BIOQUIMICA II

INFORME: Análisis de los niveles de amilasa,

CK-MB y LDH
Presentado por:
-Chambilla Aguilar Gian Cristhian
-Llano Pachacutec Yeffer Javier
-Torrez Mamani Jose Miguel
-Valdez Herrera Iara Makerlyn
-Vargas Mercado Rodrigo Wenceslao

Docente: Choque Huanca Magda

Paralelo: G-1

Fecha:18/05/2025
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
 Analizar los niveles séricos de amilasa, Creatin Cinasa y Lactato Deshidrogenasa y
su correlación con enfermedades asociadas a su elevación y disminución, en
estudiantes de Medicina, del curso de Bioquímica de grupo G1.

OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Evaluar el incremento de la enzima amilasa en patologías pancreáticas,
específicamente en la pancreatitis aguda.
 Analizar los niveles de Creatina Cinasa en casos elevados, y su relevancia en la
salud cardiaca.
 Determinar que enfermedades posibles puede presentar una elevación y
disminución de la enzima Lactato Deshidrogenasa.
MARCO TEORICO
ANALISIS DE LOS NIVELES DE AMILAS, CK- MB Y LDH
1. AMILASA SERICA:
1.1. DEFINICIÓN:
Según (RE del Laboratorio), lo define como una métalo enzima que necesita de calcio para
romper los enlaces alfa 1–4 glucosídicos de los polisacáridos (almidón glucógeno)
En otra definición, menciona que es una enzima hidrolasa encargada de catalizar la
degradación del almidón y el glucógeno en moléculas más simples como la maltosa y otros
oligosacáridos. Se encuentra presente principalmente en el páncreas (amilasa pancreática)
y en las glándulas salivales (amilasa salival), siendo producida y secretada hacia el tubo
digestivo como parte del proceso de digestión de carbohidratos.
1.2 ISOENZIMAS DE AMILASA
1.2.1. Amilasa salival (S-amilasa o AMY1):
 Origen: Se produce en las glándulas salivales.
 Función: Inicia la digestión del almidón en la boca, descomponiéndolo en azúcares
más simples.
 Características clínicas: Puede elevarse en trastornos que afectan las glándulas
salivales, como la parotiditis (paperas), y en algunas condiciones sistémicas como
insuficiencia renal.
1.2.2. Amilasa pancreática (P-amilasa o AMY2):
 Origen: Se sintetiza en el páncreas exocrino.
 Función: Continúa la digestión del almidón en el intestino delgado.
 Características clínicas: Su elevación es más específica de patologías pancreáticas,
como la pancreatitis aguda, obstrucción de los conductos pancreáticos o trauma
pancreático.
1.3. MEDICIÓN DE LA AMILASA SÉRICA
La amilasa sérica se mide mediante un análisis bioquímico en sangre, utilizando muestras
de suero obtenidas tras centrifugación de la sangre venosa. Existen varios métodos de
laboratorio para su determinación, siendo los más comunes:
a). Método colorimétrico (cinético o enzimático):
 Basado en la actividad catalítica de la amilasa sobre un sustrato sintético (por
ejemplo, etilidén-G7PNP).
  Al reaccionar, se libera un producto coloreado cuya intensidad se mide mediante
espectrofotometría.
 La velocidad de cambio de absorbancia es proporcional a la concentración de
amilasa en la muestra.
b). Método enzimático automatizado:
 Se realiza en analizadores clínicos automatizados.
 Más específico, rápido y con menor interferencia que métodos manuales.
c). Electroforesis o inmunoensayo (para isoenzimas):
 Permiten diferenciar entre amilasa pancreática y salival cuando se requiere mayor
especificidad diagnóstica.
1.4. REACCIÓN QUÍMICA DE AMILASA SERICA
La amilasa cataliza la conversión del almidón o glucógeno en maltosa (un disacárido
formado por dos unidades de glucosa). La reacción general es la siguiente:

De la formula se puede determinar que:

