Universidad de Guayaquil
Facultad de Ciencias
Químicas Carrera: Química y
Farmacia Guía de Prácticas de
Laboratorio
Práctica # 7 ESTUDIO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS. VALORES RELATIVOS
Curso: Estudiante: Laura Montalvo Polanco. Fecha: Guayaquil, 15 de julio de 2024.
G1A Docente: QF. Haydee Alvarado Alvarado. Materia: Hematología PR
Objetivos de la práctica de laboratorio
Desarrollar la competencia necesaria para reconocer e identificar de manera precisa los distintos tipos de
leucocitos y sus características morfológicas específicas en un frotis sanguíneo teñido mediante el
empleo de un microscopio para el diagnóstico, tratamiento y seguimiento de una amplia gama de
condiciones médicas.
Instrucciones o consideraciones previas
LECUCOCITOS
Tipo de glóbulo sanguíneo (célula de la sangre) que se produce en la médula ósea y se encuentra en la sangre y el
tejido linfático. Los leucocitos son parte del sistema inmunitario del cuerpo y ayudan a combatir infecciones y
otras enfermedades. Los tipos de leucocitos incluyen los siguientes tipos celulares:
Granulocitos o leucocitos con gran cantidad de gránulos en su citoplasma y que a su vez
son polimorfonucleares, ya que tienen un núcleo compuesto por varios lóbulos, de forma que adquiere
formas poco regulares: neutrófilos, eosinófilos y basófilos.
Agranulocitos o células comparativamente con pocos gránulos en su citoplasma y que a su vez
son mononucleares, ya que tienen un núcleo simple: monocitos, linfocitos y macrófagos (estos derivan de
los monocitos pero se localizan en los tejidos).
Neutrófilos
Los neutrófilos son los granulocitos más abundantes y conforman la primera línea de defensa ante las infecciones
causadas por bacterias y otros agentes. Son elementos del sistema inmune innato. Los gránulos celulares tienen
toda una batería enzimática y bactericida que ayuda a la destrucción de los patógenos y entes extraños. Para
cumplir con su función, estas células pueden migrar a distintos tejidos y fagocitar el elemento en cuestión. Tras
destruir el patógeno, el neutrófilo suele morir y puede excretarse junto con los residuos bacterianos en forma de
pus. Los neutrófilos pueden secretar una serie de sustancias que alertan a otras células del sistema inmune ya sea
otros neutrófilos o macrófagos y las “llama” o recluta al sitio donde sean necesarias. También están relacionados
con la respuesta inflamatoria y con la producción de trampas extracelulares de neutrófilos.
Eosinófilos
Representan solo un pequeño porcentaje de las células totales, aunque su número puede aumentar en pacientes
con infecciones o fiebre. Se relacionan con la respuesta a alergias. Al igual que los neutrófilos, los eosinófilos son
leucocitos que pueden fagocitar a agentes extraños que ingresan en el organismo. Se han relacionado de manera
específica con la presencia de parásitos y helmintos. Los gránulos que presentan contienen enzimas digestivas y
otros componentes citotóxicos, permitiéndoles realizar su papel como célula defensora. Aunque son células de
dimensiones muy pequeñas como para fagocitar a un parásito, los eosinófilos pueden posarse en la superficie del
mismo y vaciar el contenido tóxico de los gránulos.
Basófilos
Son las células menos abundantes. Esto supone una serie de complicaciones metodológicas para estudiarlos, por
lo que se conoce muy poco sobre su biología y función. Históricamente, los basófilos eran considerados como
células con un papel secundario en los procesos de alergia. Esto se intuía por la presencia de receptores para
inmunoglobulinas E en la superficie de la membrana. Los basófilos son integrantes tanto del sistema inmune
innato como del adaptativo. Son capaces de secretar una serie de citoquinas que ayudan a modular la respuesta
inmune y también inducen a las células B a sintetizar las inmunoglobulinas E. Gracias a la liberación de las
citoquinas, los basófilos inician la reacción alérgica. Este proceso no se restringe por las reacciones antígeno
específico con las inmunoglobulinas E, pueden ser desencadenadas por una larga lista de otras moléculas, como
antígenos de parásitos, lectinas, entre otras. A diferencia de los eosinófilos y los neutrófilos, el contenido de los
gránulos de los basófilos ha sido pobremente estudiado. Junto con los eosinófilos, los basófilos también combaten
las infestaciones causadas por helmintos.
