Arch Med Vet 46, 399-405 (2014)
ARTÍCULO ORIGINAL
Diagnóstico in vitro y en campo de resistencia antihelmíntica en nematodos
gastrointestinales de pequeños rumiantes
In vitro and field diagnosis of anthelmintic resistance in gastrointestinal nematodes
of small ruminants
R González-Garduñoa*, ME López-Arellanob, N Ojeda-Robertosc,
E Liébano-Hernándezb, P Mendoza-de Givesb
aUnidad Regional Universitaria Sursureste, Universidad Autónoma de Chapingo, Teapa, Tabasco, México.
bInstituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias, Centro Nacional de Investigación Disciplinaria
en Parasitología Veterinaria, Jiutepec, Morelos, México.
cDivisión Académica de Ciencias Agropecuarias, Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, Tabasco, México.
SUMMARY
The problem of anthelmintic resistance in ovine trichostrongyles is growing in tropical areas such as Chiapas, Mexico. Hair-sheep breeds are frequently
used by farmers because of their climate adaptation, however, anthelmintic resistance incidence requires more sensitive methods of diagnosis in this
region in order to apply selective treatments. The aim of this study was to evaluate in vitro and in vivo the relative efficacy of the three main anthelmintics
used to control gastrointestinal nematodes (GIN) in hair sheep. Naturally infected ewes and lambs experimentally infected with 100 larvae (L3) of
Haemonchus contortus and Cooperia curticei per kg body weight were used. Sheep were treated with 10 mg kg–1 albendazole, 7,5 mg kg–1 levamisole
or 0,2 mg kg–1 ivermectin. Positive faecal samples were cultured to obtain infective larvae (L3). Larvae of C. curticei and H. contortus were tested in
vitro and data were analyzed using the PROBIT procedure. Also, the relative anthelmintic efficacy was evaluated by faecal egg reduction test (FECRT).
The results of the FECRT showed 30% of levamisole efficacy while efficacies of and 87%, 64% and 65% were observed for ivermectin, albendazole
and commercial combination of ivermectin + levamisole (Iv+L), respectively. Problems of anthelmintic resistance were manly showed with the mix
Iv+L. The lethal dose (LD50) to albendazole, levamisole and ivermectin estimated after 12 h were 38, 8, 9,5 and 0,41 mg. These result show anthelmintic
resistance problems in hair sheep using the three main commercial drugs and for the combination of Iv+L in the tropical region of Chiapas, Mexico.
Key words: hair sheep, gastrointestinal nematodes, anthelmintic resistance, Probit test.
RESUMEN
El problema de la resistencia antihelmíntica en trichostrongílidos se incrementa en la región tropical, tal es el caso de Chiapas, México. Las
razas de ovinos de pelo son utilizadas frecuentemente por lo productores debido a su adaptación climática. Sin embargo, la incidencia de resistencia
antihelmíntica requiere de métodos más sensibles para el diagnóstico y así aplicar los tratamientos adecuados. El objetivo del presente estudio fue
evaluar la eficacia in vitro e in vivo de los tres principales antihelmínticos en el control de nematodos gastrointestinales (ngi) en ovinos de pelo. Se
utilizaron ovejas con infección natural y corderos infectados experimentalmente con 100 larvas (L3) de Haemonchus contortus y Cooperia curticei por
kg de peso. Los animales fueron tratados con albendazol a 10 mg/kg–1, levamisol a 7,5 mg/kg–1 o ivermectina a 0,2 mg/kg–1. Las muestras fecales se
cultivaron para obtener larvas infectantes (L3), estas se sometieron a la prueba in vitro y los datos se analizaron con el procedimiento Probit. También se
evaluó la eficiencia de los antihelmínticos con la prueba de reducción del número de huevos de ngi (PRCFH). Los resultados de PRCFH mostraron una
eficacia de 30% para levamisol, mientras que con ivermectina, albendazol y la aplicación de ivermectina + levamisol (Iv+L) hubo una eficacia de 87%,
64% y 65%, respectivamente. Se observaron problemas de resistencia antihelmíntica en la aplicación de Iv+L. La estimación de la dosis letal (DL50)
para albendazol, levamisol e ivermectina a las 12 horas fue de 38,8, 9,5 y 0,41 mg, respectivamente. Los resultados muestran que hubo problemas de
resistencia antihelmíntica en los ovinos de pelo usando los tres principales desparasitantes comerciales y para la combinación de Iv+L en la región
tropical de Chiapas, México.
