Como parte importante del Sistema de Gestión de Calidad, se les

MANUAL DE PRÁCTICAS invita a los alumnos que durante el semestre 2025-I hagan llegar
QUÍMICA ANALITICA INSTRUMENTAL sus quejas y sugerencias a la siguiente dirección de correo

electrónico.

[Link].2020@[Link]

También puede usar el buzón de quejas que está afuera de los

laboratorios L-101 y L113 o comunicarlo directamente con la Jefa

LICENCIADO EN FARMACIA
Clave de la Carrera: 105-40 de Sección de Química Analítica.
Clave de la asignatura: 1640

Revisión y Corrección
Dra. Alma Luisa Revilla Vázquez
Dra. Miriam A. Castillo Rodríguez
M.C. Pablo Hernández Matamoros
Q.F.B. Elia Granados Enríquez
Dr. José de Jesús Olmos Espejel

Vigente a partir de: 2025- I

 Introducción OBJETIVOS
Con la amplia gama de técnicas instrumentales de análisis con las que se cuenta en la
OBJETIVO(S) GENERALES DE LA ASIGNATURA
actualidad y a su incesante desarrollo, el dominio de todos ellas es difícil de abordar en su
Que el alumno conozca las técnicas y métodos más utilizados en el Análisis
totalidad en un curso de licenciatura, por lo tanto es necesario adquirir conocimiento de una
Instrumental al obtener y utilizar información obtenida con estos para en la
manera general, que nos permita interpretar y manejar datos obtenidos con cualquiera de ellas.
cuantificación de sustancias en muestras de interés en el ámbito farmacéutico para
La gran variedad de técnicas instrumentadas de análisis se basan en una relación que existe
que desarrolle habilidades, actitudes y criterio apropiados a fin de resolver problemas
entre la propiedad (absorbancia, índice de refracción, pH, área de pico, potencial, conductancia,
en su área.
intensidad de corriente, etc.) con la composición del sistema (análisis cualitativo) o bien la

cantidad de alguno de sus componentes (análisis cuantitativo). Generalmente algunas de las

OBJETIVOS DEL CURSO EXPERIMENTAL
técnicas se utilizan básicamente para el análisis cualitativo, otras más en el análisis cuantitativo
Reafirmar los conocimientos teóricos en la aplicación de las metodologías analíticas
y un buen grupo de ellas es capaz de cumplir con ambas funciones.
empleando un equipo instrumental para identificar y cuantificar una sustancia en una
La propiedad (P) , no es solamente afectada por la composición del sistema también por
muestra de interés en el área de farmacia.
variables como temperatura, presión, tiempo, perturbaciones ocasionadas al realizar la
1) Conocer e identificar las partes básicas del equipo utilizado para su manejo adecuado a fin
medición, presencia de sustancias químicas interferentes, etc. es por esta razón en este curso de obtener resultados confiables.

se estudia la relación entre la propiedad y la composición; relación en donde es necesario 2) Conocer la información que el equipo genera y su uso para análisis cuantitativo.

ejercer un control efectivo sobre las demás variables que además de la composición afectan la 3) Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar el cálculo de contenido de una

propiedad, todo esto a fin de obtener información útil desde el punto de vista analítico de esta sustancia en una muestra real.

manera P será función de la composición. Pudiendo así proponer métodos basados en esta

relación para poder conocer la composición de cierta sustancia(s) en muestras de interés.

Este enfoque contribuye a la formación profesional en análisis instrumental y al perfil

profesional en su área.

I II
 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICAS
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO SECCIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-02

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICAS FPE-CQ-DEX-03-02

CALENDARIZACIÓN FPE-CQ-DEX-04-02.
SECCIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA
CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-02 No de REVISIÓN: 00
FPE-CQ-DEX-03-02
CALENDARIZACIÓN FPE-CQ-DEX-04-02. CALENDARIO PARA LOS GRUPOS DE LOS DÍAS MIÉRCOLES
o
N de REVISIÓN: 00 Semana Fecha Actividad Entregables
07 u 08- Presentación del curso. Reglamento. Evaluación. Sistema de
1 calidad. Equipos. Preparación de disoluciones.
ago
CALENDARIO PARA LOS GRUPOS DE LOS DÍAS LUNES
Semana Fecha Actividad Entregables 2 14 o 15-ago P1. Curva de calibración directa por EAA. Zn IP1
Presentación del curso. Reglamento. Evaluación. Sistema de 3 21 o 22-ago P2. Curva de calibración indirecta. Fe-ofen IP2, IT1
1 05-ago calidad. Equipos. Preparación de disoluciones. 4 28 o 29-ago Sesión de dudas P1, Ejercicios P1 y Entrega de informe P1 IT2

2 12-ago P1. Curva de calibración directa por EAA. Zn IP1 5 04 o 05-sep P3. Curva de adiciones patrón con y sin dilución. Azul de timol IP 3
3 19-ago P2. Curva de calibración indirecta. Fe-ofen IP2, IT1 6 11 o 12-sep Sesión de dudas P3, Ejercicios P3 y Entrega de informe P3 IT3
4 26-ago P3. Curva de adiciones patrón con y sin dilución. Azul de timol 7 18 o 19-sep Dudas generales / Primer parcial
IP3, IT2
5 02-sep Sesión de dudas P1-3, Ejercicios P1-3 8 25 o 26-sep P4A. Cromatografía de gases. EtOH en enjuagues IP4A
IT3
IP4B
6 09-sep Dudas generales / Primer parcial 9 02 o 03-oct P4B. CG cuantitativa. EtOH en ejuagues IT4A
7 16-sep FESTIVO IP5
P4A. Cromatografía de gases. EtOH en enjuagues. 10 09 o 10-oct P5A. HPLC cualitativa. Enjuagues bucales IT4B
8 23-sep Cualitativa. IP4 11 16 o 17-oct P5B. HPLC cuantitativa. Enjuages bucales IT5A
P4B. Cromatografía de gases. EtOH en enjuagues. 12 21 o 22-oct Sesión de dudas P4, Ejercicios P4 y Entrega de informe P4 IT5B
9 30-sep Cuantitativa. IT4A 13 30 o 31-oct P6. Potenciometría IP6
10 07-oct P5A. HPLC cualitativa. Enjuagues bucales IP5, IT4B
11 14-oct P5B. HPLC cuantitativa. Enjuagues bucales IT5A
14 06 0 07-nov Sesión de dudas P5 y P6, Ejercicios P5 y P6 y Entrega de informe P6 IT6
12 21-oct Sesión de dudas P4 y P5, Ejercicios P4 y P5 IT5B 15 13 o 14-nov Dudas generales / Segundo parcial
13 28-oct P6. Potenciometría IP6 16 20 o 21-nov Entrega de calificaciones
14 04-nov Sesión de dudas P5 y P6, Ejercicios P5 y P6 y Entrega de informe P6 IT6
15 11-nov Dudas generales / Segundo parcial
16 18-nov FESTIVO

*La entrega de calificaciones finales será en la semana de la vuelta A.

III IV
 SISTEMA DE EVALUACIÓN
La puntuación en una escala de 100 puntos se presenta en la siguiente tabla:

1) Investigación previa (IP). Se evalúa una revisión previa del procedimiento a realizar
en la práctica. Los profesores indicarán la forma en la que se entregará esta actividad. PORCENTAJE
TIPO DE ASPECTO A PARCIAL %
ACTIVIDAD EVALUAR # DE ACTIVIDADES FINAL
2) Trabajo de laboratorio (TL). Se evalúa el orden de los resultados obtenidos durante POR REALIZAR
la práctica, así como los cálculos de los resultados preliminares. Se deberán entregar
en formatos proporcionados por los profesores al finalizar la práctica.
Investigación IP (15 %)
3) Informe de trabajo (IT). Se evalúa el informe en cuanto a claridad y presentación, Previa (IP)
así como la consistencia entre los resultados experimentales, el resultado del análisis
reportado y si la información se procesó adecuadamente. Se entregará una semana Práctica Trabajo de TL (10 %)*
Convencional laboratorio (TL) 55
después de la realización de la práctica.

4) Exámenes parciales (EP). Se evalúan los conocimientos adquiridos en cada una de Informe de trabajo IT (30 %)
las prácticas desarrolladas. El examen se aplicará una vez revisadas todas las dudas (IT)
de los estudiantes en cada bloque de prácticas.

Exámenes 1 por cada bloque de

Examen 45
parciales (EP) prácticas
SI YA APROBÓ EL LABORATORIO EN SEMESTRES PREVIOS, NO

ES NECESARIO QUE VUELVA A CURSARLO EN EL SEMESTRE

TOTAL 100
2025-1
*En caso de contingencia los profesores indicarán como se evaluará o distribuirá
PARA LOS ALUMNOS QUE HAYAN ACREDITADO EL este porcentaje en la calificación.

LABORATORIO EN SEMESTRES ANTERIORES Y VUELVAN A LA CALIFICACIÓN EN EL ACTA SERÁ 50 % TEORÍA Y

50 % LABORATORIO.
CURSARLO, SE TOMARÁ LA PRIMERA CALIFICACIÓN
PARA APROBAR LA ASIGNATURA, SE DEBE APROBAR
APROBATORIA PARA SU PROMEDIO CON LA TEORÍA LA TEORÍA Y LABORATORIO “SIN EXCEPCIONES”.

SI USTED APRUEBA EL LABORATORIO EN ESTE SEMESTRE NOTAS.

2025-1 Y REPUEBA LA TEORÍA, SU CALIFICACIÓN DE Es requisito contar con:

ü El 80% de asistencia al curso (10 minutos de tolerancia).

LABORATORIO SE GUARDARÁ SOLO POR DOS SEMESTRES
ü Entrega puntual de los productos a evaluar (IT, TL, CP y EP).
(2025-2 Y 2026-1)

V VI
 ART. 8.- Después de manipular sustancias químicas es necesario lavarse las manos con
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO agua y jabón.
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN ART. 9.- Si se utilizan parrillas o cualquier otro equipo, se deberá estar atento en su manejo
DIVISIÓN DE CIENCIAS QUÍMICO-BIOLÓGICAS para evitar un accidente.
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICAS
REGLAMENTO GENERAL DE SEGURIDAD E HIGIENE PARA LOS ART. 10.- En caso de ingestión, derrame o inhalación de algún reactivo por parte de algún
LABORATORIOS DE LA SECCIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA estudiante, deberá ser notificado al asesor del grupo, el cual tomará las acciones
pertinentes, previa consulta de las hojas de seguridad.

OBJETO DEL REGLAMENTO

ART. 11.- Al término de la sesión experimental, el asesor de grupo, deberá regresar los
Dar a conocer las reglas de seguridad e higiene que deben cumplirse al ingresar a los
Laboratorios de Química Analítica. reactivos al inter-laboratorio y las disoluciones empleadas a su lugar de resguardo
correctamente etiquetadas con la etiqueta del Sistema de Gestión de Calidad.

ART. 1.- Al ingresar Alumnos, Profesores, personal de la Sección y visitas deben portar bata
ART. 12.- Todas las personas que elaboren disoluciones y/o generen residuos deben
blanca, se realice actividad experimental, examen o cualquier otra actividad dentro del
etiquetar correctamente los frascos que se utilicen para este propósito utilizando la etiqueta
laboratorio, (excepto personal de limpieza o mantenimiento quienes usan su uniforme).
del Sistema de Gestión de Calidad (solicitar al laboratorista) y colocarse en los lugares
Durante la actividad experimental debe usarse lentes de seguridad y zapato cerrado en el asignados.
laboratorio.
ART. 2.- Se deberán conservar limpias las instalaciones (en especial las campanas de ART. 13.- Los residuos de cada experimento deberán tratarse y eliminarse
extracción, canaletas y tarjas de las mesas de laboratorio), el material y el equipo de trabajo adecuadamente por los alumnos, previa consulta del diagrama ecológico incluido en el
(incluyendo las balanzas analíticas) al inicio y al final de cada sesión experimental. manual de prácticas y con el apoyo del asesor. Los ácidos y bases deben ser tratados sin
demora.
ART. 3.- Se deberá guardar orden y disciplina dentro del laboratorio, durante la sesión
experimental deberán colocar las mochilas en los anaqueles que están indicados, no jugar, ART. 14.- Cuando el residuo no pueda ser eliminado, el alumno deberá resguardarlo, en
no correr. un contenedor, debidamente etiquetado y cerrado, y colocarlo en el anaquel destinado
para ello.
ART. 4.- Queda estrictamente prohibido fumar, consumir alimentos y bebidas dentro del
laboratorio y en el inter del mismo, ya que muchas de las sustancias químicas que se ART. 15.- Antes de iniciar las actividades experimentales se le solicitará al laboratorista el
emplean son corrosivas y/o tóxicas. material y equipo necesarios, para ello, una persona responsable del equipo dejará su
credencial (únicamente de la UNAM) en depósito y firmará un vale por el material y equipo
ART. 5.- Es importante que antes de trabajar, el estudiante conozca las características de recibidos. En caso de que existiera un defecto en el material o equipo recibido, éste deberá
las sustancias químicas que va a utilizar para que pueda manipularlas adecuadamente (se ser anotado en el vale.
deberá apoyar en la consulta de las hojas de seguridad).
ART. 16.- Es responsabilidad del alumno revisar el estado en que recibe el material, ya
ART. 6.- Para la extracción de reactivos líquidos, se deberán emplear perillas de hule y que al término de la sesión experimental lo debe regresar en las mismas condiciones en
nunca succionar con la boca. las que lo recibió y perfectamente limpio.

ART. 7.- Los reactivos químicos no deberán ser manipulados directamente, se deberán ART. 17.- En caso de extravío o daño del material o equipo de laboratorio, se resguardará
usar implementos como pipetas, espátulas, cucharas, etc. el vale de solicitud de material y la credencial del estudiante responsable del daño o
extravío hasta su reposición con iguales características.

