DPS-3 MICROBIOLOGÍA

INSTRUMENTAL Y EQUIPOS UTILIZADOS EN EL LM:

•Tubos
•Pipetas
• Frascos
• Otros
• Equipos

 TUBOS
Dentro de están:
 TUBOS DE ENSAYO:
- es el tipo + empleado
- Distintas medidas + utilizada es (18mm diámetro/160mm largo)
 Tubos de centrifugación
-Tiene un extremo convexo
-En el laboratorio de microbiología se usan para la siembra del cultivo y se usan tanto
para el crecimiento del inoculo en medio líquido y sólido
- En sólido, es necesario el agar; se coloca en plano inclinado para que
agar esté en fase licuada se solidifique volviéndose gelatina.

 Hay tubos de ensayo plásticos reforzados , son + empleados para la toma/transporte

de muestras en la clínica y se envía a laboratorio o para centrifugación
 Los tubos de vidrio son + utilizados para la generar cultivos, por 2 razones:
- Siempre construidos en vidrio térmico resistente a altas temperaturas
- Vidrio totalmente translúcido, sin escala numérica (para permitir el paso
de Luz y dejar ver la turbidez en medio líquido)
 TUBOS FALCON
1. Cilíndrico-cónicos (apical)
2. Siempre-Construidos en plástico reforzado ideal para soportar las presiones de
centrifugación a las que son sometidos
3. Hay 2 medidas las de 15ml y 45 ml
 TUBOS EPENDOR
1. Aspecto cilíndrico-cónicos
2. Siempre- construidos en plástico o polietileno
3. Tienen escala numérica
4. Se distinguen de los demás por su escala:
 1,5 ml, permiten contener volúmenes + pequeños en laboratorio se
emplean para conservar cepas o procesos de ultra-centrifugación.
 En microlitros, son lo + pequeños; soportan microvolumnes y se utilizan
apara reacciones de biología molecular
 PIPETAS
Pipeta graduada (DM)
5. Estructura tubular con unos de sus extremos son abierto o totalmente permeable y el otro extremo
apical es cónico parcialmente abierto para la descarga de volumen
6. Tiene una escala numérica q determina el volumen de su capacidad
7. Pueden cargar volúmenes de 0,1 ml a 0,25 ml
8. Son construidas en vidrio térmico tipo pirex (se reutilizan con descontaminación y estesrilización)-
o en plástico las cuales son descartables
9. Estos procesos generan salpicaduras por ellos, para utilizarlas se les adapta una boquilla
intermediaria o pipeteador para realizar la carga de volumen. Si no existiera esto se haría la succion
por succión y podría producir n accidente por ingesta
10. Este instrumento tiene 2 problemas:
1. Sino contamos con el instrumento adicional, se puede incurrir a accidentes por
ingesta
2. Alta probabilidad de salpicaduras

 Estos 2 errores o defectos se minimizan o prvienen con el uso de

micropipetas

Micropipeta (DA)
11. Son sistemas con diseño automatizado que requiere la manipulación
ór parte del operador
12. La carga de volumen genera una mínima aerosolización a
comparación de la pipeta graduada.
13. Y no hay accidente por ingesta porque la micropipeta ya trae incluido
adentro un sistema que permite hacer la carga + eficiente
 14. Permite cargas volúmenes de microlitros (ul). También hay otras +
grandes que cargan mililitros (ml) (a diferencia de la graduada que
también carga en (ml)es que esta reduce la aerosolización y accidentes por
ingesta)
15. Son de plástico autoclavables, se reutiliza y lo q se descarta son los
tips.
FUNCIÓN: En especial pipetas graduadas y micropipetas sirven para hacer cargas exactas de
un volumen