Monocitos
Son los linfocitos de mayor tamaño y en cuanto a las proporciones, corresponden a casi el 11% de todos los
leucocitos en circulación. Se caracterizan por exhibir un núcleo en forma de riñón y un citoplasma azulado.
Existen tanto en la sangre como en los tejidos. Participan tanto en reacciones del sistema inmune innato como del
adaptativo. Como parte del sistema inmune innato, los monocitos son capaces de reconocer una serie de
patógenos de naturaleza bacteriana por medio de receptores que estimulan la producción de citoquinas y de la
fagocitosis. Poseen una serie de receptores del tipo Fc, por lo que pueden fagocitar y atacar materiales recubiertos
con anticuerpos. Los macrófagos y las células dendríticas pueden interaccionar con los linfocitos T y los B para
iniciar una respuesta adaptativa. Las células dendríticas son conocidas por su excelente papel como células
presentadoras de antígenos. Los monocitos participan en la remoción de restos celulares y células muertas en las
zonas donde ha ocurrido daño tisular o infecciones. Participan en la síntesis de proteínas como factores de
coagulación, componentes del complemento, enzimas, interleuquinas, entre otras.
Linfocitos
Son células originadas en la médula ósea, donde se diferencian y maduran. Al culminar su desarrollo, las células
entran en circulación. El número de leucocitos varía dependiendo de varios factores, como la edad, el sexo y la
actividad de la persona. Exhiben un par de peculiaridades, si se le compara con el resto de los leucocitos. No son
células terminales, ya que cuando son estimuladas estas empiezan un proceso de división celular mitótica, dando
como resultado células efectoras y de memoria. Tienen la capacidad de movilizarse desde la sangre a los tejidos,
y luego volver a la sangre. Debido a la complejidad del proceso, el patrón de migración no está bien descrito en
la literatura. Se dividen en tres grandes grupos: células T, células B y células asesinas naturales o NK (del
inglés natural killer). Las primeras juegan un papel indispensable en la respuesta inmune adaptativa, mientras que
las NK son un pequeño porcentaje de los linfocitos que participan en la respuesta innata. Las células T son
llamadas así porque se producen en el timo, las B en la médula ósea (la B viene del inglés bone marrow),
mientras que las NK se producen en ambos sitios.
En lo que respecta a la respuesta adaptativa, existen tres características a resaltar. En primer lugar, posee un
número significantemente elevado de linfocitos, cada uno con receptores específicos localizados en sus
membranas que reconocen sitios específicos de los antígenos foráneos. Tras tener contacto con un antígeno, la
célula puede recordarlo y esta memoria celular puede causar una reacción más rápida y vigorosa si existe una
reexposición al mismo antígeno. Nótese que los antígenos provenientes del cuerpo son tolerados e ignorados por
el sistema inmune. Los linfocitos B participan en la producción de anticuerpos y en la presentación de los
antígenos a las células T. También están involucradas en la producción de citoquinas que regulan una variedad de
células T y presentación de antígenos. Las células T se dividen en CD4+ y CD8+. Las primeras se dividen en
múltiples categorías y participan de manera específica en funciones como mediar la respuesta inmune contra
agentes patógenos intracelulares, infecciones bacterianas, hongos, inducción del asma y otras respuestas alérgicas.
Las del tipo CD8+ son capaces de destruir células blanco por medio de las secreciones de los gránulos que
contienen una serie de enzimas tóxicas. En la literatura, las células CD8+ también son conocidas como linfocitos
T citotóxicos, por todas las moléculas que liberan. La función de los linfocitos NK está directamente ligada a la
respuesta inmune innata. Además, son capaces de matar células tumorales y células infectadas por virus.
Adicionalmente, pueden modular las funciones de otras células, entre ellas los macrófagos y las células T.
Prueba del recuento sanguíneo completo
La prueba del recuento sanguíneo completo (RSC) a menudo incluye el número de leucocitos. Este valor se usa
para detectar afecciones como infecciones, inflamaciones, alergias y leucemias. También se llama GB y glóbulo
blanco.