Palabras clave: ovinos de pelo, nematodos, resistencia antihelmíntica, prueba Probit.
INTRODUCCIÓN terapéutica (Jabbar y col 2006). Este problema es amplia-
mente conocido en nematodos gastrointestinales (ngi) que
La resistencia antihelmíntica se define como la dismi- afectan a una gran variedad de animales domésticos (cerdos,
nución en la efectividad de un desparasitante contra una equinos y rumiantes), lo que se atribuye al uso continuo de
población de parásitos susceptibles utilizando la dosis los desparasitantes (Taylor y col 2002). Como resultado
de la resistencia antihelmíntica se seleccionan grupos de
Aceptado: 21.11.2013. nematodos con alelos resistentes, y los sobrevivientes se
* Apartado Postal No. 29, Teapa, Tabasco, CP. 86800, México; recombinan formando poblaciones que muestran fenotipo
robgardu@[Link] de tolerancia antihelmíntica (Sangster 2001). Esta situación
399
GONZÁLEZ-GARDUÑO Y COL
se ha convertido en un problema mundial, al presentarse unidad se localiza a 85 msnm con coordenadas 17°34’
tanto en países con clima templado (Chartier y col 1998) de latitud norte y 92° 29’ de longitud oeste. El clima de
y en aquellos con condiciones climatológicas cálidas en la región está clasificado como Af (m) w”(i’)g, cálido
los trópicos (Torres-Acosta y col 2003, Encalada-Mena húmedo con lluvias todo el año, temperatura promedio
y col 2008). anual de 26,6 °C y precipitación de 3.289,1 mm (García
Los nematodos gastrointestinales han tenido una rápida 1988). El proceso y análisis de las muestras biológicas se
evolución y desarrollo de resistencia contra los principales realizó en la Unidad Regional Universitaria Sursureste de
productos químicos utilizados en su control (Taylor y la Universidad Autónoma Chapingo (URUSSE-UACh),
col 2002), como son: bencimidazoles, imidazotiazoles y ubicada en Teapa, Tabasco.
lactonas macrocíclicas (Arece y col 2004, Papadopoulos
2008) e incluso a las combinaciones de antihelmínticos MANEJO DE LOS ANIMALES
contra cepas resistentes de Haemonchus contortus. El uso
de varios fármacos a la vez puede ser una solución temporal, El rebaño utilizado estaba formado por 41ovejas de
sin embargo, el problema de resistencia se genera rápida- pelo, cruza Katahdin x Pelibuey que se encontraban en
mente, y una vez que se establece para ambos productos pastoreo rotacional en potreros de Estrella de África
causa resistencia múltiple (Von Samson-Himmelstjerna (Cynodon plectostachyus) y pasto Humidícola (Brachiaria
2005, Coles y col 2006). humidicola). Los potreros estaban contaminados con larvas
De los métodos para detectar resistencia antihelmíntica, de H. contortus y C. curticei por el pastoreo de ovinos. De
los más utilizados han sido las pruebas in vitro y la prueba forma adicional se utilizaron 24 corderos Pelibuey que se
de reducción del conteo fecal de huevos de nematodos adquirieron en el Centro de Capacitación y Reproducción
(PRCFH). Esta última es sencilla, se puede aplicar a de Especies Menores (CECAREM) y se criaron en esta-
cualquier tipo de fármaco y mide la efectividad in vivo de bulación, libres de ngi. Los corderos fueron infectados
los antihelmínticos (Coles y col 1992, Coles y col 2006). experimentalmente con 100 L3 por kg de peso vivo (PV)
Es capaz de detectar resistencia cuando la frecuencia de de la mezcla de H. contortus y C. curticei en proporción
los alelos mutantes con genotipo de resistencia supera el de 60 y 40%, respectivamente, obtenidos de coprocultivos
25% (Sangster 2001). En contraste, las pruebas in vitro de ovejas de la misma unidad de producción.