VII VIII
ART. 18.- Los alumnos que adeuden material de laboratorio, deberán reponerlo a la mayor PROTECCION PERSONAL
brevedad posible o a más tardar el último día de realización de prácticas, de lo contrario
los deudores serán reportados al Departamento de Servicios Escolares. CUANDO EMPIECES A TRABAJAR EN EL LABORATORIO: Te indicarán cómo

se deben utilizar los instrumentos que vayas a usar. Además, deberás saber dónde
ART. 19.- El número máximo de alumnos que podrán permanecer en el cuarto de balanzas
(L-101-102) será el mismo que el número de balanzas disponibles. se encuentran los extintores, el botiquín, la ducha, los aparatos lavaojos, y las

ART. 20.- Cuando sea asignada, una gaveta a los alumnos y por razones de olvido o salidas de emergencia.
pérdida de la llave, queda prohibido forzarla. En tal situación los alumnos deberán solicitar
su apertura, por escrito, al responsable del laboratorio o Jefe de Sección, previa
autorización del profesor del grupo. Queda prohibido guardar residuos en las gavetas.
ANTES DE EMPEZAR UNA REACCIÓN: Deberás conocer la peligrosidad de los

ART. 21.- La gaveta podrá usarse hasta la semana 15 del semestre por lo que, el grupo reactivos que vayas a usar, así como de los productos que se obtienen de la propia
de estudiantes deberán desocuparla a más tardar en la semana 16.
reacción (toxicidad, inflamabilidad, riesgo de explosión, riesgos biológicos) y
ART. 22.- No se permitirá el uso de balanzas y equipos a personas ajenas al laboratorio o
fuera del horario de su sesión experimental. Si una persona ajena al laboratorio solicita tomarás las precauciones apropiadas (por ejemplo, trabajar en la campana
reactivos, equipo o materiales debe acudir con el Jefe de Sección con un oficio de solicitud.
extractora).

ART. 23.- Queda prohibida la entrada al Inter del laboratorio y al Laboratorio de la Sección
a toda persona ajena (incluyendo niños).
AL TERMINAR UNA SESIÓN: Tendrás que tratar los residuos indicados por los
ART. 24.- Usar correctamente los equipos, consultando las guías de uso y registrando en
profesores para eliminar su peligrosidad o los almacenarás adecuadamente
las bitácoras, así como dejarlos limpios al terminar de usarlos.
clasificados y etiquetados para que sean recolectados. SE DEBEN DEJAR LAS
ART. 25.- Si un equipo está descompuesto, se debe reportar en el formato FITE-CQ-DEX-
03-02 que se encuentra al lado del Inter especificando lo que se observa del problema y MESAS DE TRABAJO LIMPIAS ANTES DE RETIRARSE.
se debe entregar al laboratorista.

ART. 26.- Si se tiene alguna queja al incumplimiento de la seguridad en los laboratorios,

AL ABANDONAR EL LABORATORIO: Te asegurarás de que no queda encendida
manifestarla en el buzón de quejas y sugerencias.
la campana extractora y ninguna fuente de peligro: gases, agitadores, calentadores,

etc.

IX X
Los alumnos deben:

1) Cubrir las prácticas que

NOTA AL PROFESOR:
comprende este manual.

2) Elaborar una bitácora; la cual

PROPORCIONAR A LOS ALUMNOS LA FORMA EN LA QUE ELLOS SE PODRÁN

debe contener nombre de la práctica o COMUNICAR FUERA DEL HORARIO DE CLASES EN CASO DE QUE TENGAN

sesión de trabajo, fecha, todos los DUDAS (CORREO, BLOG, FACEBOOK, TELÉFONO O ALGÚN OTRO MEDIO).

cálculos y las mediciones (pesadas,

preparación de disoluciones, cambios

de procedimiento, observaciones, etc.)

resultados (medidas de propiedad,

NOTA AL ESTUDIANTE:
gráficas), análisis de resultados

(cálculos de contenido, identificaciones,

EN CASO DE TENER ALGUNA DIFICULTAD PARA ASISTIR EN ALGUNA DE LAS
reacciones efectuadas) conclusiones y
SESIONES O SI EXISTE ALGÚN PROBLEMA CON LOS RECURSOS
referencias consultadas.
COMPARTIDOS POR LOS PROFESORES, COMUNICARSE A LA BREVEDAD

3) En caso de error NO BORRAR

CON ELLOS.

NADA solo cruzar con una línea y

escribir lo corregido abajo o a un lado.

XI XII
 Práctica No. 1. Det. Zn por curva directa y EAA

PRÁCTICA No. 1 concentrado y calor, hasta que no se generen humos amarillos, reflejo de que todavía hay
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE ZINC EN UN MULTIVITAMÍNICO una reacción redox presente.

MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIÓN DIRECTA Y

El zinc es un nutriente que nos aporta casi todas las enzimas de la piel, incluyendo aquellas
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA
que se encargan de crear el colágeno y producir nuevas células, tanto el zinc como el hierro
son fundamentales en la producción de células en los folículos capilares y en el transporte
I. OBJETIVOS
de oxígeno, etc.
ü Conocer el fundamento, las partes básicas y manejo del espectrofotómetro de
absorción atómica, para obtener resultados confiables en este tipo de instrumento.
A continuación, se presenta un esquema de un espectrofotómetro de absorción atómica
ü Interpretar y relacionar las variables a utilizar para efectuar el cálculo de contenido
con flama (EAA-F).
de zinc en un multivitamínico comercial por una curva de calibración directa.

II. INTRODUCCIÓN
Lectura electrónica Detector
La curva de calibración se prepara mediante diluciones de una solución estándar (stock) de
la misma naturaleza del analito a determinar en la muestra, en un intervalo que pueda ser
trabajado en el instrumento y la muestra se prepara de manera tal que la concentración del
analito en la muestra o en su dilución se encuentre dentro de dicho intervalo.
Las soluciones preparadas se llevan al instrumento de medición y se registra una respuesta
P para cada dilución de estándar y de muestra. Los resultados se grafican P=
f(concentración de cada dilución del estándar). Se debe evaluar la linealidad de la respuesta
Lámpara cátodo hueco
en relación a la concentración del analito mediante la inspección gráfica y se efectúa Monocromador

además la regresión lineal para determinar la mejor ecuación que exprese el

comportamiento de la misma. La interpolación de la señal de la muestra (o su dilución) en Nebulizador
la recta permite conocer la concentración de esta. Figura 1. Diagrama general de un sistema de espectrofotometría de absorción atómica de

flama. Adaptado de Agilent Technologies (1).

La Espectrometría de Absorción Atómica (EAA) se utiliza habitualmente en la determinación
cuantitativa de soluciones de iones metálicos Se ha aplicado a determinación de hasta 70
elementos, en concentraciones trazas (ppb) y hasta 1%. Cabe mencionar que esta técnica
no diferencia estados de oxidación de los metales, por lo que solo se mide la cantidad de
metal total.

Previo a la cuantificación por EAA es necesario realizar una digestión ácida a fin de eliminar
la presencia de materia orgánica, aún en muestras líquidas y además para solubilizar los
metales, sobretodo en muestras sólidas. Para ello se utiliza normalmente ácido nítrico

1 2
 Práctica No. 1. Det. Zn por curva directa y EAA Práctica No. 1. Det. Zn por curva directa y EAA

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES) 4.2 Preparación de sistemas para la curva de calibración problemas

MATERIAL Y EQUIPO REACTIVOS Tabla 1 Preparación de los sistemas

1 piseta Muestra:Multivitamínico Fortimin (sol. Sistema 0 1 2 3 4 5 6Zn
1 espátula oral infantil) o SIMIVIT KIDS Soln. Acida (mL) 3 3 3 3 3 3 3
1 Pipeta volumétrica de 1, 2, 3, 4, 5 mL Cloruro de Zn Soln. Stock Zn aprox. 4 ppm (mL) 0 1 2 3 4 5 0
3 vasos de precipitados de 50 mL Soln. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 0.12
1 micropipeta de 100 µL (vol. Variable) 10 10 10 10 10 10 10
R-4 Reunir los residuos de todos los sistemas (0-7)
1 parrilla con agitador magnético c/barra
6 tubos de ensaye con gradilla Ácido nítrico R.A.
1 Matraz volumétrico de 25 mL
6 Matraces volumétricos de 10 mL
4.3 Obtención de resultados

a) Optimizar las condiciones de medición en el equipo (EAA-Fl).

Siguiendo el programa que controla el equipo, revisar que estén las siguientes condiciones:
muestreo manual, mezcla de gases = acetileno /aire, señal absorbancia, posición correcta
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL de la lámpara, longitud de onda (l) 213.9 nm, ancho de banda = 0.7, voltaje de la
lámpara =15 µA, etc. (para determinación de zinc)
4.1 Preparación de soluciones (algunas soluciones se encontrarán preparadas en el
anaquel de la asignatura, revisar y solo preparar la que falte)
ü Solución de ácido nítrico 1 M. b) Optimización de la lámpara de cátodo hueco.
ü Solución estándar de Zn. Se mide 1 ml de una solución de Zn elemental 100 ppm El procedimiento se realizará siguiendo las indicaciones del profesor para alinear la lámpara
con pipeta volumétrica y se afora a 25 ml con solución ácida (soln. Stock). de cátodo hueco hacia el monocromador y la posición del quemador.
ü Solución problema del multivitamínico - Medir 0.1 mL del multivitamínico (sol.
oral infantil) agregar con mucho cuidado 2 mL de ácido nítrico concentrado,
mezclando con agitación magnética y con calentamiento en parrilla a 100 oC c) Medición de la Absorbancia.
(colocarla dentro de la campana de extracción), para eliminar el azúcar, hasta que Considerando las indicaciones del programa de trabajo del equipo, primero se emplea agua
no se generen humos amarillos. Enfriar, disolver y aforar a 10 mL con Soln. Ácida. destilada y después el blanco reactivo (sistema blanco) para calibrar la señal a cero.
(Soln. Problema)1 Después se solicitan las soluciones estándar y problemas, anotar la lectura promedio de
las mediciones que realiza (Tabla 2) y graficar los resultados que se van obteniendo.

1
No sobrepasar la temperatura y tener paciencia hasta que la solución quede lo más
transparente posible

3 4
 Práctica No. 1. Det. Zn por curva directa y EAA Práctica No. 1. Det. Zn por curva directa y EAA

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES ü Optimización de la lámpara de cátodo hueco; mismas consideraciones del punto
anterior.
Tabla 2. Resultados experimentales obtenidos. ü Calibración con el sistema blanco y lectura de los sistemas de la curva de
Sistema Zn (ppm) estándar Absorbancia calibración; mismas consideraciones del punto anterior. No olvidar mencionar qué
1 se debe hacer una vez que se terminó de usar el equipo ya para apagarlo.

2 ü Disposición de residuos; mencionar cómo se dispusieron los residuos en la sesión

experimental.
3

4 VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Agilent Technologies. An Introduction to the Fundamentals of Atomic Absorption
5 Spectroscopy (AAS). [Link]
spectroscopy/atomic-absorption/flame-atomic-absorption-instruments/how-does-
6 aas-work-aas-faqs
2. Harris, D. C., “Análisis Químico Cuantitativo”, 3ª ed., Iberoamericana, México,
Muestra --- 1992.
diluida 3. Skoog/ West, “Química Analítica”, editorial Mc Graw Hill.

Ecuación de la recta : ____________________________ VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS

La inhalación de vapores de ácido nítrico y sus productos de reacción produce trastornos
Coeficiente de determinación (r2): ___________________ en las vías respiratorias, usarlo siempre en la campana extractora.
La solución ácida sobrante de todo el grupo se debe mezclar y guardar bien etiquetada
VI DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir: indicando fecha de preparación y concentración aproximada en frasco de vidrio.
ü Preparación del STD; indicando los volúmenes, masas y/o concentraciones reales
que se emplearon en caso de una modificación a la parte experimental reportada en Mezcla de Zn!
el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y densidad (en caso en sol. ácida!
de reactivos líquidos).
ü Preparación de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar la R-4!

marca y presentación de la muestra empleada en caso que el alumno la haya

proporcionado.
ü Preparación de los sistemas de la curva de calibración; en forma de tabla incluyendo Agregar aproximadamente de 100 a
número y nombre. En el caso de la solución ácida indicar la concentración molar 150 mL de agua!
empleada.
ü Optimización del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
imágenes o dibujos y será con base a la explicación del profesor no a lo reportado Eliminar con abundante agua!
en el Manual. Recuerde especificar la mezcla de gases, longitud de onda y voltaje
de la lámpara que realmente se emplearon.

