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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL
PT. 8: DETERMINACIÓN DE CAFEÍNA EN BEBIDAS ENERGIZANTES POR
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR ULTRAVIOLETA
CURSO: LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA
DOCENTE: FERNANDO ANAYA MELÉNDEZ
ALUMNO: ALVARO ELÍAS ROJAS ADRIANZEN (22070180)
TURNO: MARTES (14:00 – 18:00)
N° DE ORDEN: 5
FECHA DE REALIZACIÓN: RECUPERACIÓN - 05/06/2024
FECHA DE ENTREGA: 12/06/2024
C.U. JUNIO – 2024
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ÍNDICE
RESUMEN………………………………………………………………………………………. 3
INTRODUCCIÓN……………………………………………………………………………….3
OBJETIVOS……………………………………………………………………………………...3
PRINCIPIOS TEÓRICOS……………………………………………………………………... 3
DETALLES EXPERIMENTALES……………………………………………………………..8
ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS………………………………………………16
CONCLUSIONES………………………………………………………………………………16
REFERENCIAS………………………………………………………………………………...16
ANEXOS………………………………………………………………………………………...17
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1. RESUMEN
Se determinó la concentración de cafeína en ppm en muestras de Volt y Guaraná por
espectrofotometría de absorción molecular ultravioleta. El grupo determinó una
concentración de cafeína en ppm de 420.23 en Volt y
176.16 en Guaraná La exactitud del método, expresada como error relativo, fue de
64% con respecto a la cafeína en el Volt, mientras que respecto del contenido de
cafeína en Guaraná no se pudo determinar ya que la empresa no indica en el
etiquetado cuánta cafeína tiene el producto.
2. INTRODUCCIÓN
La determinación de cafeína en Volt y Guaraná mediante espectrometría de absorción
ultravioleta se basa en la separación de interferencias de las muestras mediane agitación
por usando un agitador magnético. Luego, se prepararon, en fiolas de 50 mL, diluciones
de 1 y 2 mL de cada una de las muestras. De la misma forma, se prepararon patrones de
1, 5, 10 y 20 ppm de cafeína a partir de una solución madre de 1000 ppm de cafeína. Los
patrones se analizaron con el espectrofotómetro de un solo haz Genesys 50 para medir
absorbancia a una longitud de onda de 270 nm a diferentes concentraciones para una
realizar la curva de calibración. Finalmente, se colocaron las muestras en el
espectrofotómetro y se determinó la concentración de cafeína en cada una de las muestras
a partir de la curva de calibración.
3. OBJETIVOS
• Determinar la concentración de cafeína en dos bebidas energizantes.
• Determinar la exactitud y precisión del método
4. PRINCIPIOS TEÓRICOS
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4.1.Métodos ópticos de análisis
Los métodos ópticos de análisis se basan en la interacción de la materia con la
radiación electromagnética dentro del espectro ultravioleta, visible e infrarrojo, los
cuales abarcan una longitud de onda entre 180–380 nm, 380–780 nm y 0.78–50 µm,
respectivamente.
Cuando la radiación interactúa con la materia, los electrones en el estado fundamental
son promovidos a niveles de energía más altos por la absorción de energía. Dado que
los electrones no pueden permanecer en un estado excitado, regresan a sus niveles de
energía iniciales, emitiendo fotones (radiación). A estos procesos, se les conoce como
absorción y emisión, respectivamente.
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La cantidad de radiación emitida o absorbida a una longitud de onda determinada
permite identificar una sustancia, tal como puede verse en los espectros de emisión.
En particular, la espectroscopía de absorción, mide la cantidad de radiación absorbida
por una sustancia. Para esto se han formulado dos leyes: la ley de Lambert y la ley de
Beer. La ley de Lambert nos indica que la cantidad de luz absorbida por una
sustancia, depende del recorrido que deba hacer esta para atravesar el medio; por otro
lado, la ley de Beer nos indica que la cantidad de luz absorbida por una sustancia
depende su concentración. De ambas leyes surge la ley de Lambert-Beer:
𝑨 = 𝒂𝒃𝒄
La ley de Lambert-Beer define a la absorbancia (A) en función de tres parámetros: la
longitud que debe atravesar la luz (b), la concentración de la sustancia (c) y la
absortividad (a). La absorbancia es definida también como el logaritmo negativo de la
transmitancia, la cual es la fracción de luz que atraviesa el medio absorbente.