son más sensibles, pero se requiere de personal con expe-
riencia y material biológico. A pesar de las desventajas, EFICACIA Y RESISTENCIA ANTIHELMÍNTICA
las pruebas in vitro aportan información relevante para
discriminar aislamientos de ngi resistentes y susceptibles El rebaño estuvo sometido a un programa de despa-
(Coles y col 2006). rasitación selectiva para el control de ngi. Este consistió
La rápida dispersión de ngi resistentes a nivel mundial en desparasitar a las ovejas con conteos fecales mayores
ha puesto en riesgo la sustentabilidad de las estrategias de de 1.000 hpg y en estos animales se determinó la eficacia
control, debido al retardo de la conversión de poblaciones de los tres principales antihelmínticos comerciales, los
resistentes a susceptibles mediante el manejo (Sangster que fueron aplicados a las dosis recomendadas por el fa-
2001). Ante la dificultad de no contar con nuevas familias bricante (ivermectina 0,2 mg/kg–1 PV, albendazol 10 mg/
de antihelmínticos es necesario establecer otras formas de kg–1 PV y levamisol 7,5 mg/kg–1 PV). También se utilizó
diagnóstico y control de los ngi (Molento 2009). la combinación de ivermectina + levamisol (Iv+Lev). La
La amplia difusión de cruzamientos con razas especia- terapia antihelmíntica se administró durante la época de
lizadas en producción de carne como la Katahdin y Dorper, lluvias y vientos cuando ocurrió la mayor prevalencia de
distribuidas en los estados de Veracruz, Tabasco y Chiapas ngi (junio-diciembre de 2011). Los productos se aplica-
debido a su adaptabilidad a climas cálidos (Vilaboa-Arroniz ron de manera secuencial en diferente fecha a grupos de
y col 2010), pero con mayor susceptibilidad a nematodos 7 a 14 animales. Por otra parte, también se confirmó la
gastrointestinales (ngi) es que la raza Pelibuey ha originado carga parasitaria en los corderos del Cecarem infectados
un alto uso de antihelmínticos. Por tal situación el objetivo experimentalmente, y se aplicó albendazol a razón de 10
del presente estudio fue evaluar la eficacia in vitro e in mg/kg–1 PV a aquellos animales con más de 300 hpg,
vivo de los tres principales antihelmínticos en el control por lo que el número de ovejas y corderos tratados con
de ngi en ovinos de pelo. albendazol fue de 26 animales.
Tanto en las ovejas como en los corderos se realizó el
MATERIAL Y MÉTODOS monitoreo de la carga parasitaria entre los 10 y 14 días
postratamiento, tomando muestras de heces directamente
LOCALIZACIÓN del recto de cada animal para determinar el número de
huevos de ngi mediante la técnica de McMaster (Thienpont
El estudio de eficacia y resistencia antihelmíntica se y col 1986).
desarrolló en una unidad de producción de ovinos en Pueblo Se calculó el porcentaje de eficacia como la diferencia
Nuevo, Municipio de Salto de Agua, Chiapas, México. La en el porcentaje entre los conteos después (1) y antes (0) del
400
OVINOS DE PELO, NEMATODOS, RESISTENCIA ANTIHELMÍNTICA, PRUEBA PROBIT
tratamiento (100 – (hpg 1 / hpg 0)*100) por animal como 50 mg/mL–1, respectivamente), ivermectina (10 mg/mL–1)
repetición (Kochapakdee y col 1995). La comparación entre y levamisol al 12%. La evaluación de la acción antihelmín-
los tratamientos se realizó transformando a raíz cuadrada tica se realizó por duplicado en cajas de poliestireno de 96
la variable (hpg 1/hpg 0) y se comprobó la normalidad pozos, con 100 L3 por pozo y 100 μl de cada antihelmíntico
de la variable con la prueba de Kolmogorov-Smirnov en diluciones con agua destilada (cuadro 1).