 La fórmula (C₆H₁₀O₅)ₙ: Representa el almidón o glucógeno, que son polímeros de
glucosa.
 nH₂O: El agua necesaria para romper los enlaces glucosídicos.
 C₆H₁₂O₆ (Maltosa): Producto final, que es un disacárido compuesto por dos
moléculas de glucosa.
1.4. VALORES DE REFERENCIA
- Hasta 120 UA/dl
1.5 ENFERMEDADES CON NIVELES SUPERIORES E INFERIORES AL PARAMETRO NORMAL.
1.5.1 enfermedades con niveles superiores al normal

 Pancreatitis aguda
 Pancreatitis crónica (fase aguda)
 Obstrucción del conducto pancreático
 Cáncer de páncreas
 Parotiditis (paperas)
 Obstrucción intestinal
 Isquemia mesentérica
1.5.1 enfermedades con niveles inferiores al normal

 Insuficiencia pancreática exocrina

 Fibrosis quística
 Pancreatectomía (extirpación quirúrgica del páncreas)
 Hepatitis grave o enfermedad hepática avanzada
 Hipotiroidismo
 Daño pancreático extenso en pancreatitis crónica
 Cáncer de páncreas en etapa avanzada (cuando el tejido funcional está destruido)
 Desnutrición severa

2. ENZIMA LIPASA
2.1 DEFINICION:
Según (RE del laboratorio), menciona que la lipasa es una enzima tipo hidrolasa producida
por el páncreas que opera en forma óptima, en el lumen del intestino delgado.
Función:
Hidrolizar los triglicéridos, de la dieta que han sido emulsificadas por ácidos biliares y
ayudan a la absorción de grasas en el intestino delgado.
2.2. VALORES DE REFERENCIA
- Es de 10 a 150 UI/I
2.3. NIVELES SUPERIOR AL NORMAL DE LA LIPASA

 Pancreatitis aguda
 Pancreatitis crónica (fase aguda)
 Obstrucción del conducto pancreático o biliar
 Cáncer de páncreas
 Colecistitis aguda
 Isquemia intestinal (infarto mesentérico)
 Úlcera péptica perforada
 Apendicitis complicada
 Peritonitis
 Uso de ciertos medicamentos (por ejemplo: opiáceos, tiazidas, corticosteroides)

3. DETERMINACION DE CREATIN CINASA

3.1. DEFINICION:
La creatina cinasa (CK) es una enzima que cataliza la transferencia de un grupo fosfato del
ATP a la creatina, formando fosfocreatina y ADP. Esta reacción es esencial para el
almacenamiento y liberación rápida de energía en tejidos con alta demanda energética.
3.2. FORMULA DE REACCION

De la formula se puede determinar que:

 Fosfocreatina (CrP): Es una molécula que almacena energía en el músculo y el

cerebro, donando un grupo fosfato a ADP para generar ATP rápidamente,
especialmente durante esfuerzos físicos intensos.
 ADP (Adenosín difosfato): El sustrato que recibe el grupo fosfato.
 ATP (Adenosín trifosfato): La molécula que proporciona energía a las células.
 Creatina: El producto final, que puede ser reciclada para regenerar fosfocreatina.

