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Preparación y Diagnóstico de Plasmodium

El documento presenta un módulo sobre el aparato cardiovascular, linfático y hematopoyético, centrándose en la observación del parásito Plasmodium, causante de la malaria. Se detallan características generales, el ciclo biológico, técnicas de diagnóstico como el frotis de sangre y la gota gruesa, así como el cuadro clínico y la epidemiología de la enfermedad. Además, se discuten los objetivos de identificación y comprensión de los elementos para el diagnóstico del paludismo.

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Preparación y Diagnóstico de Plasmodium

El documento presenta un módulo sobre el aparato cardiovascular, linfático y hematopoyético, centrándose en la observación del parásito Plasmodium, causante de la malaria. Se detallan características generales, el ciclo biológico, técnicas de diagnóstico como el frotis de sangre y la gota gruesa, así como el cuadro clínico y la epidemiología de la enfermedad. Además, se discuten los objetivos de identificación y comprensión de los elementos para el diagnóstico del paludismo.

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA


CARRERA DE MEDICO CIRUJANO
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Modulo III: Aparato Cardiovascular Linfático y Hematopoyético

OBSERVACIÓN DE
PREPARACIÓN DE
PLASMODIUM.
INTEGRANTES
Coyotecatl Chapuli Brisa Nathali Martinez Nicanor Jonathan Jesús
Espíndola Hernandez Erik Pascual Rostro Alan Alexis
Herrera Ramos Angelica Guadalupe Pérez Vázquez Angel Jesús DR. MARIO AVILA
Jacobo Aguilar Isaí Adonai
Juárez Gómez Catherine
Rivera Tepepa Flor Vanessa
Vergara Molina Arleth Vanessa
EQUIPO 4
Ledezma Chacon Amy Donaji GRUPO 1309
ÍNDICE
01 CARACTERISTICAS 02 CICLO BIOLOGICO
GENERALES

TECNICA DE FROTIS
03 CUADRO CLINICO 04 DE SANGRE

05 TECNICA GOTA
GRUESA
06 TINCION DE GIEMSA

07 OBJETIVO 08 MATERIAL

09 PROCEDIMIENTO
OBJETIVO 1
Conocer los diferentes
estadios del género
Plasmodium e identificarlos
a través de
preparaciones fijas.

OBJETIVO 2
Identificar y comprender los
elementos importantes para
el diagnóstico de paludismo.
CARACTERISTICAS GENERALES
Reino: Protista Es la más importante de todas las parasitosis de seres humanos
Phylum: Apicomplexa parasita las células sanguineas
Clase: Esporozoos
Genero: Plasmodium
Orden: Coccidiomorpha se divide en tres subórdenes:
Eimeriidae (parásitos del tracto digestivo de vertebrados)
Adeleidae (parásito gregario de insectos)
Haemosporidae, con un ciclo de vida bifásico que alterna entre sangre de
vertebrado y tejidos de artrópodo.
Haemosporidae contiene tres familias:
Plasmodidae, que incluye el género Plasmodium que contiene 66 a 80
especies transmitidas principalmente por Anopheles o Culex.
Haemoprotidae, que incluye alrededor de 10 géneros de parásitos de
vertebrados superiores, transmitidos por Culicoides, Stomoxys e
Hippoboscidae.
Leucytozoonidae, parásitos de leucocitos de aves y transmitidos por
diferentes Simulium

Werner L. Parasitología humana. México: Mcgraw-Hill; 2013.


CARACTERISTICAS Malaria es una enfermedad causada por protozoarios del

GENERALES género Plasmodium:


♦ Plasmodium falciparum
♦ Plasmodium vivax
♦ Plasmodium malariae
♦ Plasmodium ovale
♦ Plasmodium Knowlesi

Hipnozoito: Forma presente en el higado


Esquizontes: Forma presente en los globulos rojos
Merozoitos: Forma asexual liberado a la sangre
Su ciclo reproductivo es en dos partes en dos diferentes Gametocitos (micro y macro): Forma sexual en el mosquito
huéspedes: Ooquineto: Forma que aparece despues de la union de los
Sexual que ocurre en el mosquito gametocitos
Asexual que ocurre en los seres humanos Ooquiste: Forma que se situa en el instetino del mosquito
Esporozoitos: Se desarrolla en el msoquito y es la forma
infectante
Ryan KJ, C George Ray, Sherris JC. Sherris, microbiología médica. México, D.F.: Mcgraw-Hill; 2011.
CARACTERISTICAS GENERALES
Los transmisores del paludismo son las hembras de los La transmisión puede ser:
mosquitos o zancudos pertenecientes al género Anopheles. Vectorial
Transfuncional.
En América Latina las especies de Anopheles más impotantes Transmisión vertical
como transmisores son, en México: A. quadrimaculatus, A.
pseudopunctipennis y A. albimanus; A. aquasalis es el de
mayor importancia en Centroamérica.