y Cramer-Von Mises del procedimiento univariado del La lectura de L3 vivas o muertas se realizó a las 12 y
SAS (SAS 1999). El análisis estadístico se realizó con el 24 h postinteracción con el tratamiento (antihelmíntico) y
procedimiento GLM del SAS (SAS 1999) y la prueba de también con un testigo positivo (agua destilada). Los datos
separación de medias con el test de Tukey. obtenidos fueron analizados para obtener la concentración
En 16 corderos con conteos superiores a los 300 hpg y letal (CL50) y la dosis letal (DL50) por fármaco y por aisla-
con promedio general de 1.446 ± 963 hpg, infectados de miento mediante el análisis Probit, utilizando el programa
manera experimental con 100 L3 por kg de peso vivo de SAS (SAS 1999) sobre la base del siguiente modelo:
un cultivo mixto de H. contortus y C. curticei, se realizó la
prueba de reducción del conteo fecal de huevos de ngi en Pr(Respuesta) = C + (1-C)F(X’β) = C+ (1-C) Ф(b0 + b1
heces (PRCFH) para el diagnóstico de resistencia antihel- x log10 (Dosis))
míntica, siguiendo las recomendaciones de la Asociación
Mundial para el Avance de Parasitología Veterinaria Donde:
(WAAVP, Coles y col 2006). Se formaron dos grupos de β es un vector de parámetros estimados
ocho corderos, el control sin tratamiento antihelmíntico F es una función de distribución acumulativa (normal)
y el tratado con 0,2 mg/kg–1 de ivermectina y 10 mg/kg–1 X es un vector de variables explicativas
de levamisol de manera simultánea (Iv+L). Pr es la probabilidad de una respuesta
Con los datos obtenidos de hpg se calculó la media C es la tasa de respuesta natural (proporción de individuos
aritmética, intervalo de confianza al 95% y porcentaje de que responden a la dosis cero).
reducción (Coles y col 1992) de acuerdo con la siguiente
ecuación: RESULTADOS
⎛ Xt ⎞ EFICACIA Y RESISTENCIA A LOS ANTIHELMÍNTICOS
PHR = 100 ⎜ 1− ⎟
⎝ Xc ⎠
Los datos obtenidos indican que el levamisol mostró
Donde: PRH = Porcentaje de reducción del número de bajo porcentaje de eficacia antihelmíntica (30,2% de
huevos de nematodos, Xt = Promedio de hpg del grupo reducción en el conteo de hpg) postratamiento. En con-
tratado, Xc = Promedio de hpg del grupo control. traste, con albendazol y con la aplicación comercial de
PRUEBA IN VITRO
Cuadro 1. Esquema de la concentración de tres antihelmínticos
utilizados en contra de L3 de Haemonchus contortus y Cooperia
La prueba in vitro se realizó mediante la técnica de curticei del aislamiento Ch y Haemonchus contortus aislamiento
migración larval (Wagland y col 1992) con observación CENID.
directa de la motilidad. El efecto de los antihelmínticos Concentration of three anthelmintics used against Haemonchus
se evaluó basado en el siguiente criterio: larvas muertas, contortus and Cooperia curticei Chapingo isolation and Haemonchus
aquellas que se observaron rectas y sin movimiento, mien- contortus CENID isolation.
tras que las larvas vivas se clasificaron en dos categorías:
enrolladas y en movimiento. Se utilizó un cultivo mixto de Albendazol + closantel Ivermectina Levamisol
Diluciones
(mg/mL–1) (mg/mL–1) (mg/mL–1)
L3 de H. contortus y C. curticei (60:40) provenientes de los
ovinos infectados en pastoreo de la unidad de producción Comercial 37,5 + 50 10 120
de Chiapas (Aislamiento Ch). Asimismo, se utilizó un 2 18,75 + 25 5 60
aislamiento de H. contortus resistente a bencimidazoles 3 9,38 + 12,5 3 30
como material de referencia (CENID-PAVET, INIFAP). 4 4,69 + 6,25 1,25 15
Después de siete días de cultivo se recuperaron las larvas 5 2,34 + 3,13 0,63 7,5
y se realizó la eliminación de la vaina con hipoclorito de 6 1,17 + 1,56 0,31 3,75
sodio al 0,187% por cinco minutos y posteriormente se 7 0,59 + 0,78 0,16 1,88
realizaron tres lavados con agua destilada por centrifu- 8 0,29 + 0,39 0,08 0,94
gación a 2.000 rpm a 4 °C por 5 min. El pellet de las L3 9 0,15 + 0,20 0,04 0,47
fue suspendido en agua destilada para su cuantificación
10 0,073 + 0,10 0,02 0,23
por alícuotas.
