OBSERVACIÓN DE PREPARACIÓN DE PLASMODIUM
Paludismo: Enfermedad parasitaria que provoca más decesos cada año. La transmisión se
lleva a cabo por la picadura de un mosquito. También se puede transmitir por medio de
transfusiones de sangre y jeringas infectadas. La enfermedad de paludismo es usual en
zonas endémicas, o en temporadas con climas húmedos o calurosos. Es conocida como una
enfermedad debilitante sobre todo por la célula blanco que ataca. Los órgano blanco que
va a atacar este plasmodium falciparum una vez que llegue al cuerpo son: hígado, bazo y
glóbulos rojos.
Se debe a cuatro especies del género Plasmodium: vivax, malarie, ovale y falciparum, esta
última causante de las formas más graves de la enfermedad.
Plasmodium (protozoo perteneciente al género phylum Apicomplexa): Es el
microorganismo que produce el paludismo. Es un parásito, un protozoo, es invasor. Lo
distingue la compleja disposición de estructuras apicales conocidas como roptrias y
micronemas, las cuales participan en la entrada del parásito a su célula blanco.
Ciclo biológico: tiene un ciclo de vida complejo que alterna entre dos huéspedes: un
vertebrado (hombre), donde se observan dos tipos de ciclos asexuales; y un mosquito
(hembra, del género Anopheles), en donde se lleva a cabo el ciclo sexual. Tras la picadura
de un individuo infectado con Plasmodium se continúa su desarrollo en el intestino y
glándulas salivales del mosquito, hasta que se preparan para infectar al siguiente
huésped.
Manifestaciones clínicas: Las infecciones por Plasmodium pueden inducir desde
parasitemias asintomáticas hasta enfermedades con resultados fatales, vinculada a
Plasmodium falciparum. Las manifestaciones clínicas son los síntomas típicos de un
resfriado, acompañados de fiebre y escalofrío que ocurren cada 48 horas, y ocurre como
consecuencia de una lisis de los eritrocitos infectados al final del ciclo eritrocítico.
Las complicaciones mayores de la enfermedad incluyen: anemia grave, paludismo cerebral,
complicaciones metabólicas, insuficiencia renal, edema pulmonar y paludismo maternal.
Ictericia, trastorno de coagulación, hipoglucemia, hemorragia digestiva, defensas bajas,
ascitis, encefalopatía.
Diagnóstico: forma más utilizada para el diagnóstico del paludismo es la técnica del frotis
de sangre, teñido con Giemsa y se observa al microscopio. Mediante el análisis morfológico
de los parásitos presentes en las muestras se puede diagnosticar la especie. Examen de la
gota gruesa: tomar una muestra de sangre de la persona potencialmente infectada, se
somete a ciertos movimientos mecánicos para destruir los glóbulos rojos y poder ver al
microscopio ya sea gametocitos, merozoitos o esporozoitos, o esquizontes; combiando con
el Dx clínico.
Para mejorar la detección en un frotis se añaden colorantes fluorescentes como el naranja
de acridina y la purina de benzocarboxilo, que tienen afinidad por los ácidos nucleicos.
Otras técnicas utilizadas son la reacción en cadena de la polimerasa, tira reactiva
(Dipstick), inmunocromatografías ICT-Malaria, OptiMAL y Determine; estos métodos son
muy efectivos sólo para Plasmodium falciparum.
Tx: Primaquina; cloroquina; atovacuona; artemisinina; quinina.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son las características generales del agente causal? Son eucariotas
unicelulares; son parásitos intracelulares obligados; su ciclo de vida es complejo;
llevan a cabo una reproducción asexual y sexual; producen hemozoína (pigmento
cristalino como subproducto de la digestión de hemoglobina en los globulos rojos);
presentan alta variabilidad genética, lo que les permite evadir la respuesta
inmunitaria del hosperados y desarrollar resistencia a medicamentos.
2. ¿Cuál es la especie de parásito que produce las formas más graves de paludismo y
por qué? La especie de Plasmodium que produce las formas más graves de
paludismo es Plasmodium falciparum. Esta especie es responsable de la mayoría de
las muertes por malaria a nivel mundial.
Razones por las que P. falciparum es más peligroso:
● Alta capacidad de multiplicación: Puede infectar una gran proporción de glóbulos
rojos, lo que lleva a una parasitemia elevada.
● Secuestro de eritrocitos: Los glóbulos rojos infectados se adhieren a las paredes de
los vasos sanguíneos, especialmente en órganos vitales como el cerebro, lo que
puede causar obstrucciones y daño tisular.
● Complicaciones severas: Puede provocar malaria cerebral, insuficiencia renal,
anemia severa, dificultad respiratoria y otras complicaciones que pueden ser
mortales si no se tratan a tiempo.