5 6
 Práctica 2. Curva de calibración indirecta y Espectroftometría VIS

Práctica 2. Determinación de Fe (II) por curva de calibración '/)*"# +"#

! = #! ∗
*$%&'&
indirecta y espectrofotometría VIS
Donde Vst, Vaforo, representan los volúmenes de estándar del analito X y de aforo
respectivamente. Cst corresponde a las concentraciones molares del estándar del analito
agregado para generar la reacción.
OBJETIVOS
Es importante señalar que el volumen de Y en todos los sistemas es constante y el que
cambia es el de X.
• Obtener el espectro de absorción del complejo Fe(Ofen)3 para seleccionar la
longitud de onda óptima de trabajo. Por lo que se puede graficar P=f (Vst Cst / V aforo), obteniéndose una función de pendiente
• Aplicar los conocimientos teóricos para analizar de manera correcta la curva de igual a Kyb/a y ordenada al origen igual a KyVyCy/Vaforo.
calibración indirecta para cuantificar adecuadamente Fe(II) en un medicamento
comercial. El Fe(II) presente en las disoluciones estándar o en una muestra comercial formará un
complejo estable (rojo-naranja) al reaccionar con o-fenantrolina, que absorbe a una longitud
INTRODUCCIÓN de onda de 510 nm. El complejo puede formarse en un intervalo de pH de 2 a 9, y aunque
éste es suficientemente amplio, se recomienda adicionar acetato de sodio o amonio para
Los principios de preparación y trazo de una curva de calibración consideran que la mantener el pH en un valor adecuado. Además, NO se recomienda el adicionar algún
respuesta del instrumento es lineal respecto a la concentración de la sustancia a cuantificar. reductor, para asegurar que solo se determine el hierro presente como Fe(II).
Sin embargo, debe considerarse que si la curva es indirecta existe una o varias reacciones
efectuadas en los sistemas de preparación, dado que la sustancia de interés da señal muy CUESTIONARIO PREVIO
pobre o no da señal, este reactivo que genera la reacción debe encontrarse en exceso, 1. Investigue e indique las condiciones experimentales adecuadas para que se lleve a
considerando el siguiente estado de equilibrio de manera general:
cabo la reacción entre Fe(II) y orto-fenantrolina y la cinética de reacción de la misma.
2. Indique que especie química de hierro es la que se absorbe o es biodisponible al
aX bY → cZ Keq’ > 1
ser humano.
inicio VyCy 3. Realizar los cálculos para la preparación de soluciones necesarias en la práctica
agrega Vst Cst (emplee los datos de reactivos que investigue).
equilibrio ~0 VyCy-b/a VstCst c/a VstCst

PARTE EXPERIMENTAL
Cuando la propiedad la da Z el modelo matemático que describe la respuesta gráfica es:
MATERIAL SUGERIDO POR EQUIPO REACTIVOS
7 matraces volumétricos de 10 mL Muestra: comprimidos de
3 matraces volumetricos de 25 mL FeSO4
! = #! [%]
Pipetas volumétricas de 1, 2, 4, 5 mL y 6 mL, 1 c/u.
2 pipetas volumétricas de 3 mL. Sulfato ferroso amoniacal
1 micropipeta de 20-200 µL
considerando el estado de equilibrio anterior entonces: 1 varilla de vidrio O-fenantrolina
3 vasos de precipitados de 50 mL
'/)*"# +"# 1 piseta con agua destilada Ácido sulfúrico (H2SO4)
[%] = 3 propipetas o perilla
*$%&'& 1 parrilla de agitación magnética
Espectrofotómetro VIS1 con 2 celdas

1
No enceder el espectrofotómetro hasta 5 minutos antes de usarlo. Pregunte a los profesores antes.

7 8
 Práctica 2. Curva de calibración indirecta y Espectroftometría VIS Práctica 2. Curva de calibración indirecta y Espectroftometría VIS

Preparación de soluciones Obtención del espectro de absorción.

Solución Stock de Fe(II): De la disolución de 5,000 ppm de sulfato ferroso amoniacal (ya Una vez transcurrido el tiempo, seleccionar el sistema 5 de la curva y obtener el espectro
está preparada y se encuentra en el estante de reactivos), tomar con micropipeta 0.110 mL de absorción de 600 a 400 nm calibrando con el blanco en cada cambio de longitud de onda
(110 µL) y aforar a 25 mL para obtener una concentración aproximada de Fe(II) de 3 ppm (encender el espectrofotómetro 5 min antes de utilizarlo). Seleccionar la longitud de onda
(por equipo). de máxima absorción.

O-fenantrolina 0.2%, esta disolución ya está preparada: Pesar aproximadamente 100 mg

Tabla 3. Espectro de absorción del complejo hierro(II)-o-fenantrolina
de orto-fenantrolina, disolver en 20ml de agua y adicionar 10 gotas de ácido sulfúrico
concentrado, para facilitar la solubilidad y aforar a 50 mL con agua destilada. λ (nm) 600 590 580 570 560 550 540 530 520 510 500

A
Acetato de sodio 0.2 M esta disolución ya está preparada: Tomar 50 mL en un vaso de
precipitados. λ (nm) 490 480 470 460 450 440 430 420 410 400

A
Solución problema: Se requiere de una muestra comercial que contenga sulfato ferroso.
Realizar el tratamiento adecuado y las diluciones necesarias, de tal manera que se tengan
25 mL de solución problema de concentración aproximada a 3 ppm de Fe(II).

0.6

Preparación de la curva de calibración indirecta.

0.5
De acuerdo con la tabla 1, preparar los sistemas, adicionando las soluciones en el orden
establecido.
0.4

A
0.3
Tabla 1. Curva de calibración indirecta.

Sistema 0 1 2 3 4 5 Dil. Problema 0.2

Fe(II) Stock (mL) 0 1 2 3 4 5 0

0.1
Fe(II) Prob (mL) 0 0 0 0 0 0 3

Acetato de sodio (mL) 1 1 1 1 1 1 1 0

400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
o-fenantrolina (mL) 1 1 1 1 1 1 1 Longitud de onda (nm)

Aforo agua destilada 10 10 10 10 10

(mL) Figura 2. Espectro de absorción del complejo Fe(II)-o-fenantrolina

Una vez preparados los sistemas de las curvas, se recomienda esperar al menos 20 min, Medición de la absorbancia para cada sistema de la curva.
para favorecer el desarrollo máximo del color característico del complejo (rojo-naranja).

9 10
 Práctica 2. Curva de calibración indirecta y Espectroftometría VIS Práctica 2. Curva de calibración indirecta y Espectroftometría VIS

Medir a la longitud de onda seleccionada cada uno de los sistemas empezando del sistema El Informe de trabajo debe de contener lo siguiente, empleando un formato de reporte.
más diluido al más concentrado, enjuagando la celda en cada lectura con el sistema
siguiente. Anotar los resultados en la tabla 3 realizar el tratamiento de datos adecuado. 1. El procedimiento experimental de cada actividad realizada durante la sesión
experimental.
2. Las tablas de resultados.
3. Los gráficos de: (a) espectro de absorción A=f(λ) y especificar la longitud de onda
Tabla 3. Resultados obtenidos para la curva de calibración indirecta. seleccionada, (b) curva de calibración indirecta A=f(concentración de Fe(II) std en
ppm y mol/L).
Sistema [Fe] (ppm) [Fe](mol/L) A Ecuación de la recta [Fe] prob
4. Análisis de la linealidad de las curvas por el método de mínimos cuadrados.
1 5. Establecer las ecuaciones que relacionan cada una de las variables con su gráfico
A=f(Fe)
correspondiente, especificar el valor de la pendiente y la ordenada al origen
2 indicando sus unidades.
En unidades de ppm ppm
6. Los cálculos realizados para determinar la concentración de Fe(II) std en cada
3
sistema de la curva, así como los cálculos correspondientes para la cuantificación
4 en la muestra problema.
7. Calcular la concentración de Fe(II) cuantificada y compararlas con la reportada en
En unidades de mol/L mol/L
5 el marbete de la muestra.
8. Conclusiones y referencias.
Problema
---
diluido MANEJO DE RESIDUOS

• Medir el pH de la solución sobrante de Fe(II)std y si éste se encuentra entre 5.5 y 8

desechar a la tarja.
0.6 • La solución sobrante de Fe(II) problema y el acetato de sodio pueden verterse a la
tarja.
0.5 • Todos los sistemas de la curva, así como las soluciones restantes de o-fenantrolina
deben almacenarse en un frasco de residuos perfectamente etiquetado.
0.4
REFERENCIAS
A

0.3
1. Harris, D. C., “Análisis Químico Cuantitativo”, 3ª ed., Iberoamericana, México, 1992
2. Skoog/ West, “Química Analítica”, editorial Mc Graw Hill
0.2 3. Determinación colorimétrica del hierro [en línea] disponible en:
[Link]
0.1 on_Colorimetrica_del_Hierro.pdf
4. Determinación de hierro por el método 1-10-fenantrolina [en línea] disponible en:
0 [Link]
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2
[Fe(II)] std (ppm)

Figura 3. Curva de adición patrón sin dilución para Fe(II)-o-fenantrolina.

11 12
 Práctica 3. Espectrofotometría VIS. Adiciones patrón con y sin dilución.

Protocolo desarrollado por:

Rosa María Cervantes Carrizosa,
estudiante del Programa de Procesos Alimentarios

Señal Instrumental
Universidad Tecnológica de Tehuacán
Asesores:
Dr. José de Jesús Olmos Espejel (FES Cuautitlán, UNAM),
MNH. Erika Teresa Díaz Oreján (UTTehuacán).
Proyecto PAPIME PE208921 A
B
Práctica 3. Determinación de azul de metileno por espectrofotometría VIS y

curva de adiciones patrón con y sin dilución.

Figura 1. Comparación entre una curva de calibración externa (A) y una curva con adiciones patrón (B).
OBJETIVO

• Aplicar los conocimientos teóricos para analizar de manera correcta las curvas de En la presente práctica se realizará una curva de adición patrón para cuantificar
adición patrón con y sin dilución, con el fin de cuantificar adecuadamente azul de espectrofotométricamente la cantidad de azul de metileno presente en una muestra
timol en un desinfectante para acuarios. comercial, para ello se aprovechará su absorción en el espectro visible a una longitud de
onda de 510 nm.
INTRODUCCIÓN

Una de las maneras más fáciles de realizar una cuantificación es a través de la construcción CUESTIONARIO PREVIO
de una curva de calibración, la cual implica la preparación de una serie de diluciones de un
reactivo estándar concentrado (solución stock) de la misma naturaleza del analito. Sin
embargo, cuando la matriz de la muestra a analizar es muy compleja, es conveniente
adicionar además del estándar, una cantidad constante de la muestra misma con el objetivo 1. Describa cómo se prepara una curva de adición patrón
de compensar distintos tipos de interferencias, a esta curva se le conoce como curva de 2. Explique las diferencias entre una curva de calibración y una curva de adición patrón
adición patrón. 3. ¿Cómo se debe de realizar la corrección de la propiedad medida para eliminar el
efecto de dilución?
Una vez preparados los sistemas de la curva de adición patrón, se colocan en el instrumento 4. Realizar los cálculos para la preparación de soluciones necesarias en la práctica
de medición y se obtiene su respuesta (P). Los resultados se grafican P=f(concentración (emplee los datos de reactivos que investigue).
del estándar), esperando una respuesta lineal que no parte del origen y realizando el
tratamiento matemático adecuado es posible determinar la concentración del analito de
interés.

13 14
 Práctica 3. Espectrofotometría VIS. Adiciones patrón con y sin dilución. Práctica 3. Espectrofotometría VIS. Adiciones patrón con y sin dilución.

PARTE EXPERIMENTAL Solución problema: Se requiere de una muestra comercial que contenga azul de metileno.
Colocar en un vaso de precipitados de 100 mL, aproximadamente 10 mL de producto. Medir
MATERIAL SUGERIDO POR EQUIPO 1.0 mL y colocarlos en un matraz volumétrico de 100 mL. Aforar con agua y marcar como
dilución problema 1. Tomar 1.0 mL de esta dilución y colocarlos en un matraz volumétrico
7 matraces volumétricos de 10 mL. 3 vasos de precipitados de 50 mL.
de 25 mL. Aforar con agua destilada y marcar como dilución problema 2.
1 matraz volumétrico de 25 mL. 3 vasos de precipitados de 250 mL.

2 matraces volumétricos de 100 mL. 1 piseta con agua destilada.

Preparación de las curvas de adición patrón.
1 gradilla con 7 tubos de ensayo grandes. 3 propipetas o perillas de succión.
De acuerdo con las tablas 1 y 2, preparar los sistemas, adicionando las soluciones en el
4 pipetas volumétrica de 1 mL. REACTIVOS orden establecido.
2 pipetas volumétricas de 4 mL.
Para la curva de adición patrón sin dilución (tabla 1) utilizar matraces volumétricos de 10
Azul de metileno mL.
Pipetas volumétrica de 2, 3, 5 mL (1 c/u).
Muestra: desinfectante para acuarios
Espectrofotómetro Visible con dos celdas de Tabla 1. Curva de adición patrón SIN dilución.
vidrio o plástico.
Sistema 0 1 2 3 4 5 6

Azul de metileno Stock (mL) 0 0 1 2 3 4 5

Toxicidad aguda (oral, cutánea, por inhalación), categoría 4 Dil. Prob. 2 (mL) 0 1 1 1 1 1 1
Irritación cutánea, categoría 2
Irritación ocular, categoría 2 Aforo agua destilada (mL) 10 10 10 10 10 10 10
Sensibilización cutánea, categoría 1
Toxicidad específica a un órgano definido, exposición única, categoría 3

Para la curva de adición patrón con dilución (tabla 2) utilizar tubos de ensayo para su
Preparación de soluciones preparación.

Solución Concentrada de azul de metileno (Se encuentra preparada en el estante de Tabla 2. Curva de adición patrón CON dilución.
reactivos del laboratorio): Pesar aproximadamente 30 mg de azul de metileno RA en un
vaso de precipitados de 50 mL. Agregar aproximadamente 40 mL de agua destilada y Sistema 0 1 2 3 4 5 6
colocar una barra magnética para disolver usando una parrilla de agitación. Trasvasar con
Azul de metileno Stock (mL) 0 0 1 2 3 4 5
cuidado a un matraz volumétrico de 100 mL. Enjuagar el vaso y la barra magnética con
porciones de 10 mL de agua destilada que se recuperarán en el matraz volumétrico. Repetir Dil. Prob. 2 (mL) 0 1 1 1 1 1 1
hasta que no haya color en el vaso y la barra.
Agua destilada (mL) 3 3 3 3 3 3 3
NOTA PARA EL PROFESOR: Indicar a los estudiantes la cantidad pesada de azul de
metileno RA indicada por el responsable de la asignatura para el cálculo de la concentración
de RP.
Medición de la absorbancia para cada sistema de las curvas.
Solución Stock de azul de metileno (Se preparará una disolución por equipo): Tomar
Medir la absorbancia a una longitud de onda de 640 nm, comenzando desde el sistema
aproximadamente 10 mL de solución concentrada de azul de metileno. Medir 4.0 mL de la
más diluido hasta el más concentrado, enjuagando bien la celda en cada lectura con el
disolución y colocarlos en un matraz volumétrico de 100 mL. Aforar con agua destilada y
sistema siguiente. Anotar los resultados en las tablas 4 y 5, y realizar el tratamiento de datos
marcar como disolución stock.
adecuado.