11 0,037 + 0,05 0,01 0,12
Para los bioensayos se utilizó la mezcla comercial
12 0,018 + 0,024 0,005 0,06
de albendazol + closantel (alb+clos) (37,5 mg/mL–1 y
401
GONZÁLEZ-GARDUÑO Y COL
Cuadro 2. Eficacia de tres antihelmínticos en el control de nematodos gastrointestinales de ovinos de pelo.
Effectiveness of three anthelmintics for gastrointestinal nematode control of hair sheep.
Antihelmíntico Fecha de aplicación Número de ovejas HPG previo HPG posterior Eficacia (%)*
Ivermectina (Iv) Junio-Julio 14 3.725ª 429b 86,7a±20,1
Albendazol Agosto-Septiembre 26 2.038a 565b 64,0ab±44,6
Levamisol (L) Octubre 7 2.464a 1.729a 30,2c±39,0
Iv+L Diciembre 7 3.021a 1.293ab 65,0bc±36,6
* La separación de medias corresponde a la raíz cuadrada de la variable (hpg después de la desparasitación/hpg antes de la desparasitación).
ivermectina + levamisol se registró un valor mayor de Cuadro 3. Resultados de la prueba de resistencia antihelmín-
eficacia (65%; cuadro 2). La ivermectina mostró 87% de tica en ovinos desparasitados conjuntamente con levamisol e
ivermectina.
eficacia al administrarse como producto único y en todos
Results of anthelmintic resistance test in hair sheep, drenched
los casos se observó alta variabilidad en la reducción de together with levamisole and ivermectin.
los conteos de hpg (desviación estándar, DE, superior a
20% en la eficacia). Variable Control Tratado
En la prueba de resistencia con la aplicación de Iv+L,
se observó 51% eficacia (antes y después de la aplicación) Número de ovinos 8 8
y considerando los lineamientos de la WAAVP solo hubo Conteo de hpg pretratamiento 956 1937
una diferencia de 1,3% de reducción en el hpg en el grupo Conteo de hpg postratamiento 963 950
tratado respecto del grupo control, por lo que de acuerdo Porcentaje de reducción (eficacia) 51
a los criterios de la WAAVP se determinó la existencia Porcentaje de reducción respecto del control 1,3
de resistencia antihelmíntica a la aplicación conjunta de Varianza de la red 0,05
Iv+L (cuadro 3). Límite de confianza superior 36,7
Límite de confianza inferior -53,9
PRUEBAS IN VITRO
En el estudio in vitro el análisis Probit mostró que en casi positiva en todos los casos, por lo que con el incremento
todos los ensayos la ordenada al origen (b0) y la pendiente en la concentración del antihelmíntico aumentó la tasa de
de la regresión (b1) fueron significativas (P< 0,05), excepto mortalidad (cuadro 4).
en el aislamiento Ch tratado con ivermectina y leído a las Con albendazol + closantel se observó que la DL50
12 horas. En las ecuaciones Probit se observaron tasas fue mayor en el aislamiento Ch (albendazol + closantel:
de mortalidad natural entre 12 a 23% (C) y para el resto 38,8 y 51,7 mg/mL–1) cuando se observaron las larvas a
de las larvas (1-C) la pendiente de la regresión (b1) fue las doce horas, en comparación con los ngi provenientes
Cuadro 4. Ecuaciones Probit, coeficientes de regresión y concentración letal de tres antihelmínticos utilizados en el control de nema-
todos gastrointestinales.
Probit equations, regression coefficients and lethal doses of three anthelmintics used for gastrointestinal nematodes control.
Antihelmíntico Tiempo Ecuación Probit b0 b1 CL50 DL50
Aislamiento CENID
Albendazol (Ab) + 12 Pr= 0,22+0,78(φ(-3,98+3,06×Log10(dosis))) * ** 1,07 11,86
Closantel (C)*
Ivermectina 12 Pr= 0,23+0,77(φ(1,29+1,14×Log 10(dosis))) ** ** -1,38 0,042
Levamisol 12 Pr= 0,19+ 0,81(φ(-4,47+3,57×Log 10(dosis))) ** ** 1,11 12,87
Aislamiento Ch
Ab + C* 12 Pr= 0,13+0,87(φ(-4,14+3,13×Log 10(dosis))) ** ** 1,59 38,79
Ab + C* 24 Pr= 0,17+0,83(φ(-8,53+8,02×Log 10(dosis))) ** ** 0,95 8,88
Ivermectina 12 Pr= 0,15+ 0,85(φ(4,37+21,80×Log 10(dosis))) ns ns -0,39 0,41
Ivermectina 24 Pr= 0,23+ 0,77(φ (1,62+0,60×Log 10(dosis))) ** ** -3,25 0,0006
Levamisol 12 Pr= 0,12+ 0,88(φ(-3,29+2,86×Log 10(dosis))) ** ** 0,98 9,57
Levamisol 24 Pr= 0,13+ 0,87(φ(-2,47+2,28×Log 10(dosis))) ** ** 0,92 8,23
* La concentración indicada es solo para albendazol, la correspondiente para closantel estará de acuerdo con el cuadro 1.