3. ¿Cuál es el medicamento suministrado para eliminar las formas hepáticas de
Plasmodium vivax y Plasmodium ovale? En México, el tratamiento estándar para el
paludismo por P. vivax incluye la administración de primaquina junto con
cloroquina. La cloroquina elimina las formas sanguíneas del parásito, mientras que
la primaquina se encarga de las formas hepáticas, asegurando así una cura
completa y reduciendo el riesgo de recaídas .
4. ¿Qué medidas profilácticas podrían aplicarse en México para eliminar los casos de
paludismo?
a. Eliminación y modificación de hábitats de criaderos de mosquitos: Se
promueve la limpieza de viviendas y alrededores, la correcta disposición de
basura, la eliminación de maleza y de algas en cuerpos de agua para evitar
la reproducción del mosquito vector.
b. Uso de barreras físicas: Instalación de mallas mosquiteras en puertas y
ventanas, uso de pabellones para dormir y encalamiento de viviendas para
impedir el acceso de mosquitos.
c. Control químico: Aplicación de larvicidas y adulticidas químicos o biológicos
en caso de brotes o después de desastres naturales.
OBSERVACIÓN DE TRYPANOSOMA
La enfermedad tripanosomiasis americana o enfermedad de Chagas, constituye un gran
problema de salud en casi todo el continente americano. Se considera como probable área
endémica todo territorio que se encuentre entre cero y 1800 metros sobre el nivel del mar.
La transmisión de la enfermedad puede ocurrir por transfusión sanguínea, congénita o
trasplantes.
Trypanosoma cruzi: agente causal de la enfermedad, es un protozoario flagelado de la
clase Zoomastigophora. Posee un ciclo complejo que incluye tres fases morfológicas
comprendidas en dos huéspedes: el vector invertebrado y el huésped mamífero.
Los estadios se definen por su forman y disposición del cinetoplasto respecto del núcleo y
la región por donde emerge el flagelo: promastigote, epimastigote, amastigote y
tripomastigote (metacíclico o sanguíneo).
Ciclo de vida: se inicia cuando el triatomino se alimenta de la sangre de un mamífero
infectado que contiene tripomastigotes sanguíneos; éstas se transforman y se multiplican.
Cuando el vector infectado se alimenta, puede ingerir varias veces su peso corporal en
sangre y defecarla en la piel o mucosas del mamífero, de esta manera arrastra su
excremento e introduce tripomastigotes metacíclicos infectantes. También es posible que el
mismo huésped se infecte al llevar las deyecciones a una solución de continuidad en la
piel, mucosa o conjunto ocular. Luego, se transforman en amastigotes, se multiplican por
fisión binaria y alcanzan la circulación sanguínea causando la muerte celular. El ciclo se
completa cuando el triatomino se alimenta de un mamífero infectado.
Cuadro clínico. Los signos y síntomas de la enfermedad de Chagas aguda pueden estar
ausentes o ser leves e incluyen lo siguiente:
● Signos de puerta de entrada del parásito
● Roncha o pápula en piel (chagoma de inoculación)
● Edema unilateral biparpebral con adenitis retroauricular (Signo de Romaña)
● Fiebre continua e intermitente
● Dolor de cabeza
● Náuseas, diarrea o vómitos
● Ganglios linfáticos agrandados
● Dificultad para respirar
● Dolor de músculos, área abdominal o pecho.
● Escalofrío
● Hepatomegalia
● Astenia
● Adinamia
Una primera señal visible puede ser una lesión cutánea, el llamado "chagoma de
inoculación", un nódulo subcutáneo con adenitis regional en el sitio de la picadura; y en
casos de inoculación ocular, muy típico pero poco frecuente (2% de los casos agudos
sintomáticos) es posible identificar el "signo de Romaña", edema bipalpebral unilateral,
con adenitis retroauricular. Si la infección no se trata, puede avanzar a la fase crónica.
Los signos y síntomas de la forma crónica de Chagas pueden incluir los siguientes:
● Alrededor del 30% de la gente va a desarrollar daño cardíaco:
○ Miocardiopatía
○ Alteraciones del ritmo y conducción en el corazón
○ Aneurisma apical.
○ Insuficiencia cardíaca causada por la destrucción progresiva del músculo
cardíaco.
● Menos del 10% de los pacientes sufren dilatación colon o esófago por trastornos
motores gastrointestinales
○ La dilatación del esófago o colon
○ Alteraciones del vaciamiento gástrico
○ Trastornos motores de la vesícula biliar y colon.
Diagnóstico. Las técnicas se basan en la utilización de una muestra de sangre (frotis).
También se puede realizar inoculación de sangre del paciente en animales de
experimentación, en medios de cultivo como NNN y LIT, y el xenodiagnóstico.
Para las fases subclínica o crónica se pueden aplicar hemaglutinación indirecta, ELISA,
inmunofluorescencia y Western blot.
