Capítulo 1 • Visión global de la célula e investigación celular • 9

Cé/11/as e11cnriot11s

Como las células procariotas, todas las células eucariotas están rodeadas por
membranas plasmáticas y contienen ribosomas. No obstante, las células euca­
riotas son mucho más complejas y contienen un núcleo, variedad de orgánulos
citoplasmáticos, y un citoesqueleto (Fig. 1.7). El orgánulo más grande y promi­
nente de las células eucariotas es el núcleo, con un diámetro aproximado de 5
¡1m. El núcleo contiene la información genética de la célula, que en los eucario­
tas se encuentra organizada de forma linear en lugar de moléculas de ADN
circular. El núcleo es el sitio de la replicación del ADN y de la síntesis del ARN;
la traducción del ARN en proteínas tiene lugar en los ribosomas del citoplasma.
Además de un núcleo, las células eucariotas contienen una variedad de or­
gánulos delimitados por membranas dentro del citoplasma. Estos orgánulos
proporcionan diferentes compartimentos en los que se localizan las distintas
actividades metabólicas. Las células eucarióticas son por lo general más gran­
des que las células procariotas, con frecuencia presentando un volumen celular
cien veces mayor. La compartimentalización proporcionada por los orgánulos
citoplasmáticos es lo que permite a las células eucariotas funcionar con eficien­
cia. Dos de estos orgánulos, las mitocondrias y los cloroplastos, juegan pa­
peles imprescindibles en el metabolismo energético. Las mitocondrias, que se
encuentran en casi todas las células eucariotas, son los centros del metabolis­
mo oxidativo y son por tanto las responsables de generar la mayoría del ATP
derivado de la rotura de moléculas orgánicas. Los cloroplastos son los centros
donde se lleva a cabo la fotosíntesis y se encuentran exclusivamente en las
células de las plantas y algas verdes. Los lisosomas y los peroxisomas tam­
bién proporcionan compartimentos metabólicos especializados para la diges­
tión de macromoléculas y varias reacciones oxidativas, respectivamente. Ade­
más, la mayoría de las células de las plantas contienen grandes vacuolas que
desarrollan variedad de funciones, incluyendo la digestión de macromoléculas y
el almacenaje de productos de desecho y nutrientes.
Debido al tamaño y complejidad de las células eucariotas, el transporte de
proteínas a sus destinos dentro de la célula es una labor formidable. Dos orgá­
nulos citoplasmáticos, el retículo endoplasmático y el aparato de Golgi, es­
tán específicamente dedicados a la diferenciación y transporte de las proteínas
destinadas a la secreción, a la incorporación en la membrana plasmática, y a la
incorporación en los lisosomas. El retículo endoplasmático es una red extensa
de membranas intracelulares, que se extienden desde la membrana nuclear
hasta atravesar todo el citoplasma. No solo actúa en el proceso y transporte de
proteínas, sino también en la síntesis de lípidos. Desde el retículo endoplasmá­
tico, las proteínas son transportadas dentro de pequeñas vesículas al aparato
de Golgi, donde siguen siendo procesadas y clasificadas para el transporte a
sus destinos finales. Además de esta función de transporte de proteínas, el
aparato de Golgi presenta síntesis de lípidos y (en células de las plantas) sínte­
sis de algunos polisacáridos que componen la pared celular.
Las células eucariotas tienen otro nivel de organización interna: el citoes­
queleto, una red de filamentos proteínicos que se extienden por el citoplasma.
El citoesqueleto proporciona el marco estructural de la célula, determinando la
forma celular y la organización general del citoplasma. Además, el citoesquele­
to es responsable de los movimientos de todas las células (por ej., la contrac­
ción de las células musculares), del transporte intracelular y la posición de los
orgánulos y otras estructuras, incluyendo los movimientos de los cromosomas
durante la división celular.
Los eucariotas se desarrollaron hace al menos 2.700 millones de años, des­
pués de 1.000 ó 1.500 millones de años de la evolución procariota. Los estudios
de sus secuencias de ADN indican que las arquebacterias y eubacterias son tan
diferentes entre sí como lo son de los eucariotas actuales. Por lo tanto, parece
ser que un acontecimiento en la primera etapa de la evolución ha sido el motivo
10 • Sección 1 • Introducción

