Biología / Mod I Melissa Sofia Ambrocio Alfaro
Microscopía
¿Qué nos permite ver los objetos? La Luz
- Radiación electromagnética que puede ser percibida por el ojo humano.
- Tiene naturaleza ondulatoria y corpuscular (fotones o cuantos).
Medidas Microscópicas
Milímetro: Milésima parte del metro (mm).
Micrómetro: Milésima parte del milímetro (µm).
Nanómetro: Milésima parte del micrómetro (nm).
Angstrom: Décima parte del nanómetro (Å).
Microscopio
Viene del griego: "MIKRO" :pequeño "SCOPEO" : mirar
De acuerdo con la radiación que usa, se clasifica en:
Microscopio Óptico y Microscopio Electrónico
Es un instrumento óptico que se usa para aumentar o amplificar las imágenes de objetos y
organismos no visibles a simple vista.
Microscopios Simples: Anton Van Leeuwenthoeck, capacidad de formar imágenes aumentadas
unas 200 veces un objeto.
Microscopio Óptico Compuesto: Está conformado por tres sistemas: Iluminación, Mecánico y
Óptico. Sus partes son:
1. Sistema Mecánico:
- Base o Pie: Parte del inferior del microscopio y es en donde se montan los
demás elementos, proporciona equilibrio y estabilidad.
- Brazo: Es el esqueleto del microscopio y la que conecta todas sus partes.
- Platina: Superficie donde se coloca la muestra que se quiere observar, su
posición se puede regular por los tornillos. Tiene un agujero en el centro que es
por donde pasa la luz y también tiene dos pinzas que permiten tener fija la
muestra.
- Pinzas: Mantienen fija la muestra en la platina.
- Tornillo Macrométrico: Ajusta la posición vertical de la muestra respecto al
objetivo.
- Tornillo Micrométrico: Ayuda a tener un enfoque más preciso de la muestra.
- Revólver: Pieza giratoria donde se montan los objetivos.
- Tubo: Pieza estructural unida al brazo que conecta con el ocular y los objetivos.
Biología / Mod I Melissa Sofia Ambrocio Alfaro
2. Sistema Óptico:
- Foco o Fuente de Luz: Genera un haz de luz hacia la muestra, la posición del
foco depende si es un microscopio de luz transmitida o reflejada.
- Condensador: Encargado de concentrar los rayos de luz provenientes del foco a
la muestra, en general son divergentes.
- Diafragma: Permite regular la cantidad de luz incidente a la muestra, se
encuentra debajo de la platina.
- Objetivo: Conjunto de lentes que se encuentran más cerca de la muestra y
producen la primera etapa de aumento.
- Ocular: Proporciona la segunda etapa de ampliación de imagen, amplía la
imagen que ha sido previamente aumentada mediante el objetivo. Su aumento
es inferior al del objetivo, por medio de este se observa la muestra.
Para el mecanismo de amplificación de imágenes en el microscopio se utiliza un sistema de
lentes para amplificar las imágenes.
- Lente Objetivo: 10X seco débil / 40-45X seco fuerte / 100X inmersión.
- Lente Ocular: 10X.
¿Qué tipo de imágen forma un Lente Objetivo? Una imagen real.
- Se forma cuando los rayos de luz convergen tras pasar por el sistema óptico.
- La imagen se forma detrás de la lente, se observa aumentada e invertida.
¿Qué tipo de imagen forma un Lente Ocular? Una imagen virtual.
- Se forma cuando los rayos de luz divergen tras pasar por el sistema óptico.
- La imagen se forma delante de la lente y se forma aumentada pero NO INVERTIDA.
Amplificación: Aumento del tamaño de la imagen.
Amplificación Vacía: Incremento de la imagen sin que pueda percibirse mayores detalles.
Poder de resolución: Distancia mínima entre dos objetos para que sean percibidos como
objetos separados (ojo humano 0.1 mm).
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Espectro Electromagnético
Es el conjunto de longitudes de onda de todas las radiaciones, incluye las ondas de radio,
microondas, luz infrarroja, luz visible, luz ultravioleta, rayos X y rayos gamma, determinados
por la longitud de onda que se mide en nanómetros. La LUZ VISIBLE es la única que percibe el
ojo humano esta abarca una gama de colores dependiendo la longitud de onda y está es la que
utiliza el sistema de microscopía óptico.
Naturaleza de la Luz
La luz blanca está constituida por varios colores diferentes según Isaac Newton. Forma parte
del espectro electromagnético y puede ser descrita mediante dos modelos:
1. Por su forma de propagación, naturaleza ondulatoria (James Maxwell).
2. Por su forma de interactuar con la materia, naturaleza corpuscular o fotónica (Albert
Einstein).