Periodo de incubación.
Abarca en promedio 10 a 14 días, tiempo durante
el cual ocurre el ciclo pre-eritrocítico en el hígado
y pueden presentarse síntomas generales como:
Cefalea
Mialgias
Anorexia

Romero Cabello R. Microbiología y Parasitología Humana. 4.ª ed. México: Editorial Médica Panamericana; 2018.
Tay Zavala J, Velasco Castrejón O, Lara Aguilera R. Parasitología Médica. 8.ª ed. México: Méndez Editores; 2009.
EPIDEMIOLOGIA
Prevalencia en México:
Prevalencia a Nivel Mundial:
México se encuentra en una fase de pre-eliminación del
Sigue siendo un importante problema de salud pública.
paludismo, logrando una reducción de más del 90% en la
En 2022, se estimaron 249 millones de casos de
transmisión en los últimos 18 años.
paludismo a nivel mundial, un aumento de 5 millones con
En 2023, se confirmaron 44 casos autóctonos de
respecto a 2021.
paludismo por P. vivax a nivel nacional. Esta cifra
La Región de África representando la mayoría de los
representa una disminución del 73% en comparación con
casos y muertes a nivel global.
2022.
La OMS estima que cada año ocurren entre 300 y 500
La incidencia a nivel nacional en 2023 fue de 0.03 casos
millones de nuevos casos y hasta 2.7 millones de muertes
por cada 100,000 habitantes.
a nivel mundial.

Romero Cabello R. Microbiología y Parasitología Humana. 4.ª ed. México: Editorial Médica Panamericana; 2018.
Tay Zavala J, Velasco Castrejón O, Lara Aguilera R. Parasitología Médica. 8.ª ed. México: Méndez Editores; 2009.
Organización Panamericana de la Salud/Organización Mundial de la Salud. Malaria (Paludismo): Síntomas, Prevención y Tratamientos. [Link]
Centro Nacional de Programas Preventivos y Control de Enfermedades. Día Mundial del Paludismo. [Link]
EPIDEMIOLOGIA
El paludismo se presenta en las zonas tropicales de África, Asia Grupos de edad
y Latinoamérica. Es endémico en 91 países y en ocho tiene áreas Niños menores de 5 años
pequeñas de transmisión. Mujeres embarazadas
Adultos jóvenes en áreas no endémicas (viajeros)
Plasmodium vivax: regiones templadas. Poblaciones inmunodeprimidas y adultos mayores
Plasmodium falciparum: África subsahariana y áreas Poblaciones rurales
tropicales.
Plasmodium ovale: África.
Plasmodium malariae: África, Latinoamérica y Nueva Guinea.

Zonas geográficas en México


Los casos autóctonos se concentran principalmente en el sureste del
país, específicamente en Chiapas, Oaxaca, Campeche y Tabasco.

Romero Cabello R. Microbiología y Parasitología Humana. 4.ª ed. México: Editorial Médica Panamericana; 2018.
Tay Zavala J, Velasco Castrejón O, Lara Aguilera R. Parasitología Médica. 8.ª ed. México: Méndez Editores; 2009.
Centro Nacional de Programas Preventivos y Control de Enfermedades. Día Mundial del Paludismo. [Link]
CICLO
BIOLÓGICO

Figura 1. Ciclo parasitario de


Plasmodium spp., extraído del Centers
for Disease Control and Prevention
(CDC).
CUADRO CLINICO
SINTOMAS SINTOMAS
INICIALES CARACTERISTICOS
Fiebre intermitente o continua Ciclos febriles que suelen repetirse cada 48 o
Escalofríos 72 horas, dependiendo de la especie:
Diaforesis 1.P. falciparum, P. vivax, P. ovale: cada 48 horas
Cefalea 2.P. malariae: cada 72 horas
Mialgias 3.P. knowlesi: cada 24 horas
Escalofríos seguidos de fiebre alta
Náuseas y émesis
Sudoración intensa
Esplenomegalia
Hepatomegalia ocasional
Anemia progresiva

Frotis de sangre [Internet]. [Link]. [citado el 17 de abril de 2025]. Disponible en: [Link]
TÉCNICA FROTIS SANGRE
Es una prueba que se usa para ayudar a diagnosticar y controlar una amplia variedad de trastornos de la
sangre y otros problemas que afectan la sangre.

Examina:
1. Globulos rojos
2. Glóbulos blancos
3. Plaquetas

Frotis de sangre [Internet]. [Link]. [citado el 17 de abril de 2025]. Disponible en: [Link]
TÉCNICA GOTA GRUESA
La gota gruesa es una técnica diagnóstica utilizada en el laboratorio para detectar parásitos en
la sangre, como los responsables de la malaria y la enfermedad de Chagas. Este método
consiste en examinar una muestra de sangre periférica bajo el microscopio para identificar
microorganismos que no son visibles mediante métodos tradicionales de análisis.