Célula animal

Peroxisoma

Centrfolo

M1tocondria

endoplasmático

Retículo
Núcleo endoplasmático
liso

Lisosoma

Citoesqueleto
Membrana plasmática

Aparato de Golg1

Figura 1.7
Estructuras de las células animales y
vegetales. Las células animales y vege­ de la divergencia de tres líneas de descendencia a partir de un antepasado
tales están rodeadas por una membrana común, dando lugar a las actuales arquebacterias, eubacterias, y eucariolas.
plasmática y contienen un núcleo, un ci­ Resulta interesante que muchos genes de las arquebacterias son más simila­
toesqueleto, y muchos orgánulos citoplas­
máticos en común. Las células vegetales
res a los de los eucariotas que a los de las eubacterias, indicando que las
también están rodeadas por una pared arquebacterias y los eucariotas comparten una línea común de descendencia
celular y contienen cloroplastos y vacuo­ evolutiva y que están más estrechamente relacionados entre ellos que con las
las grandes. eubacterias (Fig. 1.8).
Un paso crítico en la evolución de las células eucariotas fue la adquisición de
la envoltura membranosa de los orgánulos subcelulares, permitiendo el desa­
rrollo de la complejidad característica de estas células. Estos orgánulos se cree
que han sido adquiridos como resultado de la asociación de células procariotas
con el antepasado de los eucariotas.
La hipótesis de que las células eucariotas evolucionaron a partir de una aso­
ciación simbiótica de las procariotas --endosimbiosis- se sustenta con los
estudios de las mitocondrias y los cloroplastos, los cuales se cree que han evo­
lucionado desde bacterias que vivían en células grandes. Las mitocondrias y los
cloroplastos tienen un tamaño similar al de las bacterias, y como ellas, se repro­
ducen mediante su escisión bipartita. Lo más importante, es que las mitocon­
drias y los cloroplastos contienen su propio ADN, que codifica algunos de sus
componentes. El ADN de las mitocondrias y cloroplastos se replica cada vez
que el orgánulo se divide, y los genes que contiene se transcriben dentro del
orgánulo y se traducen en los ribosomas de este. Por lo tanto, las mitocondrias
y los cloroplastos contienen sus propios sistemas genéticos, que son diferentes
 Capítulo 1 • Visión global de la célula e investigación celular • 11

Citoesqueleto Mitocondria
Célula vegetal
Vacuola

- -· � Aíbosoma
Cloroplastos

Retículo
endoplasmático
liso

�.W-----J---1---Retículo
endoplasmático
rugoso

Nucléolo

Núcleo

Pared celular

Aparato de Golgí

Olras
C1anobacterias eubac1enas Plantas

Figura 1.8
M1tocondrias Evolución de las células. Las células
actuales evolucionaron desde un antepa­
sado procariota común a tres largas lí­
neas de descendencia, dando lugar a las
arqueobacterias, eubacterias, y eucario­
tas. Las mitocondrias y los cloroplastos
tuvieron su origen en la asociación sim­
biótica entre las bacterias aerobias y las
cianobacterias, respectivamente, con los
ancestros de las eucariotas.
12 • Sección 1 • Introducción

TABLA 1.2. Contenido de ADN

en las células
Contenido de ADN
haploide (millones
Organismo de pares de bases)

