RPR-CARBON

RPR-carbon
Aglutinación en porta

Determinación cualitativa de reaginas plasmáticas 6. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80 – 100 r.p.m. durante 8
IVD minutos (Nota 1). El exceso de tiempo puede originar la aparición de
falsos positivos.
Conservar a 2 - 8ºC.
Método semicuantitativo
PRINCIPIO DEL MÉTODO 1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solución salina 9 g/L.
RPR-carbón es una técnica no treponémica de aglutinación en porta para la 2. Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.
detección cualitativa y semicuantitativa de reaginas plasmáticas en suero
humano. Las partículas de carbón sensibilizadas con una mezcla de lípidos,
LECTURA E INTERPRETACIÓN
son aglutinadas en presencia de reaginas presentes en la muestra del
Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación
paciente afectado por sífilis.
inmediatamente después de retirar el porta del agitador. Agitar el porta
SIGNIFICADO CLÍNICO manualmente un par de veces antes de realizar la lectura.
Las reaginas son un grupo de anticuerpos dirigidos contra componentes del
Interpretación
propio organismo, originadas en pacientes que sufren infección por
Treponema pallidum, agente causal de la sífilis. Este microorganismo Tipo de aglutinación Lectura Resultado
produce lesiones en el hígado y corazón, liberando al torrente circulatorio Agregados grandes o medianos R Reactivo
pequeños fragmentos de estos órganos no reconocidos por el propio Agregados pequeños W Reactivo débil
individuo. El sistema inmunológico del paciente reacciona dando lugar a la Ningún agregado o ligera rugosidad N No Reactivo
formación de reaginas, anticuerpos frente a estos fragmentos.
El ensayo es útil para seguir la respuesta a la terapia antibiótica. En el método semicuantitativo, se define el título como la dilución mayor
que da resultado positivo.
REACTIVOS
RPR- Partículas de carbón sensibilizadas con una mezcla de CONTROL DE CALIDAD
lípidos, cardiolipina, lecitina y colesterol, en tampón fosfato Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la
carbón
20 mmol/L, Conservante, pH, 7,0. funcionalidad del reactivo de carbón, así como modelo de comparación
para la interpretación de los resultados.
Control + Todo resultado distinto al resultado que da el control negativo, se
Suero artificial con un título de reaginas ≥ 1/4.
Tapón rojo considerará positivo.
Control -
Suero animal. Conservante.
Tapón azul CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
1. Sensibilidad analítica: determinación correcta del título del Material de
PRECAUCIONES Referencia en las condiciones descritas en el ensayo (ver calibración).
Control +: H319-Provoca irritación ocular grave. 2. Efecto prozona: No se observa efecto prozona hasta títulos ≥ a 1/128.
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto. 3. Sensibilidad diagnóstica: 100 %
4. Especificidad diagnóstica: 100 %
CALIBRACIÓN
La sensibilidad del reactivo está estandarizado frente el Estándar Internacional
INTERFERENCIAS
de Sífilis de OMS (WHO 1st standard Human Syphilitic Serum, ref. 05/132).
Bilirrubina (20 mg/dL), hemoglobina (10 g/L) y lípidos (10 g/L), no
PREPARACIÓN interfieren. Los factores reumatoides (300 UI/mL), interfieren. Otros
RPR-carbón: Homogeneizar el reactivo con suavidad antes de su uso. sustancias pueden interferir5.
Abrir el vial de RPR-carbón y acoplar la micropipeta al vial dispensador de
plástico y aspirar por succión la cantidad de reactivo necesaria. Una vez NOTAS
terminado el ensayo, devolver la cantidad sobrante a su envase original y 1. Durante los 8 minutos de reacción no exponer el porta a una fuente de
lavar la micropipeta y vial con agua destilada. calor o de luz intensa para minimizar la evaporación. Dicha evaporación
podría causar una falsa aglutinación y por tanto resultados falsos positivos.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien cerrados LIMITACIONES DEL MÉTODO
a 2-8ºC, y se evita la contaminación durante su uso. No congelar: la - La prueba RPR-carbón no es específica para el diagnóstico de sífilis. Se
congelación de los reactivos altera irreversiblemente la funcionalidad de éstos. recomienda el ensayo de todas las muestras Reactivas con métodos
Conservar los viales siempre en posición vertical. En caso de cambio de treponémicos como el TPHA y FTA-Abs para la confirmación de resultados.
posición agitar hasta la disolución de posibles agregados. - Un resultado negativo no excluye el diagnóstico de la sífilis. El diagnóstico
Indicadores de deterioro de los reactivos: Presencia de partículas y turbidez. clínico no debe realizarse únicamente con los resultados de un único
ensayo, sino que debe considerarse al mismo tiempo los datos clínicos
MATERIAL ADICIONAL del paciente.
- Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 80-100 r.p.m. - La mononucleosis infecciosa, neumonía viral, toxoplasmosis, embarazo y
- Cámara húmeda. enfermedades autoinmunes pueden causar falsos resultados positivos.
- Agitador vortex.
- Pipetas de 50 µL. BIBLIOGRAFÍA
MUESTRAS [Link] P. Schimid. Current Opinion in Infectious Diseases 1994; 7: 34-40
Suero fresco o plasma. Estable 7 días a 2-8ºC o 3 meses a -20ºC. [Link] A Larsen et al. Clinical Microbiology Reviews 1995; 8 (1): 1-21.
Las muestras con restos de fibrina deben ser centrifugadas antes de la [Link] Larsen et al. A manual of Test for Syphilis American Public
prueba. No utilizar muestras altamente hemolizadas o lipémicas. Health Association 1990: 1-192.
[Link] Earle Moore et al. Gastrointestinal Haemorrhage 1952; 150(5):
PROCEDIMIENTO 467-473.
Método cualitativo [Link] DS. Effects of drugs on clinical laboratory test, 4th ed. AACC
1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La Press, 1995.
sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.
2. Depositar 50 µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los PRESENTACIÓN
controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de un porta.
Ref.: 1200401 150 tests Ref.: 1200402 500 tests
3. Mezclar el reactivo de RPR-carbón vigorosamente o con el agitador
vortex antes de usar. Invertir el vial dispensador y presionar ligeramente : 3 mL RPR-carbón : 2 X 5 mL RPR-carbón
para eliminar las burbujas de aire. : 1 mL Control + : 1 mL Control +
4. Situar la micropipeta en posición vertical y perpendicular al porta, y : 1 mL Control - : 1 mL Control -
dispensar una gota (20 µL) de este reactivo junto a cada una de las : 21 x 8 portas desechables : 63 x 8 portas desechables
gotas anteriores. : Vial y aguja dispensadora : Vial y aguja dispensadora
5. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda
la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.

SGIS04-E 10/11/17 IMPORTADORES EXCLUSIVOS: LAB CENTER DE MEXICO S.A. DE C.V.