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Técnicas de Cromatografía y Detección

El documento aborda diversos aspectos de la cromatografía, incluyendo tipos de detectores, características de fases estacionarias y móviles, y métodos de separación para compuestos orgánicos. Se discuten técnicas específicas como HPLC y cromatografía de gases, además de proporcionar ejemplos de condiciones de separación y análisis de ácidos orgánicos en café. También se incluyen cálculos y procedimientos para determinar la concentración de analitos en soluciones.
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Técnicas de Cromatografía y Detección

El documento aborda diversos aspectos de la cromatografía, incluyendo tipos de detectores, características de fases estacionarias y móviles, y métodos de separación para compuestos orgánicos. Se discuten técnicas específicas como HPLC y cromatografía de gases, además de proporcionar ejemplos de condiciones de separación y análisis de ácidos orgánicos en café. También se incluyen cálculos y procedimientos para determinar la concentración de analitos en soluciones.
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FINAL INSTRUMENTAL

1. ¿Cuál es el detector más común en CG?

Ionización de llama

2. ¿Cuál de las siguientes características NO corresponden a las fases enlazadas?

Formar enlaces con el analito

3. Indique cuál de los siguientes grupos funcionales tiene la menor polaridad

Halógeno

4. ¿Qué tipo de cromatografía es útil para separar compuestos no polares?

Fase Normal

5. Indique de qué forma se puede activar la sílica gel

Por calentamiento a 110°C

6. Las interacciones de moléculas orgánicas no polares y la superficie de adsorbente


son

Van der Waals

7. Los recubrimientos de fase unida químicamente más utilizados son:

Dioles

8. En la superposición de bandas, para mejorar la resolución debemos aumentar los


valores de:

Ninguna es correcta (factor de capacidad, factor de selectividad, coeficiente de distribución)

9. Tipo de FE utilizada en un sistema de fase reversa

Fenilsililo

10. La ley de Beer se cumple cuando:

La luz es monocromática y las especies adsorbentes NO interactúan unas con otras

11. Para la región ultravioleta deben utilizarse celdas del siguiente material:

Cuarzo

12. Cuál de la siguiente mezcla combustible oxidante produce la mayor temperatura

Acetileno-oxígeno

13. La elevada especificidad de la EAA se debe al siguiente componente:

Fuentes

14. Para la región visible, qué lámpara debemos utilizar


Lámpara de filamento de Tungsteno

15. Cuál NO es una característica de una lámpara de descarga sin electrodos

Produce menor intensidad y tubo de cuarzo lleno de neón

16. Tipo de detector que consta de una unión pn

Diodo de silicio

17. Detector IR que se basa en la dilatación de un sólido, gas o líquido.

Celda de golay

18. Fase estacionaria utiliza en cromatografía de absorción

Alúmina

19. Describe las velocidades de migración de los analitos en las columnas

Factor de capacidad

20. Qué tipo de relleno de columna nos permite una buena resolución y una buena
eficacia

Microporoso

21. Retiene la capa de adsorbente sobre una superficie lisa

Yeso y almidón

22. Reactivo revelador en cromatografía de capa fina para cationes del grupo II y III

H2S

23. Cromatografía líquida en la cual la separación de los analitos se basa en el


coeficiente de partición entre la FM y FE químicamente enlazada

Fase Reversa

24. Qué tipo de compuestos se pueden separar en un sistema de fase reversa

Polares

25. Evaluación que se realiza por comparación visual o midiendo el diámetro de la


mancha

Semicuantitativa

26. A la transferencia de un analito entre las fases estacionaria y móvil se le llama:

Constante de distribución

27. Las fases móviles utilizadas en cromatografía son:

Gaseosa, líquida y fluido supercrítico


28. Grupo funcional más polar utilizado en un sistema de fase normal

Diol

29. Cuál es la fase móvil utilizada en la separación de una mezcla de compuestos


fenólicos:

