género Neisserieae y más específicamente la
especie gonorrhoeae. Como es selectivo entonces, es suplementado con VCNT, donde la
vancomicina inhibe a las bacterias gram positivas, la colistina inhibe a las gram negativas, la
nistatina es adicionada para inhibir las levaduras y por ultimo el trimetropim inhibe a la especie
de Proteus que tiende a invadir toda la superficie de la placa y no permiten la detección de
Neisseria
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Neisseria gonorrhoeae: Son colonias
pequeñas de color grisáceo o blanquecinas,
mucoides y con bordes lisos.
Neisseria meningitidis: Son colonias
medianas a grandes, grises y bordes lisos

*INFORMACION COMPLEMENTARIA PARA LA IDENTIFICACION DE LA ESPECIE

Neisseria
Se debe realizar un extendido del cultivo obtenido teñidas con tinción Gram, donde se
debe observar diplococos gram negativos. También en la prueba de la oxidasa tiene
que ser positiva.
TIPO DE MEDIO: Selectivo
UTILIDAD: Es utilizado para el cultivo de hongos y levaduras patógenas y no patógenas
COMPONENTES:
 Dextrosa
 Peptona de caseína pH final= 5.6 +/- 0.2
 Digerido péptico de tejido animal
 Cloranfenicol
 Agar

FUNDAMENTO: La peptona, el digerido pépticos son los nutrientes para el desarrollo de

microorganismos, la glucosa(dextrosa) proporcionan una fuente de carbono y energía para
que el microorganismo crezca, la gran concentración de glucosa y el pH acido van a favorecer
el crecimiento de los hongos, mientras que muchas otras bacterias no toleran estas condiciones.
También se puede adicionar lo que es el cloranfenicol o la gentamicina para una mayor
selectividad e inhibición de microrganismos Gram negativos y por último el agar es un agente
solidificante.
.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Las colonias por lo general son
blanquecinas, grandes. Se aconseja
subcultivar en otros medios como el Chrom
agar Cándida

EJEMPLOS:
Candida albicans Colonias blancas a crema
Saccharomyces cerevisiae Colonias blancas a crema
Aspergillus brasilensis Colonias blancas a negras, reverso amarillo
TIPO DE MEDIO: Enriquecido
UTILIDAD: Es utilizado para el desarrollo de microorganismos aerobios y anaerobios, donde
también se incluyen los nutricionalmente exigentes.
COMPONENTES:
 Caseína digerida por enzimas pancreáticas
 L-Cistina
 Extracto de levadura pH final= 7.1 +/- 0.2
 Cloruro de sodio
 Resazurina
 Agar
FUNDAMENTO: La base de este medio esta constituido por caseína, extracto de levadura la
cual le permiten el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, la presencia de
los grupos -SH- aportados por la cistina y el tioglicolato de sodio son los que disminuyen el
potencial de oxido reducción , facilitando así el desarrollo de diversas bacterias anaerobias y
además se neutralizan los efectos bacteriostáticos de los derivados mercuriales y de otros
metales pesados que pudieran estar presentes en las muestras en estudio. El bajo contenido de
agar que contiene, permite una mejor visualización del desarrollo microbiano ya que se
observa como turbio, a la vez retarda la difusión del oxigeno y la dispersión del CO2,
favoreciendo el estado de reducción de sus componentes y del ambiente anaerobio, y el cloruro
de socio mantiene el equilibrio osmótico.
Por ultimo como indicador esta la resazurina que es un indicador oxido reducción, está en
presencia de oxigeno es de color rosado a fucsia y será incolora en ausencia de oxigeno
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Microorganismos aerobios estrictos:
Crecen en la parte superior del caldo los
microorganismos.

Microorganismos anaerobios
facultativos: Crecen en todo el caldo los
microorganismos.

Microorganismos anaerobios estrictos:

Crecen en la profundidad del caldo los
microorganismos.