Tx. Sintomático; antiparasitarios; benznidazol; nifurtimox (uso prolongado)
CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la fase replicativa extracelular de Trypanosoma cruzi? es la forma
epimastigote. Esta etapa ocurre en el intestino medio del insecto vector, los
triatominos (también conocidos como chinches besuconas), donde los epimastigotes
se multiplican activamente por fisión binaria.
2. ¿Mecanismos de patogenicidad en las infecciones por Trypanosoma cruzi?
a. Invasión celular: Entra en células del huésped y se multiplica como
amastigote, causando daño tisular.
b. Ruptura celular y diseminación: Al multiplicarse, los amastigotes revientan
las células, liberando tripomastigotes que invaden nuevas células,
generando inflamación y destrucción tisular progresiva.
c. Inflamación crónica: Afecta órganos como el corazón y el intestino.
d. Reacción autoinmune: El sistema inmune puede atacar tejidos propios por
error (mimetismo molecular).
e. Daño nervioso: Afecta nervios del sistema digestivo, causando megacolon o
megaesófago.
f. Evasión inmune: Se esconde dentro de células y bloquea respuestas
defensivas.
3. ¿Quién es el transmisor de la enfermedad de Chagas? Insecto conocido como
triatomino, también llamado chinche besucona o vinchuca.
4. ¿Fundamento del xenodiagnóstico? Consiste en permitir que insectos triatominos no
infectados, criados en laboratorio, se alimenten de la sangre de un paciente
sospechoso de estar infectado. Después de un período de incubación, que puede
variar entre 30 y 60 días, se examinan las heces de estos insectos en busca de
formas tripomastigotas de T. cruzi. La detección del parásito en las heces confirma
la infección en el paciente.
5. ¿Características morfológicas de los estadios básicos por los que atraviesa el
parásito?
a. Amastigote
i. Forma: Redondeada u ovalada.
ii. Tamaño: Pequeño (aproximadamente 1.5–5 µm).
iii. Flagelo: Ausente o muy corto, no sobresale de la célula.
iv. Localización: Intracelular, dentro de células del hospedador
mamífero, como macrófagos y células musculares.
v. Función: Forma replicativa en el hospedador vertebrado.
b. Epimastigote
i. Forma: Alargada, con membrana ondulante.
ii. Tamaño: Aproximadamente 20–25 µm de longitud.
iii. Cinetoplasto: Ubicado anteriormente al núcleo.
iv. Flagelo: Presente, emerge cerca del núcleo y forma una membrana
ondulante.
v. Localización: Intestino medio del insecto vector (triatomino).
vi. Función: Forma replicativa en el vector invertebrado.
c. Tripomastigote
i. Forma: Alargada y delgada, con membrana ondulante prominente.
ii. Tamaño: Aproximadamente 12–30 µm de longitud.
iii. Cinetoplasto: Ubicado posteriormente al núcleo.
iv. Flagelo: Largo, emerge del extremo posterior y forma una
membrana ondulante.
v. Localización: Sangre del hospedador mamífero y heces del vector.
vi. Función: Forma infectiva para el hospedador vertebrado; no se
divide.
HEMOCULTIVO
Hemocultivo: El hemocultivo es un método diagnóstico que se realiza para la detección de
microorganismos en la sangre y así, posteriormente, realizar la identificación y
susceptibilidad antimicrobiana.
Se pueden clasificar según el tipo de paciente (neonatal, pediátrico, adulto), el tipo de
toma de muestra (centrales o periféricos); tipo de microorganismo (bacterias aerobias,
anaerobias, hongos, fastidiosas o micobacterias) y según la metodología de los distintos
sistemas de identificación.
Las bacteriemias y fungemias se diagnostican por hemocultivo, que consiste en el cultivo
de una muestra de sangre en medios adecuados para recuperar las bacterias y los hongos
que son capaces de crecer en medios artificiales.
Para realizar un hemocultivo en un adulto se extrae al paciente entre 10 y 20 mL de
sangre.
Es recomendable practicar dos o tres hemocultivos mediante extracciones separadas y de
puntos de venopunción diferentes. El intervalo depende de la enfermedad que se sospeche
y la evolución de la enfermedad. En niños la cantidad de sangre a sembrar es entre 1 y 5
mL.
La realización de varios hemocultivos permite la confirmación de una sepsis y descartar
una contaminación por microorganismos de la flora normal de la piel.
Técnica. El sistema bifásico de Ruíz-Castañeda consiste en frascos que tienen en su interior
dos fases, una sólida de agar adosada a la pared y otra líquida. Este sistema se ideó para
el diagnóstico de la brucelosis ya que la bacteria responsable de esta infección es de
crecimiento lento y tiene una elevada virulencia.