Diferencia entre Pipeta graduada y Micropipeta

Característica Pipeta Graduada Micropipeta
Rango de
Generalmente de 1 mL a 25 mL De 0.1 µL a 1000 µL (1 mL)
volumen
Precisión Media o exacta Muy alta (diseñada para precisión)
Material Vidrio o plástico Plástico y componentes mecánicos
Graduaciones Escala numerica Tiene una pantalla digital con el volumen
Tipo de uso Manual (con perilla o propipeta) Automática/manual (con émbolo y puntas)
Sí, pero usa puntas desechables para cada
Reutilizable Sí, se lava y reutiliza
uso
Salpicadura o
Alta probabilidad Minimiza la aerosolizacion
aerosolización
Sino contamos con el instrumento Y no hay accidente por ingesta xq trae
adicional, se puede incurrir a incluido adentro un sistema que permite
Accidentes accidentes por ingesta hacer la carga + eficiente

Pipeta Pateur(DM)
 Es cilíndrica, cónica
 Elaborada en plástico flexible
 Tubo con 30 cm de longitud, en su extremo superior tiene un extremo tipo gotero y en el inferior termina
en una punta parcialmente para descargar el volumen
 FUNCION:
1. se utiliza cuando no se necesita cargar volúmenes exactos o
2. . También se la puede utilizar como instrumento de siembra (si no hay asas bacteriológicas, asas
descartables; pero hay PIPETAS PASTEUR , se las puede utilizar como instrumentos de
siembra para hacer los frotis de siembra
  FRASCOS
 Frascos matraz o quitasato son + aracaicos
Erlenmeyer
- Recipiente térmico calidad pirex
- Con una morfología cilindrico-conica con un base ancho para el soporte
vertical y una boca excéntrica que evita q se derrame si esta horizontal
- Siempre tienen una escala numérica que indica el volumen cargado, pero
no hace mediciones exactas como las pipetas.
- Se los emplea para obtener cultivos en gran cantidad en medio líquido, por
EJM: aveces se necesita alta necesidad de colonización microbiana para
purificar antígenos

Frasco tipo Castañeda

- Recipiente de vidrio térmico de pirex

- Con forma de prisma rectangular con todas sus 4 caras planas con cuello
estrecho y boca excéntrica para evitar derrames si se coloca en posición
horizontal
- Se utiliza en microbiología médica para realizar cultivos. en microbiología oral
se utiliza bastante para hacer el test de adherencia microbiana

Probeta
- Recipiente cilíndrico altos, estrechos, con una base amplia para mantener la
sustentación vertical y con una boca q termina en pico jarra para facilitar el vertido
- Posee escala numérica milimétrica, permite realizar mediciones exactas que supere
los 25 ml
- Fabricadas en plástico reforzado (que no se descartan) y las de vidrio térmico
(reutilizables y soportan el calor autoclave)

Vaso de precipitación
- Recipientes cilíndricos anchos de base plana, amplia para permitir la sustentación
vertical y un orificio con pico de jarro para permitir el vertido
- Confeccionados en plástico reforzado o vidrio térmico calidad pirex
- Siempre presentan una escala numérica que al igual que el ERLENMEYER, no es
milimétrica que indica solo una aproximación sobre el volumen cargado
- Se emplea para realizar mezclas, para llevar a incubaciones a baño maría, preparar
medios de cultivos (los medios de cultivo vienen en polvo y se los prepara
mezclando el polvo con agua destilada; entonces se mide el agua en la probeta y
con el polvo pesado se realiza la mezcla en el vaso de precipitación. Y con este
recipiente de lo puede llevar a baño maria)

