Tema 4.

Espectroscopía de absorción molecular UV-Vis.

• Introducción
• Especies absorbentes
• Instrumentación
• Aplicaciones de las medidas de
absorción
• Valoraciones fotométricas
• Espectrofotometría derivada
Introducción.
La espectroscopía de absorción molecular UV-visible:
• Análisis cuantitativo
• Procedimiento más usado

Las moléculas absorben en forma de bandas de absorción:

• Formadas por rayas (transición estado fundamental-estados rotacionales y
vibracionales)
4
3
2
1
E2 0

4
3
Energía

2
E1 1
0
UV

Vis

4
3
2
IR
1 hν
E0
0
λ1 λ2 λ´1 λ´2 λ´´1
2
Introducción.
Absorción-Relajación
La absorción de radiación UV o visible por una especie atómica o molecular M se puede
considerar que es un proceso en dos etapas. La primera de las cuales implica una
excitación electrónica:
M + h𝜈𝜈 → M ∗

El tiempo de vida de la especie excitada es breve 10−8 a 10−9 s. y su existencia acaba

por alguno de los diversos procesos de relajación:
• nM ∗ → M + calor
• Descomposición de M* para formar nuevas especies químicas (reacción fotoquímica)
• Reemisión de radiación (fluorescente o fosforescente)

Las medidas de absorción producen una alteración mínima del sistema en estudio.

3
Introducción.

La absorción de la radiación UV o visible se produce por lo general como consecuencia

de la excitación de los electrones de enlace.

Picos de absorción → tipos de enlace

Espectroscopía absorción molecular → grupos funcionales

análisis cuantitativo

Tres tipos de transiciones:

1. Electrones π, σ, y n

2. Electrones d y f

3. Electrones de transferencia de carga

4
Especies absorbentes.
Especies absorbentes que contienen electrones π, σ y n

• Moléculas e iones orgánicos

• Algunos aniones inorgánicos.

Los compuestos orgánicos son capaces de absorber radiación UV y visible debido a sus
electrones de valencia que pueden ser excitados a niveles de energía más altos.

Electrones enlaces sencillos→energía excitación alta, λ<185 nm (zona UV de vacío)

Cromóforos → energía excitación baja, λ más largas (λ>185 nm)

Los espectros electrónicos de moléculas orgánicas que contienen cromóforos son

complejos → superposición de transiciones vibracionales sobre las transiciones
electrónicas → banda de absorción.

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Especies absorbentes.
Especies absorbentes que contienen electrones π, σ y n

Tipos de electrones absorbentes.

1. Electrones enlazantes
2. Electrones no enlazantes

Los primeros son aquellos que participan directamente en la formación del enlace
entre átomos y que además están asociados a más de un átomo.

Los segundos son los electrones externos que no participan y que están localizados
en átomos como el oxígeno, los halógenos, el azufre y el nitrógeno.

6
Especies absorbentes.
Teoría orbital-molecular

1. Enlaces sencillos: orbitales σ

2. Doble enlace: un orbital σ y un orbital π
3. Orbitales antienlace σ* y π*
4. Orbitales no enlazantes n

σ π σ*
π*

=σ
Diferentes orbitales moleculares. Molécula de formaldehido.

=π
H

x x
C O x
=n
H
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Especies absorbentes.
Especies absorbentes que contienen electrones π,σ y n

Niveles electrónicos de energía molecular.

Las energías de los distintos tipos de orbitales moleculares difieren considerablemente.
En general el nivel de energía de un electrón no enlazante se encuentra entre los
orbitales π y σ enlazantes y antienlazantes.
Las transiciones electrónicas entre los distintos niveles de energía se pueden producir
por absorción de radiación.
σ∗ (anti-enlazante)

π∗ (anti-enlazante)

Son posibles cuatro tipos de transiciones

n (no-enlazante) σ→σ*
π→π*
π (enlazante) n→σ*
n→π*
σ (enlazante)
8
Especies absorbentes.
Tipos de transiciones

σ → σ*
La energía requerida para esta transición es alta y corresponde a las frecuencias
radiantes de la región UV de vacío.

n → σ*
Generalmente requieren menos energía que las σ→σ*. El mayor número de picos de
absorción aparece por debajo de 200 nm.

n → π* y π →π*
La mayoría de las aplicaciones de la espectroscopía de absorción a compuestos
orgánicos se basan en estas transiciones porque las energías requeridas llevan los picos
de absorción a una región espectral experimentalmente accesible 200-700 nm.
Ambas transiciones requiere la presencia de grupos funcionales no saturados que
aportan los electrones π.
A estos centros absorbentes no saturados se les llama cromóforos.

