es

Inmunoensayo

CMN0201/CMN0202/CMN0203

50 pruebas/100 pruebas/200 pruebas

P-AFP CLIA Micropartículas

Este ensayo se basa en un inmunoensayo de micropart ículas quimioluminiscentes (micropartículas CLIA) para la
determinació n cuantitativa de P-AFP (alfa fetoproteína del embarazo) en suero humano.

Todas las marcas comerciales son propiedad de sus respectivos dueños.

Clave de los símbolos gráficos utilizados

Código de lote Uso para

fabricante Contenido suficiente para <n> pruebas

dispositivo medico de diagnóstico in vitro Límite de temperatura

Número de catálogo Consulte instrucciones de uso

Autorizado en la Comunidad Europea

OBELIS S.A
Bd. Général Wahis, 53
1030Brussels
Belgium

AUTOBIO DIAGNOSTICS CO., LTD

No.87 Jingbei Yi Road
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local

Julio 10, 2018 / Autobio Diagnostics

Introducción Analizadores de ensayo en los que se puede utilizar el
kit
El kit P-AFP es para la determinación cuantitativa de la alfafetoproteína del  AutoLumo A2000 Plus
embarazo (P-AFP) en el suero materno.  AutoLumo A2000 Plus B
La AFP es una glicoproteína de 591 aminoácidos y una fracción de  AutoLumo A1000
carbohidrato, el peso molecular es 38000 Da [1]. La AFP es una proteína El inmunoensayo de micropartículas quimioluminiscentes (micropartículas
plasmática importante producida por el saco vitelino y el hígado durante el CLIA) está diseñado para su uso en analizadores de ensayo que son
desarrollo fetal2]. En mujeres embarazadas, los niveles de AFP fetal se AutoLumo A2000 Plus, AutoLumo A2000 Plus B y AutoLumo A1000.
pueden controlar en la orina. Desde la décima semana de gestación se
puede medir la AFP en la sangre materna, la concentración de AFP Materiales requeridos pero no suministrados
aumentó linealmente a las 11 ~ 20 semanas de gestación y alcanzó el pico
hasta aproximadamente las 32 ~ 34 semanas, luego disminuyó 1. Analizador de ensayo
gradualmente después del parto a niveles normales [3]. 2. Vaso (s) de reacción para la reacción de la muestra y el reactivo
La AFP se puede utilizar como indicador de detección de defectos del tubo 3. Tubo (s) de muestra o taza (s) para la muestra que contiene
neural. Además, la detección de AFP en suero materno también se puede 4. Diluyente Universal
utilizar para partos múltiples, síndrome de trisomía 18 y otros diagnósticos 5. Sustrato quimioluminiscente
auxiliares. 6. Lavador de sistema para lavar la aguja de pipeteado
7. Tampón de lavado utilizado en el procedimiento de lavado
Principio de medición 8. Agua destilada o desionizada
Este ensayo se basa en el método sándwich de dos pasos. En el primer paso,
se añaden la muestra y las micropartículas recubiertas de anticuerpo P-AFP.
Trazabilidad metrológica de los calibradores
Durante la incubación, la P-AFP presente en la muestra se une a los El mensurando o analito en estos calibradores P-AFP es trazable a un
anticuerpos que recubren las micropartículas, después del lavado, en el calibrador comprado en NICPBP (Instituto Nacional para el Control de
segundo paso, los antígenos P-AFP capturados en las micropartículas se dejan Productos Farmacéuticos y Biológicos), China, en cada nivel de
reaccionar con los anticuerpos ligados a enzimas. Después del segundo concentración.
lavado, se genera un complejo entre las micropartículas, el antígeno P-AFP
dentro de la muestra y los anticuerpos ligados a enzimas por reacciones Advertencias y precauciones
inmunológicas. A continuación, se añade el sustrato quimioluminiscente y este
complejo lo cataliza, lo que da como resultado una reacción Información de salud y seguridad
quimioluminiscente. La reacción quimioluminiscente resultante se mide como
Para calibradores, solución de micropartículas y conjugado enzimático, que
RLU. El RLU es proporcional a la concentración de P-AFP en la muestra del
contienen 5-cloro-2-metil-4-isotiazolin-3-ona y 2-metil-4-isotiazolin-3-ona, se
paciente.
aplican las siguientes declaraciones

Materiales suministrados H315 Provoca irritación cutánea.