MATERIALES PROCEDIMIENTO
Alcohol de 70º [Link] el porta objetos con las iniciales del paciente.
Algodón [Link] guantes protectores durante la extracción y la
Guantes protectores manipulación de las muestras de sangre.
Láminas portaobjetos [Link] y desinfectar el dedo medio o anular del paciente
limpias con algodón ligeramente humedecido en alcohol de 70º
Lancetas estériles [Link] vigorosamente el dedo para estimular la circulación
Giemsa al 10% sanguínea y punzar la zona lateral de la yema con una
Agua lanceta estéril.

Links Global. Gota gruesa y frotis delgado [Internet]. [Lugar desconocido]: Links Global; [fecha desconocida] [citado 18 abr 2025]. Disponible en: [Link]
Mora Murillo R. Gota gruesa y frotis delgado - Diagnóstico de malaria [Internet]. YouTube. 2021 ago 17 [citado 18 abr 2025]. Disponible en: [Link]
TÉCNICA GOTA GRUESA
5. Aplicar una presión suave sobre el dedo para extraer la
primera gota y limpiarla con algodón seco.
6. Extraer una segunda gota de un buen tamaño y colocarla
en el porta objeto.
7. Utilizar la punta de otro porta objetos para homogenizar la
gota con movimientos circulares formando una extensión
gruesa de 1cm de diámetro.
8. Dejar secar completamente a temperatura ambiente.
9. Una vez seca agregar Giemsa al 10% y dejar actuar 20
minutos.
10. Pasados los 20 minutos enjuagar el portaobjetos
moviéndolo suavemente en un recipiente con agua y dejar
secar.
11. Ya seco observar al microscopio.

Links Global. Gota gruesa y frotis delgado [Internet]. [Lugar desconocido]: Links Global; [fecha desconocida] [citado 18 abr 2025]. Disponible en: [Link]
Mora Murillo R. Gota gruesa y frotis delgado - Diagnóstico de malaria [Internet]. YouTube. 2021 ago 17 [citado 18 abr 2025]. Disponible en: [Link]
TINCIÓN GIEMSA
MATERIALES PROCEDIMIENTO
• Colorante de Giemsa (solución al 10%) [Link] preparamos la solución de Giemsa al 10%
• Vaso de precipitados [Link] una pipeta de Pasteur, ponemos gotas de metanol
• Metanol, (sin acetona) únicamente sobre la extensión fina.
• Pipeta de Pasteur [Link] secar la extensión al aire sobre una gradilla de secado.
• Temporizador [Link] el colorante lentamente sobre los portaobjetos hasta
• Gradilla de secado que las extensiones de sangre queden cubiertas.
• Agua destilada [Link] teñir durante X minutos.
[Link] con agua destilada para eliminar todo el colorante.
[Link] secar y observamos al microscopio.

Organización Mundial de la Salud. TINCIÓN DE GIEMSA DE EXTENSIONES DE SANGRE PARA EL DIAGNÓSTICO MICROSCÓPICO DEL PALUDISMO [Internet]. 1 DE ENERO DE 2016. [citado el 17 de abril de 2025].
Disponible en: [Link]
OBSERVACIÓN AL MISCROSCOPIO
Gota gruesa:
Estructuras básicas del parásito en el frotis:
Los glóbulos rojos se lisan (se rompen).
Se observan los parásitos libres. Cromatina: Redonda, teñida de rojo.
Citoplasma: formas variadas según la etapa del ciclo y la
Extendido hemático:
Los glóbulos rojos se conservan intactos. especie:
Se observa el parásito dentro del eritrocito. Anillo
Redondeada
Banana

Pigmento malárico (hemozoína):


Gránulos de color amarillo pálido, café o negro.
Producto del metabolismo al digerir hemoglobina.

Granulaciones específicas (según la especie)


Schüffner: Punteado rosado, visible y abundante.
Maurer: Manchas grandes e irregulares
Ziemann: Punteado fino y discreto.
Puntos de James: Similar a Schüffner
Organización Mundial de la Salud. TINCIÓN DE GIEMSA DE EXTENSIONES DE SANGRE PARA EL DIAGNÓSTICO MICROSCÓPICO DEL PALUDISMO [Internet]. 1 DE ENERO DE 2016. [citado el 17 de abril de 2025].
Disponible en: [Link]
OBSERVACIÓN AL MISCROSCOPIO
Etapa P. falciparum P. vivax P. knowlesi P. ovale P. malariae

Trofozoíto
joven

Trofozoíto
maduro

Esquizonte

Gametocito
OBSERVACIÓN AL MISCROSCOPIO
Etapa P. falciparum P. vivax P. ovale P. malariae

Múltiples anillos Anillo grande, ocupa un Similar a P. vivax, pero más


Trofozoíto Crecimiento en forma de
pequeños en un tercio del eritrocito, pequeño; Deforma los
banda; ocupa un cuarto del
joven eritrocito, a veces con citoplasma amplio y un eritrocitos, dándoles forma
eritrocito.
doble cromatina. gránulo de cromatina. ovalada o irregular.

