Universidad Autónoma de Ciudad Juárez.
Instituto de Ciencias Biomédicas.
Departamento de Ciencias Veterinarias.
Práctica No. 8
“Determinación de ácido úrico.”
Luciana Marcela Suchill Valerio 237298
Jesus Alejandro Arellano Barron 237324
Victor Ponce de Leon 217935
Luz Elena Espinosa Tellez 232462
PRÁCTICA # 8
DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO
OBJETIVO
Comprenderá de donde proviene el ácido úrico y el fundamento químico para su detección,
así como su significancia clínica.
INTRODUCCIÓN
El ácido úrico es la principal sustancia nitrogenada excretada por los animales uricotelicos.
El ácido úrico es un compuesto nitrogenado, blanco, incoloro e insípido que se forma en el
cuerpo como resultado del catabolismo de las purinas. Está presente en pequeñas
cantidades en la orina humana, y en cantidades mayores en la orina de los pájaros y reptiles.
El ácido úrico es muy poco soluble en agua e insoluble en alcohol y éter. Al calentarse forma
urea, amoniaco y dióxido de carbono. La gota es el resultado de una alteración en el
metabolismo del ácido úrico. Las piedras en los riñones formadas por sales de ácido úrico
aparecen en las personas con altos niveles de este ácido en la orina.
Las bases que originan el ácido úrico son la adenina y la guanina, que forman parte de los
ácidos nucleicos. Por un proceso de aminación oxidativa, con intervención de una enzima,
la adenasa, la adenina se transforma en hipoxantina y la guanina en xantina. Por acción de
una nueva enzima, la xantinoxidasa, la hipoxantina se transforma en xantina y está en ácido
úrico. Existen dos fuentes de ácido úrico: la endógena, originada por destrucción de tejidos
del propio organismo y la exógena, proveniente de la alimentación.
MATERIAL POR EQUIPO
Tres tubos de ensaye
Tres tubos para sedimentación
Una gradilla
Celdas de 2 mL para espectrofotómetro
Un vaso de precipitado de 200 mL
Una pizeta con agua destilada
MATERIAL POR MESA
Dos pipetas de 5.0 mL
Seis pipetas de 1 mL
Dos propipetas de 5.0 mL
Tres propipetas de 1.0 mL
PROCEDIMIENTO
FUNDAMENTO. Se basa en la reducción del ácido fosfotúngstico a azul de tungsteno en
medio alcalino constituido por carbonato de sodio.
Preparar según la siguiente tabla:
TUBO
Tubo Blanco Patrón Problema
Ácido 1ml 1ml 1ml
fosfotúngstico
Agua destilada 0.3ml ………………………. ……………………………
Suero control ………………………. 0.3ml ……………………………
Suero no ……………………… ………………………… 0.3ml
hemolizado
Mezclar bien cada tubo y centrifugar los tubos problema y patrón a 2000 rpm por 5
minutos y recuperar el sobrenadante.
En seguida preparar otra serie de tubos de acuerdo al siguiente cuadro:
Tubo Blanco Patrón Problema
Carbonato de Sodio 2.5ml 2.5ml 2.5ml
3.5%
Sobrenadante Tubo 0.5ml ……………………….. …………………………
blanco
Sobrenadante Tubo …………………….. 0.5ml ………………………..
patrón
Sobrenadante tubo ………………………. …………………………. 0.5ml
problema
Mezclar bien cada tubo y dejar reposar durante 20 minutos.
Leer la absorbancia del problema y del patrón ajustando el fotocolorímetro a cero con el
blanco a una longitud de onda de 640 nm.
RESULTADOS
Absorbancia (640nm) Interpretación
-0.027 A Indica un error en el ajuste del blanco o
una muestra con muy baja concentración
de ácido úrico.
-0.000 A Posible blanco.
-0.077 A Baja concentración de ácido úrico.
0.071 A Mayor presencia de ácido úrico entre las
mediciones. Tubo Problema.
-0.100 A Muestra con inferencias.
El valor 0.071 A es el más alto, lo que sugiere que la muestra presenta más ácido úrico.
DISCUSIÓNES
Durante esta práctica se logró observar y comprender la importancia clínica de la medición
de ácido úrico en suero. A través del método colorimétrico basado en la reducción del ácido
fosfotúngstico a azul de tungsteno, fue posible determinar de manera visual y cuantitativa
la presencia de este compuesto. La reacción es específica en medio alcalino, lo que permitió
una lectura confiable a 640 nm.
Los resultados obtenidos reflejan la correcta aplicación del procedimiento, incluyendo la
desproteinización del suero para evitar interferencias en la medición. El uso de un patrón
control también permitió validar la técnica y comparar la muestra problema con un valor de
referencia. En general, la metodología empleada fue sencilla y eficaz, lo cual la convierte en
una herramienta útil en medicina veterinaria para el monitoreo de trastornos relacionados
con el metabolismo de las purinas.
CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es necesario desproteinizar el suero en la técnica de detección del
ácido úrico?