15 16
 Práctica 3. Espectrofotometría VIS. Adiciones patrón con y sin dilución. Práctica 3. Espectrofotometría VIS. Adiciones patrón con y sin dilución.

3. Los gráficos de: curvas de adición patrón con y sin dilución A=f(concentración de
AM std en ppm y mol/L).
Tabla 4. Resultados obtenidos para la curva de adición patrón SIN dilución. 4. Análisis de la linealidad de las curvas por el método de mínimos cuadrados.
[AM] 5. Establecer las ecuaciones que relacionan cada una de las variables con su gráfico
Sistema [AM] (ppm) [AM](mol/L) A640 nm Ecuación de la recta correspondiente, especificar el valor de la pendiente y la ordenada al origen
Dil. Prob. 2 indicando sus unidades.
6. Los cálculos realizados para determinar la concentración de AM std en cada sistema
1 de la curva, la corrección de la absorbancia, así como los cálculos correspondientes
A=f(AM) para la cuantificación en la muestra problema.
2
7. Calcular la concentración de AM en el producto cuantificada por ambas curvas y
En unidades de ppm compararlas con la reportada en el marbete de la muestra.
3
ppm 8. Conclusiones y referencias.
4
En unidades de
5 MANEJO DE RESIDUOS
mol/L
mol/L
6 • Todos los sistemas de la curva, así como las soluciones restantes de AM deben
almacenarse en un frasco de residuos perfectamente etiquetado.
AM = azul de metileno

REFERENCIAS
Tabla 5. Resultados obtenidos para la curva de adición patrón CON dilución.
1. Harris, D. C., “Análisis Químico Cuantitativo”, 3ª ed., Iberoamericana, México, 1992
[AM] 2. Skoog/ West, “Química Analítica”, editorial Mc Graw Hill
[AM] Ecuación de la 3. Visible Light Spectroscopic Analysis of Methylene Blue in Water; What Comes after
Sistema [AM](mol/L) A640 nm !)*+ -.
!"##$%&'(
(ppm) recta Dil. Prob. Dimer? Amparo Fernández-Pérez and Gregorio Marbán ACS Omega 2020 5 (46),
2 29801-29815.
4. Steve Jacques (Bioengineering, University of Washington) and Scott Prahl (Oregon
1 Tech). Methylen blue spectra. [Link]
Acorr=f(AM)
2
En unidades
3 de ppm
ppm
4

5 En unidades
de mol/L mol/L
6

El Informe de trabajo debe de contener lo siguiente, empleando un formato de reporte.

1. El procedimiento experimental de cada actividad realizada durante la sesión

experimental.
2. Las tablas de resultados.

17 18
 1ª Serie de ejercicios

1ª SESION DE EJERCICIOS

1. El coeficiente de Absortividad Molar de una solución acuosa de fenol a 211 nm es de 3. Se sabe que el cianuro con ciertos metales forma un complejo con estequiometria 1:1 de
6170 M-1 cm-1 cuando se mide en celdas de 1 cm calcular el intervalo de concentraciones color rojo a valores de pH básicos. El coeficiente de absortividad de este compuesto es
en el cual la absorbancia no es menor a 0.15 ni mayor de 0.8. 1909.4 cm-1 M-1.

Respuesta: 2.4311 X10-5 a 1.2965X10-4 M a) ¿Cuál sería el intervalo de longitud de onda en el que podría absorber el complejo?
Respuesta: 470-500 nm
2. Se requiere cuantificar permanganato de potasio en un desinfectante de peceras, para b) ¿Cuál sería el valor de absorbancia que se esperaría para los siguientes valores de
ello se miden 0.5 mL de la muestra y se aforan a 50 mL. De esta última se miden 2 mL concentración de cianuro? Llenar la tabla y esbozar la gráfica A vs Concentración
y se aforan a 25 mL, dando como resultado una absorbancia de 0.73 y 0.45 a 540 y que se obtendrá. Considerar una celda de longitud de 1 cm de paso óptico.
500 nm, respectivamente.
[CN] x 10-5 M 0 5 13 20 27 41
DATOS: Espectro de Absorción de Permanganato de Potasio Absorbancia

l (nm) 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 Respuesta: 0, 0.0955, 0.2482, 0.3819, 0.5155, 0.7829
Absorbancia 0.23 0.18 0.16 0.18 0.3 0.52 0.78 0.9 0.71 0.42 0.19 0.15 0.17
4. Se desea determinar la cantidad de ácido ascórbico en gomitas pediátricas, para ello
se preparan disoluciones stock de la siguiente manera:
a) Grafique el espectro de absorción y elija la longitud de onda con la que trabajaría una
curva de calibración directa de permanganato de potasio utilizando los datos de su
Disolución Stock (ácido ascórbico). Se pesaron 20 mg del reactivo analítico, se
espectro de absorción. Justifique su repuestas. Respuesta 540 nm
disolvieron con 10 mL de disolución amortiguadora de acetatos pH=4.5 y se aforó a
25 mL con agua destilada (Sol. A). Posteriormente, se tomaron 3 mL de esta última
b) Determina la concentración molar de la muestra con aquella curva que consideres más
disolución, se agregaron 10 mL de disolución amortiguadora y se aforaron a 25 mL
apropiada, explica la razón de la elección. Respuesta: 0.3066 M
con agua destilada (Sol B).
Curvas de Calibración KMnO4
1
Se preparó una curva de calibración como se indica en la siguiente tabla.
540 nm 500 nm
0.8
y = 3009.7x - 0.0083
R² = 0.9998
0.6
Absorbancia

0.4
y = 1547.5x + 0.0086
0.2 R² = 0.9845

0
0 0.00005 0.0001 0.00015 0.0002 0.00025 0.0003 0.00035
Concentración (M)

19
20
 1ª Serie de ejercicios 1ª Serie de ejercicios

Sistema 1 2 3 4 5 6 7 Sistema 1 2 3 4 5 6 7
Sol. B (stock) (mL) 0 1 2 3 4 5 0 Sol. Stock Fe (mL) 0 1 2 3 4 5 0
Sol. Triyoduro 3x10-3 M (mL) 0 1 1 1 1 1 1 Sol. Ácida (mL) 0 3 3 3 3 3 3
Sol. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 3 Sol. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 1
Buffer acetatos (mL) 1 1 1 1 1 1 1 Aforo 10 10 10 10 10 10 10
Aforo 10 10 10 10 10 10 10 Absorbancia 0 0.0744 0.1393 0.2021 0.2718 0.3158 0.1982
Absorbancia 0 1.881 1.631 1.262 1.031 0.709 1.078
Solución Stock: Se tomaron 3 ml de una solución de Fe elemental de 250 ppm y se aforo
a 25 mL (Sol. Stock Fe).
Muestra Problema: Se pesaron 500 mg de gomitas, se adicionaron 15 mL de agua
destilada y se mantuvo en agitación y calentamiento a una temperatura de 40 °C hasta Preparación muestra problema: Se obtuvo el peso promedio de 20 tabletas (!̅ =1.3128 g),
la disolución, se dejó enfriar y se aforó a 25 mL con agua destilada (Dis. 1), se pulverizaron en mortero, posteriormente se pesaron 50 mg de polvo de tabletas,
posteriormente se tomaron 2 mL y aforaron a 10 mL (Dis. Problema). adicionando 5 mL de HNO3 R.A. con agitación y calentamiento a 100°C, se dejó enfriar y
se aforo a 10 mL con solución ácida (Sol. Problema)
a) Calcular la concentración de las soluciones A, B y de los sistemas en unidades de
molaridad. Respuesta: Sol. A =4.5285 X10-3 M Sol.B= 5.4342X10-4 M a) Realice el cálculo parar preparar 25 mL de una solución de Fe elemental de 250

b) Indicar el método de cuantificación utilizado en este análisis y la función del sistema 1 ppm a partir de FeCl3.6H2O Respuesta: 31.0268 mg de FeCl3 .6H2O R.A

de la curva. b) Calcule la concentración de la Sol. Stock Fe elememtal y cada uno de los

c) Realizar el análisis de regresión lineal, analizar el valor de r2 obtenido e identificar sistemas. Respuesta: Sol. Stock = 30 ppm y sistemas [Fe] = 3, 6, 9, 12 y 15 ppm

cada uno de la ecuación. Respuesta: y = -5417.5x + 2.186, r² = 0.996 c) Grafique los datos y determina la m y b de una regresión lineal.

d) Establezca la reacción química balanceada que se lleva a cabo. Respuesta: y = 0.0205x + 0.0161 r² = 0.9956

e) Estimar el valor del Coeficiente de Absortividad del analito que da la propiedad

d) ¿Cuál es el contenido de Fe en mg y % por tableta? Concluya si se acepta o
señalando sus unidades. Respuesta: 5417.5 M-1 cm-1
rechaza, si el criterio de aceptación es de 90 a 110 %.
f) Calcula los mg de ácido ascórbico en el producto y el % de contenido en la forma Respuesta: 23.3153 mg de Fe/ tableta, 97.1470%
farmacéutica analizada. Respuesta: 30.3784 mg por pieza, 101.2613%
MARBETE: Contiene 24 mg de Fe por tableta.
g) Concluir sobre la aceptación o rechazo del producto, si el principio activo debe estar
entre el 95% y 105% sobre lo especificado en el marbete. FeCl3 .6H2O PM= 270.30 g/mol Pureza= 97.5 %
MARBETE: Contenido de ácido ascórbico 30 mg por pieza. Peso promedio 1.012 g.

Ácido Ascórbico pka’s = 4.05, 7.25 PM=176.13 g/mol Pureza= 99.7 %

-
C6H7O6 ↔ C6H6O6 + H+ + 2e- E° = 0.13 V (pH=4.5) I3/ I- E°=0.58

5. Se desea determinar Fe en un multivitamínico “CENTER SILVER”, mediante

Espectroscopia de Absorción Atómica, para ello se preparó una curva de calibración
de la siguiente manera:

21 22
 1ª Serie de ejercicios 1ª Serie de ejercicios

6. Resultados Obtenidos para evaluar la adecuabilidad del sistema en la determinación de a) Escriba la reacción balanceada.
Ampicilina/ Bromhexina en una formulación por espectrofotometría, completar la tabla. b) Calcule la constante de la reacción. R = 1x1053.
Sistema Bromhexina Ampicilina c) Indique el método de cuantificación que se emplea para la cuantificación.
d) Desarrolle la tabla de variaciones molares considerando la estequiometria.
1 0.5698 0.659
e) Mencione que especie(s) da(n) propiedad a la longitud de onda de trabajo
2 0.5841 0.676 (550nm).
3 0.6113 0.674 f) Calcule la concentración en ppm de cromo en la muestra de agua en unidades de
mg/L. R = 23.80 mg/L Cr
4 0.5817 0.677
g) Si la norma sobre descargas a cuerpos de agua NOM-ECOL-001-1996 considera
5 0.5852 0.657 que la concentración de cromo total debe de ser menor de 10 ppm, ¿podría
6 0.5398 0.664 eliminarse por el desagüe elagua de desecho? Comente que debe hacerse al
respecto.
Promedio
Desviación Estándar 8. Se quiere hacer el análisis de Pb(II) en agua de pozo (solución problema) ya que la
contaminación ha afectado a las personas de los alrededores y se presume de una
CV % intoxicación crónica. Para la cuantificación se aprovecha la cuantitatividad de la
siguiente reacción:

Señalar si el sistema de medición empleado funciona adecuadamente ¿Por qué? Pb(II) + 2 HDz Û Pb(Dz)2 + 2 H+ D`` = 1014.3

7. Como es bien sabido el Cr (VI) es un metal tóxico y oxidante que se emplea para Solución A: solución amortiguadora acuoso de fosfatos 0.1M a pH = 2.0
diversos procesos químicos. Se requiere determinar la cantidad de cromo (Cr2O72-) en
aguas de desecho de una industria que realiza cromados. Se toma una muestra de 10
L de agua de desecho y se lleva al laboratorio. A un litro de muestra se le adicionan
100 mL de ácido clorhídrico concentrado y se refrigera hasta su análisis (Soln A = Solución B: estándar de ditizona (HDz) en tetracloruro de carbono, 4x10-5 M
solución acidulada).
Se preparan los siguientes sistemas:
Se preparan 7 sistemas y se obtienen las lecturas respectivas:
Sistema 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Mta (mL) 5 5 5 5 5 5 5
Vprob (ml) 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Cr2O7 std (mL) 0 1 2 3 4 5 6
Vol Fe2+ (mL) 8 8 8 8 8 8 8 VA (ml) 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24
Vaforo (mL) 25 25 25 25 25 25 25
A 550nm 0.210 0.256 0.321 0.386 0.442 0.487 0.562 VB (ml) 0 3 6 9 12 15 18 21 24 27

VCCl4 (ml) 30 27 24 21 18 15 12 9 6 3
[Cr2O7]std= 2.97x10-4 M [Fe2+]=0.01 M

DATOS:
Eo Cr2O72-/Cr3+ = 1.3 V, PM Cr2O72- = 215.99 g/mol Nota: como el agua y el tetracloruro de carbono son inmiscibles, cada sistema presenta
Eo Fe3+/Fe2+ = 0.77 V, PM Cr = 51.996 g/mol dos fases con diferente volumen de solución acuosa (25ml) y de solución orgánica
El dicromato y el hierro (III) dan soluciones amarillas. (30mL).
El cromo (III) genera una solución verde.
El hierro (II) es incoloro en solución