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Especies absorbentes.
Cromóforos orgánicos
Cromoforo Ejemplo Disolvente λmax (nm) εmax Transición
alqueno C6H13CH=CH2 n-heptano 177 13000 π→π∗
alquino C5H11C≡CCH3 n-heptano 178 10000 π→π∗
196 2000 ------
225 160 ------
carbonilo CH3COCH3 n-hexano 186 1000 n→σ∗
280 16 n→π∗
CH3COH n-hexano 180 Grande n→σ∗
293 12 n→π∗
carboxilo CH3COOH etanol 204 41 n→π∗
amido CH3CONH2 agua 214 60 n→π∗
azo CH3N=NCH3 etanol 339 5 n→π∗
nitro CH3NO2 isooctano 280 22 n→π∗
nitroso C4H9NO éter etílico 300 100 ------
665 20 n→π∗
nitrato C2H5ONO2 dioxano 270 12 n→π∗
10
Especies absorbentes.
Efecto de la conjugación de los cromóforos

Compuesto Tipo λmax εmax

CH3CH2CH2CH=CH2 Olefina 184 10000

H2C=CHCH2CH2CH=CH2 Diolefina no conjugada 185 20000

H2C=CHCH=CH2 Diolefina conjugada 217 21000

H2C=CHCH=CHCH=CH2 Triolefina conjugada 250 ------

CH3CH2CH2CH2COCH3 cetona 282 27

H2C=CHCH2CH2COCH3 Cetona insaturada no 278 30

conjugada

H2C=CHCOCH3 Cetona insaturada conjugada 324 24

219 3600

La presencia de más de un cromóforo en una molécula orgánica hace que la absorción

sea aproximadamente aditiva siempre que los cromóforos estén separados entre sí por
más de un enlace sencillo.
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Especies absorbentes.
Absorción por sistemas aromáticos

Compuesto Banda E2 Banda B

λmax (nm) εmax λmax (nm) εmax
benceno 204 7900 256 200
tolueno 207 7000 261 300
m-xileno ---- ---- 263 300
clorobenceno 210 7600 265 240
fenol 211 6200 270 1450
ion fenolato 235 9400 287 2600
anilina 230 8600 280 1430
ion anilina 203 7500 234 160
tiofenol 236 10000 269 700
naftaleno 286 9300 312 289
Estireno 244 12000 282 450

Los espectros UV de los HC aromáticos se caracterizan por unas bandas cuyo origen son las
transiciones π →π*. Estas bandas características del benceno se ven afectadas por la sustitución del
anillo. Un auxocromo es un grupo funcional que no absorbe en la región UV pero que tiene efecto en
desplazar los picos del cromóforo a λ más largas así como aumentar sus intensidades 12
Especies absorbentes.
Absorción que implica electrones d y f

La mayoría de los iones de los metales de transición absorben en la región UV o

visible del espectro.
En la serie de los lantánidos y los actínidos este proceso se debe a transiciones
electrónicas de los electrones 4f y 5f.
En el caso de los elementos de la primera y segunda serie de transición se debe a
electrones 3d y 4d.

Absorción por transferencia de carga

Para fines analíticos el tipo más importante de absorción por especies inorgánicas es
la absorción por transferencia de carga porque las absortividades molares son muy
elevadas.
Para que un complejo presente un espectro de este tipo es necesario que uno de sus
componentes tenga características de dador de electrones y el otro componente tenga
propiedades de aceptor.

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Instrumentación.
Un sólo haz

14
Instrumentación.
Doble haz

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Instrumentación.
Fotómetros

Ventajas: Inconvenientes:
bajo coste poca versatilidad
Sencillez no generan espectros completos
Robustos anchura de banda mayor
portátiles
fáciles de mantener

Espectrofotómetros

Existen numerosos diseños para operar en la región comprendida entre 380-800 nm.