402
OVINOS DE PELO, NEMATODOS, RESISTENCIA ANTIHELMÍNTICA, PRUEBA PROBIT
del CENID (albendazol + closantel: 11,9 y 15,9 mg/mL–1). a utilizar de manera conjunta con levamisol, la reducción
Sin embargo, en la lectura a las 24 horas en el aislamiento en el conteo fecal de huevos de ngi fue menor (65%) y con
Ch, la DL50 se redujo hasta un valor de 8,9 y 11,9 mg ml–1 mayor variabilidad en la reducción del conteo de huevos
para albendazol + closantel, con lo que se requirió de una de ngi (DE = 36,6%). La varianza en la eficacia implica
dosis menor para reducir en 50% la población de nemato- que en algunas ovejas los conteos fecales de huevos de
dos cuando el tiempo de exposición fue mayor (figura 1). ngi se redujeron, pero en otras en vez de disminuir se
Cuando se comparó la aplicación de ivermectina en los incrementaron, y en un caso una oveja a pesar de haberse
dos aislamientos a un mismo tiempo (12 horas), la DL50 desparasitado con levamisol presentó anemia, anorexia
fue mayor en el aislamiento Ch (0,41 mg ml–1) que en las y finalmente murió, ello se atribuyó a la presencia de
larvas del CENID (0,04 mg ml–1). Sin embargo, cuando se H. contortus y C. curticei observados a la necropsia.
dejó actuar el producto por 12 horas más en el aislamiento Esta variabilidad en la eficacia también se ha indicado
Ch, la DL50 fue menor (figura 2) en compuestos derivados de bencimidazol en un estudio
Para el aislamiento CENID únicamente con levamisol reciente (Muñoz y col 2008). Sin embargo, esos autores
en la lectura a las 12 horas se observó una mayor DL50 indicaron alta eficacia para ivermectina y doramectina, con
respecto de la determinada para el aislamiento Ch a las una persistencia del efecto antihelmíntico durante 35 días.
12 y a las 24 horas (figura 3). Aunque también existen indicios actuales de resistencia
contra ivermectina en el estado de Tlaxcala (Montalvo-
DISCUSIÓN Aguilar y col 2006). A pesar de que no fue posible separar la
resistencia por especie, se pudo determinar en la necropsia
El bajo efecto nematicida de levamisol en el rebaño de que esta ocurre tanto en H. contortus como en C. curticei,
Salto de Agua, Chiapas (30% de eficacia), se atribuyó al uso los que son los dos principales nematodos encontrados en
constante de este antihelmíntico durante un periodo cercano a la unidad de producción. Esto se confirmó en los cultivos
cuatro años. La baja eficacia ya se había indicado previamente larvarios del rebaño. Sin embargo, es necesario hacer es-
en un estudio, en el que se utilizaron tres antihelmínticos tudios independientes para cada especie para comprobar
(levamisol, ivermectina y albendazol + closantel), con la el grado de resistencia de cada una de ellas.
intención de reducir el número de huevos de ngi en ovinos Debido a la baja eficacia existente en todos los pro-
en pastoreo (González-Garduño y col 2010). ductos utilizados en las ovejas, se decidió realizar una
Con ivermectina el promedio de eficacia fue de 87% prueba de resistencia a la combinación de ivermectina y
cuando se utilizó al inicio del periodo de evaluación. Sin levamisol. Sin embargo, a pesar de utilizarse de manera
embargo, debido al comportamiento variable entre las conjunta no fue posible reducir los conteos de hpg en
ovejas (DE= 20%) se suspendió su uso y cuando se volvió todos los animales y se obtuvieron resultados similares
0,9
Valor estimado de probabilidad
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
Albendazol CENID 12
0,3
Albendazol Chapingo 24
0,2 Albendazol Chapingo 12
0,1
0
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200
Dosis
(mg/mL–1)
Figura 1. Resultado comparativo de la mortalidad de larvas infectantes de nematodos gastrointestinales de ovinos utilizando albendazol
+ closantel.