FRASCOS DE TAPA DE ROSCA

- Con diseño convencional

- Recipientes cilíndricos de base amplia, de cuello estrecho y corto, de una boca excéntrica con tapa rosca. Son frascos que
se compran
- Se utilizan para autoclavar los medios de cultivo. EJM: si ya tengo la mezcla del polvo agua destilada en el vaso de
precipitación no seria lo correcto llevarlos allí xq se regaría, por ello se usan estos frascos. Entonces la tapa se deja
parcialmente abierta y se lo lleva a la autoclave y se permite que el vapor ingrese esterilizando el contenido que es el
cultivo (para un medio de cultivo ya no se usa eso, se usa placas de Petri, tubos de ensayol)
 VARIOS
 ESPATULA DE DRIGALSKI
-Estructura tubular que puede ser construida
-Hay 3 tipso:
i. De acero inoxidable (se reutilizan por autoclave),
ii. vidrio térmico (se reutiliza por exposición a la llama de mechero, por ello se acodan ya que el
vidrio es flexible en la llama). Son las utilizadas
¿Cómo SE REAUTILIZA LAS ESPATULAS QUE SON DE VIDRIO?
La parte triangular que es la parte activa se la moja en alcohol etílico y se expone a la llama de un
mechero como es inflamable se prende la llama. Una vez que se prende la llama, esta lista
para que sea usada
iii. en plástico(un solo uso)
-Se utiliza para realizar la siembra por diseminación en superficie (implica vaciar el inoculo: se puede
pipetear el inoculo o depositar en inoculo con agar con la pipeta manual. Para utilizar esta espátula
SIEMPRE TIENE QUE SER UN INOCULO LIQUIDO no sólido, si lo depositamos unos 10ul con la
espátula hacemos q el inoculo se expanda por toda la superficie del agar como un movimiento de
aspiracion), esta técnica nos permite tener colonias separadas

 PLACAS DE PETRI
-Hay en varias medidas o diámetros
-Las + empleadas son las 10 mm de diámetro por 2 cm de alto
-siempre vienen en pareja, estructuras con capsula donde uno es + amplio para ser la tapa

 EMBUDO
-En microbiología siempre se el de vidrio térmico
-Se usa para hacer el traspaso de líquidos de uno de + diámetro a – diámetro
-Evitar accidentes con derrames (EJM: al fraccionar ácidos de un frasco grande a
pequeño se necesita este embudo)

 MORTERO
- Es un dispositivo de cerámica, con una superficie interna plana áspera para facilitar el
proceso de filtración
- Su boca es ancha
- Tiene acoplada un masa o pistilo, para realizar los procesos de trituración
- Su utilidad es triturar muestras de biopsia o tejidos, para obtener barias partes para que
sembrar o inocular en distintos medios de cultivo

 PORTAOBJETOS o LAMINAS DE VIDRIO

- Son laminas con medida estándar de 76mm de largo x 26mm de ancho por 1mm de
espesor
- Sus bordes son biselados para evitar cortes
- Tiene
 PARTE ESMERILADA: donde se consigna los datos de identificación
 PARTE TRANSPARENTE: usa para realizar frotis o montajes en fresco o por
extendido
  CUBREOBJETOS
- Laminas ultradelgadas de 0,20 mm de espesor el cual es siempre, pero su largo es variable donde
toma forma cuadrada o rectangular.
- Se utilizan para cubrir los montajes realizados en portaobjetos, para los montajes en frescos
siempre se usa la lámina porque la muestra esta viable y se debe evitar contaminar el lente.

 ASA BACTERIOLOGICA O DE SIEMBRA

- Plastico descartable o la reutilizable
- Tiene 3 partes:
1. Mango de cole (elaborado con cabo de baquelita es aislante termico)
2. Vastago de 20cm, de aquí emerge
3. La parte activa q no debe tener + de 6 cm (elaborada en alambre nitrilo o platino)
4. Puede terminar en asa, gancho o aguja

 EQUIPOS
• CENTRÍFUGAS Equipos
• Centrífugas
- contiene en su interior un eje vertical q están insertados alrededor de las camisas o • Estufas para cultivo
portatubos metálicos • Jarra para anaerobios
- Siempre debe tener tapa o cubierta para evitar la exposición a material biológico • Microscopios
peligroso. (Es una barrera primaria, siendo un diseño creado por ingeniero q debe -Balanza de precisión
evitar el riesgo biológico) -Autoclave
- Los tubos flacos se ubican alrededor de un eje vertical interno
- Hay varios tipos según la velocidad de emplean:
 las + usadas son las que ejecutan de 3000 a 5000 rvm. Usan para
actividades básicas como : aislar un germen, identifican modelos clásicos
 Ultracentrifugas q trabajan a velocidades + grandes y se emplean + para
laboratorios de biología molecular. Además tienen q estar refrigeradas; es
decir, emplean un sistema interno q generan bajas temperaturas
- FUNCIÓN: permitir o acelerar el proceso de decantamiento o sedimentación de las
partículas de una muestra mediante las presiones de centrífuga
- EJM: tiene un cultivo en medio líquido pero t quieres sacar el caldo del cultivo y te
quiere quedar solo con la población microbiana q quedó allí. Entonces para llegar a
ello se logra con la centrífuga q es para separar partículas, a su vez esto se da por las
densidades