Seguimiento. Una vez inoculados los frascos se incuban a 37°C durante siete a diez días
con lectura diaria. Se debe detectar enturbiamiento, hemólisis, gas o presencia de colonias
en el medio de Castañeda.
Cuando se detecta un hemocultivo positivo se practica una tinción de Gram y
posteriormente se resiembra. Para su posterior aislamiento e identificación. En los
hemocultivos visualmente negativos se recomienda un subcultivo transcurridas las primeras
48 horas antes de desecharlos.
Resultados. Para interpretar correctamente un hemocultivo positivo es necesario conocer la
situación clínica del paciente, su enfermedad base, la presencia de factores
predisponentes, así como el tratamiento antimicrobiano previo recibido.
CUESTIONARIO
1. Definición de los siguientes conceptos:
a. bacteriemia: Presencia de bacterias viables en el torrente sanguíneo, lo que
puede ocurrir de forma transitoria, persistente o intermitente, sin
necesariamente causar síntomas.
b. septicemia: Infección grave y diseminada en la sangre causada por
microorganismos (bacterias, hongos), que provoca una respuesta
inflamatoria sistémica (sepsis).
c. fungemia: Presencia de hongos (como Candida) en la sangre; puede ser
grave y ocurre sobre todo en pacientes inmunocomprometidos.
d. piemia: Tipo de septicemia en la que hay formación de abscesos múltiples
en órganos, debido a la diseminación de microorganismos piogénicos por
vía sanguínea.
2. ¿Qué microorganismos se pueden aislar a partir de un hemocultivo?
a. Bacterias aerobias y anaerobias (Staphylococcus aureus, Escherichia coli,
Streptococcus pneumoniae, Klebsiella, Pseudomonas, etc.).
b. Hongos como Candida spp.
c. En algunos casos, micobacterias o incluso Brucella spp.
3. ¿Qué enfermedades se pueden diagnosticar? Sepsis, endocarditis infecciosa,
meningitis bacteriana, neumonía grave con bacteriemia, osteomielitis, fiebre de
origen desconocido, fiebre tifoidea.
4. ¿Cuál es la composición química del medio Ruíz-Castañeda? consiste de dos fases
una sólida de Agar-tripticasa-soya y una fase líquida de caldo de tripticasa soya.
5. ¿Qué microorganismos se pueden considerar contaminantes? Staphylococcus
epidermidis; Corynebacterium spp.; Propionibacterium acnes (ahora Cutibacterium
acnes); Bacillus spp.
Estos son flora normal de la piel y pueden contaminar la muestra si no se realiza
un buen procedimiento.
6. ¿En qué situaciones se manda realizar un hemocultivo?
a. Fiebre persistente sin causa aparente.
b. Sospecha de sepsis o septicemia.
c. Paciente inmunocomprometido con signos de infección.
d. Sospecha de endocarditis.
e. Pacientes con catéteres venosos prolongados.
f. Fiebre en neonatos o ancianos sin foco aparente.
RESIEMBRA EN MEDIOS SELECTIVOS
Los microorganismos presentes en sangre circulante representan una amenaza para cada
órgano del cuerpo y pueden llegar a traducirse en consecuencias graves como shock,
insuficiencia de múltiples órganos, coagulación intravascular diseminada y muerte.
los frascos de hemocultivo deben examinarse de manera visual por lo menos una vez por
día en búsqueda de cualquier indicativo de crecimiento como puede ser la hemólisis de los
eritrocitos, la presencia de burbujas de gas en el medio, turbidez o la aparición de
pequeñas acumulaciones de desarrollo bacteriano o micótico en el caldo, sobre la
superficie de la capa de eritrocitos sedimentados o, algunas veces a lo largo de las
paredes del frasco. En caso de desarrollo o de la existencia de evidencias es necesario
proceder a realizar tinción de Gram para iniciar la identificación.
Si no se observa microorganismo alguno en el examen microscópico de un frasco
aparentemente “positivo”, la resiembra debe efectuarse de todas maneras.
una posible elección básica puede incluir medios cómo Agar Sangre al 5%, Agar
Chocolate, Agar S-110, Agar Sal Manitol, Agar EMB o Agar Mac Conkey, Agar Sabouraud
y Agar BIGGY.
Un ejemplo es Brucella spp. que debe incubarse en un ambiente de 37 °C con 10% de CO2
por lo menos tres semanas, realizando subcultivos a los 4 días y después una vez por
semana.
Bacterias aisladas frecuentemente en hemocultivos
S. coagulasa negativos
S. aureus
Streptococcus viridans
Algunas especies de Enterococcus
Streptococcus pyogenes
Streptococcus pneumoniae
Klebsiella pneumoniae
Haemophilus influenzae
Bacterias entéricas (E. coli, Salmonellas y Brucellas)
Pseudomona aeruginosa
Procedimiento. Tomar inóculo con el asa bacteriológica tanto del medio líquido como del
sólido, y sembrar por estría cruzada.
