Práctica No.

5 11 – 04 – 2025

Química Analítica e
Instrumental
Programa de Biología

Determinación del contenido de proteína en un

alimento por el método Kjeldahl
Determination of the protein content of a food by
the Kjeldahl method
Carlos Andrés Villamizar Valencia1, María Gabriela Castañeda Serna2

Universidad de los Llanos, Facultad de Ciencias Básicas e Ingeniería, Vereda Barcelona km 12 vía a
Puerto López, Villavicencio 500017, Colombia

RESUMEN
El método Kjeldahl, desarrollado en 1883, es una técnica clave para determinar el contenido de
nitrógeno en compuestos orgánicos. Este método, ampliamente usado en la industria alimentaria,
ambiental y farmacéutica, mide proteínas de manera indirecta a partir del nitrógeno total. Consiste en
tres etapas principales: digestión, destilación y titulación. Se analizó comida para perro (1,0483 g)
utilizando catalizadores y ácido sulfúrico. Tras la digestión, el destilado fue titulado con HCl. Se
determinó que el porcentaje de proteína en la muestra era del 15,38%, menor al 18% indicado por el
fabricante, con un error relativo del 14,56%. Esto se atribuye a una ligera imprecisión durante la
titulación que llevó a un exceso en el volumen registrado. El análisis destacó la importancia de la
precisión en cada etapa del procedimiento para obtener resultados confiables.

Palabras clave: Digestión, destilación, titulación, proteínas, nitrógeno.

ABSTRACT

The Kjeldahl method, developed in 1883, is a key technique for determining the nitrogen content of
organic compounds. This method, widely used in the food, environmental and pharmaceutical
industries, measures proteins indirectly from total nitrogen. It consists of three main steps: digestion,
distillation and titration. Dog food (1.0483 g) was analyzed using catalysts and sulfuric acid. After
digestion, the distillate was titrated with HCl. The percentage of protein in the sample was determined
to be 15.38%, lower than the 18% indicated by the manufacturer, with a relative error of 14.56%. This
was attributed to a slight inaccuracy during titration that led to an excess in the volume recorded. The
analysis highlighted the importance of precision at each stage of the procedure to obtain reliable
results.

Keywords: Digestion, distillation, titration, proteins, nitrogen.