Comparative results in mortality of gastrointestinal nematodes infective larvae of sheep, using albendazole + closantel.
403
GONZÁLEZ-GARDUÑO Y COL
0,9
0,8
Valor estimado de probabilidad
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3 Ivermectina CENID 12
0,2 Ivermectina Chapingo 12
0,1 Ivermectina Chapingo 24
0
0,0 0,1 0,1 0,2 0,2 0,3 0,3 0,4 0,4 0,5 0,5
Dosis
(mg/mL–1)
Figura 2. Resultado comparativo de la mortalidad de larvas de nematodos gastrointestinales de ovinos de pelo utilizando ivermectina.
Comparative results in mortality of gastrointestinal nematodes infective larvae of hair sheep, using ivermectin.
0,9
0,8
Valor estimado de probabilidad
0,7
0,6
0,5
0,4
Levamisol CENID 12
0,3
Levamisol Chapingo 12
0,2 Levamisol Chapingo 24
0,1
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Dosis
(mg/mL–1)
Figura 3. Resultado comparativo de la mortalidad de larvas de nematodos gastrointestinales de ovinos de pelo utilizando levamisol.
Comparative results in mortality of gastrointestinal nematodes infective larvae of hair sheep, using levamisole.
a los de la mezcla de albendazol + levamisol aplicada en de resistencia antihelmíntica con la prueba de PRCFH
otro estudio (Márquez 2003). con ivermectina y levamisol (Rimbaud y col 2005) y en
El rápido incremento en la resistencia desarrollada por Chile se ha indicado resistencia antihelmíntica en bovinos
lo ngi contra ivermectina se ha demostrado en H. contor- (Sievers y Alocilla 2007).
tus, en un estudio en el que al cabo de tres generaciones En el análisis Probit no se encontró significancia en la
de larvas la eliminación fecal de huevos de esta especie ordenada al origen (b0) y en la pendiente de la regresión (b1)
se reducía a 65% al usar el producto (Coles y col 2005). en el aislamiento Ch tratado con ivermectina, lo que indica
También en Nicaragua se han obtenido algunos indicios que no hubo relación directa entre la dosis y la mortalidad
404
OVINOS DE PELO, NEMATODOS, RESISTENCIA ANTIHELMÍNTICA, PRUEBA PROBIT
larvaria, esto es posiblemente consecuencia de la baja eficacia Coles GC, F Jackson, WE Pomroy, RK Prichard, G von Samson-
y la gran variación existente en la reducción del conteo fecal Himmelstjerna, A Silvestre, MA Taylor, J Vercruysse. 2006. The
detection of anthelmintic resistance in nematodes of veterinary
de huevos de ngi entre los animales, aunque con mayor tiempo
importance. Vet Parasitol 136, 167-185.
de exposición se pudo observar que sí hubo relación entre Encalada-Mena LA, ME López-Arellano, P Mendoza-de Gives, E
el tiempo y la mortalidad ocurrida (pendiente de la curva). Liébano-Hernández, V Vázquez-Prats, G Vera-Ycuspinera. 2008.
En todos los casos la dosis letal requerida fue superior Primer informe en México sobre la presencia de resistencia a
en los nematodos gastrointestinales del aislamiento Ch que ivermectina en bovinos infectados naturalmente con nematodos
en las larvas de H. contortus resistentes a bencimidazol gastrointestinales. Vet Méx 39, 423-428.
García E. 1988. Modificaciones al Sistema de Clasificación Climática
proveniente del CENID, por lo que existen indicios para de Köppen. 4ª ed. Editorial Instituto de Geografía, Universidad
suponer que el aislamiento Ch tiene ngi con un alto grado de Nacional Autónoma de México, México, Pp 90-95.
resistencia múltiple. Los resultados del PRCFH obtenidos González-Garduño R, JC Cordero-Ortega, G Torres-Hernández, J Arece-
en este estudio fueron confirmados con los estudios de las García, P Mendoza-de Gives. 2010. Efecto del hipoclorito de sodio y
pruebas in vitro, tomando como referencia el aislamiento extracto de cítricos en la reducción de la infestación con nematodos
gastrointestinales resistentes a antihelmínticos en ovinos de pelo.
resistente del CENID.