Bacterias
Mycoplasma 0,6
E. col/ 4,6
Eucariotas unicelulares
Saccharomyces 12
cerevlsiae
(levaduras)
Oictyostellum 70
discoideum
Euglena 3,000
Plantas
Arabidopsis 125
tha/iana
Zea mais (maíz) 5,000
Animales
Caenorhabditis 97
etegans Figura 1.9
(nematodo) Micrografía electrónica de barrido de Saccharomyces cerevisiae. Micografía con
Orosophifa 180 color artificial. (Andrew Syed Sciene Photo Library Photo Researchers, lnc.)
metanogaster
(mosca de la
fruta)
Pollo 1.200 del genoma nuclear de la célula. Además, los ribosomas y los ARN ribosómicos
Pez cebra 1.700
Ratón 3.000
de estos orgánulos están más relacionados con los bacterianos que aquellos
Humano 3.000 codificados por los genomas nucleares de los eucariotas.
En general, se ha aceptado un origen endosimbiótico de estos orgánulos,
suponiendo que la mitocondria ha evolucionado a partir de las bacterias aero­
bias y los cloroplastos de las bacterias fotosintéticas, como las cianobacterias.
La adquisición de bacterias aerobias podría provenir de una célula aerobia con
la habilidad de llevar a cabo un metabolismo oxidativo. La adquisición de bacte­
rias fotosintéticas podría provenir de la independencia nutricional conseguida al
desarrollar la fotosíntesis. Por tanto, estas asociaciones endosimbióticas resulta­
ron muy beneficiosas para sus asociados, que fueron seleccionados en el curso
de la evolución. A través del tiempo, la mayoría de los genes originalmente pre­
sentes en estas bacterias en apariencia pasaron a incorporarse dentro del geno­
ma nuclear de la célula, así que solamente algunos componentes de las mitocon­
drias y cloroplastos siguen siendo codificados por los genomas de los orgánulos.

Desarrollo de orga11is111os 11111/tice/11/nres

Muchos eucariotas son organismos unicelulares que, como las bacterias, se
componen de células únicas capaces de su propia replicación. Los eucariotas
Fig ura 1.10
Micrografía óptica de Amoeba pro­
más simples son las levaduras. Las levaduras son más complejas que las bac­
teus. (M. l. Walker/ Photo Researchers, terias, pero mucho más pequenas y simples que las células animales o vegeta­
lnc.) les. Por ejemplo, la levadura hasta ahora más estudiada Saccharomyces cere­
visiae tiene un diámetro aproximado de 6 ¡,m y contiene 12 millones de pares de
bases de ADN (Fig. 1.9). Sin embargo, otros eucariotas unicelulares son células
mucho más complejas, algunas contienen tanto ADN como el que contienen las
células humanas (Tabla 1.2). Estos incluyen organismos especializados para de­
sarrollar gran variedad de funciones, incluyendo la fotosíntesis, el movimiento, y
la captura e ingestión de otros organismos como alimento. La Amoeba proteus,
por ejemplo, es una célula grande y compleja. Su volumen es 100.000 veces
mayor que el de E. coli, y su longitud puede sobrepasar 1 mm cuando la célula
está completamente extendida (Fig. 1.1O). Las amebas son organismos muy
L__j
móviles que utilizan extensiones citoplasmáticas, llamadas pseudopodia o
0,2mm pseudópodos, para moverse y envolver a otros organismos, incluyendo bacte-
 Capítulo 1 • Visión global de la célula e investigación celular • 13

rias y levaduras, como alimento. Otros eucariotas unicelulares (las algas ver­
des) contienen cloroplastos y son capaces de llevar a cabo la fotosíntesis.
Los organismos multicelulares evolucionaron de los eucaritas unicelulares
hace al menos 1.700 millones de años. Algunos eucariotas unicelulares forman
agregados multicelulares que parecen representar una transición evolutiva des­
de una única célula a un organismo multicelular. Por ejemplo, las células de
muchas algas (por ej., el alga verde Vo/vox) se asocian unas con otras para
formar colonias multicelulares (Fig. 1.11 ), las cuales se cree que son los precur­
sores evolutivos de las plantas actuales. El aumento de la especialización celu­
lar determinó la transición de las colonias agregadas a los verdaderos organis­
mos multicelulares. La continua especialización y la división de las funciones
entre las células de un organismo ha proporcionado la complejidad y diversidad Figura 1.11
observada en los muchos tipos de células que componen las plantas y animales Alga verde colonial. Las células indivi­
de hoy, incluyendo a los seres humanos. duales de Volvox forman colonias que
consisten en esferas huecas en las que
Las plantas se componen de menos tipos de células que los animales, pero están embebidas en una masa gelatinosa
cada tipo diferente de célula vegetal está especializada para desarrollar funcio­ cientos o miles de células. (Cab1sc0Ni­
nes específicas requeridas por el organismo en su conjunto (Fig. 1.12). Las suals Unlimited.)
células vegetales están organizadas en tres sistemas de tejidos principales:
tejido basal, tejido dérmico, y tejido vascular. El tejido basal contiene a las célu­
las del parénquima, que lleva a cabo la mayoría de las reacciones metabólicas