H319 Provoca irritación ocular grave.
1. Calibradores H317 Puede provocar una reacción alérgica en la piel.
6 viales que contienen cada uno 1.0 ml de calibrador A a F con diferentes H412 Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos
concentraciones de antígeno P-AFP. La matriz es un tampón PBS que
duraderos
contiene caseína. Contiene conservante ProClin 300®.
P261 Evite respirar el polvo/humo/gas/niebla/vapores/
Calibradores proporcionados listos para usar.
aerosoles.
Calibrador Concentración P-AFP (ng/ml) P280 se guantes de protección/ropa protectora/protección
A 0 para los ojos/protección para la cara.
B 5 P273 Evítese su liberación al medio ambiente
C 20 P305+P351+P338 N CASO DE CONTACTO CON LOS
GHS 07
D 50 OJOS Enjuagar cuidadosamente con agua durante
Advertencia
2. Paquete Ede reactivos varios minutos. Quítese las lentes de contacto, si lleva y
200
El paquete de reactivos es fácil de hacer. Continúe enjuagando.
F se proporciona listo para 500
usar.
P321 Tratamiento específico (ver en esta etiqueta).
P501 Eliminar el contenido/el recipiente de acuerdo con las
50 100 200 regulaciones locales/regionales/nacionales/internacionales.

1. Solo para uso profesional.

Solución de 1.2 ml 2.3 ml 4.3 ml
micropartículas 2. Siga cuidadosamente las instrucciones de uso. No se puede garantizar la
fiabilidad de los resultados del ensayo si hay alguna desviación de las
Conjugado de enzimas 5.5 ml 11.0 ml 21.0 ml
instrucciones de estas instrucciones de uso.

3. Consulte la hoja de datos de seguridad del material y el etiquetado del

 Solución de micropartículas producto para conocer los peligros químicos que puedan estar presentes en
1 vial que contiene micropartículas recubiertas de anticuerpo P-AFP en tampón este ensayo.
Tris-HCl que contiene BSA. Contiene ProClin 300® y conservante de azida de
4. Manipule los materiales potencialmente contaminados de forma segura de
sodio. acuerdo con los requisitos locales.
 Conjugado de enzimas 5. PRECAUCIÓN: los calibradores contienen material de origen humano, que ha
1 vial que contiene anticuerpo P-AFP marcado con peroxidasa de rábano sido probado y no reactivo para HBsAg, VIH-1 y VIH-2, VHC y sífilis. Se
picante en tampón Tris-NaCl que contiene BSA (albúmina de suero bovino) recomienda que todos los materiales de origen humano se consideren
potencialmente infecciosos. Este ensayo contiene materiales de origen
y suero bovino recién nacido. Contiene conservante ProClin 300®.
animal. Los componentes bovinos proceden de países donde no se ha
informado de encefalopatía espongiforme bovina (EEB).