Hexano:acetato de etilo

30. Cómo se puede desactivar la silica gel

Impregnándola en agua

31. Detección semi-cuantitativa en cromatografía de papel y capa fina

Tamaño de la mancha

32. Primero en utilizar la cromatografía en papel

Martin

33. Por la interacción de la FM y el soluto, la cromatografía puede ser

Afinidad, hidrofóbica, intercambio ionico, fase normal y reversa

34. Fase enlazada utilizada en un sistema de fase reversa

Fenilsililo y octilsililo

35. Interacciones que se producen entre moléculas orgánicas no polares y la superficie


de adsorbente

Van der Waals

36. FE más utilizada en cromatografía Flash

Silica gel

37. Útil para el análisis cualitativo y cuantitativo

Cromatograma

38. Cuál de las siguientes características NO corresponden con las fases enlazadas

Formar enlaces con el analito

39. Qué adsorbente tiene el mayor poder de adsorción

Carbón vegetal

40. Grupo funcional presente en una cromatografía de interacción hidrofóbica

Éter, fenilo, propilo (todas son correctas)

41. Fase enlazada utilizada en un sistema de fase normal

Diol, ciano
42. Cuál es la FE más polar

Alúmina

43. Al disminuir la presión:

Disminuye el punto de ebullición de un compuesto

44. Cromatografía que se fundamenta en las afinidades de equilibrios de adsorción y


partición

Capa fina

45. Al disminuir el tamaño de partícula en cromatografía “Flash”:

Aumenta la pureza, aumenta la velocidad, aumenta la resolución

46. Detector utilizado para la identificación de ácido fórmico en miel

Conductividad térmica

47. Detector selectivo para compuestos orgánicos que contienen fósforo y nitrógeno

Termoiónico

48. Fase estacionaria que separa cocaína por cromatografía de gases

Ninguna es correcta: (SE-30, OV-17, OV-210, Carbowax 20M)

49. Efecto directamente porporcional al diámetro de las particlas del relleno de una
columna

Transferencia de masa

50. Componente NO común, a las diferentes técnicas de separación cromatográficas:

Columna

51. Para la separación de una mezcla de fitoesteroles por CG indique quien tiene el
amyor tR

B-sitosterol

52. Fase enlazada utilizada en un sistema de fase normal

Nitrilada

53. Tipo de modificador de fase móvil que suprime la ionización de los analitos

Acidificador

54. FE que separa: nitrocompuestos y aminoácidos por HPLC en fase normal

Fase reversa Rp-18

55. Columna que se utiliza en la separación de los insecticidas


WCOT

56. Fuente de radiación IR que consiste en una barra de carburo de silicio

Calentador globar

57. Cuál de los siguientes dispositivos NO es un componente de un instrumento IR-TF

Monocromador

58. Cuál de los siguientes enlaces adsorberá radiación de mayor número de onda

Triple

59. En espectroscopia del infrarrojo la muestra obtenida se debe a

La energía absorbida por vibración de moléculas

60. La región de la huella es útil para

Identificar plenamente al compuesto

61. Fuente que se constituye de mezclas de óxidos fundidos y opera a temperaturas a


1500°C

Nerts

62. Qué tipo de pérdida se producen cuando un haz de luz incide en un recipiente de
vidrio, cuando se analizan diferentes muestras con un equipo UV/VIS.

Reflexión y dispersión

63. Modelo de la espectroscopia IR en la cual una molécula puede absorber o emitir luz
entre dos niveles energéticos sucesivos

Oscilador no armónico

Segunda Serie
1. Ejemplifique como se cuantifica en cromatografía de gases o HPLC
• Método de adición estándar/
• Curva de calibración de un estándar y ley de beer
• Integrando las arcas de los picos / bandas
2. ¿Cuáles fueron los compuestos prueba que utilizo mc raynolds y como clasifico las
fases estacionarias liquidas?
1. Benceno – Aromático
2. n-Butanol – Alcohol
3. 2-Pentanona – Cetona
4. Nitropropano – Compuesto nitro
5. Piridina – Base nitrogenada aromática
6. 2-metil-2-pentanol
7. 1-yodobutano
8. 2-octino
9. 1,4-dioxano
10. cis-hydrindano