23 24
 1ª Serie de ejercicios

Se decidió hacer el análisis espectrofotométricamente dado que se conocen los espectros PRÁCTICA No. 4A
de absorción de la ditizona y del ditizonato de plomo (Ver figura) en tetracloruro de carbono ANÁLISIS CUALITATIVO Y OPTIMIZACIÓN DE LA SEPARACIÓN DE
ALCOHOL ETÍLICO EN PRODUCTOS DE HIGIENE Y/O DESINFECTANTES
POR CROMATOGRAFÍA DE GASES
A

Pb(Dz)2 HDz I. OBJETIVOS

Conocer e identificar las partes básicas del cromatógrafo de gases para capacitarse
Longitud de onda (nm)
en su manejo a fin de obtener resultados confiables.
480 520 560 600 640
Comprender las condiciones que permiten la separación de los analitos en
Después de agitar vigorosamente y separar las fases se mide la absorbancia de las
Cromatografía de Gases.
fracciones orgánicas (l= 640 nm) en celdas de 1 cm de longitud de paso óptico y usando
el sistema “0” como “blanco” se obtuvieron los siguientes resultados:

Sistema 1 2 3 4 5 6 7 8 9
II. INTRODUCCION
A640 0 0 0 0 0.128 0.254 0.386 0.512 0.639
En Cromatografía de Gases (CG) la muestra se inyecta y volatiliza en la cabeza de

una columna cromatográfica. La elución se produce por el flujo de una fase móvil,
a) Diga que tipo de método de cuantificación se empleó (ponga el nombre en la
determinación de plomo. un gas inerte (no interacciona con las moléculas del analito) cuya única función es
b) Escriba la tabla de variaciones molares la de transportar el analito a través de la columna (fase estacionaria). Al pasar por
c) Explique que especie química es la que se utilizo para la determinación
la columna los solutos son separados y eluyen hacia el detector, cuya respuesta se
espectrofotométrica
2
d) Obtener el análisis lineal de la(s) recta(s) y expresar los parámetros de m, b y r visualiza en un integrador o una computadora.
tanto su valor numérico como su significado quimico P = KC
Los estándares internos tienen su máxima utilidad cuando hay pérdidas inevitables
e) Determinar el e640 (coeficiente de absorvitividad molar) para la(s) especie(s) que da
la propiedad. Recuerde que A= elC de la muestra, por ejemplo durante una inyección manual en CG. Si se agrega un
f) Calcular la concentración del Pb(II) en molaridad y ppm en la solución problema.
estándar interno a una mezcla antes de cualquier pérdida, entonces la fracción de
Peso atómico Pb = 207.2 g/mol
g) ¿De qué color es la ditizona (HDz) y el complejo Pb(Dz)2 en tetracloruro de estándar que se pierde es la misma que la fracción de la muestra que se pierde y el
carbono?. cociente (Cmta/Cstd) permanece constante.
h) Explique brevemente porque seria o no adecuado realizar la cuantificación:
1. Midiendo la absorbancia en la fase acuosa a 520 nm
2. Midiendo la absorbancia en la fase orgánica a 520 nm

25 26
 Práctica 4. Cromatografía de gases. Análisis cualitativo. Práctica 4. Cromatografía de gases. Análisis cualitativo.

Un compuesto para ser utilizado como Estándar Interno (EI), debe reunir los

siguientes requisitos: a) que el pico de respuesta esté cercanos pero resuelto de los III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

componentes a determinar, b) que sea estable y químicamente inerte, c) tener REACTIVOS MATERIAL EQUIPOS

estructura similar al componente a determinar, d) no estar presente en la muestra Alcohol etílico 2 tubos de ensaye de volumen Cromatógrafo de

original y e) tener alto grado de pureza. absoluto pequeño. gases con detector

1 gradilla. de ionización de

flama
Los enjuagues bucales llevan la finalidad primordial de corregir el mal aliento de 3 vasos de precipitado de 50 mL.

origen bucal, tornándolo agradable. Para ello, deben controlar el desarrollo P.M. 46.0 g/mol, 1 piseta con agua destilada .
99.85 % de
bacteriano y dejar la boca agradablemente fresca, por eso integran en su Pureza, densidad 1 jeringa para CG de 10 µL (el
0.79 g/ml, Punto
composición etanol. de ebullición: profesor la solicita al
78.3 oC
laboratorista).

Alcohol n-propílico 1 micropipeta de 100 a 1000 µL.

1 pipeta graduada de 10 mL.

P.M. 60.097 g/mol,

99.0 % de Pureza,
1. Fase móvil (gas) densidad 0.80 g/ml,
2. Puerto de inyección Punto de ebullición:
97.2 oC
3. Columna (FE)
[Link] de la columna
5. Detector
6. Computadora
MUESTRA: ENJUAGUE BUCAL DE CUALQUIER MARCA QUE CONTENGA
Esquema de un cromatógrafo de gases
ALCOHOL.

27 28
 Práctica 4. Cromatografía de gases. Análisis cualitativo. Práctica 4. Cromatografía de gases. Análisis cualitativo.

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Tabla 1. Parámetros a emplear para la separación de alcoholes por CG-FID

POR GRUPO. EL PROFESOR INDICARÁ EL EQUIPO QUE REALIZARÁ LA
PARÁMETRO CONDICIONES
SIGUIENTE DISOLUCIÓN:
Columna DB-wax 60 m Megabore
Prepare en un tubo de ensaye, una mezcla con 200 µL de etanol + 100 µL de n- Gas acarreador Nitrógeno, a 5 psi
propanol + 9.7 mL de agua destilada (se puede agregar con una pipeta graduada). Presión de aire 7 psi
Presión de hidrógeno 20 psi
Temperatura del detector 250°C
POR EQUIPO.

Prepare en un tubo de ensaye, una mezcla con 900 µL de enjuague bucal + 9.1 mL
Encender el detector y verificar su funcionamiento.
de agua destilada (se puede agregar con una pipeta graduada).

b) Optimización de la separación cromatográfica de los alcoholes.

2.- DESARROLLO EXPERIMENTAL
1.- Ajustar la temperatura del horno a 200 ºC.
Conectar el equipo a la corriente eléctrica.
2.- Inyectar en modo isotérmico, 1.0 μL de la mezcla de etanol + n-propanol.
Abrir las válvulas de los tanques de gas (nitrógeno e hidrógeno) y las llaves de paso.
Determinar si los analitos se separan y registrar el tiempo de retención de cada uno.
Encender el equipo y esperar a que alcance la temperatura programada.
3.- Ajustar la temperatura del horno a 100 ºC. Una vez que se alcance la
Encender la computadora.
temperatura, esperar dos minutos para que el sistema se equilibre.

4.- Inyectar en modo isotérmico, 1.0 μL de la mezcla de etanol + n-propanol.

Determinar si los analitos se separan y registrar el tiempo de retención de cada uno.

a) Seleccionar las condiciones de medición en el equipo (CG-FID).
5.- Ajustar la temperatura del horno con el siguiente programa de temperatura:
Siguiendo la pantalla y el programa que controla el equipo, ajustar las siguientes
Temperatura inicial: 50 ºC,
condiciones.
Mantener (Hold): 1 min,

Rampa: 8 ºC/min,

Temperatura final : 150 ºC

29 30
 Práctica 4. Cromatografía de gases. Análisis cualitativo. Práctica 4. Cromatografía de gases. Análisis cualitativo.

6.- Inyectar con el programa de temperatura, 1.0 μL de la mezcla de etanol + n- V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

propanol. Determinar si los analitos se separan y registrar el tiempo de retención de

TABLA 2. Resultados obtenidos en el análisis cualitativo de la mezcla de etanol +
cada uno. estándar interno.
tR(min) W1/2(min)
7. Entre cada inyección, calcule los valores de eficiencia de los picos (N) y tR (min) W1/2 (min) tR (min) W1/2 (min)
Analito Prog. Prog.
200 oC 200 oC 100 oC 100 oC
resolución (Rs), para poder discutir sobre cuál de las tres condiciones de Temp. Temp.

temperatura es la mejor para el análisis del etanol y el estándar interno (n-propanol).

EtOH
Anotar los resultados en las Tablas 2 y 3.

n-
c) Identificación de etanol en las muestras de enjuague bucal.
Propanol

8.- Con las condiciones óptimas de temperatura, inyectar 1.0 μL de la dilución de

enjuague bucal. A través del tr, identifique la presencia o no de etanol en la muestra. !"#$% '( )*#% ! +! ,!-( = /! = 0. 2 ∗ /"
#
9.- Discuta si el estándar interno utilizado serviría o no para realizar la cuantificación
#
de etanol en la muestra de enjuague. 9$ # 9$
45*#*("#*! = 6 = 07 8 : = ;. ;< = >
/! /"
#
d) Limpieza del sistema cromatográfico.
#('!" ('!# )
?(-%+@#*ó" = ?% = *$# +*$"
Al terminar las inyecciones, mantener durante 10 minutos más el flujo del gas de

arrastre programando una temperatura en el horno de 150 ºC. Después, disminuir 9C − 9%

B!#9%C '( C(9("#*ó" = D, =
9%
la temperatura del horno a 60 ºC, apagar el equipo y cerrar las válvulas de los gases.
D,#
F(+(#9*G*'!' = H =
D,"

31 32
 Práctica 4. Cromatografía de gases. Análisis cualitativo.

TABLA 3. Resultados de los parámetros cromatográficos de la mezcla de etanol + PRÁCTICA No. 4B

estándar interno. ANÁLISIS CUANTATIVO DE ALCOHOL ETÍLICO EN PRODUCTOS DE
Isotérmico 200 0C Isotérmico 100 0C Programa de temperatura HIGIENE Y/O DESINFECTANTES Y OPTIMIZACIÓN DE LA SEPARACIÓN POR
Parámetro CROMATOGRAFÍA DE GASES Y CURVA DE CALIBRACIÓN CON ESTÁNDAR
EtOH n-PropOH EtOH n-PropOH EtOH n-PropOH
INTERNO.
k'

I. OBJETIVO
N
Aplicar las condiciones óptimas para la separación de los analitos obtenidas

! en la práctica No. 4 a la obtención de una curva de calibración y el análisis

de las muestras de enjuague bucal.

Rs Cuantificar al etanol en las muestras mediante el método de curva de

calibración con estándar interno.

II. INTRODUCCION
V. ORIENTACIONES PARA EL TRATATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE
En la práctica anterior se estudiaron los principios de la técnica de cromatografía de
RESIDUOS
gases y su aplicación en el análisis cualitativo.
Debido a que los residuos de la práctica tiene concentraciones de los alcoholes
En esta práctica se utilizará el estándar interno (EI) para compensar las pérdidas
menores al 2 %, se pueden desechar a la tarja sin ningún tratamiento.
inevitables de la muestra durante la inyección manual en CG. De esta forma, una

pérdida en la cantidad de analito introducida al sistema, se verá reflejado de la

BIBLIOGRAFÍA.
misma forma en la cantidad del estándar interno agregado previamente a las
• Principios de Análisis Instrumental. Sexta edición. Skoog, D., Holler, F.,
muestras.
Crouch, S. Cengeage Learning Editores. 2008.
Para que una sustancia pueda ser utilizada como EI debe reunir los siguientes
Disponibles en BIDI-UNAM:
requisitos: a) que el pico de respuesta esté cercanos pero resuelto (separado) de
• Química Analítica. Gary D. Christian. McGraw-Hill. México. 6a edición.
2009. los componentes a determinar, b) que sea estable y químicamente inerte, c) tener
• Practical gas chromatography : a comprehensive reference. Katja Dettmer-
Wilde, Werner Engewald, Berlin : Springer, 2014. estructura similar al componente a determinar, d) no estar presente en la muestra
• Gas chromatography / Colin F. Poole, [editor], Amsterdam: Elsevier, 2012.

33 34
 Práctica 5. Cromatografía de gases. Análisis cuantitativo. Práctica 5. Cromatografía de gases. Análisis cuantitativo.

original, e) tener alto grado de pureza y f) estar a la misma concentración en los La relación de las señales obtenidas para el analito respecto a las señales del EI en

sistemas estándar así como en las muestras. todos los puntos de la curva, deberá ser proporcionalmente directa a la

En el método de curva de calibración con estándar interno, se preparan diferentes concentración relativa del analito con respecto a la concentración del EI en todos

sistemas estándar con cantidades variables de los analitos a determinar y en cada los puntos de esta curva como se muestra en la figura 2.

disolución se agrega la misma cantidad de EI, de esta forma, al aforar cada sistema,

las concentraciones del analito son diferentes y la del EI permanece igual en todos

los puntos de la curva. Así, al obtener los cromatogramas de esta curva, se obtienen

señales como las mostradas en la siguiente figura 1.

Finalmente, si se agrega el EI a las muestras a la misma concentracion que en la

curva, la proporción de las señales obtenidas introducidas en la recta de mejor

ajuste de la curva, nos darán la concentración relativa del analito en la disolución

inyectada.

Los enjuagues bucales llevan la finalidad primordial de corregir el mal aliento de

origen bucal, tornándolo agradable. Para ello, deben controlar el desarrollo

Figura 1. Ejemplo de la preparación de una curva con estándar interno y el cambio
bacteriano y dejar la boca agradablemente fresca, por eso integran en su
en las señales en los cromatogramas obtenidos.
composición etanol.

35 36
 Práctica 5. Cromatografía de gases. Análisis cuantitativo. Práctica 5. Cromatografía de gases. Análisis cuantitativo.