Figura 1.12
Micrografías ópticas de células vegetales representativas. (A) Células del parénqui­
ma. responsables de la fotosíntesis y de otras reacciones metabólicas. (B) Células del co­
lénqu1ma, especializadas para dar soporte y endurecer las paredes celulares. (C) Células
epidérmicas en la superficie de una hoja. (D) Los elementos de los vasos y las traqueidas
son células alargadas que se disponen enfrentadas para formar los vasos del xilema. (A,
Jack M. Bastsack/Visuals Unlimited; B, A. J. KarpoffNisuals Unlimited; C, Al/red Owczarzak/
Biological Photo Service; D, Biophoto Associates/Science Source/Photo researchers lnc.)
(A) (B)

(D)
14 • Sección 1 • Introducción

de la planta, incluyendo la fotosíntesis. El tejido basal también contiene dos

tipos de células especializadas (células del colénquima y células del escle•
rénquima) que se caracterizan por paredes celulares gruesas y por proporcio­
nar el soporte estructural de la planta. El tejido dérmico cubre la superficie de la
planta y está compuesto por células epidérmicas, que forman un revestimien­
to de protección y permiten la absorción de nutrientes. Finalmente, el sistema
vascular (el xilema y floema) está formado por diversos tipos de células alarga­
das, y es el responsable del transporte de agua y nutrientes a través de la planta.
Las células presentes en animales son considerablemente más diversas
que las de las plantas. El cuerpo humano, por ejemplo, está compuesto por más
de 200 tipos de células diferentes, consideradas generalmente como compo­
nentes de los cinco tipos principales de tejidos: tejido epitelial, tejido conectivo,
sangre, tejido nervioso, y tejido muscular (Fig. 1.13). Las células epiteliales
forman láminas que cubren la superficie del cuerpo y delimitan los órganos in-

(A)i Boca (A)11 Conducto biliar (A)íii Intestino

(B)

Figura 1.13
Micrografías ópticas de células anima­ (C)
les representativas. (A) Células epitelia­
les de la boca (una lámina multiestratifica­
da gruesa), conducto biliar, e intestino. (B) Eritrocito----
Los fibroblastos son células del tejido co­
nectivo caracterizadas por su forma de
huso alargado. (C) Eritrocitos, granuloci­
tos, linfocitos, y monocitos en sangre hu­
mana. ((A)i y (A)ii, G. W. Willis/biological
Photo Service; (A)iii, Biophoto Associate­
s/Photo Researchers, lnc.; B, Don W.
FawcetWisuals Unlimited; e, G. W. Willis/
Biological Photo Service.]
16 • Sección 1 • Introducción