Resultados. reconocerán los medios usados frecuentemente en los subcultivos del
hemocultivo, así como sus características y microorganismos que pueden crecer en ellos.
Asociando estos medios de cultivo como herramientas en la identificación de géneros y de
los microorganismos.
Medios de cultivo — Aspectos de la morfología colonial: Tamaño, borde (redondeado,
ondulado, espiculado), color, aspecto (mate o brillante), elevación (cóncavo o convexo),
mucoide (si o no)
Morfologías típicas de las colonias en agar S-110
Morfologías típicas de las colonias en agar sal manitol
Morfologías típicas de las colonias en agar EMB
Morfologías típicas de las colonias en agar Sabouraud
Morfologías típicas de las colonias en agar Biggy
CUESTIONARIO
1. ¿Qué microorganismo esperaría encontrar en Agar Sangre y por qué es importante
leer en este medio a las 24 horas?
a. Entre los microorganismos que se pueden encontrar en este medio se
incluyen: Streptococcus spp.; Staphylococcus aureus; Escherichia coli;
Pseudomonas aeruginosa; Haemophilus influenzae
La lectura a las 24 horas es crucial porque permite observar las
características hemolíticas de las colonias en su estado óptimo. Una lectura
tardía puede llevar a interpretaciones erróneas debido a cambios en el
patrón de hemólisis o sobrecrecimiento de colonias.
2. ¿Qué microorganismos esperaría encontrar en Agar chocolate y qué tipo de medio
es? El Agar Chocolate es un medio de cultivo enriquecido y no selectivo, utilizado
principalmente para el aislamiento de bacterias exigentes desde el punto de vista
nutricional. Se prepara mediante la lisis de glóbulos rojos, lo que libera nutrientes
esenciales como el factor X (hemina) y el factor V (NAD), necesarios para el
crecimiento de ciertos patógenos.
Los microorganismos que comúnmente se aíslan en este medio incluyen:
Haemophilus influenzae; Neisseria meningitidis; Neisseria gonorrhoeae;
Streptococcus pneumoniae.
Este medio es esencial para el diagnóstico de infecciones causadas por estos
patógenos, ya que proporciona los nutrientes necesarios que otros medios no
ofrecen.
3. ¿Cuál es la etiología de la presencia de microorganismos en sangre? La presencia
de microorganismos en la sangre, conocida como bacteriemia o fungemia, puede
deberse a diversas causas:
a. Diseminación desde un foco infeccioso primario, como infecciones urinarias,
neumonías o infecciones de heridas.
b. Procedimientos médicos invasivos, como la colocación de catéteres o
cirugías.
c. Inmunosupresión, que disminuye la capacidad del organismo para combatir
infecciones.
d. Infecciones nosocomiales adquiridas durante la estancia hospitalaria.
4. ¿Después de cuánto tiempo debe darse como negativo un hemocultivo y por qué?
Un hemocultivo se considera negativo generalmente después de 5 días de
incubación si no se ha detectado crecimiento microbiano. Este período permite la
detección de la mayoría de los patógenos bacterianos y fúngicos clínicamente
relevantes.
Es importante esperar este tiempo para asegurar que no se omitan
microorganismos de crecimiento lento, como algunas especies de Brucella o
Mycobacterium.
IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS
Las pruebas bioquímicas ponen de manifiesto características muy particulares de cada
microorganismo, razón por la cual en general se utilizan para confirmación de género
como es el caso de pruebas como catalasa (para distinguir Streptococcus de
Staphylococcus) o bien identificación de especie.
Procedimiento.
1. Realizar pruebas de catalasa y coagulasa a partir de colonias del medio S-110
2. Realizar prueba de catalasa y tinción de Gram en caso de crecimiento en agar
chocolate.
3. En caso de desarrollo en los medios EMB o Mac Conkey proceder a la inoculación
de las pruebas TSI, SIM, LIA, MIO, Citrato de Simmons y Caldo Urea.
CUESTIONARIO
1. Fundamento y la técnica de siembra en el medio TSI:
a. Fundamento: El medio de cultivo contiene extracto de carne y pluripeptona
como fuente de nutrientes. Incluye lactosa, sacarosa y glucosa como
azúcares fermentables. El tiosulfato de sodio permite la producción de ácido
sulfhídrico, que al reaccionar con el sulfato de hierro y amonio (fuente de
Fe³⁺), forma sulfuro de hierro de color negro. El rojo de fenol actúa como
indicador de pH, virando a amarillo en medio ácido, y el cloruro de sodio
mantiene el equilibrio osmótico. El agar solidifica el medio.
b. Técnica de siembra: Se utiliza un tubo con agar inclinado y fondo (butt).
Con una aguja de inoculación, se toma una colonia y se inocula primero en
el fondo del tubo mediante una punción y luego se estría la superficie
inclinada. El tubo se incuba a 35-37°C durante 18-24 horas.