Luz Visible
La luz visible tiene una propagación ondulatoria, estas longitudes de onda interactúan con la
materia, entre más pequeña o corta sea la onda puede interactuar con muy pequeños y al
contrario. La longitud de la luz visible es muy amplia y es la que utiliza el microscopio óptico
esto es lo que le da el límite de su poder de resolución.
Forma parte de una estrecha franja del espectro electromagnético abarca la longitud de onda de
380nm (color violeta) le sigue toda la gama de colores percibe el ojo humano a distintas
longitudes hasta llegar a 780nm (color rojo).
Microscopio Óptico
Necesita de 3 elementos para formar una imágen:
1. Luz Visible (tipo de radiación) .
2. Muestra (materia con la que interactúa la luz).
3. Sistema de lentes (el que forma la imagen que visualiza el ojo).
Sistema de Lentes
Las lentes son los objetivos que concretan o hacen divergir los rayos de luz. Existen 2 tipos:
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1. Lente Convergente: Como ejemplo: Lente Objetivo, este forma una imagen real, la luz
visible que se irradia va a tener contacto con el lente y este va a converger los rayos de
luz dando una imagen real.
- Tenemos la muestra y esta está fuera del plano focal y el lente va a formar la
imagen detrás del lente está se observará aumentada e invertida.
2. Lente Divergente: Como ejemplo: Lente Ocular, este hace que la luz al interactuar con
el lente diverja o se refracte a distintos puntos y forma imágenes virtuales.
- El objeto o muestra es la imagen que proyecta el lente objetivo, este si está
dentro del plano focal y la imagen que se ve forma delante de observa
aumentada pero no invertida.
Formación de la Imágen
- Nuestra fuente de luz se encuentra en la base, la base irradia la luz y va a iluminar
nuestra muestra.
- El primer lente es el CONDENSADOR esté concentra todos los rayos de luz que están
dispersos este lente solo recolecta los rayos de la luz.
- Los rayos son recogidos por el lente objetivo aquí se consideran 2 conjuntos de rayos.
Los que no son modificados por la muestra constituyen a los de fondo y los que si son
modificados porque interactúan con la muestra, forman la imagen de esta (imagen real).
- Esta imagen es amplificada y es invertida, la imagen formada por el objetivo se utiliza
como un objeto mediante un segundo sistema de lentes que es el lente ocular.
- El lente ocular va a formar una imagen ampliada y no la invierte.
- El sistema de lentes ubicado en la parte frontal del ojo usa la imagen virtual producido
por el lente ocular como un objeto para producir una imagen real en la retina del ojo la
cual es amplificada e invertida
● El microscopio óptico es utilizado para aumentar o amplificar imágenes de objetos y
organismos no visibles a simple vista.
● Se utiliza para examinar objetos transparentes o cortados en láminas finas que se
transparentan algunas veces se necesita de coloración para ser percibido por el ojo.
Microscopio Electrónico
Este ha venido a revolucionar porque permite visualizar materia mucho más pequeña que no es
visible al ojo humano.
- Utiliza una fuente de iluminación que son haces de electrones.
- Un sistema de lentes que en este caso son electroimanes.
- El haz de electrones se puede enfocar en una pantalla fluorescente, en una película
fotográfica o un detector digital que forma la imagen de una computadora.
Poder de Resolución
Debido a que utiliza electrones, estos tienen una longitud de onda de 0.004nm que es 100,000
veces más corta que la luz, se pueden mostrar estructuras mucho más pequeñas por lo que
presenta un alto poder de resolución
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Diferencias entre Microscopio Óptico y Microscopio Electrónico
Microscopio Óptico Microscopio Electrónico
Fuente de iluminación Foco de luz que produce luz Haz de electrones
blanca
Sistema de lentes De vidrio Electroimanes
Poder de resolución 0.2mm o 200nm 0.2nm o 2Å
Otros tipos de Microscopios de Luz
- Campo claro: El más común, sencillo y económico. Necesita tinción de muestras
(muertas).
- Campo oscuro: Muestras no teñidas, objeto se observa brillante sobre un foco oscuro.
- Contraste de fases: Muestras vivas o carentes de color; el contraste se logra con el
microscopio.
- Luz polarizada: Observación de estructuras birrefringentes (que permiten luz).
- Fluorescencia: Utiliza la luz de longitud de onda corta y anticuerpos fluorescentes para
indicar estructuras específicas en la muestra.
- Confocal: Utiliza también fluorocromos y un láser que permite observar varios planos
de la muestra y formar imágen 3D.
Microscopio de Transmisión
Los electrones pasan a través de la muestra la cual debe cortarse en finas capas y puede tener
tinción.
- Forma imágenes en 2D
- El poder de resolución de 1 a 2nm
Microscopio de Barrido
La radiación que utiliza son los electrones estos van a chocar con la muestra (no la atraviesan) la
barren al rededor y esto produce imágenes tridimensionales de la superficie del objeto. El
poder de resolución es de 10nm.
Diferencias