clónica de E. coli, en la que todas las células se derivan de la división de una

única célula original, se puede aislar fácilmente como una colonia en crecimiento
en un medio que contenga agar semisólido (Fig. 1.14). Debido a que las colonias
bacterianas que contienen más de 108 células se pueden desarrollar en una no­
che, la selección de variantes genéticas de una cepa de E. coli -por ejemplo,
mutantes que son resistentes a un antibiótico, como la penicilina- es fácil y
rápida. La facilidad con la que estos mutantes pueden ser seleccionados y ana­
lizados resultó clave para el éxito de los experimentos que definen los principios
básicos de la genética molecular, discutidos en el Capítulo 3.
Las mezclas nutritivas en las que E. coli se divide más rápidamente incluyen
glucosa, sales, y varios compuestos orgánicos, tales como aminoácidos, vitami­
nas, y precursores de ácidos nucleicos. No obstante, E. coli también puede
crecer en un medio mucho más simple que contenga solamente sales, una
fuente de nitrógeno (como el amoniaco), y una fuente de carbón y energía
Figura 1. 14
(como la glucosa). En este medio, la bacteria crece un poco más lenta (con un
Colonias de bacterias. Fotografía de tiempo de división de unos 40 minutos) ya que tiene que sintetizar todos sus
colonias de E. coli creciendo en la superfi­ aminoácidos, nucleótidos, y otros compuestos orgánicos. La habilidad de E. coli
cie de un medio de agar. (A. M. Siegel­ para llevar a cabo estas reacciones biosintéticas en un medio simple ha hecho
manNisuals Unlimited.)
que sea extremadamente útil para el descubrimiento de los procesos bioquími­
cos implicados. Por tanto, el rápido crecimiento y los simples requisitos nutricio­
nales de E. coli han facilitado los experimentos fundamentales de la biología
molecular y la bioquímica.

Le1.1ad11ras

Aunque las bacterias han sido un modelo de valor incalculable para el estudio
de muchas de las propiedades conservadas de las células, éstas obviamente
no pueden ser utilizadas para estudiar aspectos de la estructura y función celu­
lares que son únicos de eucariotas. Las levaduras, los eucariotas más simples,
aportan numerosas ventajas experimentales similares a las de E. co/i. En con­
secuencia, las levaduras han proporcionado un modelo crucial para el estudio
de muchos de los aspectos fundamentales de la biología celular eucariota.
El genoma de la levadura que con más frecuencia se ha estudiado, Saccha­
romyces cerevisiae, consiste en 12 millones de pares de bases de ADN y con­
tiene alrededor de 6.000 genes. Aunque el genoma de las levaduras es aproxi­
madamente tres veces mayor que el de E. coli, resulta más manejable que los
genomas de eucariotas más complejos, como el de los humanos. Incluso en su
Figura 1.15 simplicidad, la célula de levadura exhibe las características típicas de las célu­
Micrografía electrónica de Saccha­
romyces cerevisiae. (David Scharf/Pe­
las eucariotas (Fig. 1.15): Contiene un núcleo distinto rodeado por una membra­
ter Arnold, lnc.) na nuclear, su ADN genómico esta organizado en 16 cromosomas lineales, y su
citoplasma contiene un citoesqueleto y orgánulos subcelulares.
Las levaduras pueden crecer con facilidad en el laboratorio y pueden ser
estudiadas bajo muchos de los mismos protocolos genéticos moleculares que
han resultado satisfactorios con E. coli. Aunqllle las levaduras no se replican tan
rápido como las bacterias, se dividen cada 2 horas y pueden crecer fácilmente
dando lugar a colonias a partir de una sola célula. Las levaduras se pueden
utilizar en variedad de manipulaciones genéticas similares a aquellas que se
pueden realizar utilizando bacterias.
Estas características han hecho a las levaduras las células eucariotas más
accesibles desde el punto de vista de la biología molecular. Las levaduras mutan­
tes han resultado importantes para la comprensión de muchos procesos funda­
mentales en eucariotas, incluyendo la replicación del ADN, transcripción, proce­
samiento del ARN, ensamblaje de proteínas, y la regulación de la división celular,
tal y como discutiremos en capítulos siguientes. La unidad de la biología celular
molecular se presenta clara debido al hecho de que los principios generales de la
estructura y función celulares revelados por los estudios de las levaduras se
pueden aplicar a todas las células eucariotas.
 Capítulo 1 • Visión global de la célula e investigación celular • 17