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES) TABLA 1. Preparación de los sistemas para la curva de calibración con
estándar interno.
REACTIVOS MATERIAL EQUIPOS
Sistema V V V V Aforo
Alcohol etílico POR GRUPO: • Cromatógrafo EtOH STD n-PropOH (EI) Problema H2 O
(µL) STD (µL) (mL)
absoluto • 5 matraces volumétricos de 10 mL. de gases con (µL)
1 40 100 - 10.0
detector de
• 2 micropipetas de micropipeta de
2 80 100 - 10.0
ionización de
100 a 1000 µL. 3 120 100 - 10.0
flama 4 160 100 - 10.0
P.M. 46.0 g/mol, • 1 micropipeta de micropipeta de 20
99.85 % de Pureza, 5 200 100 - 10.0
densidad 0.79 g/mL, • 1 jeringa para
Punto de ebullición: a 200 µL. 6 240 100 - 10.0
78.3 oC CG de 10 µL
Alcohol n-propílico POR EQUIPO:
(el profesor la NOTA: Es importante que entreguen a los profesores los sistemas de la curva bien
• 1 matraz volumétrico de 10 mL.
solicita al etiquetados conforme los vayan aforando.
• 3 vasos de precipitado de 50 mL.
P.M. 60.097 g/mol, laboratorista)
99.0 % de Pureza,
• 1piseta con agua destilada.
densidad 0.80 g/mL,
Punto de ebullición: POR EQUIPO.
97.2 oC • 1 gotero de plástico.
Preparar en un matraz volumétrico de 10 mL, una dilución con 900 µL de la muestra,

100 µL de EI y aforando con agua destilada.

MUESTRA: enjuague bucal que contenga alcohol etílico.
Etiquetar bien la dilución y entregarla a los profesores.

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
2.- DESARROLLO EXPERIMENTAL
POR GRUPO: LOS PROFESORES INDICARÁN EL EQUIPO DE ESTUDIANTES
Conectar y verificar las conexiones eléctricas del equipo
QUE PREPARARÁ LA CURVA.
Abrir las válvulas de los tanques de gas (nitrógeno e hidrógeno) y las llaves de paso.
Preparar la curva de calibración con estándar interno, utilizando los volúmenes y
Encender el equipo y esperar a que alcance la temperatura programada.
reactivos mostados en la tabla 1.

37 38
 Práctica 5. Cromatografía de gases. Análisis cuantitativo. Práctica 5. Cromatografía de gases. Análisis cuantitativo.

a) Seleccionar las condiciones de medición en el equipo (CG-FID).

Tabla 3. Concentraciones de los sistemas estándar y problema.
Siguiendo la pantalla y el programa que controla el equipo, ajustar las siguientes
Sistema Conc. EtOHSTD AREA de EtOH Conc. n-PropOHSTD AREA de
condiciones. (% v/v) (% v/v) n-PropOH
1

Tabla 2. Parámetros a emplear para la separación de alcoholes por CG-FID 2

PARÁMETRO CONDICIONES 3
Columna DB-wax 60 m Megabore
4
Gas acarreador Nitrógeno, a 5 psi
Presión de aire 7 psi 5
Presión de hidrógeno 20 psi
6
Temperatura del detector 250°C

Prob. -----

Encender el detector y verificar su funcionamiento. EtOH

a) Cuantificación de EtOH mediante la curva de calibración con EI.

Tabla 4. Datos para la curva de calibración con estándar interno.
8.- Inyectar la curva de calibración con estándar interno y las muestras problema Sistema Conc EtOH AREA EtOH
Conc PropOH Area n-Propanol
con las condiciones óptimas que se obtuvieron en la práctica 4.
1
9.- Coloque los resultados de área y concentración como se muestra en las tablas
2
3 y 4.
3

4
b) Limpieza del sistema cromatográfico.
5
Al terminar las inyecciones, mantener durante 10 minutos más el flujo del gas de 6
arrastre a una temperatura del horno de 150 ºC. Después, disminuir la temperatura Prob. ----

del horno a 60 ºC, apagar el equipo y cerrar las válvulas de los gases. EtOH

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

39 40
 Práctica 5. Cromatografía de gases. Análisis cuantitativo.

Protocolo desarrollado por la estudiante Daniela Mariana Sánchez Hernández

Carrera: Química
V. ORIENTACIONES PARA EL TRATATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE Asesor: Dr. José de Jesús Olmos Espejel
Proyecto PAPIME 203859
RESIDUOS
Determinación de Ácido Benzoico y Timol en enjuagues bucales mediante
Debido a que las diluciones preparadas tiene concentraciones menores al 2 % de cromatografía de líquidos

cada alcohol, se pueden desechar directamente a la tarja. I. Objetivos

● Conocer el fundamento de la cromatografía de líquidos de alta resolución, así como
el uso de este equipo
● Obtener las condiciones cromatográficas óptimas para realizar la separación de los
REFERENCIAS.
analitos.

II. INTRODUCCIÓN
• Principios de Análisis Instrumental. Sexta edición. Skoog, D., Holler, F.,
Crouch, S. Cengeage Learning Editores. 2008. La Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC, por sus siglas en inglés)
es la técnica de separación más ampliamente utilizada en la industria, debido a su
Disponibles en BIDI-UNAM:
sensibilidad. Su fácil adaptación a determinaciones cuantitativas es idónea para
• Química Analítica. Gary D. Christian. McGraw-Hill. México. 6a edición.
sustancias no volátiles o termolábiles de aplicación en la industria, en muchos
2009.
• Practical gas chromatography : a comprehensive reference. Katja Dettmer- campos de la ciencia y para la sociedad en general.
Wilde, Werner Engewald, Berlin : Springer, 2014. En la Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución, se ponen en contacto dos fases
• Gas chromatography / Colin F. Poole, [editor], Amsterdam : Elsevier, 2012.
inmiscibles, una móvil y la otra estacionaria. Una muestra que se introduce en la
fase móvil es transportada a lo largo de la columna que contiene a la fase
estacionaria distribuida. Los componentes separados emergen en orden creciente
de interacciones con la fase estacionaria. La migración depende de la solubilidad
de los solutos en fase móvil o estacionaria.
Los métodos de evaluación para las determinaciones cuantitativas por medio de
HPLC son variados. Entre ellos tenemos: 1) la calibración con estándares, 2)
utilización de un estándar interno y normalización del área.
Sin lugar a duda, la calibración con estándares es el método más utilizado en HPLC.
El éxito de la separación para un compuesto dado depende de las condiciones de
operación como son: tipo y longitud de columna, proporción y tipo de fase móvil,
velocidad de flujo de la fase móvil, etc.

41 47
 Práctica 4. Cromatografía de líquidos. Práctica 4. Cromatografía de líquidos.

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

DETECTOR PREPARACIÓN DE SOLUCIONES

1 FASE MÓVIL
AUTO-
MUESTREADOR
- ACN HPLC. Colocar en un frasco para fase móvil 400 mL de ACN HPLC.
Desgasificar en el baño de ultrasonido durante 10 minutos. Conectar el frasco
BOMBA
en la línea A del cromatógrafo.
- Agua ácida (Agua + 0.02 % H3PO4 v/v). Colocar en un fraso para fase móvil 400
mL de agua desionizada y agregar con cuidado 80 µL de ácido fosfórico
concentrado con micropipeta. Filtrar con membrana de 0.45 µm utilizando el
sistema Millipore. Desgasificar en el sonicador durante 5 minutos. Separar 150
FIGURA 1. Componentes básicos que integran un equipo de HPLC
mL en un vaso de precipitados para realizar los aforos de estándares y muestras
problema. El sobrante conectarlo a la línea B del cromatógrafo.
Parte experimental

2 DISOLUCIÓN ESTÁNDAR DE LOS ANALITOS Y ESTÁNDAR INTERNO

Material por grupo Reactivos Reactivos

● 4 vasos de precipitado de ● Agua ● Disolución de

50 mL Desionizada Timol a 1000 • Mezcla estándar de analitos + EI (MA+EI). (Preparar una por grupo)
● 2 pipetas volumétricas de ● Acetonitrilo mg/mL.
1 mL grado HPLC ● Disolución de
● 1 Pipeta volumétrica de Ácido Benzóico a A partir de las disoluciones de ácido benzócio, timol y estándar interno,
0.5 mL 1000 mg/mL. colocar los volúmenes de estándares en matraz volumétrico de 10 mL como
● 2 pipetas graduadas de 10 ● Disolución de
mL Carvacrol a 500 se indica en la siguiente tabla 1 y escribir el valor de la concentración de los
● Micropipeta de 10 a 100 ● Ácido fosfórico mg/L. analitos en esta dilución.
µL
● 2 propipetas
● 2 goteros de plástico
● Viales para
automuestrador
● 3 matraces volumétricos
de 5 mL

48 49
 Práctica 4. Cromatografía de líquidos. Práctica 4. Cromatografía de líquidos.

Tabla 1. Preparación de la mezcla de estándares + EI. NOTA: LOS PROFESORES INDICARÁN CUÁL ES EL SISTEMA QUE SE
Conc. en la mezcla estándar MF+EI UTILIZARÁ.
Analito o disolvente Volumen (mL)
(mg/L)

Ác. benzóico El orden de elución de los analitos es:

1.0 mL
1º Ácido Benzóico, 2º Timol, 3º Carvacrol (EI)
1000 ppm
Timol

4 ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO.
0.5 mL
Ác. Benzóico (EI)
500 ppm
MeOH 2 --- Separación en modo isocrático.
Aforo con Agua ácida hasta 10 --- a) Acondicionar el equipo durante 10 min con una proporción inicial de (75%
ACN y 25% agua ácida)
Colocar aproximadamente 1 mL de la disolución ME+EI en un vial para b) Inyectar 20 µL de la mezcla estándar MA+EI y determinar el tiempo de
automuestreador, rotularlo bien con plumón (no usar etiquetas o cinta retención de cada analito. Detener el análisis 1 minuto después del 3er pico
adhesiva) y entregarlo a los profesores. mayoritario.
c) Calcular los parámetros cromatográficos obtenidos y colocarlos en la tabla 3.
3 CONDICIONES DEL EQUIPO. d) Acondicionar el equipo durante 10 min con una proporción inicial de (55%
Opción 1. ACN y 45% agua ácida)
Equipo: VARIAN con Bomba ternaria Modelo 240, Automuestreador Modelo 410, e) Inyectar 20 µL de la mezcla estándar MA+EI y determinar el tiempo de
Detector UV Modelo 310. retención de cada analito. Detener el análisis 1 minuto después del 3er pico
Columna: C18 de 15 cm de largo y diámetro de partícula de 5 µm. mayoritario.
Fase móvil: A) ACN HPLC y B) Agua + 0.02 % H3PO4 v/v f) Calcular los parámetros cromatográficos obtenidos y colocarlos en la tabla 3.
Flujo: 1 mL min-1
Longitud de onda: 254 nm Separación en modo gradiente.
g) Acondicionar el equipo durante 10 min con una proporción inicial de (40%
Opción 2. ACN y 60% agua ácida)
Equipo: Waters con Bomba Binaria Modelo 1525, Automuestreador Modelo 417, h) Programar en la bomba cromatográfica el siguiente gradiente de elución:
Detector UV Modelo 2487. 0 min, 40 % ACN
Columna: C18 de 15 cm de largo y diámetro de partícula de 5 µm. 3 min, 40 % ACN
Fase móvil: A) Metanol grado HPLC y B) Agua + 0.02 % H3PO4 10 min, 90 % ACN
Flujo: 1 mL min-1 11 min, 40 % ACN
Longitud de onda: 240 nm y 272 nm 15 min, 40 % ACN

50 51
 Práctica 4. Cromatografía de líquidos. Práctica 4. Cromatografía de líquidos.

i) Inyectar 20 µL de la MA+EI y determinar el tiempo de retención de cada uno

de los analitos. $
+% $ +% 2(+%$ − +%" )
j) Calcular los parámetros cromatográficos obtenidos y colocarlos en la tabla 3. !! = #. % ∗ !"/$ ( = #) * , = -. -. / 0 1& =
!! !"/$ !!" + !!$
c. Con el cromatograma de la mezcla de estándares a las condiciones óptimas,
k) Al terminar las inyecciones, cambiar el frasco con agua ácida del equipo, por
calcule el intervalo de confianza para el tr de cada analito (tr + 5%) y
otro con agua desionizada. Pasar al sistema una fase móvil de 50% ACN y
coloquelos en la tabla 4.
50% agua durante 10 minutos y apagarlo.

Tabla 4. Parámetros cromatográficos obtenidos para la disolución estándar.

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES
a. Calule los parámetros cromatográficos para cada resultado y determine cuál Mezcla de fármacos + EI
es la condición óptima para la separación de los fármacos.
b. Coloque sus resultados en la tabla 3. Modo de tr tr – 5% tr + 5%
Analito
elución (min) (min) (min)

Tabla 3. Parámetros cromatográficos obtenidos para la disolución estándar. Ác. Benzóico

Modo de Analito Concentración tr W1/2 Área N Rs
elución (ppm) (min) (s) Timol
Óptimo

Ác. Benzóico Carvacrol

(EI)
Isocrático Timol
75 % ACN
Carvacrol BIBLIOGRAFIA.
(EI) 1. Introduction to the Modern Liquid Chromatography. 3d Edition. Snyder, L., Kirkland, J.,
Ác. Benzóico Dolan, J. A John Wiley & Sons, Inc. 2010.
2. Principios de Análisis Instrumental. Sexta edición. Skoog, D., Holler, F., Crouch, S.
Isocrático Cengeage Learning Editores. 2008
Timol
55 %
3. Fundamentos de Cromatografía. Polo, L. Dextra Editorial. 2015.
MeOH
Carvacrol 4. Handbook of HPLC. Danillo Corradini, Terry M. Phillips. Editors. CRC Press. 2011.
(EI)
Ác. Benzóico CIBERGRAFÍA
1. Chromatography. California State University Northridge.
Gradiente
Timol [Link] Consultada 15/01/17
2. Theory in HPLC. CHROMacademy.
Carvacrol [Link] Consultada
(EI) 15/01/17
tr= tiempo de retención, Wb= ancho de pico a la base, W1/2 = ancho de pico a la mitad de la altura, 3. HPLC Operation. University South of Australia.
N= Número de platos teóricos.