2. Fundamento y la técnica de siembra en el medio de SIM
a. Fundamento: El medio SIM es semisólido y permite evaluar tres
características: producción de sulfuro de hidrógeno (H₂S), producción de
indol a partir del triptófano y motilidad bacteriana. La producción de H₂S
se detecta por la formación de un precipitado negro; el indol se detecta
añadiendo reactivo de Kovac, que produce una capa roja si es positivo; la
motilidad se observa por la difusión del crecimiento desde la línea de
inoculación.
b. Técnica de siembra: Por punción profunda utilizando aguja de inoculación
recta. Inocular el centro del tubo, y la punción debe abarcar 2 tercios de
profundidad del medio de cultivo desde la superficie.
3. ¿Qué pruebas utilizaría para confirmar la especie de Streptococcus pneumoniae?
Prueba de optoquina; Detección de antígeno capsular (pruebas serológicas que
detectan el polisacárido capsular específico de S. pneumoniae); PCR.
4. Fundamento de la prueba Citrato de Simmons: Esta prueba determina la
capacidad de un microorganismo para utilizar el citrato como única fuente de
carbono y las sales amónicas como única fuente de nitrógeno. Si la bacteria puede
metabolizar el citrato, se produce una alcalinización del medio, virando el color del
indicador de pH (azul de bromotimol) de verde a azul.
5. Fundamento de la prueba MIO: El medio MIO permite evaluar tres características:
● Motilidad: Bacterias móviles difunden desde la línea de inoculación,
enturbiando el medio.
● Producción de indol: Si la bacteria posee la enzima triptofanasa, degrada el
triptófano produciendo indol, que se detecta añadiendo reactivo de Kovac,
formando una capa roja en la superficie.
● Descarboxilación de ornitina: Si la bacteria puede descarboxilar la ornitina,
se produce una alcalinización del medio, cambiando el color del indicador
de pH (púrpura de bromocresol) de amarillo a púrpura.
Interpretación de resultados.
TSI: Observar el color del medio de cultivo y la producción de gas.
● Superficie alcalina/profundidad ácida (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo
solamente fermenta la glucosa.
● Superficie ácida/Profundidad ácida (pico amarillo/fondo amarillo): el
microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa.
● Superficie alcalina/Profundidad alcalina (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo
es no fermentador de azúcares.
● La presencia de burbujas o la ruptura del medio de cultivo indican que el
microorganismo produce gas.
SIM: Observar la movilidad y el color del medio de cultivo. Luego realizar la prueba de
indol.
● Movilidad:
○ Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento más allá de la línea
de siembra.
○ Resultado negativo: crecimiento solamente en la línea de siembra.
● Producción de SH2:
○ Resultado positivo: ennegrecimiento del medio de cultivo a lo largo de la
línea de siembra o en todo el medio.
○ Resultado negativo: el medio permanece sin cambio de color.
● Prueba del indol: Agregar al medio de cultivo 3 a 5 gotas de Indol Reactivo.
○ Resultado positivo: color rojo.
○ Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece
incoloro-amarillento.
REACCIONES FEBRILES
conjunto de pruebas de laboratorio serológicas (reacciones de aglutinación) útiles en
países en vías desarrollo como México, pero con limitaciones por sus reacciones cruzadas
con otras bacterias y falsos positivos incluso en proceso autoinmunes o falsos negativos
por uso temprano de antibióticos, corticoesteroides, medición temprana de anticuerpos (en
la 1ª. Semana de enfermedad), inmunodeficiencias adquiridas o congénitas, portadores
crónicos de Salmonella typhi y problemas con la estandarización de la prueba. usa
antígenos de Proteus OX19 por su reacción cruzada.
Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando el organismo humano es invadido
por agentes bacterianos estos generan antígenos presentes en el suero del paciente y el
huésped responde produciendo anticuerpos aglutinantes contra ellos, los cuales se ponen
de manifiesto al entrar en contacto el anticuerpo con el antígeno específico de las
bacterias. Para la detección de los anticuerpos se usa el suero del enfermo y antígenos
purificados.
Para que los resultados tengan valor diagnóstico el título de ellos debe aumentar
consecutivamente y se requieren 2 muestra tomadas en periodo de 2- 4 semanas de
intervalo.
Estas pruebas pueden efectuarse de dos maneras diferentes
1. Aglutinación en placa (como prueba tamiz): si se hace cuidadosamente, sirve como
prueba de aglutinación completa. Las reacciones dudosas deben repetirse con la
aglutinación en tubo.