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P-AFP CLIA Microparticles
6. Algunos reactivos que contienen ProClin 300® pueden causar horas; para un uso prolongado, las muestras deben taparse y almacenarse
sensibilización por contacto con la piel, que debe evitarse si entra en a 2-8 ℃ hasta 48 horas. O congele las muestras que necesiten ser
contacto con la piel. Este material y su recipiente deben eliminarse almacenadas o transportadas por más de 48 horas a -20 ℃. Evite múltiples
de forma segura. En caso de ingestión, consulte con un médico ciclos de congelación-descongelación. Mezcle bien las muestras
inmediatamente y muestre este envase o etiqueta. descongeladas agitando con vórtex a baja velocidad o invirtiéndolas 10
7. No fume, beba, coma ni use cosméticos en el área de trabajo. veces. Inspeccione visualmente las muestras, si se observa estratificación o
estratificación, continúe mezclando hasta que las muestras sean
8. Utilice ropa protectora y guantes desechables cuando manipule
visiblemente homogéneas. Después de descongelar, lleve a temperatura
muestras y reactivos. Lávese las manos después de las operaciones. ambiente y mezcle bien agitando suavemente.
9. Tenga cuidado al manipular muestras de pacientes para evitar la 8. Centrifugue las muestras descongeladas que contengan glóbulos rojos o
contaminación cruzada. Se recomienda el uso de pipetas o puntas
partículas, o que tengan un aspecto turbio o turbio antes de usarlas
de pipeta desechables.
10. Realice el ensayo lejos de las malas condiciones ambientales. [Link]. para asegurar la consistencia de los resultados.
aire ambiente que contenga gas corrosivo de alta concentración, 9. Tenga en cuenta que pueden estar presentes niveles interferentes de
como ácido hipoclorito de sodio, alcalino, acetaldehído, etc., o que fibrina en muestras que no tienen partículas obvias o visibles.
contenga polvo. 10. Si no se puede verificar la recolección y preparación adecuadas de la
11. No mezcle ni utilice componentes de kits con diferentes códigos de
muestra, o si las muestras se han interrumpido debido al transporte o
lote.
12. Al almacenar los calibradores, asegúrese de que los viales estén manipulación de la muestra, se recomienda un paso de centrifugación
bien sellados. adicional. Las condiciones de centrifugación deben ser suficientes para
13. Asegúrese de que las micropartículas se vuelvan a suspender antes eliminar las partículas.
de cargarlas en el analizador.
14. Evite la formación de espuma en todos los reactivos y tipos de Procedimiento de medición
muestras (muestras, calibradores y controles).
15. No sustituya ningún reactivo de este kit de otros fabricantes u otros
lotes. 1. Verifique los materiales consumibles
16. Cuando se observe algún daño en el embalaje protector o cualquier  Verifique que haya un volumen adecuado de materiales consumibles
cambio en el rendimiento analítico, no utilice el kit. antes de ejecutar la prueba.
17. No utilice reactivos después de la fecha de caducidad indicada en la  Consulte el manual de funcionamiento del analizador de ensayos.
etiqueta.
2. Cargue el kit
Almacenamiento  Mezcle el contenido de los paquetes de reactivos nuevos (sin
perforar) invirtiendo suavemente el paquete varias veces antes de
1. Guarde el kit a 2-8 ℃. No congelar. Evite la luz fuerte. cargarlo en el analizador. No invierta los paquetes abiertos
2. La fecha de caducidad se muestra en la etiqueta del envase. (perforados). Si es necesario, agite suavemente para mezclar
3. Almacene el paquete de reactivo en posición vertical a 2-8 ℃ en el horizontalmente después de la primera carga.
analizador. De lo contrario, refrigere a 2-8 ℃ durante un mínimo de  El analizador puede leer el código de barras en el paquete de reactivo
automáticamente para obtener los parámetros requeridos para la prueba.
2 horas antes de usar en el analizador.
 Si el código de barras no se puede leer en casos excepcionales, se
4. El paquete de reactivos puede almacenarse dentro o fuera del
pueden reconocer manualmente.
analizador. Pueden almacenarse a bordo del analizador durante un
 Consulte el manual de funcionamiento del analizador de ensayos.
máximo de 28 días. Después de 28 días, se debe desechar el
paquete de reactivos. Una vez que se retiran del analizador, 3. Solicitar pruebas
guárdelos a 2-8 ℃ en posición vertical. Para los reactivos  Coloque los tubos de muestra en el portamuestras, 25 µl de muestras
almacenados fuera del analizador, se recomienda que se y calibradores para cada prueba. Pero teniendo en cuenta el
almacenen en sus bandejas y cajas originales para asegurarse de recipiente de la muestra y los 150 µl de los volúmenes muertos del
que permanezcan en posición vertical. Selle y devuelva los sistema, que pueden consultarse en los manuales del analizador de
calibradores no utilizados a 2-8 ℃, en cuyo caso la estabilidad se ensayo correspondientes para conocer el volumen mínimo de muestra
requerido.
mantendrá durante 1 mes, para un uso más prolongado, almacene
 Cargue el portamuestras e introduzca la información de la muestra en
los calibradores abiertos en alícuotas y congele a -20 ℃. Evite
la interfaz del software del sistema.
múltiples ciclos de congelación-descongelación.
 Seleccione "ejecutar" para iniciar la prueba, el analizador realiza
automáticamente la operación de prueba. El analizador realiza las
Muestra siguientes funciones:
 Mueve la muestra al punto de ajuste
1. Recoja las muestras de suero de acuerdo con las prácticas médicas  Carga un recipiente de reacción en la ruta del proceso
correctas.
 Aspira y transfiere la muestra al recipiente de reacción
2. No utilice muestras inactivadas por calor. No utilice conservante de
azida sódica en las muestras.  Agrega la solución de micropartículas y el conjugado enzimático al
3. Los sedimentos y los sólidos en suspensión en las muestras pueden recipiente de reacción
interferir con el resultado de la prueba, que debe eliminarse mediante  Mezcla, incuba y lava la mezcla de reacción
centrifugación. Asegúrese de que se haya producido la formación  Agrega sustrato quimioluminiscente
completa del coágulo en las muestras de suero antes de la  Mide la emisión quimioluminiscente para determinar la cantidad de P-AFP
centrifugación. Algunas muestras, especialmente las de pacientes que
en la muestra
reciben terapia anticoagulante o trombolítica, pueden exhibir un mayor
tiempo de coagulación. Si la muestra se centrifuga antes de que se  Desecha el recipiente de reacción usado
forme un coágulo completo, la presencia de fibrina puede causar  Calcula el resultado
resultados erróneos. Asegúrese de que las muestras no se deterioren  Consulte el manual de funcionamiento del analizador de ensayos.
antes de su uso.
4. Antes del envío, se recomienda que las muestras se extraigan del 4. Calibrar la curva
coágulo, del separador de suero o de los glóbulos rojos.  El analizador puede leer el código de barras en el paquete de reactivo
5. Un procesamiento insuficiente de la muestra o la interrupción de la automáticamente para obtener los parámetros requeridos para la prueba.
muestra durante el transporte pueden causar resultados deprimidos.
 Si el código de barras no se puede leer en casos excepcionales, se
6. Evite las muestras extremadamente hemolíticas, lipémicas o turbias.
7. Tape y almacene las muestras a 18-25 ℃ durante no más de 8 pueden reconocer manualmente.
 Transfiera los calibradores a los tubos de muestra y coloque los tubos de