52 53
 Práctica 4. Cromatografía de líquidos. Práctica 4. Cromatografía de líquidos.

[Link] Consultada 15/01/17 VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS

4. HPLC Injection. [Link] Consultada 15/01/17
5. High Performance Liquid Chromatography HPLC. Procurar generar y guardar la menor cantidad de residuos. Aquellas soluciones que
[Link] Consultada
puedan ser re-utilizadas deben emplearse o bien ser desechadas adecuadamente.
15/01/17

Residuos con metanol!

R-4!

Colocar en el frasco de residuos del

cromatógrafo de líquidos!

Residuos con ácido fosfórico!

Neutralizar con cal y desechar con

abundante agua!

54 55
 Práctica 7. Cromatografía de líquidos, analisis cuantitativo.

Protocolo desarrollado por la estudiante Daniela Mariana Sánchez Hernández

Carrera: Química
Asesor: Dr. José de Jesús Olmos Espejel
Proyecto PAPIME 203859
III. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Práctica 5
Determinación de Ácido Benzoico y Timol en enjuagues bucales mediante
cromatografía de líquidos y el método de factor de respuesta relativo
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES

I. OBJETIVOS
1 FASE MÓVIL
• Obtener los cromatogramas de estándares y muestras de enjuague bucal para
realizar el análisis cuantitativo de los compuestos identificados.
- ACN HPLC. Colocar en un frasco para fase móvil 400 mL de MeOH HPLC.
• Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar el cálculo de contenido
Desgasificar en el baño de ultrasonido durante 10 minutos. Conectar el frasco
de ácido benzóico y timol en productos comerciales utilizando el método del
en la línea A del cromatógrafo.
factor de respuesta relativo.
- Agua ácida (Agua + 0.02 % H3PO4). Colocar en un fraso para fase móvil 400 mL
de agua desionizada y agregar con cuidado 80 µL de ácido fosfórico
II. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)
concentrado con pipeta graduada. Filtrar con membrana de 0.45 µm utilizando
Equipo y material Reactivos y símbolo de peligrosidad
Por grupo: Acetonitrilo grado HPLC el sistema Millipore. Desgasificar en el sonicador durante 5 minutos. Separar
1 matraz volumétrico de 10 mL 150 mL en un vaso de precipitados para realizar los aforos de estándares y
1 vaso de precipitados de 50 mL. mustras problema. El sobrante conectarlo a la línea B del cromatógrafo.
1 probeta de 500 mL. Disolución de Timol a Disolución de Ácido
1000 mg/L benzóico a 2000 mg/L
1 vaso de precipitados de 500 mL.
Disolución de Carvacrol a 1000 mg/mL
2 micropipetas de 100 a 1000 microlitros. Ácido fosfórico R.A.
2 DISOLUCIÓN ESTÁNDAR DE LOS ANALITOS + ESTÁNDAR INTERNO
2 goteros de plástico.
1 pipeta volumétrica de 1 mL (Preparar una por grupo)
A partir de las disoluciones estándar, en matraz volumétrico de 10 mL colocar
Por equipo: Muestra problema. los volúmenes de estándares como se indica en la siguiente tabla 1 y escribir
1 Piseta con agua desionizada. Enjuague bucal
el valor de la concentración de los analitos en esta dilución.
1 matraz volumétrico de 10 mL.
2 pipetas volumétricas de 1 mL.
1 pipeta graduada de 3 mL.
1 gotero de plástico.
3 vasos de precipitados de 100 mL.
2 propipetas

59 57
 Práctica 7. Cromatografía de líquidos, analisis cuantitativo. Práctica 7. Cromatografía de líquidos, analisis cuantitativo.

Tiempo Flujo % MeOH % agua

(min) (mL/min) ácida
Tabla 1. Preparación de la mezcla de estándares + EI. Inicio 0.8 40 60
Conc. en la mezcla estándar MF+EI 3 0.8 40 60
Analito o disolvente Volumen (mL)
(ppm) 10 0.8 90 10
11.0 0.8 40 60
Ácido benzóico 2000 mg/L 15.0 0.8 40 60

Timol 1000 mg/L 1.0 Detector UV/VIS: 254 nm

Carvacrol (EI) 1000 mg/mL Opción 2. Cromatógrafo de líquidos Waters.

Columna: Se utiilizará una columna cromatográfica C18, dimensiones 15 cm
ACN 2 ---
x 4.6 mm, tamaño de partícula 5 µm.
Aforo con Agua ácida hasta 10 ---
Bomba cromatográfica: Siguiendo las instrucciones del profesor,
programar el siguiente gradiente de elución:
Colocar aproximadamente 1 mL de la disolución ME+EI en un vial para
automuestreador, rotularlo bien con plumón (no usar etiquetas o cinta Tiempo Flujo % MeOH % agua
(min) (mL/min) ácida
adhesiva) y entregarlo a los profesores. Inicio 0.8 40 60
3 0.8 40 60
10 0.8 90 10
3 SOLUCIÓN PROBLEMA + EI
11.0 0.8 40 60
a) Tomar 1.0 mL de enjuague bucal y colocarlo en un matraz volumétrico de 10 15.0 0.8 40 60
mL.
b) Agregar 1.0 mL de carvacrol (EI) 1000 mg/L.
Detector UV/VIS: Longitud de onda 1 = 254 nm y longitud de onda 2 = 272
c) Añadir 3 mL de ACN HPLC.
d) Aforar con agua ácida. nm.
e) Colocar aproximadamente 3 mL de la solución problema + EI en una jeringa
de plástico y filtrar aproximadamente 1 mL utilizando un acrodisco de 0.45
5 ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO.
µm de diámetro de poro. Recolectar el filtrado en un vial para
a) Acondicionar el equipo durante 10 min con la proporción inicial del gradiente
automuestreador, rotularlo con plumón y entregarlo a los profesores.
(40% MeOH y 60% agua ácida).
4 CONDICIONES DEL EQUIPO. b) Inyectar 20 µL de la mezcla estándar de analitos con estándar interno
Opción 1. Cromatógrafo de líquidos VARIAN. (MA+EI) y determinar el tiempo de retención de cada uno de los compuestos
Columna: Se utiilizará una columna cromatográfica C18, dimensiones 15 cm y del EI. Integrar las áreas para determinar el factor de respuesta (Frr) de
x 4.6 mm, tamaño de partícula 5 µm.
cada analito con la siguiente ecuación:
Bomba cromatográfica: Siguiendo las instrucciones del profesor, !!"!#$%& [!&'()*+]
programar el siguiente gradiente de elución: = #)) ∗
!'( [-.]

58 59
 Práctica 7. Cromatografía de líquidos, analisis cuantitativo. Práctica 7. Cromatografía de líquidos, analisis cuantitativo.

c) Inyectar 20 µL de la mezcla problema con estándar interno (MP+EI) y 3. Fundamentos de Cromatografía. Polo, L. Dextra Editorial. 2015.
4. Handbook of HPLC. Danillo Corradini, Terry M. Phillips. Editors. CRC Press. 2011.
determinar el tiempo de retención de los analitos. Integrar las áreas de los
picos identificados para determinar la concentración de cada uno de estos.
CIBERGRAFÍA
1. Chromatography. California State University Northridge.
V. RESULTADOS EXPERIMENTALES [Link] Consultada 15/01/17
Llenar la siguiente tabla con los resultados obtenidos. 2. Theory in HPLC. CHROMacademy.
[Link] Consultada
Sistema Analito Concentración tr W1/2 Área Frr N Rs
15/01/17
(ppm) (min) (s)
3. HPLC Operation. University South of Australia.
[Link] Consultada 15/01/17
Ác. Benzóico
4. HPLC Injection. [Link] Consultada 15/01/17
5. High Performance Liquid Chromatography HPLC.
Timol
MF+EI [Link] Consultada
15/01/17
Carvacrol
(EI)
Ác. Benzóico

Timol
MP+EI

Carvacrol
(EI)
tr= tiempo de retención, Wb= ancho de pico a la base, W1/2 = ancho de pico a la mitad de la altura,
N= Número de platos teóricos, FR = factor de respuesta.

$
+% $ +% 2(+%$ − +%" )
!! = #. % ∗ !"/$ ( = #) * , = -. -. / 0 1& =
!! !"/$ !!" + !!$

a. Calcular la concentración de los analitos en la dilución problema.

b. Calcular la concentración de los analitos en el producto original.

c. Comparar el resultado con los valores marcados en el marbete.

BIBLIOGRAFIA.
1. Introduction to the Modern Liquid Chromatography. 3d Edition. Snyder, L., Kirkland, J.,
Dolan, J. A John Wiley & Sons, Inc. 2010.
2. Principios de Análisis Instrumental. Sexta edición. Skoog, D., Holler, F., Crouch, S.
Cengeage Learning Editores. 2008

60 61
 Práctica 7. Cromatografía de líquidos. Cuantificación por Frr

VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS PRÁCTICA No. 6

“DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE SULFATO FERROSO EN TABLETAS MEDIANTE UNA
Procurar generar y guardar la menor cantidad de residuos. Aquellas soluciones que CURVA DE VALORACIÓN POTENCIOMÉTRICA BAJO CONDICIONES DE
AMORTIGUAMIENTO”.
puedan ser re-utilizadas deben emplearse o bien ser desechadas adecuadamente.

I. OBJETIVOS
Residuos con metanol!
• Efectuar la cuantificación de FeSO4 por medio de una Curva de valoración

potenciométrica.
R-4!
• Identificar las partes básicas del potenciómetro para reconocer su manejo a fin

de obtener resultados confiables.

Colocar en el frasco de residuos del
cromatógrafo de líquidos!
II. INTRODUCCIÓN

El método de titulación potenciométrica consiste en medir el potencial (voltaje) en una

solución por medio de un electrodo como función de volumen de agente titulante. El

potencial que se mide se puede transformar a unidades de concentración de una especie

Residuos con ácido fosfórico!
en solución. La ventaja de medir potencial es que éste se mide por medio de un electrodo

que es selectivo a la especie o analito que se quiere determinar. Por lo tanto, el voltaje que

se mide en la solución es representativo de la concentración de la especie en solución. Este

alto grado de selectividad (señal analítica que puede mostrar un pequeño grupo de analitos
Neutralizar con cal y desechar con
abundante agua! en una solución que contiene múltiples especies químicas) se debe a la propiedad física

del electrodo con que se mide el voltaje. La medida del potencial se puede emplear para

poner de manifiesto el punto final en reacciones ácido-base, redox, precipitación y

formación de complejos; para ello se selecciona el electrodo indicador adecuado y un

electrodo de referencia que cierra la celda.

Para determinar el punto final se pueden utilizar varios métodos; el más directo se basa en

representar el potencial en función del volumen de valorante. Otro procedimiento más exacto

consiste en representar el (DE= f(V)).

64 65
 Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica

En esta práctica el hierro presente se disuelve en ácido se valora con dicromato de potasio IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

y las variaciones del potencial durante el proceso se siguen con un potenciómetro, para
1.-Preparación de soluciones
obtener una gráfica de E = f(mL de valorante) mediante la cual se determinara el volumen

gastado para llegar al punto de equivalencia y así poder cuantificar el contenido de hierro. -Solución de ácido fosfórico 1 M.(solución ácida)

El grado en que ocurre la reacción (y por tanto del cambio de pendiente en el punto de -Solución problema

equivalencia) depende de la constante condicional de formación, el efecto del pH en la Se pesan tres tabletas y se obtiene el peso promedio, se muelen y se pesa el polvo

titulación es un parámetro a considerar en el amortiguamiento del medio de reacción. equivalente a 25 mg de sulfato ferroso en un vaso de precipitados ( considerar el peso

promedio y el contenido según em marbete del producto) y se agregan 10 mL de solución

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES) ácida con agitación mecánica.(soln. problema)

MATERIAL REACTIVOS EQUIPOS

1 piseta Ácido fosfórico R.A. 1 agitador magnético

2.- Valoración Potenciométrica: Efectuar el montaje con el potenciómetro, calibrando
2 vasos de volumen pequeño
previamente. Llenar la bureta con el valorante (dicromato de potasio 0.01 M), comenzar la
1 Pipeta graduada de 5 mL titulación agregando 0.5mL consecutivamante a la solución problema (hasta después del
1 bureta de 10 mL Potenciómetro con punto de equivalencia) VER MONTAJE ANEXO

1 Pipeta volumétrica de 2 ,10 mL Ácido Nítrico R. A. electrodo de platino y

1 agitador magnético c/barra de calomel ( o

1 probeta de 25 ml combinado)

2 vasos de precipitados de 50 mL Soln. de Dicromato de

1 Soporte universal completo potasio 0.01M

Tabletas que contengan sulfato

ferroso (Hemobión o SSA)

66 67
 Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

Tabla 1: Datos experimentales de la valoración potenciométrica del Fe(II) en las

tabletas

K2Cr2O7 0.01 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
M (mL)

E’ECS(mV)

∆E´ ECS(mV)

Gráfico 2. Curva de valoración potenciométrica ∆E= f(Vol. De K2Cr2O7 0.01 M )

VI. INFORME DE TRABAJO

ESQUEMA Y PUNTOS MÍNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIÓN DEL INFORME

DE TRABAJO.