3.3 TIPOS DE ISOENZIMAS:

La CK tiene varias isoenzimas según el tejido en que se encuentra:
 CK-MM: Es la isoenzima más abundante en el cuerpo, representando alrededor del
95% de la CK total en personas sanas. Se encuentra principalmente en los músculos
esqueléticos. Su presencia en sangre puede aumentar significativamente en casos
de daño muscular, como traumatismos, ejercicio intenso, distrofias musculares o
rabdomiólisis. Niveles elevados de CK-MM indican daño o estrés en el tejido
muscular esquelético.
 CK-MB: Se encuentra en mayor concentración en el músculo cardíaco. Aunque
constituye una pequeña fracción de la CK total en condiciones normales, su
elevación en sangre es un indicador sensible de daño al corazón, especialmente en
casos de infarto agudo de miocardio. Por eso, CK-MB fue durante muchos años una
prueba clave para el diagnóstico de ataques cardíacos, aunque hoy ha sido
parcialmente reemplazada por marcadores más específicos como la troponina.
 CK-BB: Es la isoenzima que predomina en el cerebro y en tejidos de origen
neurogénico como el intestino y la próstata. Normalmente no se encuentra en
grandes cantidades en sangre, pero puede aumentar en casos de daño cerebral
(como traumatismos craneoencefálicos, accidentes cerebrovasculares o ciertos
tumores) o en algunas enfermedades neurológicas. Su medición es menos común
en la práctica clínica rutinaria.
3.4 FORMULA DE MEDICION
 Factor x (d – b)
3.5 VALORES DE REFERENCIA DE CREATIN CINSA
3.5.1. Valores de referencia:
Hombres: 5 – 100 UI/L
Mujeres: 10 – 70 UI/L
3.5.2. Valores normales de isoenzima de creatin cinasa
CKMM: 97%- 100%
CKMB: 0% - 3%
CKBB: 0%
3.6 ENFERMEDADES ASOCIADA A CREATIN CINASA
3.6.1. NIVELES DE CREATIN CINASA MB SUPERIORES AL NORMAL
 Infarto agudo de miocardio
 Miocarditis (inflamación del corazón)
 Cirugía cardíaca o cateterismo
 Traumatismo cardíaco
 Taquicardias prolongadas o insuficiencia cardíaca aguda
3.6.2. NIVELES DE CREATIN CINASA MM SUPERIORES AL NORMAL
 Rabdomiólisis (descomposición muscular grave)
 Distrofias musculares (como la distrofia muscular de Duchenne)
 Polimiositis / Dermatomiositis (enfermedades autoinmunes musculares)
 Traumatismos musculares o esfuerzo físico intenso
 Convulsiones prolongadas
 Hipotiroidismo
 Inyecciones intramusculares o cirugía muscular reciente
3.6.3. NIVELES DE CREATIN CINASA BB SUPERIORES AL NORMAL
 Traumatismo craneoencefálico
 Accidente cerebrovascular (ACV)
 Tumores cerebrales o metastásicos
 Enfermedades neurodegenerativas graves (menos frecuente)
 Cáncer de próstata o pulmón (algunos tipos pueden secretarla)
 Shock cerebral o hipoxia severa
4. DETERMINACION DE LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)
4.1. DEFINICION:
Es una enzima presente en casi todos los tejidos del cuerpo, cuya función principal es
catalizar la conversión reversible de piruvato en lactato, utilizando el cofactor NADH.
Esta reacción es esencial en el metabolismo energético, especialmente en condiciones
de bajo oxígeno (anaerobiosis). La LDH se libera al torrente sanguíneo cuando hay
daño celular o tisular, por lo que su concentración en sangre se utiliza como un
marcador inespecífico de lesión tisular, incluyendo infarto de miocardio, enfermedades
hepáticas, cáncer, anemias hemolíticas y otras condiciones. Existen cinco isoenzimas
de LDH (LDH-1 a LDH-5), cada una predominante en diferentes órganos, lo que permite
orientar el origen del daño según cuál esté elevada.
4.2. REACCION QUIMICA
Es una reacción reversible que ocurre en el metabolismo de la glucosa, especialmente
durante la glicólisis y en condiciones de baja disponibilidad de oxígeno.

De la formula se puede determinar que:

 En condiciones anaerobias (falta de oxígeno), el piruvato producido por la
glucólisis se convierte en lactato, permitiendo la regeneración de NAD⁺, necesario
para que la glucólisis continúe.
 En condiciones aeróbicas, la reacción puede revertirse: el lactato es convertido
nuevamente en piruvato para ingresar al ciclo de Krebs y ser utilizado para producir
energía (ATP).
4.3. TIPOS DE ISOENZIMAS
LDH-1: Esta isoenzima está formada por cuatro subunidades de tipo H (corazón) y
predomina en tejidos con alta demanda de oxígeno, como el miocardio (corazón), los
glóbulos rojos y los riñones. Su aumento en sangre se asocia especialmente con infarto
agudo de miocardio, así como con anemias hemolíticas, ya que también se libera
cuando los glóbulos rojos se destruyen. En condiciones normales, su concentración es
menor que la de LDH-2, pero en un infarto cardíaco puede superarla (fenómeno
llamado "inversión de isoenzimas" o flipped pattern).
LDH-2: Compuesta por tres subunidades H y una M, LDH-2 es la isoenzima más
abundante en sangre en condiciones normales. Se encuentra principalmente en el
sistema reticuloendotelial, incluyendo el bazo, ganglios linfáticos y leucocitos. Un
aumento de LDH-2 se puede observar en anemias megaloblásticas, leucemias y
algunas infecciones sistémicas. Si bien su incremento es menos específico que el de
LDH-1, puede ayudar a identificar procesos hematológicos o inmunológicos.
LDH-3: Esta isoenzima se encuentra en órganos como el pulmón, las plaquetas, y
algunos órganos endocrinos. Su elevación es característica en enfermedades
pulmonares agudas como neumonía, embolia pulmonar o neumopatías intersticiales.
También puede aumentar en ciertos tipos de cáncer, especialmente cuando hay
 metástasis pulmonares o linfáticas. Es menos común que LDH-1 y LDH-5, pero puede
ser clave en diagnósticos pulmonares.
LDH-4: Formada por una subunidad H y tres M, la LDH-4 se encuentra
predominantemente en el hígado, el músculo esquelético y el páncreas. Su elevación
moderada puede observarse en hepatopatías leves a moderadas, miositis y en algunas
enfermedades pancreáticas. Aunque no es específica de un órgano, su aumento en
combinación con otras isoenzimas puede ayudar a identificar daño hepático o
muscular.
LDH-5: Compuesta exclusivamente por subunidades M, LDH-5 predomina en el hígado
y el músculo esquelético. Es la isoenzima que más se eleva en enfermedades hepáticas
graves como la hepatitis aguda, cirrosis avanzada o necrosis hepática masiva. También
se eleva en casos de lesión muscular extensa, como en traumatismos, distrofias
musculares o ejercicio extenuante. Su concentración suele ser mayor en personas con
daño hepático crónico o muscular severo.
4.4 MEDICION
 Diferencia de absorbancia x factor
4.5 VALORES DE REFERENCIA
 Valor normal: 230 a 460 UI/L
4.6. VALORES DE REFERENCIA DE LAS ISOENZIMAS DEL LACTATO DESHIDROGENASA
(LDH)

LDH1 17 a 27%
LDH2 27 a 37%
LDH3 17 a 25%
LDH4 3 a 8%
LDH5 0 a 5%

4.7. ENFERMEDADES ASOCIADOS A LOS VALORES SUPERIORES AL NORMAL DE LACTATO

DESHIDROGENASA (LDH)
 Infarto agudo de miocardio
 Insuficiencia cardíaca congestiva
 Miocarditis
 Accidente cerebrovascular (ACV)
 Traumatismos craneoencefálicos
 Tumores cerebrales
 Anemia hemolítica
 Anemia megaloblástica
  Leucemias

MATERIALES

MATERIALES Y EQUIPO

DENOMINACION UNIDADES
Espectrofotómetro/ Stat fax 1
Microcentrífuga 1
Gradilla 1

Torniquete 1
Puntilla para micropipeta 1
Plastilina 1
Tubo de hemólisis con EDTA 1
Gradillas 1
Micropipeta de 20-200 ul 1
Baño María 1

INSUMOS

DENOMINACION CANTIDAD

Reactivo de amilasa 1

Reactivo CK MB 1
Reactivo LDH 1

Cinta adhesiva 1

Guantes de látex 1 PAR

Jeringa estéril desechable 1

con aguja
#21(para adulto)

Torunda húmedas y secas 1

 PROCEDIMIENTO

edssds

Se inicio con la Llevamos a la Seguidamente

microcentrífuga rompemos el
extracción de muestra
durante 5 coagulo con una
sanguínea a un
minutos a 2000 puntilla.
compañero RPM

Tomado las medidas de

bioseguridad adecuadas
A una temperatura
para el paciente Hacemos pre encubar el reactivo
de 37 grados
de amilasa durante dos minutos
centígrados
en el espectrofotómetro

Mezclamos por
inmersión
Una vez ya pre encubados el
reactivo, añadimos 20 ul de suero