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 muestra en el portamuestras. Realizar detección de duplicados en el tasa de detección de embarazos anormales puede variar según el número
sistema. de muestras.
 Cargue el portamuestras y la información de los calibradores de 7. Esta prueba mide concentraciones dentro del rango de 5-500 ng / ml. Si las
concentraciones de P-AFP están por encima del rango de medición esperado,
entrada en la interfaz del software del sistema. se recomienda diluir las muestras con Diluent Universal, la dilución máxima es
 Seleccione “ejecutar” para iniciar la prueba y generar la curva de 1:30 de esta prueba, lo que permite cuantificar las muestras hasta
calibración.
aproximadamente 15000 ng/ml.
 Una vez que se acepta y se almacena una curva de calibración, todas
las muestras posteriores pueden analizarse sin más calibración a
Intervalo biológico de referencia
menos que:
 Los controles están fuera de rango después de mediciones repetidas Se examinaron un total de 1324 muestras de mujeres embarazadas
 Se utiliza un kit de reactivos y una solución de sustrato con un nuevo normales. La mediana de P-AFP en mujeres embarazadas se enumeró a
código de lote continuación:
 Más allá de la fecha de vencimiento de una curva de calibración
 Se reemplazan o reparan piezas importantes del analizador Semanas N Mediana
Gestacionales (ng/ml)
 Consulte el manual de funcionamiento del analizador de ensayos.
14 121 30.18
5. Diluir la muestra 15 253 34.75
Las muestras con un valor de P-AFP superior a 500 ng/ml pueden diluirse
16 359 40.02
con el método de dilución automático. Diluyente Universal se utiliza para
diluir las muestras. 17 234 46.10
 Para esta prueba de P-AFP, la dilución recomendada es 1:30. 18 156 53.10
 Cuando diluya las muestras con Diluyente Universal manualmente, 19 102 61.16
multiplique el resultado de la detección por el factor de dilución para
20 99 70.45
obtener el resultado final.
 La concentración de la muestra después de la dilución no debe ser Nota: 1 ng / ml = 0,826 UI / ml.
inferior a 10 ng / ml. Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango normal,
que puede ser exclusivo de la población a la que sirve, dependiendo de
Resultados de medición factores geográficos, del paciente, dietéticos o ambientales.

