EMPALME O SPLICING
ANDREA ZURITA
Objetivos
• Comprender el proceso de empalme del pre-ARN mensajero
• Identificar los componentes del esplaiceosoma
Generalidades del proceso de splicing
• Proceso esencial en los pre-ARNm de los eucariotas
• Este proceso necesita de ATP
• Catalizado por un complejo de ribonucleoproteínas
conocidas como esplaiceosoma o empalmosoma
• El ARNm de procariotas no sufre splicing u otras
modificaciones
Generalidades del proceso de splicing
Generalidades del proceso de splicing
• Interactúan aproximadamente 150 proteínas y
5 ARNs nucleares pequeños (ARNsn)
• ARNsn: U1, U2, U4, U5 y U6 (ricos en
uridinas)
• Trimetilados en el extremo 5´
Generalidades del proceso de splicing
• Entre las proteínas más importantes está PRP8
• Altamente conservada en los eucariotas
• Secuencia de 2300 aa
• PRP8 se asocia con U4, U5 y U6
• PRP8 interactúa con el pre-ARNm en los sitios
5' y 3' del exón para efectuar la unión entre los
exones
Generalidades del proceso de splicing
• Mutaciones en la proteína PRP8 ha sido
relacionado en el desarrollo de ciertas
enfermedades tales como retinitis pigmentosa
Procesamiento de preARNm-
Splicing
Nucleótidos Secuencia CURAY Nucleótidos
importantes GU, citosina, uracilo, importantes AG,
inicio del intron purina, adenina, finalización del
pirimidina intrón
Procesamiento de preARNm-
Splicing
1.
• Primer ataque nucleofílico, libera
extremo 5´ del intrón
2.
3.
Procesamiento de preARNm-
Splicing
4.
• Segundo ataque nucleofílico, libera
extremo 3´ del intrón, permitiendo
la unión de los dos exones
5.
Procesamiento de preARNm-
Splicing
• 1ero: U1 es reclutado al extremo 5´del
Pre-esplaiceosoma
intón
• 2ndo : U2 es reclutado al branching point
• 3ero: U2AF y BBP son reclutados cerca
del extremo 3´
Procesamiento
Esplaiceosoma maduro
de preARNm-
Splicing
• 4to: se disocia BBP permitiendo la
entrada del complejo de U4/U6 y
U5
Procesamiento de preARNm-
Splicing
Procesamiento de preARNm- Splicing
Procesamiento de preARNm- Splicing
Splicing alternativo
• A partir de un transcrito de pre-ARNm distintas isoformas de ARNm y por lo tanto
diferentes proteínas