INTRODUCCIÓN método Kjeldahl, no solo transformó los

Desde su creación en 1883 por Johan Kjeldahl, estándares científicos de su época, sino que se
el método para la determinación del nitrógeno consolidó como una herramienta esencial en
en compuestos orgánicos marcó un antes y un una amplia variedad de aplicaciones,
después en el campo de la química analítica. abarcando desde el análisis de alimentos y
Esta técnica innovadora, conocida como el
piensos hasta la evaluación de suelos y aguas bloque de digestión conectado a un scrubber,
(GerHardt, s. f.). programado para alcanzar 400 °C. La digestión
La determinación del contenido proteico en los duró entre 3 y 4 horas, hasta obtener una
alimentos es importante dentro de la industria solución clara de color azul, sin residuos
alimentaria, y el método Kjeldahl ha emergido sólidos. Posteriormente, los tubos se dejaron
como uno de los procedimientos más enfriar antes de continuar con la destilación.
confiables para esta tarea. Su fundamento En esta etapa, los tubos se colocaron en el
radica en la medición indirecta de las equipo de destilación y, bajo el condensador,
proteínas, mediante la cuantificación del se ubicó un matraz Erlenmeyer de 250 mL con
contenido total de nitrógeno. A pesar de las 4 gotas de solución indicadora. Desde el panel
modificaciones realizadas para perfeccionar la de control, se programó la adición de 50 mL de
técnica, sus pasos esenciales —digestión, agua destilada, 50 mL de NaOH al 30% y 25
destilación y titulación— han permanecido mL de ácido bórico al 4%. La destilación por
inalterados desde su origen, lo que lo convierte arrastre de vapor se realizó durante 15
en una herramienta versátil y confiable (Admin, minutos, recolectando 150 mL de destilado con
2022). viraje del indicador a color verde. Finalmente,
se tituló con HCl 0,10 N hasta el punto de
El alcance del método Kjeldahl trasciende las equivalencia (color gris-lila), registrando con
fronteras de la industria alimentaria. Su precisión el volumen de ácido utilizado.
precisión y facilidad de uso lo han popularizado
en sectores como el farmacéutico y el análisis RESULTADOS Y DISCUSIÓN
medioambiental, donde el contenido de Digestión, Destilación y Titulación
nitrógeno es un parámetro clave. Además de Para la práctica se utilizó específicamente
medir el nitrógeno total, este método permite 1.0483 g de comida de perro de la marca
identificar componentes como amonio, DONKAN Adultos, la cual se dejó dentro de un
nitratos, nitritos y nitrógeno ligado tubo por más de 4 horas con una tableta de
orgánicamente en matrices tan diversas como catalizador y 12,5 mL de H2SO4.
alimentos, aguas residuales, lodos, fertilizantes
y suelos. Esta capacidad lo posiciona como un Posteriormente, se llevó a cabo la etapa de
estándar de referencia en el análisis químico destilación, seguida de la titulación con ácido
(GerHardt, s. f.). clorhídrico (HCl), en la cual se registró un
Sin embargo, el método Kjeldahl enfrenta retos volumen final de 8,7 mL. No obstante, durante
importantes relacionados con su impacto este procedimiento se presentó un leve
ambiental y costos asociados. El uso de sobrepaso del punto de equivalencia,
reactivos, como el sulfato de cobre como evidenciado por un viraje del indicador a un
catalizador, si bien optimiza la técnica, también tono rojo pálido, en lugar del color gris
puede generar acumulaciones perjudiciales característico del punto final. A partir de este
que contribuyen a la contaminación de suelos y resultado, se procedió a calcular el porcentaje
aguas. Estos desafíos subrayan la necesidad de de nitrógeno presente en la muestra, y
equilibrar su efectividad analítica con medidas posteriormente, el contenido de proteína,
que reduzcan los impactos adversos sobre el utilizando las siguientes fórmulas:
medio ambiente (Da Silva et al., 2016).
Datos:
EXPERIMENTAL -Volumen HCl: 8.7 mL
La cuantificación de nitrógeno total se realizó -Normalidad HCl : 0.1982 N
mediante el método de Kjeldahl, comenzando -Peso Muestra: 1.0483 g
con la digestión de la muestra. Se pesó 1,0000 -Factor de conversión de comida de perro: 6.25
g de comida para perro en papel libre de -valor Ref o declarado por el fabricante: 18%
nitrógeno y se transfirió a un tubo de digestión,
al cual se le añadió una tableta de catalizador =
y 12,5 mL de ácido sulfúrico concentrado (96– Volumen de HCl x normalidad HCl x 14.01 x 1
98%). El proceso se llevó a cabo en una cabina %Nitr ó geno=
1000 x peso muestra
de extracción, colocando los tubos en un
 8.7 mL x 0.1982 N x 14.01 x 100 -Admin. (2022, July 18). Determinación de
%Nitrógeno= proteínas en alimentos a través del Método
1000 x 1.0483 g
Kjeldahl. SICA Medición.
= 2.46%
[Link]
%Proteína= %N x Factor de conversión
acion-procesos/determinacion-de-proteinas-en-
%Proteína= 2.46% x 6.25 = 15.38%
alimentos-a-traves-del-metodo-kjeldahl/
-Da Silva, T. E., Detmann, E., De Oliveira
Error relativo:
Franco, M., Palma, M. N. N., & Rocha, G. C.

( valor Ref −Valor experimental

Valor de referencia ) x 100
(2016). <b>Evaluation of digestion procedures
in Kjeldahl method to quantify total nitrogen in
analyses applied to animal nutrition. Acta
Scientiarum Animal Sciences, 38(1), 45.
ER(%) =
( 18−15.38
18 ) x100 ≈14.56% [Link]
171
-GerHardt, C. (s. f.). El método Kjeldahl.
Con base en los resultados obtenidos, se [Link]
determinó un contenido de proteína del -analiticos/el-metodo-kjeldahl/
15,38%, valor inferior al 18% declarado por el -Harvey, D.T., Modern Analytical Chemistry.
fabricante, lo que representa un error relativo 2000, Boston: McGraw-Hill. 798.
del 14,56%. Esta diferencia podría estar -Harris, D.C., Análisis químico cuantitativo. 2
relacionada con un leve exceso en la adición ed. 2001: Reverté.
de ácido clorhídrico durante la titulación, ya
que el viraje del indicador superó el punto de
equivalencia y alcanzó un tono rojo muy claro,
en lugar del gris-lila esperado. Esta
sobrevaloración del volumen titulado influyó
directamente en la estimación del contenido de
nitrógeno y, por ende, en el valor final de
proteína. Esta situación pone de manifiesto la
importancia de detener la titulación en el
momento justo del viraje para asegurar la
precisión y confiabilidad del análisis.

CONCLUSIONES

-El porcentaje de proteína obtenido fue menor

al declarado por el fabricante.
-Un leve exceso de titulante afectó la precisión
del resultado.
-El método de Kjeldahl requiere precisión para
obtener datos confiables.-En la valoración de
HCl con NaOH, El error relativo del 9.9%
sugiere imprecisión, posiblemente por
variaciones en el volumen titulado o en el
punto final.
-La curva de titulación obtenida sigue el patrón
esperado para una titulación ácido-base.
-Se determinó el punto de equivalencia en 3.5
mL de NaOH, donde ocurrió el cambio más
abrupto de pH.

REFERENCIA