1.

Concepto
La microscopía electrónica es una técnica para obtener información morfológica de
una muestra y la composición atómica. Muy útil en la caracterización de materiales ya
que se necesita muy poca cantidad de muestra y se trata de una técnica no
destructiva (mientras no haya que cortar la muestra para que quepa en el
portaobjetos o recubrir), es decir, la muestra no se ve perjudicada y se puede
recuperar.
El Microscopio electrónico de barrido es un tipo de microscopio electrónico que utiliza un
haz de electrones para formar una imagen ampliada de las distintas estructuras biológicas
de la superficie de la muestra que se observa. Con buena iluminación y a 30 cm de
distancia, el ojo humano puede distinguir dos puntos separados 0,1 mm, con el microscopio
óptico se puede magnificar hasta 2000 veces (2000x). Para poder sobrepasar el límite de
resolución de un microscopio óptico es necesario diseñar instrumentos que utilicen otras
radiaciones diferentes a la luz visible para formar la imagen. Las imágenes de un
microscopio electrónico se obtienen mediante la detección, procesamiento y visualización
de las señales resultantes de las interacciones entre un haz de electrones de alta
energía con la materia. Estas interacciones pueden proporcionar información sobre
topografía, composición y estructura.
2. Historia

En la década de 1920 diversos descubrimientos comprobaron que un haz de electrones

acelerados en el vacío, además de recorrer trayectorias rectas, se comportaba también
como una onda similar a la luz visible caracterizada por una longitud de onda 100.000 veces
más pequeña. Se logró inventar el MEB en 1937 que consistía en un haz de electrones que
barría la superficie de la muestra a analizar, que, en respuesta, emitía algunas partículas.
Estas partículas son analizadas por los diferentes sensores que hacen que sea posible la
reconstrucción de una imagen tridimensional de la superficie.

Si bien estos microscopios comenzaron a desarrollarse comercialmente alrededor de 1960,

su performance y facilidad de operación fue mejorando continuamente. Un instrumento
moderno permite observar muestras con una resolución de unos 4 nanómetros con
magnificaciones de hasta 300.000x. Se pueden obtener así imágenes de todo tipo de
materiales estructurales o de material biológico con un mínimo de preparación previa y
observar directamente todo tipo de superficies con una gran profundidad de foco.

3. Funcionamiento y partes
Todos los microscopios electrónicos de barrido constan de un cañón electrónico en una
columna de alto vacío, en la cual se genera un haz de electrones de alta energía. Este haz
es colimado (“haz de rayos paralelos”) por una serie de lentes electrónicas y focalizado
sobre la muestra analizada. Los detectores registran las señales originadas por la
interacción entre el haz de electrones y la muestra, que son procesadas y visualizadas en el
sistema final de observación (monitor o pantalla de computadora).
Un sistema de bobinas desvía este haz de tal manera que una zona de la superficie de la
muestra es continuamente explorada (scanning) y las señales resultantes son registradas
por los detectores.
La parte final de la columna del microscopio electrónico es la cámara con cierre de vacío
que contiene la platina donde se coloca la muestra. Un conjunto de controles externos
permite desplazar esta platina. En esta cámara se colocan los detectores para registrar las
distintas señales emitidas por la muestra.
- Formación de imágenes
En un microscopio electrónico de barrido la imagen se obtiene a partir de las señales
emitidas por la muestra y se va formando a medida que el haz de electrones se desplaza
sobre una porción de su superficie. Este barrido (scanning) se realiza línea por línea sobre
una pequeña zona de forma rectangular(raster). Esta zona es la que se visualiza
amplificada en la imagen final. La señal detectada puede ser entonces analizada y
amplificada, tanto en su forma analógica como digital, y finalmente procesada
convenientemente. A diferencia de una imagen óptica, el microscopio electrónico de barrido
no forma una imagen real del objeto sino que construye una imagen virtual a partir de
alguna de las señales emitidas por la muestra. Actualmente la visualización se realiza en la
pantalla de una computadora.

Las señales (rayos secundarios, rayos retro-dispersados y rayos X entre otros) son
colectadas por detectores y cada uno de ellos nos brindan información específica.

➔ Los electrones secundarios producen imágenes de morfología superficial de la

muestra.
➔ Los electrones retrodispersados producen imágenes con diferente brillantez en
función de la composición química y topografía de la superficie.
➔ Los Rayos X, obtiene información cualitativa de composición química de la muestra
de manera rápida y eficiente, realizando un análisis semi-cuantitativo de los
elementos detectados.

Partes

● Cañón de electrones: de aquí salen los electrones acelerados.