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𝑷
𝑻=
𝑷𝟎
𝑷
𝑨 = −𝒍𝒐𝒈𝑻 = −𝒍𝒐𝒈
𝑷𝟎
Dada la ley de Lambert-Beer, se puede trazar una curva de calibración de
absorbancia contra concentración (dados factores a y b constantes). La curva de
calibración nos permitirá determinar la concentración de un analito en una muestra
gráficamente, interceptando la una absorbancia con su concentración correspondiente.
[Link]ón
Para realizar un análisis por espectrofotometría se requieren una fuente de radiación
constante, un selector de longitud de onda, contenedores de muestra, un detector de
radiación y una unidad de lectura. Los equipos con estos componentes se conocen
como espectrómetros. Los selectores de longitud de onda consisten en una rejilla de
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difracción o filtros de absorción o interferencia, los cuales dejan pasar únicamente el
haz de luz de una longitud de onda determinado.
Los espectrofotómetros pueden ser de un solo haz o de doble haz. Los espectrómetros
de un solo haz tienen un solo compartimiento para colocar el blanco, luego retirarlo y
colocar la muestra.
Por otro lado, los espectrofotómetros de doble haz, tienen dos compartimientos para
colocar el blanco como la muestra a la vez, además de tener un espejo que divide el
rayo de luz incidente en dos.
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[Link]ía de absorción molecular ultravioleta en compuestos orgánicos
La espectroscopía ultravioleta solo es aplicable a compuestos conjugados (McMurry, 2012),
lo cual implica la presencia de enlaces dobles. Esto se debe a que, según Skoog (2015), los
electrones en enlaces dobles y triples de moléculas orgánicas no están unidos son más
fáciles de excitar, produciendo que los electrones de la orbital pi pasen a del mayor estado
de energía ocupado al menor estado de energía desocupado, produciéndose una excitación
de electrones. A los compuestos que absorben radiación en la región ultravioleta del
espectro se les conoce como cromóforos, cada uno de los cuales posee una longitud de onda
a la que tiene la máxima absorbancia. En particular, la cafeína presenta un máximo de
absorbancia en 273 nm de longitud de onda, anexo 2. Los datos de absorbancia de algunos
grupos funcionales se muestran en el anexo 3.
5. DETALLES EXPERIMENTALES
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Para la determinación de cafeína en las muestras de Volt y Guaraná, primero se preparó
una solución intermedia de 100 ppm a partir de 5mL la solución madre de 1000 ppm
usando una fiola de 50 mL.
𝑉(1000 ppm) = 50 mL(100 ppm)
𝑉 = 5 mL
A partir de dicha solución, se prepararon 4 patrones de 1, 5, 10 y 20 ppm diluyendo 1, 5,
10 y 20 mL de la solución intermedia hasta 100 mL
• Patrón 1
𝑉(100 ppm) = 100 mL(1 ppm)
𝑉 = 1mL
• Patrón 2
𝑉(100 ppm) = 100 mL(5 ppm)
𝑉 = 5 mL
• Patrón 3
𝑉(100 ppm) = 100 mL(10 ppm)
𝑉 = 10 mL
• Patrón 4
𝑉(100 ppm) = 100 mL(20 ppm)
𝑉 = 20 mL
Se usó agua como blanco, ya que todas las disoluciones se hicieron con esta.
Luego se prepararon las muestras, llevando 1 y 2 mL de cada una a 50 mL luego de
haberlas agitado por 20 minutos para eliminar el gas.
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Se colocaron los patrones y el blanco en el espectrofotómetro Genesys 50 a una longitud
de onda de 273 nm (máxima absorbancia para la cafeína) y se registraron los datos
mostrados en la pantalla del equipo.
Tabla 1. Absorbancia y concentración para los patrones
A partir de dicha tabla se trazó una curva de calibración y se calculó su ecuación
mediante una regresión lineal.
Gráfica 1. Curva de calibración
𝐴 = 𝑚𝐶 + 𝑏
𝑛 ∑ 𝐶𝑖 𝐴𝑖 − ∑ 𝐶𝑖 ∑ 𝐴𝑖
𝑚=
𝑛 ∑ 𝐶𝑖2 − (∑ 𝐶𝑖 )2
11
5(0 + 1 ∗ 0.079 + 5 ∗ 0.253 + 10 ∗ 0.525 + 20 ∗ 1.011) − (0 + 1 + 5 + 10 + 20)(0 + 0.079 + 0.253 + 1.011)
𝑚=
5(02 + 12 + 52 + 102 + 202 ) − (0 + 1 + 5 + 10 + 20)2
𝑚 = 0.0501
𝑏 = 𝐴̅ − 𝑚𝐶̅
0 + 0.079 + 0.253 + 0.525 + 1.011
𝐴̅ = = 0.3736
5
0 + 1 + 5 + 10 + 20
𝐶̅ = = 7.2
5
𝑏 = 0.3736 − 0.0501(7.2) = 0.0129
𝐴 = 0.0501𝐶 + 0.0129 … (1)
A partir de dicha ecuación, se calculó la concentración en cada muestra. Los resultados se
muestran en la 2.