2. Aglutinación en tubo: Es más segura, además las reacciones cruzadas son menos
frecuentes.
los microorganismos representantes típicos de los padecimientos con acceso febril, por lo
tanto, el grupo de antígenos febriles se presenta con las siguientes suspensiones:
● Salmonella typhi Antígeno somático O
● Salmonella typhi Antígeno flagelar H
● Salmonella paratyphi Antígeno flagelar A
● Salmonella paratyphi Antígeno flagelar B
● Brucella abortus Antígeno somático
● Proteus OX19 Antígeno somático
Cuatro serotipos de salmonella que causan fiebre entérica se identifican en el laboratorio:
Salmonella paratyphi A (serogrupo A), Salmonella paratyphi B (serogrupo B), Salmolla
choleraesuis (serogrupo C1) y Salmonella typhi (serogrupo D).
FIEBRE TIFOIDEA
La causa Salmonella typhi vía oral llegan a células M de intestino delgado, entran a
linfáticos donde proliferan en macrófagos, folículos linfáticos de intestino y circulación
sanguínea para diseminarse, se excretan por heces y bilis; posterior a 10-14 días de
incubación se presenta fiebre elevada, malestar general, cefalea, estreñimiento, mialgias,
bradicardia, hepato y esplenomegalia. La Salmonella typhi puede causar enterocolitis y
septicemia.
Factores de riesgo:
Periodo de latencia: 30 días.
Cuadro clínico: Nauseas, vomitos, diarrea, mala digestión, mala absorción, dolor
abdominal, intolerancia alimenticia (eso en el tracto gastrointestinal); crecimiento,
inflamación, ulceración (en los ganglios linfáticos); exantema rosado.
Tratamiento: Cloranfenicol; Ampicilina; Trimetroprim; Eritromicina.
Prevención: Vacuna
En Fiebre Tifoidea las aglutininas aumentan de manera brusca en 2da. Y 3ª. Semana de
infección y el ensayo de aglutinación de Widal o Reacción de Widal se basa en la
detección de anticuerpos en el suero de los pacientes a los antígenos O (LPS)y
H(flagelar). Se requieren 2 muestras de suero con intervalo 7-10 días para mostrar
elevación del título de anticuerpos.
INTERPRETACIÓN. Debe ser interpretado en el contexto clínico del paciente se debe
conocer la prevalencia de la enfermedad en el área geográfica, se considera positivo un
título contra antígeno O de 1: 320 en zona no endémica y en zona endémica como México
antígeno O y H de 1: 160 indica una gran probabilidad de enfermedad activa, mientras
tanto los estudios complementarios deberán confirmar el diagnóstico y reorientar el
tratamiento.
Otros métodos diagnósticos en Fiebre Tifoidea Biometría hemática 1ª semana leucopenia
con eosinopenia y linfocitosis relativa, hemocultivo finales 1ª y en 2ª semana positivo da un
diagnóstico definitivo; 2da. Semana cultivo de médula ósea, orina y heces positivos,
Pruebas de función hepática con transaminasas elevadas.
BRUCELOSIS
Fiebre de malta, fiebre ondulante (episodios recurrentes de fiebre que alternan con
períodos asintomáticos), Fiebre de Bang o Fiebre del mediterráneo) es una zoonosis
causada por género Brucella en el ser humano los más frecuentes Brucella melitensis en
98% y Brucela abortus en 2 % se transmite por ingesta de leche y derivados no
pasteurizados presenta cuadro clínico agudo con síndrome febril e invasión hígado, bazo y
ganglios linfáticos y forma crónica.
Factores de riesgo: Contacto estrecho con infectados; personal de salud; laboratoristas;
ingesta de alimento no pasteurizado; veterinarios; plantas procesadoras; cría de animales.
Periodo de incubación: 1 semana a 3 meses.
Modo de transmisión: Inhalación, ingesta de alimento contaminado, ocupacional (personal
de salud)
Manifestaciones clínicas: Fiebre ondulante y crónica; sudoración nocturna; dolor muscular;
anorexia; disminución de peso; fatiga; cefalea; endocarditis; afección valvular; insuficiencia
cardíaca; arritmia cardíaca.
Tratamiento: Estreptomicina; Tetraciclina; Rifampicina; Sulfas. También se recomienda
vigilancia dos años más luego del Tx.
Métodos serológicos para el diagnóstico probable aglutinación positiva con antígeno Rosa
de Bengala, confirmación con prueba de aglutinación estándar y en presencia de 2-
mercaptoetanol y posibilidad o no a hemocultivo.
La reacción de Huddleson dentro de las reacciones febriles aportan sólo un diagnóstico
presuntivo con la aglutinación rápida en placa para Brucella, se utiliza una suspensión de
Ag de Brucella abortus para buscar anticuerpos. La interpretación en zona endémica
títulos de seropositividad de 1: 160 o superiores en fases iniciales de la enfermedad.