1.-DATOS GENERALES

I) CARÁTULA. Incluir en éste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,

Gráfico 1. Curva de valoración potenciométrica E= f(Vol. De K2Cr2O7 0.01 M )
nombre de la Sección, nombre de la asignatura comenzando con “Laboratorio de…”,
Número y nombre de la práctica, Número de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
de aquellos que participaron en su realización, se dará por entendido que los que no
aparezcan no recibirán calificación correspondiente a esa práctica. También es importante
recordar que aquellas personas que faltaron a la parte experimental de la práctica no
tendrán calificación de reporte y por ende no se colocará su nombre, a menos que halla
repuesto la práctica en otro grupo bajo autorización de los profesores y su informe lo
realizará de manera individual), Nombre de los profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C,
Dr., etc.), Fecha de realización de la práctica y Fecha de entrega de reporte.

68 69
 Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica

II) NÚMERO Y NOMBRE DE LA PRÁCTICA. 2) RESULTADOS. Incluir:

Ø Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de valoración.
III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las Ø Gráfico de la curva de valoración indicando número y nombre CORRECTO (el
actividades realizadas en la práctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que nombre correcto del gráfico de una curva de valoración se puede indicar bajo el
deben responder el ¿Qué?, ¿Cómo? y ¿Para qué?. modelo: PROPIEDAD=f(V(ml)VALORANTE). Recordar que tienen que transformar los
valores de EECS a EENH sumándole 0.245 V o 245 mV, según sea el caso, y con esta
IV) INTRODUCCIÓN. Incluir solamente aplicaciones del Método de cuantificación en las gráfica es con la que trabajarán para la cuantificación y otros datos que se piden
diferentes áreas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar en el análisis de resultados.
las referencias). Ø Incluir tabla: con número y nombre.
Muestra empleada (nombre comercial)
V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:
v Preparación de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar Presentación
la marca y presentación de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado. Señalar la concentración real de la solución ácida empleada. Incluir Lote y fecha de caducidad (u origen)
tabla:
Peso de polvo de tableta empleada Marbete (enfocándose sólo al analito que se cuantificó
(unidades): experimentalmente)
Peso promedio por tableta (unidades): Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cápsula,
v Calibración del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir por 100ml, etc.)
imágenes o dibujos y será con base a la explicación del profesor no a lo reportado % de principio activo con respecto al marbete
en el Manual.
v Montaje experimental; mismas consideraciones del punto anterior. Enfatizar bien
en lo que contiene el vaso y la bureta (en este caso señalar la concentración exacta 3) ANÁLISIS DE RESULTADOS. Incluir:
y real de la solución valorante de K2Cr2O7 que se empleó), así como de los ü Analizar y discutir que dato(s) podrían emplear para dar validez y confiabilidad de
electrodos que se sumergirán en el sistema de valoración (tipo y composición). sus resultados.
v Lectura de la valoración; mismas consideraciones del punto anterior. Mencionar ü Identificar y calcular las condiciones de amortiguamiento impuestas en el sistema
como serán las adiciones del valorante y en que volumen se detendrá la valoración, de valoración; además, proponer la reacción de valoración generalizada y
así como la propiedad que se medirá y en qué unidades. No olvidar mencionar qué representativa empleando los Diagrama anexos en el Manual, así como el cálculo
se debe hacer una vez que se terminó de usar el equipo ya para apagarlo. de la Keq´´ considerando que en los equilibrios redox el cálculo de la Keq´´ no es
v Disposición de residuos; mencionar cómo se dispusieron los residuos en la sesión mediante Ley de acción de masas, sino mediante la fórmula general
experimental. considerando los E°´´ y, en caso que alguna de las especies hayan cambiado por
el amortiguamiento, calcular los E° de nuevos pares.

70 71
 Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica

ü Con ayuda de la gráfica de la Curva de valoración con datos de EENH, calcular el

valor del E°´´ experimental del par Fe(II)/Fe(III) y el valor de E°´´ experimental del DATOS: H3PO4 pKa’s = 2.2 , 7.2 , 12.3
par Cr(III)/Cr(VI), y con base a estos valores calcular la Keq´´ experimental y
Complejos de Fe(II)
compararla con la Keq´´ teórica calculada en el punto anterior.
Fe(OH)n+ Log β1= 4.5
ü Obtener el valor del Volumen de Punto de Equivalencia (VPE) mediante el método Fe2+ + H2PO4- → Fe H2PO4+ log K = 2.7
de las tangentes (puede ocupar la gráfica de los resultados o realizar otra y Fe2+ + HPO42- → Fe HPO4 log K = 3.6
colocarla en este punto). Obtener de igual forma el VPE con el método de la 1ra Complejos de Fe(III)
derivada graficando ΔE/ΔV, y finalmente comparar y analizar ambos resultados, Fe(OH)n3-n Log β1= 11.0 , Log β2= 21.7
Fe + H2PO4- → Fe H2PO42+ log K = 3.47
3+
justificando con cuál de los 2 realizarán la cuantificación. Fe3+ + HPO42- → Fe HPO4+ log K = 8.3
ü Si quisieran cuantificar el Hierro en la misma muestra, empleando al Dicromato
Complejos de Cr(III)
de potasio o no (sería opcional), con las diferentes técnicas instrumentales Cr(OH)n3-n Log β1= 10.2, Log β2= 18.3
revisadas en las prácticas anteriores (Espectrofotometría, Espectroscopía de Cr + H2PO4- → Cr H2PO42+ log K = 2.56
3+

Cr(OH)3↓ pKs = 30.3

Absorción Atómica, HPLC y Cromatografía de gases), menciona para cada una
de ellas si es posible o no su medición (justificando tu respuesta) y en caso de
ser posible mencionar cómo lo harías y mediante que método de cuantificación DIAGRAMA pPO4´ como función del pH para Fe(III)
lo propondrías.
pPO’
15
ü Incluir los cálculos de cuantificación, en el siguiente orden: Mencionar el VPE que
emplearán y de qué método es (tangentes o 1ra derivada), obtener la
Fe(OH) 2+
10
concentración de hierro en el sistema de valoración, regresión a las diluciones de
Fe 3+
Fe(OH)2 +
la muestra si es que hubo (deben coincidir con lo reportado en el diagrama de 5

flujo en Preparación de la muestra) y cambio de unidades a las similares al

0
marbete así como el % de principio activo; recordar que aunque hallan justificado pH
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
que VPE es más confiable, deben realizar la cuantificación con ambos, y al final -5
compararlos. FeH2PO4 FeHPO4 +
2+
ü Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el -10

resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores

-15
que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometió y las
acciones preventivas que sugieres para la mejoría. -20

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo general del Manual y a los redactados por
DIAGRAMA pPO4´ como función del pH para Fe(II)
ustedes (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. Deberán ser citadas ya sea en la introducción o en

el análisis de resultados en caso que se hallan empleado.

72 73
 Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica

PO4' 4 pCr(III)'
Fe 2+ Fe(OH)+ 12
3 Cr(OH)2+
CrH2PO42+
7
2

1 Cr(OH)3↓
2
FeH2PO4+ FeHPO4
0 pH
pH 0 2 4 6 8 10 12 14
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 -3
-1

-2 -8

-3
-13

DIAGRAMA pPO4´ como función del pH para Cr(III)

VIII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS

Deberá disponer de un frasco debidamente etiquetado como residuos de K2Cr2O7 y deberá

mantenerse bien tapado, alejado de materiales combustibles y protegidos de calor, daño

físico y flamas y en lugares secos (se almacena para su tratamiento)

El tratamiento posterior se realizará como sigue:

74 75
Práctica No. 8. Curva de valoración potenciométrica

2ª SERIE DE EJERCICIOS

1. Se desea determinar Clorhidrato de Fenilefrina en la solución oftalmológica

FRESHCLEAR por HPLC, por lo cual se tomaron 30 µL de solución
oftalmológica, se adicionaron 10 mL de Fase móvil y se aforo a 50 mL con agua
desionizada (Solución problema). Se prepararon los siguientes sistemas:

Concentración de la Sol. Stock de Fenilefrina: 79.2 ppm.

(mL) (mL) Volumen Aforo

Sistema Área
Stock Problema (mL)

1 1 0 10 39570

2 2 0 10 62095

3 3 0 10 89830

4 4 0 10 120375

5 5 0 10 150850

Problema 0 4 10 104091

Marbete: 10 g de Fenilefrina por cada 100 mL de solución

a) Calcular las concentraciones para cada sistema estándar indicando las unidades.
Respuesta: 7.92, 15.84, 23.76, 31.68, 39.6 ppm
b) Graficar los datos, Área & Concentración determine m y b por medio de una
regresión lineal. Respuesta: y = 3546x + 8292 r² = 0.9965
c) Indicar el método de cuantificación utilizado.
d) Calcular los g de Fenilefrina por cada 100 mL de solución oftálmica y compare con
en el marbete. Respuesta: 11.2567 g/ 100 mL de solución oftálmica.

76 77
 2ª serie de ejercicios 2ª serie de ejercicios

b) ¿Cuáles son los componentes que contiene el tequila? Justificar su

2. Se realizó un análisis de diferentes alcoholes en una muestra de tequila
respuesta
mediante la técnica de CG, obteniéndose los siguientes cromatogramas, a cada
c) ¿Cuáles son los componentes que se encuentran en mayor cantidad en
sistema se les adicionó un Estándar Interno (3):
el tequila?
d) Calcular los siguientes parámetros para el cromatograma de la solución
Mezcla de STD´s
Muestra problema problema. Indicar que nos indican cada uno de los parámetros en el
cromatograma.
e) Calcular el Factor Respuesta de Etanol con respecto al estándar Interno
Respuesta: FR Etanol/EI = 0.5862
f) Determinar la concentración de Etanol % v/v en el Tequila. Considere que
la muestra problema se preparó tomando 800 µL del tequila, llevándose
a un aforo de 10 mL.
Respuesta: 31.6268 % v/v
Mezcla de STD’s: Los picos corresponden a las siguientes moléculas
3. Completar la tabla, calculando los parámetros que se piden y explicar si esta

separación es eficiente, dibujando el cromatograma correspondiente.

Metanol Etanol n-Propanol n-Butanol Componente Tr Wb K´ N α Rs

(min) (min)

a) Con la información que proporcionan los cromatogramas llene las

A 21.5 0.96
siguientes tablas de datos:

Concentración Nombre del tr

Solución Área Wb N Rs B 22.1 0.95
%v/v compuesto Aprox.
1.2 8732 0.45
Mezcla de 1.95 15165 0.40
STD´s 0.98 14487 0.38 C 25.3 0.99
2.97 35478 0.41
Tiempo muerto ( to ) es de 2.5 min.
7245 0.43
Solución
22078 0.42
Problema
0.98 14494 0.39

76 77
 2ª serie de ejercicios 2ª serie de ejercicios

4. El análisis de residuos de pesticidas en plantas se realiza por cromatografía, 5. Una muestra de 0.1462 g de alambre de hierro puro fue disuelta en una
disolución ácida de manera que todo el hierro fue convertido a hierro (II). La
para ello 2.8560 g de planta son triturados y colocados en un solvente apropiado disolución resultante de ion ferroso requirió 30.62 mL de disolución de dicromato
de potasio para su titulación (Cr2O72-/Cr3+). Calcule la molaridad de la
y aforados a 20 mL, con fase móvil. Posteriormente se toman 20 µl de esta disolución de dicromato de [Link] (Fe) = 55.847 g/mol
solución y se inyectan al cromatógrafo, obteniendo un área de 3587. 6. La siguiente reacción no balanceada es cuantitativa:

Se cuenta con un estándar de concentración de 52 µg/ml, y se preparan los SnCl 2 ( ac ) + K 2 Cr2 O7 ( ac ) + HCl ( ac ) Û CrCl 3( ac ) + SnCl 4 ( ac ) + H 2 O + KCl ( ac )

siguientes sistemas, los cuales son aforados a 20 mL, obteniéndose los

i. Para alcanzar el punto de equivalencia en la titulación de 30 mL de una disolución de
siguientes resultados : cloruro de estaño(II) de concentración desconocida se requirieron 5 mL de una
disolución estándar de dicromato de potasio 0.02 mol L-1. La concentración de la
mL del mL de Tiempo de Wb Área disolución de SnCl2 es:
Sistema
estándar fase móvil retención (min) a. 5x10-3 N b. 3.33x10-3 M c. 0.01 N d. 0.01 M e. 3x10-2 N
(min)
ii. En la reacción de la pregunta anterior, la proporción en moles que reaccionan entre el
1 2 18 2.510 0.196 1168 cloruro de estaño (II) y el ácido clorhídrico es:

2 4 16 2.505 0.197 2170 a. 3 a 22 b. 3 a 14 c. 1 a 14 d. 1 a 10 e. 1 a 6

3 6 14 2.521 0.198 3214

4 8 12 2.513 0.197 4079

5 10 10 2.518 0.196 5392

a) Calcule la ecuación de la curva de calibración y determine si tiene una

tendencia lineal.

Respuesta: y = 199.1730 x + 97.5, r² = 0.9962

b) Determine la concentración de pesticida en la muestra de planta y expresela

en unidades de µg/g. Respuesta: 122.6887 μg/g

78 79
 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICAS
SECCIÓN QUÍMICA ANALÍTICA
CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-06A,
SOLICITUD PARA PRÉSTAMO DE MATERIAL,
FPE-CQ-DEX-03-06A
REACTIVOS, EQUIPO MENOR Y DE APOYO
No de REVISIÓN: 2

Laboratorio No: Fecha:

Alumno: Equipo: No. de Cuenta:
Asignatura: Grupo:
Carrera: Semestre
Profesores: Práctica:

Cantidad Material, reactivo o equipo Especificación Observaciones

Firma del Alumno