Dictyosteli11111 discoirle11m
Dictyostelium discoideum es un moho celular del lodo, el cual, como las levadu­
ras, es un eucariota unicelular comparativamente simple. El genoma de Dictyoste­
lium es aproximadamente diez veces mayor que el de E. co/i-más complejo que
el genoma de las levaduras pero considerablemente más simple que los genomas
de los eucariotas superiores-. Además, Dictyostelium puede crecer con facilidad
en el laboratorio y resulta susceptible a una variedad de manipulaciones genéticas.
Bajo condiciones nutritivas abundantes, Oictyostelium vive como una ame­
ba de una única célula, que se alimenta de bacterias y levaduras. Es una célula
móvil, y esta propiedad ha hecho que Dictyostelium sea un modelo importante
para el estudio de los mecanismos moleculares responsables de los movimien­
tos de las células animales (Fig. 1.16}. Por ejemplo, la introducción de mutacio­
nes apropiadas en Dictyostelium ha revelado las funciones de varios genes im­
plicados en la movilidad celular.
Otra de las características interesantes de Dictyostelium es la habilidad de
las células únicas para agregarse formando estructuras multicelulares. Si el su­
plemento adecuado de comida no está disponible, las células se asocian para
formar estructuras parecidas a lombrices llamadas babosas, cada una de ellas
constituida por más de 100.000 células que funcionan como una unidad. Dict­
yostelium se sitúa por tanto en la frontera entre los organismos unicelulares y
multicelulares, proporcionando un modelo importante para los estudios de se­
ñalización celular e interacciones célula-célula.

Cae11orlrnbditis elega11s
Los eucariotas unicelulares Saccharomyces y Dictyoste/ium son modelos im­
portantes para el estudio de las células eucariotas, pero entender el desarrollo
de los organismos multicelulares requiere los análisis experimentales de plan­
tas y animales, organismos que son mucho más complejos. El nemátodo Cae­
norhabditis elegans (Fig. 1.17) posee diversas características notables que
L,____j
hacen que sea uno de los modelos más utilizados en los estudios de desarrollo 10,,m
animal y diferenciación celular.
Figura 1.16
Aunque el genoma de C. elegans (aproximadamente 100 millones de pares Dyctiostelium discoideum. Estas foto­
de bases) es mayor que los eucariotas unicelulares, es más simple y más mane­ grafías muestran el movimiento de dos
jable que los genomas de la mayoría de los animales. Su secuencia ha sido de­ amebas durante 40 segundos. (Cortesía
terminada por completo, revelando que el genoma de C. elegans contiene aproxi­ de David Knecht, Universíty of Connecti­
cut.)
madamente 19.000 genes -alrededor de tres veces más que el número de
genes de levaduras, y un quinto del número de genes previsibles en humanos-.
Biológicamente, C. elegans es también un organismo multicelular relativamente
simple: Las lombrices adultas solamente se componen de 959 células somáti­
cas, y de 1.000 a 2.000 células germinales. Además, C. elegans puede ser repro­
ducida con facilidad y ser sometida a manipulaciones genéticas en el laboratorio.
La simplicidad de C. elegans ha permitido que el curso de su desarrollo se
haya estudiado en detalle mediante observación microscópica. Estos análisis

Ovario lnlestmo

Figura 1.17
Faringe Huevos Vulva Recio Ano Caenorhabditis etegans. (De J. E. Suls­
ton y H. R. Horvitz, 1977. Dev. Bio/. 56:
1mm 110.)
18 • Sección 1 • Introducción

han trazado satisfactoriamente el origen embrionario y el linaje de todas las

células en la lombriz adulta. Los estudios genéticos también han identificado
algunas de las mutaciones responsables de anormalidades del desarrollo, condu­
ciendo al aislamiento y descripción de genes claves que controlan el desarrollo y
diferenciación del nemátodo. Cabe destacar que se han encontrado similares
genes que funcionan en animales complejos (incluyendo humanos), resultando
C. elegans un importante modelo para los estudios del desarrollo animal.

