1.
detectores
Es un dispositivo que permite medir, a la salida de la columna, una
propiedad física del eluyente
detectores en cromatografía de líquidos son de dos tipos básicos:
detectores basados en una propiedad de la disolución: responden a una
propiedad de la fase móvil, que puede ser modificada por la presencia
de analitos: índice de refracción, constante dieléctrica, densidad
o Detector Índice de refracción (RI)
-Este tipo de detectores constan de una cubeta con dos
compartimentos separados por una placa de vidrio, por uno de
los cuales solamente pasa fase móvil, como referencia, y por el
otro pasa el eluyente que abandona la columna y que contiene
la muestra. Sobre la cubeta se irradia un haz de luz que se
desvía cuando la muestra aparece en el líquido eluido de la
columna
o Detector conductividad*
-Para cromatografía iónica o separaciones de intercambio
iónico. Usos en industrias: farmacéutica, ambiental, alimentos y
bebidas
detectores basados en una propiedad del soluto: responden a una de
las propiedades del soluto, que no son propias de la fase móvil:
absorbancia UV, fluorescencia, intensidad de difusión
o Detector UV: con filtros y con monocromadores
-Se hace pasar radiación electromagnética a través de
compuestos con ciertos grupos funcionales, estos experimentan
excitación. electrónica a causa de la absorción de energía
-Muchos detectores de absorbancia son dispositivos de doble
haz, en los que uno de los haces pasa por la cubeta de flujo y el
otro a través de un filtro que reduce su intensidad. Para
comparar las intensidades de los dos haces se utilizan
detectores fotoeléctricos contrastados. También se utilizan
instrumentos de un solo haz. En este caso, las medidas de
intensidad del disolvente se almacenan en la memoria de un
ordenador y al final se recuperan para el cálculo de la
absorbancia
-Con filtros: fotómetros de filtros con una lámpara de mercurio
como fuente. Lo más común en estos casos es aislar la línea
intensa a 254 nm por medio de filtros. Detector se utiliza de
forma restringida para aquellos solutos que absorben a alguna
de estas longitudes de onda
-monocromadores: detectores que consisten en un
espectrofotómetro de barrido con óptica de red. Algunos se
limitan a la radiación ultravioleta; mientras que otros abarcan la
radiación ultravioleta y la visible. Detectores
espectrofotométricos de ultravioleta más potentes son los
instrumentos de series de diodos
o Infrarrojo (IR):
-dos tipos de detectores de infrarrojo: primero con barrido de
longitud de onda que proporcionan tres segmentos de filtro
semicirculares. El segundo, mucho más sofisticado, es un tipo
de detector infrarrojo que se basa en los instrumentos de
transformada de Fourier. Los instrumentos de infrarrojo más
sencillos pueden trabajar a una o más longitudes de onda Los
instrumentos con transformada de Fourier se utilizan de manera
análoga a los instrumentos de series de [Link]
limitaciones al uso de los detectores de infrarrojo se debe a la
baja transparencia de muchos de los disolventes
o Fluorescencia:
-Compuestos excitados emiten una mayor energía de longitud
de onda que la usada
-La fluorescencia se detecta por medio de un detector
fotoeléctrico colocado perpendicularmente respecto al haz de
excitación. Los detectores más sencillos utilizan una fuente de
excitación de mercurio, y uno o más filtros para aislar la
radiación fluorescente. Una ventaja inherente a los métodos de
fluorescencia es su alta sensibilidad, que resulta ser más de un
orden de magnitud mayor que la de los sistemas de absorbancia
o De masa:
-detección por MS proporciona un nivel adicional de información
al determinar la relación masa-carga de los analitos contenidos
en la muestra. Los espectrómetros de masas tienen tres
componentes principales: la fuente de iones, el analizador de
masas y el detector, a veces denominado electrómetro.
La fuente de iones primero genera iones en fase gaseosa a
partir de la corriente de eluyente y proporciona un haz de iones
enfocado al analizador de masas. El analizador de masas
separa los iones en el tiempo o el espacio según la m/z
respectiva. el detector convierte los iones en una señal eléctrica
basada en el tiempo y genera un espectro del m/z
o Electroquímicos:
Basados en la oxidación del analito eluido mediante un
electrodo adecuado, registrando la intensidad de la
corriente, mantenida mediante la electrólisis de los
analitos.
electrodos de medida de pasta de carbón, pulimentado y
amalgama de oro y mercurio, con contraelectrodo de
plata-cloruro de plata
Análisis de mezcla complejas, fluidos biológicos y
extractos de muestras naturales
-Un detector electroquímico mide la corriente producida cuando
un compuesto electroquímicamente activo sufre oxidación o
reducción en la superficie del electrodo causada por un potencial
aplicado. Según la ley de Faraday, la corriente resultante es
directamente proporcional a la concentración del analito que
experimenta la reacción electroquímica.