EJEMPLOS:
Bacillus subtilis Crecimiento satisfactorio
Staphylococcus aureus Crecimiento satisfactorio
Pseudomonas aeruginosa Crecimiento satisfactorio
Streptococcus pyogenes Crecimiento satisfactorio
TIPO DE MEDIO: Enriquecido, selectivo

UTILIDAD: Es un medio utilizado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella spp. A partir

de heces, alimentos y otros materiales de importancia sanitaria

COMPONENTES:
 Peptona pH final= 8.4 +/- 0.2
 Sales biliares
 Carbonato de calcio tiosulfato de sodio

FUNDAMENTO: Este medio contiene peptona que le proporciona los nutrientes necesarios
para el desarrollo bacteriano, el carbonato de calcio neutraliza y absorbe los metabolitos
tóxicos, la selectividad de este caldo lo da la presencia de las sales biliares junto con el
tetrationato , este ultimo compuesto es generado en el medio de cultivo al reaccionar el
tiosulfato de sodio con la solución de Iodo-Iodurada que inhibirá el desarrollo de
microorganismos Gram positivos y algunas enterobacterias. En el caso de la Salmonella spp.
Contiene la enzima tetrationato reductasa y puede crecer satisfactoriamente en este medio
de cultivo debido a que no le afecta la toxicidad del tetrationato.

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Salmonella typhimurium: buen
crecimiento.
Escherichia coli: El crecimiento es inhibido.
Salmonella typhii: buen crecimiento.

*Para confirmación se debe subcultivar en medios selectivos para el crecimiento de

Salmonella, utilizar agar SS, Agar Mac Conkey, Agar entérico, etc.
TIPO DE MEDIO: Selectivo

UTILIDAD: Es un medio utilizado para el aislamiento y cultivo de microorganismos del género

Mycobacterium.

COMPONENTES:
 Solución de sales
 Homogenizado de huevo
 Verde de malaquita pH final= 6.4 +/- 0.2
 Citrato de magnesio
 Glutamato de sodio
 Glicerol

FUNDAMENTO: Este medio es preparado principalmente en un buffer de fosfatos , las

cuales le brinda una fuente de carbono a estos microorganismos, el glutamato de sodio le
proporciona una fuente de nitrógeno y la fuente de energía esta en el glicerol, además el
medio posee albumina que es un componente esencial para el crecimiento de las
Micobacterias, el homogenizado de huevo le da esa consistencia medio semisólida y el pico de
flauta.

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
El desarrollo del género de Mycobacterium
tuberculosis aparece entre dos a tres
semanas, donde se observan colonias de
color crema, rugosas con aspecto de coliflor
y de bordes irregulares
TIPO DE MEDIO: Cromógeno, selectivo y Diferencial
UTILIDAD: Es utilizado para el aislamiento de levaduras patógenas oportunistas del genero
Candida en muestras clínicas
COMPONENTES:
 Peptona
 Glucosa pH final= 7.2 +/- 0.2
 Cloranfenicol
 Sustrato cromogenico
 Agar

FUNDAMENTO: En este medio la función de la peptona es aportar los nutrientes en el medio,

la mezcla cromogenica consiste en sustratos artificiales (cromógenos) , las cuales colorean los
diferentes compuestos producidos por la degradación con las diferentes enzimas especificas ,
como ser las enzimas hexosaminidasa y la fosfatasa alcalina, Estas reacciones enzimáticas
provocan la generación de pigmentos coloreados que permiten la identificación presuntiva de
estas levaduras, mientras que el cloranfenicol inhiben el crecimiento de las bacterias gram
negativas.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Candida albicans: Son colonias verde
calipso o verde claro

Candida tropicalis: Son colonias azul

verdoso o azul metálico

Candida krusei: Son colonia rosa purpura

con bordes blanduzcos

Candida glabrata: Son colonias lila claro

TIPO DE MEDIO: Enriquecido y Diferencial
UTILIDAD: Es un medio preparado para la recuperación y el aislamiento de toda clase de
microorganismos, ya sea gram positivos o gram negativos, así también para hongos. El medio
es adicionado con sangre de cordero con el fin de establecer en los microorganismos
características de hemolisis como ser alfa, beta, gamma, esto es lo que ayuda a su identificación.
COMPONENTES:
 Hidrolizado pancreático de caseína
 Hidrolizado péptido de tejido animal
 Cloruro de sodio pH final= 7.3 +/- 0.2
 Levadura
 Agar
 Sangre de cordero desfibrinado al 5%
FUNDAMENTO: En este medio la función de la peptona de caseina y el extracto de levadura
son los que proveen nitrógeno, carbono, aminoácidos y vitaminas. El cloruro de sodio
proporciona un equilibrio osmótico que mantiene la concentración del medio y el agar es
utilizado como el agente solidificante.
También esta complementado con sangre ovina desfibrinada al 5% lo que promueve el
desarrollo de bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación
de las reacciones de hemolisis
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Hemolisis alfa: Se observa un halo color
verdoso, lo que indica una lisis parcial de los
eritrocitos.
Hemolisis beta: Se observa un halo claro
brillante alrededor de las colonias, lo que
indica una lisis total de los eritrocitos.