Citoplasma voluminoso,
Trofozoíto Eritrocitos con tamaño Similar a P. vivax, con Forma de banda; eritrocito
pigmento pardo, eritrocitos
normal, Granulaciones puntos de James y bordes con gránulos rosados de
maduro agrandados y pálidos con
de Maurer poco visibles. irregulares en el eritrocito. Ziemann.
gránulos de Schüffner.

Raro en sangre
periférica; 8-36 Redondeado, 12-24 Redondeado, 4-12 núcleos 6-12 núcleos dispuestos en
Esquizonte merozoítos (promedio núcleos (promedio 16). roseta.
(promedio 8).
24).

En forma de media luna Esférico, citoplasma más


Ovalado; cromatina
o plátano. cromatina denso en
Gametocito densa; gran macrogametocitos,
Similar a P. vivax. compacta, llena casi todo el
eritrocito.
pigmentación. cromatina compacta.
DIPSTICK (PDR)
Las pruebas de diagnóstico rápido (PDR), a menudo denominadas "dipsticks", son inmunoensayos cromatográficos
sencillos diseñados para detectar antígenos específicos de los parásitos de la malaria en sangre total.

Principios del funcionamiento:


[Link]ón: La sangre se mezcla con un agente para liberar
los antígenos del parásito.
[Link]ón: Los antígenos (si presentes) se unen a anticuerpos
marcados con color en la tira.
[Link]ón: La mezcla viaja por la tira de nitrocelulosa.
[Link] (Línea de Prueba): Los complejos antígeno-
anticuerpo marcado son atrapados por anticuerpos en la línea
de prueba, formando una banda de color si hay malaria.
[Link] (Línea de Control): Anticuerpos marcados restantes
son capturados en la línea de control, siempre generando una
banda de color para verificar la validez de la prueba.

Beadle, C., Long, G. W., Weiss, W. R., McElroy, P. D., Maret, S. M., Oloo, A. J., & Hoffman, S. L. (1994). Diagnosis of malaria by detection of Plasmodium falciparum HRP-2 antigen with a rapid dipstick antigen-capture 1
assay. The Lancet, 343(8897), 564-568
MATERIAL Y REACTIVOS
- Porta y cubre objetos.
- Microscopio.
- Aceite de inmersión.
- Preparaciones fijas de Plasmodium spp.
- Papel seda.

PROCEDIMIENTO
1. Observar las preparaciones al microscopio a 4x, 10x y 40x una vez localizado el
campo de interés se podrá observar a 100x usando el aceite de inmersión (solo con
supervisión del profesor).

2. Limpiar el lente 100x con el papel seda cuidadosamente para no dejar ningún
residuo. Si es necesario limpiar la preparación fija con papel seda para quitarle el aceite
de inmersión.
¡MUCHAS
GRACIAS!
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Frotis de sangre [Internet]. [Link]. [citado el 17 de abril de 2025]. Disponible en:
[Link]
2. Organización Mundial de la Salud. TINCIÓN DE GIEMSA DE EXTENSIONES DE SANGRE PARA EL
DIAGNÓSTICO MICROSCÓPICO DEL PALUDISMO [Internet]. 1 DE ENERO DE 2016. [citado el 17 de abril de
2025]. Disponible en: [Link]
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3. Tay Zavala J, Velasco Castrejón O, Lara Aguilera R. Parasitología Médica. 8.ª ed. México: Méndez Editores;
2009.
4. Romero Cabello R. Microbiología y Parasitología Humana. 4.ª ed. México: Editorial Médica Panamericana;
2018.
5. Ryan KJ, C George Ray, Sherris JC. Sherris, microbiología médica. México, D.F.: Mcgraw-Hill; 2011.
6. Werner L. Parasitología humana. México: Mcgraw-Hill; 2013.
7. Centro Nacional de Programas Preventivos y Control de Enfermedades. Día Mundial del Paludismo.
[Link]
8. Links Global. Gota gruesa y frotis delgado [Internet]. [Lugar desconocido]: Links Global; [fecha desconocida]
[citado 18 abr 2025]. Disponible en: [Link]
9. Mora Murillo R. Gota gruesa y frotis delgado - Diagnóstico de malaria [Internet]. YouTube. 2021 ago 17 [citado
18 abr 2025]. Disponible en: [Link]

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