● Ánodo: parte del cañón de electrones que acelera los electrones emitidos desde el
cátodo por medio de un gran potencial positivo que los atrae.
● Diafragma concentrador: regula el paso de electrones hacia las lentes.
 ● Bobinas de alineamiento: alinea el tamaño del objetivo.
● Lente condensador 1: enfoca los electrones hacia el objetivo.
● Lente condensador 2: enfoca los electrones a mayor intensidad hacia el objetivo
reduciendo la imagen del filamento otorgando una mejor resolución.
● Stigmator: enfoca la muestra, reduciendo el astigmatismo.
● Bobinas deflectoras: barre un fino haz de electrones sobre la muestra punto por
punto y línea por línea.
● Detector de electrones secundarios: otorga resolución a la imagen reflectando los
electrones.
● Lente condensador 3: enfoca la imagen con la mayor resolución por electrones.
● Porta espécimen: se coloca la muestra a observar.
● Cámara porta espécimen: se colocan las muestras y se genera el vacío para la
muestra.
● Sistema de vacío: permite generar un haz de electrones de mayor intensidad. Los
electrones no pueden tener contacto con nada.
4. Usos en la Criminalística
La aplicación de la Microscopía Electrónica de Barrido, dentro de las áreas de la
Criminalística y de las Ciencias Forenses, se ha convertido en los últimos años, en una
práctica de uso casi rutinario para el análisis de evidencias, proporcionando no solo
resultados oportunos y expeditos, sino también unificados y auditables.
● BALÍSTICA: RESIDUOS DE ARMA DE FUEGO
PARTÍCULA CARACTERÍSTICA DE RESIDUO DE DISPARO: PLOMO, BARIO Y
ANTIMONIO. UNA SOLA PARTÍCULA CON TRES ÁTOMOS.
La presencia indica que una persona estuvo cerca de un arma de fuego disparada. La
ausencia de estas, no indica nada, las partículas pueden irse por frotar o lavar. La
conclusión de si se disparó o no la toma un juez.
Cuando se produce un disparo con un arma de fuego, se produce una nube de gases que
se depositan en objetos cercanos por impregnación de partículas.
En la búsqueda de residuos de disparo, resulta indispensable:
- Plomo: provenientes del proyectil o bala.
- Bario: provenientes del fulminante.
- Antimonio: provenientes del fulminante.
Estos tres elementos, que tienden a juntarse formando una sola molécula, permite
diferenciar los residuos de disparo, de otros residuos de elementos que contienen plomo o
bario o antimonio. Para evitar falsos positivos, no debe tenerse en cuenta únicamente la
presencia de un elemento, sino de los tres.
Técnicas antiguas (guantelete de parafina): Utilizada para la investigación de residuos de
disparo en la piel (específicamente en las manos) o en las prendas de vestir del sospechoso
de haber disparado un arma de fuego. Ya no se utiliza con frecuencia debido a que esta
técnica se aplica sobre cualquier sustancia oxidante, a fin de verificar la presencia de
nitratos o nitritos, es decir, es inespecífica, además, esta técnica tendría alguna utilidad si
se realiza una o al máximo dos horas del hecho delictivo, de otro modo, la prueba se ve
"contaminada" haciéndola. Se derrite la parafina y se procede a cubrir las manos del
sospechoso con una brocha de pelo de camello, inmediatamente se realiza el guantelete,
colocando trozos de gasa sobre las manos, con la finalidad de que se refuerce y quede un
molde fácil de retirar. Una vez se enfría la parafina se retira el guantelete por medio de una
abertura que se le realiza a un costado; el guantelete se trae consigo las partículas
microscópicas.
Con el reactivo de Peter Griss, el nitrito es detectado y analizado por la formación de un
color rojo rosado al tratamiento de una muestra conteniendo NO2− con el reactivo de
Griess.
Con el reactivo de Lunge, aplicándolo en el interior del guantelete una vez retirado. La
presencia de nitratos se pone en manifiesto porque éstos ante el reactivo dan una
coloración azul, entonces se dice que la prueba de parafina es positiva.
● COMPARACIÓN DE FIBRAS TEXTILES
Cotejo sospechoso/víctima
● COMPARACIÓN DE SUELOS
Comparación tierra del cadáver y tierra región geográfica para ver si el cuerpo fue localizado
o no.
● ESTUDIOS MORFOLÓGICOS Y ESTRUCTURALES
Se trata de la identificación y análisis de distintos materiales como metales, polímeros,
cerámicas, minerales o composites.
5. M.E.B. en la provincia de Mendoza.
Laboratorio de investigación forense: ubicado en la playa de estacionamiento del edificio de
la Policía de Mendoza, sobre calle Virgen del Carmen de Cuyo, al Este de las oficinas
donde se sitúa el laboratorio del Cuerpo Médico Forense. Ellos son los encargados de la
recolección y análisis de residuos de disparo.
El recolector debe estar libre de estas partículas, antes de la toma de muestras no debe
esposarse al individuo ni que vaya al baño. La recolección se realiza con STUBS de
carbono (uno en blanco, otro para la toma de muestra).
DATOS DE INTERÉS (COSAS QUE PUEDEN PREGUNTARNOS)
- Es necesario asegurar que las muestras sean limpias, secas, resistentes al alto
vacío del instrumento y buenas conductoras eléctricas. Si se trata de observar un
material no conductor, normalmente se recubren las muestras con una delgada capa
metálica,[Link]. oro.