UNIVRSIDAD PRIVADA FRANZ TAMAYO
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
BIOQUIMICA Y FARMACIA
DETERMINACION DE ACIDO URICO
INTEGRANTES: Quispe Pucho Michelle Zuleida
Salome Mollo Briselyn
Vargas Aruquipa Carol Belen
Zarate Calani Maria Mercedes
MATERIA: BIOQUIMICA CLINICA II
DOCENTE: Dra. Flavia Misme Gomez
GRUPO: 6
LA PAZ - BOLIVIA
DETERMINACION DE ACIDO URICO
1. OBJETIVO
1.1 OBJETIVO GENERAL
Determinar la concentración de ácido úrico en plasma de un integrante del
grupo por el método estándar.
1.2 OBJETIVO ESPECIFICOS
Determinar las cantidades de reactivo de ácido úrico para determinar
el blanco, estándar y muestra.
Realizar los cálculos necesarios para determinar los valores de ácido
úrico del paciente
Analizar los resultados obtenidos y determinar las determinar las
condiciones fisiopatológicas mediante los valores de ácido úrico
obtenidos.
2. MATERIAL Y EQUIPOS
MATERIALES EQUIPOS
Tubos de ensayo (3unidades) Vortex
Gradilla Centrigufa
Micropipeta ( 50ul, 10ul) Stat Fax
Reactivo Ácido úrico Calculadora
Tips azules y amarillos
Material de toma de muestra
sanguinea
3. INTERES CLINICO
En el hombre el ácido úrico es el principal producto del catabolismo de las
bases puricas, cuales se obtienen en parte de la dieta y en parte de la
síntesis in vivo. La determinación de ácido úrico se utiliza para detectar
concentraciones elevadas en sangre que puedan ser de utilidad en el
diagnóstico de la gota. Esta prueba también se utiliza en el seguimiento de
los pacientes con cáncer sometidos a quimioterapia o radioterapia.
4. CONDICIONES FISIOPATOLOGICAS
Valores elevados.
La hiperuricemia se asocia generalmente con la gota, disminución de la
función renal, deshidratación, alteraciones mieloproliferativas y otras
condiciones en el que no se conocen bien la causa.
Valores disminuidos
Uno de los factores de los niveles bajos de ácido úrico son las deficiencias
minerales. Los estudios han demostrado que estos bajos niveles se
relacionan con las deficiencias de molibdeno, vitamina D y vitamina B12. La
hipouricemia no es una enfermedad propiamente, pero se asocia con otros
problemas de salud. En muy raras condiciones, podría ser el resultado de
defectos metabólicos hereditarios. Muchos medicamentos también
producen bajos niveles de ácido úrico.
5. METODOLOGIA
La metodología para la determinación de la concentración de ácido úrico se
basa en la reacción de Trinder, un método enzimático colorimétrico que
involucra dos reacciones acopladas. En la primera, la enzima úricas cataliza
la oxidación del ácido úrico a alantoína, con la producción de peróxido de
hidrógeno (H2O2):
6. PRINCIPIOS DE REACCION
El ácido úrico presente en la muestra origina según las reacciones
acopladas descritas a continuación, un complejo coloreado que se
cuantifica por espectofotometria.
La cantidad de luz absorbida es directamente proporcional a la cantidad de
colorante formado y, por lo tanto, a la concentración de ácido úrico en la
muestra.
7. COMPOSICION DEL REACTIVO
A. Reactivo fosfato 100 mmol/L , detergente 1,5 g/L, diclorofenolsulfato 4
mmol/L, uricasa > 0,12 U/ml, ascorbato oxidasa > 5 U/ml, peroxidasa >
1 U/ml, 4- aminoantipirina 0,5 mmol/ L, pH 7,8.
B. Patron de acido urico: Acido urico 6mg/ml, patrón primario acuoso.
8. CONDICIONES DEL REACTIVO
Conservar a 2-8ºC.
El Reactivo y el Patrón son estables hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se
evite la contaminación durante su uso.
Indicaciones de deterioro:
Reactivo: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco
superior a 0,200 a 520 nm (cubeta de 1 cm).
Patrón: Presencia de partículas o turbidez
9. CARACTERISTICAS METROLOGICAS
Longitud de onda. 520 nm
Estabilidad del producto formado.
Linealidad. : 25 mg/dL = 1487 µmol/L. Cuando se obtengan valores
superiores, diluir la muestra 1/5 con agua destilada y repetir la medición.
Exactitud. Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran
diferencias sistemáticas significativas al ser comparados con reactivos de
[Link] detalles del estudio comparativo están disponibles bajo
solicitud.
Precisión. d: 33,3 mA⋅dL/mg = 0,56 mA⋅L/µmol
Especificidad. Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los
resultados pueden variar al cambiar de instrumento o realizar el
procedimiento manualmente.
Interferentes. La hemoglobina (2 g/L) y la bilirrubina (2,5 mg/dL) y la
lipemia interfieren. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir.
10. INDICACIONES TOMA DE MUESTRA
Para la muestra de sangre, debe presentarse en ayunas, evitando
modificar la forma de vida cotidiana, esto garantizara resultados
reales.
No realizar esfuerzo físico 24 horas antes del examen.
El ayuno recomendado es un periodo de 12 a 14 horas del día antes
de la cita. NO Ingerir bebidas alcohólicas o fumar, preferiblemente
dos días antes de la toma de la muestra.
11. TIPO DE MUESTRA
Muestra sanguínea: Plasma
12. PROCEDIMIENTO
BLANCO PATRON MUESTRA
Agua destilada 25 ul
Patrón ácido úrico (S) 25 ul
Muestra 25 ul
Reactivo (A) 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml
Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura
ambiente (16-25ºC) o durante 5 minutos a 37ºC.
Leer la absorbancia (A) del Patrón y de la Muestra a 520 nm frente al
Blanco. El color es estable durante al menos 30 minutos.
13. CALCULOS
|.|muestr a
Conc. Muestra = x Conc . patron
|.| patron
1, 48
Conc. Muestra = x6
1 ,23
Conc. Muetra = 7,22 mg/ dL
14. VALORES DE REFERENCIA
Suero y plasma:
Hombres: 3,5-7,2 mg/dL = 210-420 µmol/L
Mujeres: 2,6-6,0 mg/dL = 150-350 µmol/L
Orina:
250-750 mg/24 horas = 1,5-4,5 mmol/24 horas
15. REPORTE DE RESULATDOS
Resultado obtenido Valor de referencia
7,22 mg/ dL 2,6-6,0 mg/dL
16. INTERPRETACION DE RESULTADOS
Después de haber realizado los cálculos necesarios se obtuvo un resultado
por encima de los valores de referencia para una paciente joven de sexo
femenino. Por lo tanto corresponde analizar que posibles condiciones
fisiopatologías puede ser posible ante los resultados de ácido úrico
17. DISCUSION Y COMENTARIO
Ante los valores de ácido úrico elevados por encima de los valores de
referencia para una mujer se trata de una hiperuricemia que puede ser a
causa de disminución de la función renal, deshidratación, alteraciones
mieloproliferativas u otras condiciones que se desconocen.
La paciente no tiene ningún antecedente de enfermedad renal ni otra
alteración a este nivel, por lo tanto se llega a la conclusión de que se
trataría de una deshidratación.
18. BIBLIOGRAFIA
[Link]
[Link]
Fossati P, Prencipe L, Berti G. Use of 3,5-dichloro-2-
hydroxybenzenesulfonicacid/4-aminophenazone chromogenic system
in direct enzymic assay of uric acid in serum and urine. Clin Chem
1980; 26:227-231.