Polaridad

Fases no polares: entre 0 y 100


Fases de polaridad intermedia: entre 100 y 400
Fases altamente polares: mayores a 400

3. Para cada ácido orgánico en café, indique las condiciones de separación adecuadas
para cada técnica cromatográfica
Condición de separación Cromatografía de gases Cromatografía HPLC
Tipo de columna Supelco DB-1/30 intercambio Supelco Gel
CGCOH
Tipo de fase móvil Helio Solución de H₃PO₄ 0.01 N o
agua
Caudal y temperatura 1.5 ml/min 100-150 °C 0.5–0.6 mL/min 40 °C (30-
65°C)
Muestra aplicada y tiempo 35 min 20 / 30 min
de análisis
Tipo de detector y longitud Detector FID (ionización de Detector UV-VIS, λ = 210 nm
de onda flama)

Explique cual fue el mejor método y quien de los analitos tiene el menor y mayor tR de cada
una

HPLC: Mejor opción en general para ácidos orgánicos en café: no requiere derivatización, se
usa en fase reversa, alta sensibilidad en UV, y permite analizar directamente muestras
acuosas. HPLC es el método más apropiado para analizar ácidos orgánicos en café, por su
mayor versatilidad, menor preparación de muestra y mayor compatibilidad con estos
compuestos polares.

¿Qué analito tuvo el menor y mayor tiempo de retención (tR)?

A. En HPLC (fase reversa, columna C18):

• tR menor (eluyen primero):

Ácido cafeico o cítrico (dependiendo del pH), por ser más polar → interaccionan menos con la
fase estacionaria apolar.

• tR mayor (eluyen último):

Ácido ferúlico o siríngico, debido a su mayor tamaño y menor polaridad relativa →


interaccionan más con la columna C18.

El orden general típico en fase reversa para ácidos fenólicos:

Cafeico < Siríngico < Ferúlico

B. En Cromatografía de Gases (GC, con derivatización):

• tR menor (eluyen primero):

Ácido de menor peso molecular y menor punto de ebullición → por ejemplo, ácido acético (si
estuviera) o el derivado metílico del ácido cafeico.

• tR mayor (eluyen último):

Ácidos con más masa o ramificaciones (ej. ácido ferúlico metilado), debido a mayor punto de
ebullición y mayor interacción con la FE.

4. Indique el orden de elución y las condiciones de separación del acido cafeico,


ferúlico y siringico

Tipo de columna: Kromasil 18


Fase Móvil: Acetonitrilo : Acido acetico (4%) agua
Temperatura: 25°C
Cantidad de muestra aplicada: 20 µL
Tipo de detector y longitud de onda: UV – 280 nm
Orden de elusión de los analitos: Cafeico – Siríngico – Ferúlico
5. Una muestra de 0.6g de una aleación fue disuelta en ácido, tratada con exceso de
peryodato y calentada para oxidar cualquier manganeso presente al esta +7 de
acuerdo a la reacción

5IO4+ 2Mn+2 + 3H2O = 2MnO4 +5IO3 +6H

La solución resultante se diluyo a 250 ml en un frasco volumétrico. Se alcanzo de color entre


la solución diluida y una solución de KMnO4 de 8.25x10-4 M, cuando la trayectoria de la luz a
través de la solución problema fue de 5,20 cm. Mientras que para la solución patrón b=1 cm,
Calcule el % de magnesio en la aleación
6. Muchas aminas forman sales con el acido pierico (c6H3N3O7 / PM= 229.1) en
soluciones de etanol a una longitud de onda de 380 nm, absortividad molar de
1.35x10’4 una muestra de amina desconocida se convirtió en el picrato y la sal se
secó. Se disolvieron 16.20 mg de esta sal en 100 ml de etanol y 10 ml de esta solución
se diluyeron a 100l, la absorbancia de esta solución fue de 0.624 a 380 nm ¿Cuál es el
peso molecular de la amina?

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