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Instrumentación.
Instrumentos para el UV y visible

Longitud de onda: mínima 190-210 nm

máxima 800-1000 nm

Lámparas: intercambiables tungsteno-H2 o D2

Detector: tubo fotomultiplicador

Monocromador: generalmente de rejilla

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Instrumentación.
Comparación haz simple-doble haz

Doble haz
• Compensan las fluctuaciones eléctricas (medida simultánea de P y P0).
• Compensan irregularidades dependientes del tiempo en la fuente, detector y
amplificador.
• Mayor comodidad y velocidad de medición.
• Útil en el análisis cualitativo (gran número de muestras).

Haz simple
• Análisis cuantitativo a una sola longitud de onda.

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Aplicaciones de las medidas de absorción.

Cualitativas
• Aplicación limitada debido a que los espectros tienen un número relativamente bajo
de máximos y mínimos.
• En muchos casos se usa para detectar grupos funcionales que actúan como
cromóforos.

Cuantitativas
1. Gran aplicación.
2. Alta sensibilidad.
3. Selectividad de moderada a alta.
4. Buena precisión.
5. Facilidad y comodidad.

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Aplicaciones de las medidas de absorción.
Detalle del procedimiento
Los primeros pasos del análisis fotométrico o espectrofotométrico consisten en establecer
las condiciones de trabajo y preparar una curva de calibración que relacione la absorbancia
con la concentración.

Elección de longitud de onda

La medición de la absorbancia se hace generalmente a una longitud de onda que
corresponda con un máximo de absorción. Se obtiene así sensibilidad máxima.

Variables que influyen en la absorbancia

• Naturaleza del disolvente
• pH
• Temperatura 1.00

• Concentración elevada de electrolitos 0.80

A = 4854.7C - 0.0164

• Presencia de sustancias interferentes

Absorbancia εb
0.60

0.40
Relación entre absorbancia y concentración
Calibrado a partir de disoluciones patrón.
0.20 A = ε ⋅b ⋅C
0.00
0.00000 0.00005 0.00010 0.00015 0.00020

Limpieza y manejo de las celdas Concentración

Hay que emplear celdas calibradas y una técnica adecuada de limpieza y secado.
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Aplicaciones de las medidas de absorción.

Análisis de mezclas de sustancias absorbentes

Por ser la absorbancia una propiedad aditiva, los métodos espectrofotométricos se

pueden aplicar al análisis de multicomponentes.
Si dos o mas especies absorben a una λ dada la absorbancia total es la suma de las
absorbancias individuales:

At = ε1 b1 c 1 + ε2 b2 c2

Si se usa la misma cubeta de paso óptico (b):

At = (ε1 c 1 + ε2 c2 )b

21
Aplicaciones de las medidas de absorción.
Análisis de mezclas de sustancias absorbentes

Se determina la absorbancia de la mezcla a dos longitudes de onda λ’ y λ’’ donde los

espectros de las dos especies independientes difieren significativamente:

A′ = ε′M bc M + ε′N bc N (a λ′ )
A′′ = ε′′
M bc M + ε′′ ′′
N bc N (a λ )

Las cuatro absortividades pueden evaluarse partiendo de las disoluciones patrón

individuales de M y de N.

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Aplicaciones de las medidas de absorción.
Espectrofotometría derivada

En la espectrofotometría derivada se utiliza como ordenada en la gráfica de los datos

espectrales la primera o segunda derivada de la absorbancia o de la transmitancia.

Ventajas:
Mejor selección de λ óptima.
Eliminación de interferencias por superposición de picos.

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Aplicaciones de las medidas de absorción.

Espectrofotometría de λ dual

Los espectrómetros de doble longitud de onda también son útiles para el análisis
cuantitativo de una especie química en presencia de otra (interferencia), cuando los
espectros de ambas son semejantes. En este caso el instrumento mide las absorbancias
a dos longitudes de onda en las cuales la interferencia tiene absortividades molares
idénticas. Por otro lado el analito debe absorber con más intensidad en una de estas
longitudes de onda que en la otra. De esta forma la absorbancia diferencial es
directamente proporcional a la concentración del analito.

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Aplicaciones de las medidas de absorción.
Valoraciones fotométricas
Las medidas fotométricas o espectrofotométricas se utilizan para localizar el punto de
equivalencia en una valoración.
El punto final de una valoración fotométrica directa es el resultado de un cambio en la
concentración de un reactivo o de un producto o de ambos, es evidente que por lo
menos una de estas especies debe absorber radiación.
En el método indirecto se observa la absorbancia de un indicador en función del
valorante agregado.

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