La desproteinización del suero es crucial porque las proteínas presentes en la
muestra pueden interferir con las reacciones químicas utilizadas para medir el ácido
úrico. Estas interferencias pueden llevar a resultados inexactos, ya sea
sobreestimando o subestimando la concentración real de ácido úrico. Al eliminar las
proteínas, se asegura que la medición sea precisa y confiable.
2. ¿En qué situaciones clínicas se eleva la concentración sanguínea de ácido
úrico?
La hiperuricemia (niveles elevados de ácido úrico en sangre) puede ocurrir en
diversas situaciones clínicas, incluyendo:
* Gota: Una enfermedad caracterizada por la formación de cristales de urato
monosódico en las articulaciones, causando inflamación y dolor intenso.
* Insuficiencia renal: Los riñones son los principales responsables de eliminar el
ácido úrico del cuerpo. Cuando la función renal está comprometida, el ácido úrico
se acumula en la sangre.
* Quimioterapia: El tratamiento del cáncer puede causar la rápida destrucción de
células, liberando grandes cantidades de purinas que se metabolizan a ácido úrico.
3. ¿En qué animales se encuentra elevado el ácido úrico y si es de importancia
clínica?
* Las aves y los reptiles excretan ácido úrico como principal producto final del
metabolismo del nitrógeno. En estos animales, los niveles elevados de ácido úrico
pueden indicar problemas renales o deshidratación.
* En perros y gatos, la hiperuricemia es menos común, pero puede ocurrir en ciertas
razas o condiciones, y puede estar asociada con la formación de cálculos renales.
* En el ganado, también es de importancia clínica, ya que puede estar relacionado
con problemas renales, y una mala alimentación.
4. ¿Qué síntomas se presentan en la enfermedad gota?
La gota se caracteriza por episodios de dolor intenso, hinchazón, enrojecimiento y
sensibilidad en las articulaciones, especialmente en el dedo gordo del pie. Otros
síntomas pueden incluir:
* Calor en la articulación afectada.
* Limitación del movimiento.
* Descamación y picazón de la piel alrededor de la articulación.
* En casos crónicos, puede ocurrir la formación de tofos (depósitos de cristales de
urato) debajo de la piel.
5. ¿De dónde procede el ácido úrico?
El ácido úrico es el producto final del metabolismo de las purinas, que son
compuestos presentes en el ADN y el ARN. Las purinas se obtienen de:
* La degradación de las células del cuerpo.
* La digestión de alimentos ricos en purinas.
6. Esquematice las bases púricas y pirimídicas
* Purinas:
* Adenina (A)
* Guanina (G)
* Pirimidinas:
* Citosina (C)
* Timina (T) (en el ADN)
* Uracilo (U) (en el ARN)
7. Describa cuatro (4) alteraciones del metabolismo de las purinas.
* Gota: Acumulación de ácido úrico, que forma cristales en las articulaciones.
* Síndrome de Lesch-Nyhan: Deficiencia enzimática que causa producción
excesiva de ácido úrico, con retraso mental y comportamiento agresivo.
* Deficiencia de adenina fosforribosiltransferasa (APRT): Puede llevar a la
formación de cálculos renales de 2,8-dihidroxiadenina.
* Deficiencia de xantina oxidasa: Produce xantinuria, con formación de cálculos de
xantina.
8. Mencione cuatro (4) alteraciones del metabolismo de las pirimidinas.
* Aciduria orótica: Deficiencia enzimática que causa acumulación de ácido orótico,
con anemia y retraso del crecimiento.
* Aciduria beta-ureido propiónica: Una alteración muy rara que puede causar
retraso mental.
* Deficiencia de pirimidina 5'-nucleotidasa: Causa anemia hemolítica.
* Acidemias pirimidínicas: son muy raras, pero pueden producir retraso en el
desarollo, y problemas neurológicos.
9. Defina uricemia, uremia y uricaciduria.
* Uricemia: Concentración de ácido úrico en la sangre.
* Uremia: Acumulación de productos de desecho en la sangre debido a insuficiencia
renal.
* Uricaciduria: Excreción excesiva de ácido úrico en la orina.
Espero que esta información sea útil.
Referencias:
* Richette, P., & Doherty, M. (2010). When can gout be considered cured?. Nature
reviews rheumatology, 6(3), 175-181.
[Link]
* Choi, H. K., Curhan, G. (2004). Coffee consumption and serum uric acid level:
the Third National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES III). Arthritis
research & therapy, 6(5), 455.
[Link]
* Johnson, R. J., Nakagawa, T., Sanchez-Lozada, L. G., Shafiu, M., Sundaram,
S., Le, M., ... & Segal, M. S. (2003). Sugar (fructose) and uric acid: a link to
obesity, metabolic syndrome and renal disease. Nephrology Dialysis
Transplantation, 18(suppl_2), ii11-ii17.
[Link]
* Gota - Síntomas y causas - Mayo Clinic.
* Enlace: [Link]
causes/syc-20372897
* Gota: MedlinePlus enciclopedia médica.
* Enlace: [Link]