RICKETTSIOSIS
enfermedades como el Grupo de Fiebres manchadas agente Rickettsia rickettsii y Grupo
de Fiebres Tíficas agente Rickettsia prowazekii, son consideradas zoonosis transmitida por
picadura o contaminación de picadura con heces de vectores como pulgas, garrapatas y
piojos estos últimos causan Tifus epidémico.
Rickettsia rickettsii
Vector: Pulga, garrapata y piojo.
Modo de transmisión: Picadura de insecto infectado; ingestión de carne contaminada.
Hospedador: Garrapata; piojo; gato; perro; pulga.
Periodo de incubación: 7 días.
Factores de riesgo: Exposición a garrapatas infectadas; presencia de mascotas infestadas;
residencia en zonas endémicas; edad avanzada, sexo masculino, deficiencia de G6PD.
Manifestaciones clínicas: Exantema (centrípeto): Aparece en las muñecas y tobillos. Fiebre
>39ºC, cefalea, mialgias, vómitos, hiporexia.
Tratamiento: Quinolona; Doxiciclina; Tetraciclina; Eritromicina.
Medidas preventivas: Evitar áreas infestadas; uso de repelentes; usar ropa de manga
larga, pantalones largos y calzado cerrado; después de actividades al aire libre,
inspeccionar cuidadosamente el cuerpo y la ropa para detectar y eliminar garrapatas;
revisar regularmente a las mascotas para detectar garrapatas.
Tifus epidémico (Rickettsia prowazekii)
Vector: El piojo del cuerpo humano
Modo de transmisión: las heces infectadas del piojo entran en contacto con la piel a través
de heridas o al rascarse las picaduras.
Hosperador: Huésped humano
Periodo de incubación: 7-14 días
Factores de riesgo: Hacinamiento, mala higiene, desnutrición y pobreza extrema
Manifestaciones clínicas: Fiebre 40ºC, cefalea intensa, escalofríos, mialgias. Erupción
cutánea que aparece entre el cuarto y sexto día, comenzando en el tórax y extendiéndose
a extremidades, respetando palmas y plantas.
Tratamiento: Doxiciclina.
Medidas preventivas: Higiene personal, control de vectores, mejoras sanitarias, educación
comunitaria.
La reacción de Weil Felix se basa en la capacidad del suero del paciente infectado por
Rickettsias para aglutinar cepa de Proteus OX-19 por reacción cruzada, es decir es un
antígeno común entre Proteus OX 19 y Rickettsias por lo que es poco sensible y específica
y deben realizarse pruebas para un diagnóstico confirmatorio como fijación de
complemento, hemaglutinación indirecta, inmunofluorescencia directa e indirecta.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuándo está indicado solicitar Reacciones Febriles? Las reacciones febriles se
solicitan cuando se sospechan infecciones bacterianas que cursan con fiebre,
especialmente en regiones donde estas enfermedades son endémicas. Son útiles
como pruebas de tamizaje en casos de fiebre de origen desconocido.
2. ¿Cuántas técnicas existen para la determinación de las reacciones febriles,
descríbalas?
a. Reacción de Widal: Detecta anticuerpos contra antígenos O y H de
Salmonella typhi mediante aglutinación en tubo.
b. Reacción de Huddleson: Utiliza aglutinación en lámina para detectar
anticuerpos contra Brucella spp.
c. Reacción de Weil-Felix: Emplea cepas de Proteus (OX19, OX2, OXK) para
detectar anticuerpos contra Rickettsia spp.
3. ¿Cuáles son los antígenos detectables en las Reacciones Febriles?
a. Salmonella typhi: Antígenos somáticos (O) y flagelares (H).
b. Brucella abortus: Antígenos de superficie específicos.
c. Proteus OX19, OX2, OXK: Antígenos utilizados en la reacción de Weil-Felix
para detectar anticuerpos contra Rickettsia spp.
4. ¿Por qué se utiliza el antígeno Proteus 0X19 para el diagnóstico de Rickettsiosis? El
antígeno Proteus OX19 se utiliza debido a la reacción cruzada entre ciertos
antígenos de Proteus y Rickettsia spp. Esta similitud antigénica permite que los
anticuerpos contra Rickettsia reaccionen con los antígenos de Proteus en la prueba
de Weil-Felix, facilitando la detección serológica de rickettsiosis.
5. ¿Qué muestras biológicas son de utilidad para el diagnóstico de Fiebre tifoidea,
Brucelosis y Rickettsiosis?
a. Fiebre tifoidea: Se pueden utilizar muestras de sangre, médula ósea, heces u
orina para cultivos bacterianos. El cultivo de médula ósea es el más sensible.
b. Brucelosis: La sangre es la muestra más común para cultivos y pruebas
serológicas, como la prueba de Rosa de Bengala.
c. Rickettsiosis: Se utilizan muestras de suero para pruebas serológicas, como
la inmunofluorescencia indirecta, y en algunos casos, biopsias de piel para
detección directa del patógeno.