Drosopl,ila melanogaster
Al igual que C. elegans, la mosca de la fruta Drosophila melanogaster ( Fig. 1 .18)
ha sido un modelo de organismo crucial en la biología del desarrollo. El genoma
de Drosophila es similar al tamaño del genoma de C. e/egans, pudiéndose man­
tener y reproducir fácilmente en el laboratorio. Además, el corto ciclo de repro­
ducción de Drosophila (unas 2 semanas) la convierte en un organismo muy útil
Figura 1.18 para los experimentos genéticos. Muchos conceptos fundamentales de la gené­
Drosophl/a melanogaster. (Darwin Dale/
tica -como la relación entre genes y cromosomas- se derivaron de los estu­
Photo Researchers, lnc.)
dios en Drosophila a principios del siglo veinte (véase el Cap. 3).
Los exhaustivos análisis genéticos en Drosophila han descubierto muchos de
los genes que controlan el desarrollo y la diferenciación, siendo los métodos actua­
les de la biología molecular los que han permitido el análisis en detalle de las fun­
ciones de estos genes. Como consecuencia, los estudios de Drosophila han permi­
tido avanzar en el entendimiento de los mecanismos moleculares que gobiernan el
desarrollo animal, particularmente respecto a la formación del cuerpo de organismos
multicelulares complejos. Al igual que C. elegans, en vertebrados existen genes
y mecanismos similares, validando el uso de Drosophila como uno de los mode­
los experimentales más importantes de la biología contemporánea del desarrollo.

Arabirlopsis tlrnlinna
El estudio del desarrollo y la biología molecular vegetal es un campo activo y en
expansión de considerable importancia económica al igual que de interés inte­
Figura 1.19 lectual. Desde que los genomas de las plantas cubren una dimensión de comple­
Arabidopsís thaliana. (Jeremy Burgess/ jidad comparable a los genomas animales (véase la Tabla 1.2), un modelo óptimo
Photo Researchers, lnc.)
para el estudio del desarrollo vegetal sería un organismo relativamente simple
que poseyera alguna de las ventajas de C. elegans y Drosophila. La pequeña
planta con flor Arabidopsis tha/iana (Fig. 1.19) recoge estos criterios, por lo
que se utiliza como modelo para el estudio de la biología molecular en plantas.
Arabidopsis resulta notable por su genoma de tan sólo unos 120 millones de
pares de bases que contiene aproximadamente 15.000 genes diferentes -una
complejidad similar a la de C. elegans y Drosophila. Además, la Arabidopsis es
fácil de cultivar en el laboratorio, y ya se han desarrollado métodos para su
manipulación genética molecular. Estos estudios han llevado a la identificación
de genes implicados en varios aspectos del desarrollo vegetal, como es el de­
sarrollo de las flores. El análisis de estos genes indica la existencia de numero­
sas similitudes, pero también diferencias notables, entre los mecanismos que
controlan el desarrollo de vegetales y animales.

Vertebrados
Los animales más complejos son los vertebrados, incluyendo a los humanos y
otros mamíferos. El genoma humano se compone aproximadamente de 3 billones
de pares de bases -alrededor de 30 veces más que los genomas de C. e/egans,
Orosophila, o Arabidopsis- y contiene 30-40.000 genes. Además, el cuerpo hu­
mano se compone de más de 200 clases diferentes de tipos de células especializa­
das. Esta complejidad hace que los vertebrados sean difíciles de estudiar desde el
punto de vista de la biología celular y molecular, aunque la mayoría del interés de
las ciencias biológicas nace del deseo de entender el organismo humano. Además,
entender muchas de las cuestiones sobre la importancia de la práctica inmediata
 Capítulo 1 • Visión global de la célula e investigación celular • 19