Rev Mex Cienc Pecu 1, 179-187.
La resistencia en los aislamientos observados se Jabbar A, Z Iqbal, D Kerboeuf, G Muhammad, MN Khan, M Afaq.
podría abatir si se aplican dosis mayores de 9,6 mg/ml–1 2006. Anthelmintic resistance: The state of play revisited. Life Sci
para levamisol, 0,41 mg/ml–1 para ivermectina y 39 mg/ 79, 2413-2431.
ml–1 para albendazol. El incremento de dosis es un pro- Kochapakdee S, VS Pandey, W Pralomkarn, S Choldumrongkul, W
ceso que se ha seguido para el control de nematodos en Ngampongsai, A Lawpetchara. 1995. Anthelmintic resistance in
goats in southern Thailand. Vet Rec 137, 124-125.
poblaciones con alto índice de resistencia, sin embargo, Márquez LD. 2003. Resistencia a los antihelmínticos: origen, desarrollo
también representa un problema al generar otro tipo de y control. Rev Corpoica 4, 55-71.
mutaciones múltiples que puedan estar fuera de control Molento MB. 2009. Parasite control in the age of drug resistance and
en los programas sanitarios (Márquez 2003). Por ello se changing agricultural practices. Vet Parasitol 163, 229-234.
recomienda utilizar otras herramientas de control de ne- Montalvo-Aguilar X, ME López-Arellano, V Vázquez-Pratts, E Liébano-
Hernández, P Mendoza-de Gives. 2006. Resistencia antihelmíntica
matodos gastrointestinales y de manera integral con uso
de nematodos gastroentéricos en ovinos a febendazol e ivermectina
cuidadoso de los antihelmínticos comerciales. en la región noroeste del estado de Tlaxcala. Téc Pec Méx 44, 81-90.
El uso constante de levamisol ha originado una reducida Muñoz JA, C Angulo, R Ramírez, O Vale, E Chacín, D Simoes, A Atencio.
eficacia (30%) en el control de nematodos gastrointesti- 2008. Eficacia antihelmíntica de doramectina 1%, ivermectina 1% y
nales (H. contortus y C. curticei) en ovinos de pelo. Por ricobendazol 15% frente a nematodos gastrointestinales en ovinos
otra parte la combinación de levamisol con invermectina de pelo. Rev Científica FCV-LUZ 18, 12-16.
Papadopoulos E. 2008. Anthelmintic resistance in sheep nematodes.
mostró resistencia antihelmíntica en la prueba PRCFH y Small Rumin Res 76, 99–103.
también la combinación albendazol + closantel mostró Rimbaud E, P Zúniga, M Doña, N Pineda, L Luna, G Rivera, L Molina,
resistencia, comprobada con la prueba de motilidad larvaria J Gutiérrez, J Vanegas. 2005. Primer diagnóstico de resistencia a
in vitro, la que representa una herramienta de diagnóstico levamisol y lactonas macrocíclicas en nematodos gastrointestinales
más sensible para evaluar diferentes antihelmínticos en parásitos de ovinos en Nicaragua. Red Vet VI, 1-3.
Sangster NC. 2001. Managing parasiticide resistance. Vet Parasitol
poblaciones de nematodos.
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SAS Institute. 1999. The SAS System for Windows. Version 8. SAS
AGRADECIMIENTOS Institute. Inc. Cary, N. C. USA.
Sievers G, A Alocilla. 2007. Determinación de resistencia antihelmíntica
Al Sr. Natael Guillén García por su valioso apoyo en los muestreos y frente a ivermectina de nematodos del bovino en dos predios del sur
en el manejo del rebaño. A José Arias Julián y Demetrio Esteban Andrés de Chile. Arch Med Vet 39, 67-69.
por su ayuda en el procesamiento de las muestras. Taylor MA, KR Hunt, KL Goodyear. 2002. Anthelmintic resistance
detection methods. Vet Parasitol 103, 183-194.
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