Hemolisis gamma: Se observa la ausencia

de los eritrocitos, no presenta modificación
de color.

EJEMPLOS:
Streptococcus pyogenes Beta hemolisis
Streptococcus pneumoniae Alfa hemolisis
Staphylococcus aureus Beta hemolisis
Streptococcus viridans Alfa hemolisis
TIPO DE MEDIO: Enriquecido
UTILIDAD: Es un medio preparado para para el aislamiento de microorganismos poco
exigentes. Se lo recomienda mas que todo para aquellos gérmenes que no son demasiado
exigentes en elementos nutritivos. La incorporación a este medio de un 5% de sangre, lo hace
apto para muchas bacterias patógenas.
COMPONENTES:
 Cloruro de sodio
 Pluripeptona
 Agar pH final= 7.3 +/- 0.2
 Sangre de cordero desfibrinado al 5%
FUNDAMENTO: En este medio la función de la peptona de caseina y el extracto de levadura
son los que proveen nitrógeno, carbono, aminoácidos y vitaminas. El cloruro de sodio
proporciona un equilibrio osmótico que mantiene la concentración del medio y el agar es
utilizado como el agente solidificante.
También esta complementado con sangre ovina desfibrinada al 5% lo que promueve el
desarrollo de bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación
de las reacciones de hemolisis
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Hemolisis alfa: Se observa un halo color
verdoso, lo que indica una lisis parcial de los
eritrocitos.
Hemolisis beta: Se observa un halo claro
brillante alrededor de las colonias, lo que
indica una lisis total de los eritrocitos.

Hemolisis gamma: Se observa la ausencia

de los eritrocitos, no presenta modificación
de color.

EJEMPLOS:
Streptococcus pyogenes Beta hemolisis
Streptococcus pneumoniae Alfa hemolisis
Staphylococcus aureus Beta hemolisis
Streptococcus viridans Alfa hemolisis
TIPO DE MEDIO: Nutritivo no Enriquecido
UTILIDAD: Es un medio de cultivo recomendado universalmente para la realización de la
prueba de sensibilidad a los antimicrobianos

COMPONENTES:
 Peptona acida de caseína pH final= 7.3 +/- 0.1
 Almidón
 Agar
 Agua purificada

FUNDAMENTO: Este tipo de medio de cultivo nutritivo no selectivo que promueve el

desarrollo microbiano. Por su composición, ha sido recomendado por el Clinical and Laboratory
Standards Institute (CLSI) para ser utilizado sólido, debido a sus múltiples ventajas y a una
gran cantidad representa buena reproducibilidad lote a lote en las pruebas de sensibilidad, su
contenido en inhibidores de sulfonamidas, trimetoprima y tetraciclina es bajo, la mayoría de
los patógenos microbianos crece satisfactoriamente

INTERPRETACION DE RESULTADOS:

Para determinar la
sensibilidad se debe
medir los halos de
inhibición y según el
diámetro determinar
su resistencia o
sensibilidad a un
determinado
microorganismo
TIPO DE MEDIO: Enriquecido
UTILIDAD: Es un medio de cultivo recomendado universalmente para la realización de la
prueba de sensibilidad a los antimicrobianos en las cepas de Streptococcus pneumoniae,
Streptococcus grupo viridans y Streptococcus grupo Beta Hemolítico

COMPONENTES:
 Infusion de carne
 Sangre ovina al 5% pH final= 7.3 +/- 0.1
 Peptona acida de caseína
 Almidón
 Agar
 Agua purificada
FUNDAMENTO: Este tipo de medio de cultivo nutritivo no selectivo que promueve el
desarrollo microbiano en las pruebas de sensibilidad. Cuando se suplementa con sangre de
carnero al 5%, permite realizar las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos en especies de
estreptococos. También, con el agregado de sangre puede utilizarse para el cultivo y
aislamiento de microorganismos nutricionalmente exigentes.

INTERPRETACION DE RESULTADOS:

Para determinar la
sensibilidad se debe
medir los halos de
inhibición y según el
diámetro determinar
su resistencia o
sensibilidad a un
determinado
microorganismo