• Volt
- Muestra de 1 mL
(0.449) = 0.0501(𝐶) + 0.0129
𝐶 = 8.705 𝑝𝑝𝑚
(1𝑚𝐿)(𝐶1 ) = 50 mL(8.705 ppm)
(𝐶1 ) = 435. 25 ppm
- Muestra de 2 mL
(0.825) = 0.0501(𝐶) + 0.0129
𝐶 = 16.210 𝑝𝑝𝑚
(𝐶2 )(2mL) = 50 mL(16.210 𝑝𝑝𝑚)
(𝐶2 ) = 405.24 ppm
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• Guaraná
- Muestra de 1 mL
(0.1999) = 0.0501(𝐶) + 0.0129
𝐶 = 3.733 𝑝𝑝𝑚
(𝐶1 )(1mL) = 50 mL(3.733 𝑝𝑝𝑚)
(𝐶1 ) = 186.63 ppm
- Muestra de 2 mL
(0.345) = 0.0501(𝐶) + 0.0129
𝐶 = 6.629 𝑝𝑝𝑚
(𝐶2 )(2mL) = 50 mL(6.629 𝑝𝑝𝑚)
(𝐶2 ) = 165.72 ppm
• Promedio
1. Volt
435.23 + 405.24
𝑥̅ =
2
𝑥̅ = 420.23
2. Guaraná
186.63 + 165.72
𝑥̅ =
2
𝑥̅ = 176.17
%Error
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1. Volt
En el anexo 5 se tiene la información necesaria para calcular las ppm de cafeína en la
muestra, que es de 256 ppm. Por lo tanto, el porcentaje de error será
|256 − 420.23|
%𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗ 100% = 64%
256
2. Guaraná
No se encontró información acerca de la cantidad de cafeína que trae la guaraná brindada
por la empresa.
Valor del grupo
3. Volt
𝑥̅ ± 2(𝑠) = 420.23 ± 2(𝑁𝑁) = 420.23
4. Guaraná
𝑥̅ ± 2(𝑠) = 176.17 ± 2(𝑁𝑁) = 176.17
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Gráfica 2. Diagrama de flujo del proceso
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Tabla 2. Tabla de resultados
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6. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Para el Volt, la cantidad de cafeína determinada está por encima de lo establecido por
INACAL para bebidas energizantes, de acuerdo con la Plataforma Digital del Estado
Peruano, que establece que las bebidas energizantes deben tener 35 mg de cafeína en 100
mL, lo que constituye 350 ppm de cafeína. Por otro lado, el análisis pudo resultar
equivocado por tomar las celdas del espectrofotómetro por el lado no opaco, sin embargo,
esto es poco probable. Por otro lado, la guaraná si cumpliría con la Norma Técnica
Peruana (NTP). Asimismo, el etiquetado de esta última no indica la cantidad de cafeína,
los que no puede establecerse una comparación con el resultado obtenido. Finalmente, al
trabajar con una sola muestra por todo el grupo, no puede establecerse variación para el
método empleado.
7. CONCLUSIONES
- La concentración de cafeína en Volt es 420.23 ppm, mientras que en Guaraná
es de 176.17 ppm
- La exactitud del método para Volt fue del 64%, mientras que para Guaraná no
se pudo determinar. No se puede especificar precisión del método ya que se
trabajó con una sola muestra.
8. REFERENCIA
1. Skoog AD, West DM, Holler JF, Crouch RS. Fundamentos de química analítica,
9a ed: Cengage Learning; 2015.
2. McMurry, J. Química Orgánica. 8ª ed: Cengage Learning: 2012.
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3. Plataforma digital del Estado Peruano (2022). Inacal define los requisitos de calidad
para las bebidas energizantes. [Link]
inacal-define-los-requisitos-de-calidad-para-las-bebidas-energizantes
9. ANEXOS
Anexo 1. Espectrofotómetro Genesys 50
Anexo 2. Características de absorción de algunos cromóforos
Anexo 3. Absorbancia contra longitud de onda para la cafeína
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Anexo 4. Estructura de la cafeína
Anexo 5. Información Nutricional de Volt