Los resultados de la prueba de muestra son determinados automáticamente por

el software del sistema utilizando un método de reducción de datos de ajuste Caracteristicas de Rendimiento
de curva logística de 4 parámetros. La cantidad de antígeno P-AFP en las
muestras se determina a partir de la producción de luz medida mediante los 1. Precisión de medición
datos de calibración almacenados. Los resultados de las pruebas de muestra se Este ensayo está diseñado para tener una precisión dentro de una serie de
pueden revisar utilizando la pantalla adecuada. Consulte el manual de <10%. Se analizaron 2 miembros del panel combinados a base de suero
funcionamiento del analizador de ensayos sobre cómo revisar los resultados de
humano (1 y 2), utilizando 1 lote de reactivos, en réplicas de 10. Los datos
las muestras.
La unidad predeterminada para este ensayo es ng / ml. de este estudio se resumen en la siguiente tabla.

Procedimiento de control Miembro Precisión intra corrida

Lote n Media
panel SD %CV
El requisito de control recomendado para este ensayo es comprar los
1 1 10 19.24 0.25 1.89
materiales de control por separado y analizarlos junto con las muestras
2 1 10 103.04 1.85 1.79
dentro de la misma serie. El resultado es válido si los valores de control caen
dentro de los rangos de concentración impresos en las etiquetas. Cuando un
Este ensayo está diseñado para tener una precisión entre análisis de
valor de control está fuera del rango especificado, puede indicar deterioro
<15%. Se ensayaron 2 miembros del panel combinados a base de suero
de los reactivos o errores en la técnica. Los resultados de las pruebas
humano (1 y 2), usando 2 lotes de reactivos. Los datos de este estudio se
asociadas pueden no ser válidos y pueden requerir una nueva prueba.
resumen en la siguiente tabla.
Puede que sea necesario realizar una recalibración del ensayo. Se
recomienda que cada laboratorio establezca su rango aceptado para
Miembro Precisión entre corridas
garantizar un rendimiento adecuado de la prueba. Panel Lote n Media
SD %CV
1 1 20 19.56 0.262 1.34
Limitaciones de procedimiento
2 1 20 107.24 2.288 2.13
1. Este ensayo está destinado a ayudar al diagnóstico clínico. Realice este
ensayo junto con el examen clínico, el historial médico del paciente y 2. Sensibilidad Analítica
otros resultados de la prueba. La sensibilidad analítica, definida como la concentración correspondiente
2. Si los resultados no concuerdan con la evidencia clínica, se sugiere a las RLU medias de 20 réplicas del calibrador A más 2 desviaciones
realizar pruebas adicionales para confirmar el resultado. estándar, es ≤ 0,5 ng/ml.
3. Los anticuerpos heterofílicos y los factores reumatoides en las
muestras pueden interferir con los resultados de la prueba. Los 3. Especificidad analítica
anticuerpos heterofílicos en el suero humano pueden reaccionar con Se analizaron las sustancias enumeradas a continuación, a los niveles de
las inmunoglobulinas reactivas, interfiriendo con los inmunoensayos in concentración enumerados.
vitro. Realice este ensayo junto con el examen clínico, el historial
médico del paciente y otros resultados de la prueba. Sustancia Concentración esultado de reactividad
4. Las muestras extremadamente hemolíticas, lipémicas o turbias pueden cruzada
dar como resultado resultados de prueba incorrectos; evite el uso de HSA 500 ng/ml No cross reactivity
tales muestras.
5. El cálculo preciso de las semanas gestacionales puede obtener
Interferencia: Sin interferencia con 500 mg / dl de hemoglobina, 65 mg / dl
resultados precisos de la evaluación del riesgo.
de bilirrubina y 1000 mg / dl de triglicéridos.
6. Las diferentes poblaciones pueden tener una mediana diferente, la

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P-AFP CLIA Microparticles
 4. Exactitud de la medición por correlación
Se realizó un estudio de comparación en el que las muestras se analizaron
utilizando este ensayo y un ensayo de referencia de P-AFP. Los datos
fueron analizados y resumidos en la siguiente tabla.

Número
Método de Coeficiente
de Intercepto Pendiente
correlación de
muestras
correlación

Regresión
478 -56.683 0.9858 0.953
linear

5. Efecto gancho de dosis alta

na muestra enriquecida con P-AFP hasta 100000 ng / ml da un valor de
RLU más alto que el último punto de calibrador.

Literatura de referencia

1. Mackiewicz. A, Breborowicz. I, Thein-vitro production of Al- pha-

fetoprotein variants by human fetal organs. Oncodev[J]. Biol. Med.
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serum alpha-fetoprotein level[J]. Br. J .Obstet. Gynaecol.1987 : 94. 387-
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5. Second Report of UK Collaborative Study on Alpha-fetoprotein in

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