 ESTUFA O ENCUBADORA
- es una triple caja térmica sotermica
- tiene un termostato externo para regular la temperatura q yo quiero generar en el
interior de la cámara
- Tiene un dispositivo q permite regular la temperatura interna evitando q las
oscilaciones térmicas no superen el medio grado centígrado
- Tiene estantes en su intención para colocar los tubos, erlenmeyer o las cajas de
petri. Una vez q inoculo el medio sólido o líquido inmediatamente lo llevo a este
dispositivo para lograr la temperatura de crecimiento.
 Las BACTERIAS patogenas para el hombre generalmente crecen entre 5y 40 °C.
 Los HONGOS de importancia médica crecen entre 28 y 37 °C
- con este dispositivo no brinda condiciones atmosféricas, si el organismo es aeróbico
o facultativo va a crecer porque la presión atmosférica q circula en la caja es igual a
la del exterior.

Por el contrario si es para un microorganismo anaeróbico estricto ( q

crece en bajo potencial redox) se necesita:
  JARRA ANAEROBIOSIS
- dispositivo le da las condiciones adecuadas a tu cultivo para q pueda crecer en caso de ser un microorganismo
anaeróbico estricto
- Primero se coloca las placas o tubos inoculados dentro de este recipiente y con todo el recipiente en conjunto se
lleva a la estufa.

Estructura

- Recipiente cilíndrico, elaborado en acrílico

- Tiene base amplia, para permitir la sustentación vertical
- Tiene tapa de cierre ermetico
- Tiene el manual q te indica la presión en el interior
- En la parte interna tiene un soporte metálico donde se apilan las placas de petri o tubos

¿COMO SE GENERA ANAEROBIOSIS dentro de está JARRA?

⁃ Hay varios tipos:

La jarra actúa por evacuación remplazo: La jarra q actúa con generador de gas
desechable:
•+antiguas • + modernas
•una vez cerrada la jarra va a quedar atrapado •Unas vez tapada la jarra queda aatrapado
aire, entonces se usa esta jarra q tiene en su oxígeno, para generar la atmósfera necesaria
tapa tubuladuras; por las q se conectan con se vierte un sobre (2 pastillas: 1 de
mangueras a una bomba de succión al vacío y borohidrutato sódico y bicarbonato de sodio)
con ello se aspiran todo el aire contenido en en el interior. Le pipetemaos 10 ml de agua
el recipiente. Y se remplaza ese aire evacuado destilada para disolver estas 2 pastillas. Esa
por una mezcla de tres gases q son : N(85%), jarra como tal tiene un catalizador que es el
H (10%)y CO2(5%). paladio. cuando se adiciona la mezcla
(químicos + agua) genera H y CO2; entonces el
H en presencia del paladio va a permitir unirse
al O2, lo va consumir el oxígeno y va a generar
H2O. Así se genera un cámara húmeda q va a
tener CO2 q es la atmósfera anaeróbica y H2O
q le da la humedad.

Si se desea tener la 2 cosas juntas la temperatura y regular la atmósfera. Allí se usa la

ESTUFA o INCUBADORA PARA ANAEROBIOSIS

 BALANA DE PRESICION o ANALÍTICA

- sirve para pesar la masa de una sustancia
- Lo hace en varias escalas. La q + se usa es de gr y miligramos.
- el margen de error es de 0, 001 g. Es decir, es un dispositivo muy preciso para sustancias
sólidas