Los leucocitos o células blancas de la sangre son fácilmente reconocibles en un frotis ya que son células
nucleadas (a diferencia de las plaquetas y los hematíes). Estas células se originan en la médula ósea y se
relacionan con la protección del organismo frente a diversos ataques a su integridad, como pueden ser las
infecciones.
El recuento de leucocitos (células blancas de la sangre) o WBC (White Blood Cells Count) es una parte del
recuento total de células sanguíneas (CBC o Complete Blood Cell Count) y consiste en el recuento de leucocitos
en un pequeño volumen sanguíneo. Este análisis puede ser microscópico, o lo que es más habitual hoy en día, se
pueden utilizar analizadores hematológicos automáticos que permiten la diferenciación y cuantificación de los
distintos tipos de células sanguíneas en base a su tamaño y complejidad (en relación a las características de sus
citoplasmas y núcleos).
El recuento total de leucocitos o formula leucocitaria
Representa la cantidad de cada uno de los tipos de leucocitos en sangre periférica. Se puede expresar como valor
ABSOLUTO de cada tipo de leucocito por mm3 de sangre o como valor RELATIVO que hace referencia al
porcentaje de cada tipo de leucocitos presentes en la muestra sanguínea respecto al total. Los valores relativos de
diversos tipos celulares pueden verse alterados de forma indirecta porque se ha visto alterada otra de las
poblaciones celulares sanguíneas. Alteraciones en el recuento de alguna de las poblaciones en concreto o de más
de una de ellas suele ir ligado a diversas anomalías o problemáticas de diversa índole. De esta forma el recuento
de leucocitos puede tener una gran importancia clínica ya que se pueden evaluar ciertos parámetros de relevancia
en cuanto al estado, respuesta y evolución del organismo en el caso de infecciones, inflamación, alergias, cáncer,
inmunodéficits, terapias, etc. Para evitar interpretar los resultados de forma indebida las alteraciones cuantitativas
se deben referir siempre en términos absolutos.
Los rangos de referencia para un recuento de leucocitos en adultos son los siguientes:
Rango de valores Valor medio % % Tamaño
Tipo celular
(células/µl) (células/µl) normal medio (µm)
Leucocitos 4000-11000 7400 7-18
Neutrófilo 2500-7500 4000 50-70 60 12-15
Granulocitos/
Eosinófilo 40-400 200 1-4 3 12-15
polimorfonucleares
Basófilo 10-100 40 0,2-1 1 8-12
Agranulocitos/ Linfocito 1500-3500 2500 20-40 32 7-12
mononucleares Monocito 200-800 300 2-8 4 12-18
Los valores normales de leucocitos pueden diferir considerablemente entre distintas poblaciones, sexos y
estados especiales como el embarazo. En sangre se pueden observar también neutrófilos inmaduros liberados por
la médula ósea antes de terminar su maduración de nominados neutrófilos en cayado (por la forma de su núcleo
aun sin lóbulos definidos y con forma de bastón grueso) y pueden aparecer en un 1-5 % (100-150 cayados/µl).
Reactivos de laboratorio
Reactivo de Wright
Materiales de laboratorio
Sangre venosa recién extraída con anticoagulante EDTA k3
Placas portaobjetos
Aceite de inmersión
Papel higiénico
Lápiz graso
Cronómetro
Equipos de laboratorio.
Microscopio binocular
Mezclador de tubos
Actividades a desarrollar/ técnica operatoria
Resultados Obtenidos
Rangos de Referencia
Metamielocitos Neutrófilos 0-2%
Neutrófilos en Banda 0-6%
Neutrófilos segmentados 40 - 75 %
Eosinófilos 0 - 6 %
Basófilos 0 - 2 %
Linfocitos 20 - 45 %
Monocitos
NEUTROFILIA (Aumento del número de Neutrófilos)
NEUTROPENIA (Disminución de los Neutrófilos) 1-7%
Conclusiones
Recomendaciones
Bibliografía
Rodríguez J. (2012). Guía de Prácticas de Hematología y Atlas Editorial EduQuil Kodak, B. (2015)
Hematología Fundamentos y aplicaciones clínicas.
Firma
Laura Montalvo Polanco
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Laura Montalvo
0954250577