Esperamos la lectura
Dejamos en el
espectrofotómetro
durante 7 minutos

En nuestro caso
salió 89 UI/dL
 Hacemos
Para obtener los niveles de Vaciamos 0.5 ml de pre
creatin cinasa seguimos reactivo CK MB en un incubar
los siguientes pasos tubo de ensayo durante
algunos
minutos

Mezclamos por Sacamos el tubo y

Debemos de inmersión agregamos 50 ul de
tener listo suero al tubo de
nuestro suero ensayo
em el tubo de
Eppendorf

Esperamos durante
15minutos y
sacamos del
espectrofotómetro

En nuestro caso el CK-MB salió

14 U/L

Para la determinación de LDH

realizamos los siguientes pasos
 Hacemos pre Sacamos y
Vaciamos en un tubo de
encubar durante agregamos 1
ensayo 2 ml de reactivo
algunos minutos ml de suero
LDH

A 37gradoos
centígrados
Mezclamos por
inmersión

Esperamos durante 4
minutos

Sacamos y en nuestro
caso salió 348 UI/L
RESULTADOS

GRUPO AMILASA CK-MB LDH GENERO NOMBRE

110.1 UI/L 22 UI/L 904 UI/L Masculino DILAN

1

75 UI/L 23.3 UI/L 322 UI/L Femenino KATERIN

2

46 UI/L 16 UI/L 278 UI/L Femenino ANGELA

3

248 UI/L 1.5 UI/L 466 UI/L femenino PAOLA

4

89 UI/l 14 UI/L 348 UI/L Masculino RODRIGO

5

CASO CLINICO
Mujer de 45 años de edad con antecedentes de diabetes presenta dolor abdominal. La
paciente indica sedentarismo y consumo constante de alimentos de la calle.
Datos
Hemograma: 15.000 con desvió a la izquierda
Amilasa: 405 UI/dl
CPK-MB: 42 UI/L
Lactato deshidrogenasa (LDH): 750 UI/L
Diagnostico
En los análisis de laboratorio se reporta:
Leucocitosis (15.000/mm³) con desviación a la izquierda, lo que sugiere una respuesta
inflamatoria aguda,
Amilasa sérica elevada (405 U/L), valor marcadamente superior al rango normal,
LDH elevada (750 U/L), indicativa de daño celular o necrosis tisular.
Estos hallazgos orientan firmemente hacia un diagnóstico de pancreatitis aguda,
especialmente por la elevación significativa de amilasa y LDH, enzimas que aumentan en
respuesta a la lesión del tejido pancreático.
En este contexto, la LDH se incrementa debido a la necrosis celular provocada por la
inflamación intensa del páncreas. Durante una pancreatitis aguda, las enzimas
pancreáticas (como la amilasa y la lipasa) se activan de forma inapropiada dentro del
propio órgano, lo que conduce a autodigestión del tejido pancreático. Este proceso libera
contenido intracelular, entre ellos la LDH, hacia la circulación sanguínea.
El consumo frecuente de alimentos grasos o contaminados, combinado con un
metabolismo alterado por la diabetes, puede haber favorecido la formación de
microlitiasis biliar o bien un episodio de hipertrigliceridemia, ambas causas comunes de
pancreatitis.
Por lo tanto, los datos clínicos y paraclínicos respaldan el diagnóstico de pancreatitis aguda
de probable origen metabólico o biliar, con una respuesta inflamatoria sistémica activa.

