Práctica 11.
Control microbiológico I (Efecto de los
factores físicos)
PREPARACIÓN DE LAS CEPAS
Colocar en un tubo con caldo nutritivo varias asadas de E. coli hasta obtener una suspensión turbia homogénea
Etiquetar cuatro tubos estériles para E. coli y distribuir volúmenes iguales de caldo nutritivo
Diluir la suspensión bacteriana original en estos tubos a una proporción 1:2 y preparar la cepa de B. subtilis de la misma manera etiquetando los tubos con los
valores de temperatura 80, 90, 110 y 120 °C.
Para Escherichia coli
Colocar los baños metabólicos a 35, 45, 55 y 65 °C respectivamente.
Incubar los tubos a sus temperaturas correspondientes durante 10 minutos.
Sembrar una asada por estría simple de cada uno de los tubos en el sector correspondiente
En el quinto sector sembrar una asada de la suspensión original
Dejar el sexto sector sin inocular como control negativo.
Para Bacillus subtilis
Realizar el mismo procedimiento que para E. coli pero a temperaturas de 80, 90, 110 y 120 °C
Determinación del período térmico mortal para Escherichia coli
Dividir una placa de agar nutritivo en seis sectores
Colocar el tubo con la suspensión diluida de E. coli en el baño metabólico a la temperatura de 65 °C por un período de 5 minutos.
Tomar una asada y sembrar por estría simple
Volver a colocar el tubo en el baño metabólico por otros 5 minutos
Colocar el tubo otros 10 minutos en el baño
Repetir el procedimiento por 10 minutos más (30 min).
Sembrar una asada de la suspensión original (sin tratamiento térmico) en el quinto cuadrante.
Dejar sin inocular el sexto cuadrante.
Para Bacillus subtilis
Realizar el mismo procedimiento que para Escherichia coli utilizando en este caso la temperatura de 90 °C para el baño metabólico.