DISCUSIÓN
Durante la presente práctica de laboratorio se abordó el estudio funcional y bioquímico de
tres enzimas fundamentales: amilasa, CK-MB (creatinfosfoquinasa MB) y LDH (lactato
deshidrogenasa). Estas enzimas representan herramientas clave en el análisis bioquímico
debido a su especificidad, función metabólica y expresión en tejidos particulares.
La amilasa es una enzima hidrolasa que actúa sobre los enlaces α-1,4 glucosídicos del
almidón y glucógeno. Su medición espectrofotométrica se basa en la pérdida del color del
complejo almidón-yodo, lo que permite cuantificar su actividad enzimática. En esta
práctica se reforzó la comprensión del mecanismo catalítico y la importancia de esta
enzima en procesos digestivos, destacando su aplicación en el análisis funcional sin
necesidad de asociarlo estrictamente con una patología.
En cuanto a la CK-MB, esta isoenzima de la creatina cinasa cumple una función esencial en
la transferencia de grupos fosfato desde el ATP hacia la creatina y viceversa, participando
activamente en el metabolismo energético muscular. Se enfatizó la comprensión de sus
isoformas (CK-MM, CK-BB y CK-MB) y su distribución tisular, lo que permitió al estudiante
comprender su uso como marcador de daño muscular y su papel bioquímico en tejidos de
alta demanda energética.
La LDH, por otro lado, cataliza la reacción reversible entre piruvato y lactato, utilizando
como cofactor NAD⁺/NADH. Se destacó su estructura tetramérica, compuesta por
subunidades H y M, y cómo su distribución en distintos tejidos permite distinguir entre las
isoenzimas LDH1 a LDH5. La técnica aplicada permitió visualizar la importancia de esta
enzima en la glicólisis anaeróbica y su utilidad como indicador de actividad metabólica.
En conjunto, el manejo de estas enzimas en el laboratorio permitió reforzar conceptos
clave sobre actividad enzimática, cinética, uso de espectrofotometría y aplicación del
método colorimétrico para la cuantificación de biomoléculas.
CONCLUSIÓN
La práctica realizada permitió consolidar los conocimientos teóricos sobre la función,
estructura y medición de las enzimas amilasa, CK-MB y LDH. A través del trabajo
experimental, se aplicaron técnicas colorimétricas y espectrofotométricas para evaluar su
actividad enzimática, lo cual favorece la comprensión integral del papel de estas enzimas
en el metabolismo celular.
Asimismo, se desarrollaron competencias prácticas en el manejo de muestras, reactivos y
equipos de laboratorio, fortaleciendo la capacidad analítica del estudiante. La correlación
entre teoría y práctica fomenta el pensamiento crítico y prepara al estudiante para
interpretar datos bioquímicos con rigor científico. Este enfoque experimental representa
un paso clave en la formación profesional en el área biomédica y en la comprensión de los
fundamentos de la bioquímica clínica.
CUESTIONARIO
Amilasa

1. ¿Cuál es el principal sustrato sobre el que actúa la amilasa?

a) Proteínas

b) Ácidos nucleicos

c) Polisacáridos como almidón y glucógeno

d) Lípidos

2. ¿En qué tipo de reacción participa la enzima amilasa?

a) Reacción redox

b) Hidrólisis de enlaces glucosídicos

c) Fosforilación oxidativa

d) Transaminación

CK-MB (Creatina Cinasa MB)

3. ¿Cuál es la función bioquímica de la creatina cinasa?

a) Catalizar la síntesis de proteínas musculares

b) Descomponer ácidos grasos en ATP

c) Transferir grupos fosfato entre creatina y ATP/ADP

d) Degradar el glucógeno en glucosa

4. ¿Qué porcentaje representa normalmente la isoenzima CK-MB en el suero?

a) 3–7%

b) 0–3%

c) 5–15%

d) 10–20%

LDH (Lactato deshidrogenasa)

5. ¿Qué reacción cataliza la enzima lactato deshidrogenasa (LDH)?

a) Conversión de lactato en piruvato y viceversa

b) Conversión de glucógeno en glucosa

c) Conversión de triglicéridos en glicerol

d) Síntesis de proteínas en el retículo

6. ¿Cuál es el cofactor que utiliza la LDH en su actividad catalítica?

a) NADP+

b) NAD+

c) FAD

d) ATP

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
o Murray, R. K., Bender, D. A., Botham, K. M., Kennelly, P. J., Rodwell, V. W., & Weil,
P. A. (2018). Harper: Bioquímica ilustrada (30.ª ed.). McGraw-Hill Education.
o (OMS), O. M. (2004). Manual de bioseguridad en el laboratorio.

o Re-10-lab-025. (2025). Bioquimica II v4. La Paz.

o
ANEXOS