(por ej., en medicina) deben estar basadas en estudios de células

humanas (o estrechamente relacionadas).
Un avance importante en el estudio de células humanas y de
los mamíferos es el crecimiento de células aisladas en cultivo, don­
de pueden ser manipuladas bajo condiciones de laboratorio contro­
ladas. El uso de células cultivadas ha permitido realizar estudios
sobre diversos aspectos de la biología celular de los mamíferos,
incluyendo experimentos que han iluminado los mecanismos de la
replicación del ADN, expresión génica, síntesis y procesamiento
de proteínas, y división celular. Además, la habilidad de cultivar
células en un medio químico definido ha permitido realizar estudios
sobre los mecanismos de señales que normalmente controlan el
crecimiento y la diferenciación celular en el organismo intacto.
Las propiedades especializadas de algunos tipos de células al­
tamente diferenciadas han hecho de ellas importantes modelos
L___,J
para el estudio de aspectos determinados de la biología celular. 1 mm
Las células musculares, por ejemplo, están altamente especializadas para reali­ Figura 1.20
zar la contracción, produciendo fuerza y movimiento. Debido a esta especializa­ Huevos de la rana Xenopus laevis.
ción, las células musculares son un modelo crucial para el estudio del movimiento (Cortesía de Michael Danilchik y Kimberly
celular a nivel molecular. Otro ejemplo lo proporciona las células nerviosas Ray.)
(neuronas), que están especializadas en la conducción de señales electroquí­
micas a larga distancia. En humanos, los axones de las células nerviosas pue­
den tener más de un metro de largo, y algunos invertebrados, como el calamar,
tienen neuronas gigantes con axones de hasta 1 mm de diámetro. Debido a su
estructura y función tan especializadas, estas neuronas gigantes han sido im­
portantes modelos en el estudio del transporte de iones a través de la membra­
na, y del papel del citoesqueleto en el transporte de orgánulos citoplasmáticos.
La rana Xenopus faevis es un modelo importante para los estudios del de­
sarrollo temprano de los vertebrados. Los huevos de Xenopus son normalmen­
te grandes células, con un diámetro aproximado de 1 mm (Fig. 1.20). Debido a
que estos huevos se desarrollan fuera de la madre, todas las etapas del desa­
rrollo desde el huevo hasta el renacuajo se pueden estudiar con facilidad en el
laboratorio. Además, los huevos de Xenopus se pueden obtener en grandes
cantidades, facilitando el análisis bioquímico. Gracias a estos avances técnicos,
se ha utilizado Xenopus ampliamente en estudios sobre el desarrollo biológico y
ha proporcionado importantes descubrimientos en los mecanismos que contro­
lan el desarrollo, diferenciación, y división celular del embrión.
El pez cebra (Fig. 1.21) posee numerosas ventajas para los estudios genéti­
cos del desarrollo de los vertebrados. Este pequeño pez es fácil de mantener en

(A) Figura 1.21

Pez cebra. (A) Embrión de 24 horas.
(B) Pez adulto. (A, cortesía de Charles
Kimmel, University ol Oregon; B, cortesía
de S. Kondo).

(B)
20 • Sección 1 • Introducción

Figura 1.22
El ratón como modelo del desarrollo
humano. Niño y ratón muestran defectos
similares en la pigmentación (piebaldis­
mo) como resultado de mutaciones en un
gen necesario para la migración normal
de los melanocitos (células responsables
de la pigmentación de la piel) durante el
desarrollo embrionario. (Cortesía de R. A.
Fleischman, Markey cancer Center, Uni­
versity of Kentucky.)

el laboratorio y se reproduce con rapidez. Además, los embriones se desarro­

llan fuera de la madre y son transparentes, por lo que las primeras etapas del
desarrollo pueden ser observadas con claridad. Se han desarrollado métodos
poderosos para facilitar el aislamiento de las mutaciones que afectan al desa­
rrollo del pez cebra, consiguiendo la identificación de varios cientos de estas
mutaciones. Ya que el pez cebra es un vertebrado de fácil estudio, promete ser
el puente entre los humanos y los sistemas más simples de invertebrados,
como C. elegans y Drosophila.
Entre los mamíferos, el ratón es el más manejable para los análisis genéti­
cos, lo cual se facilitará con la reciente finalización de la secuenciación del ge­
noma del ratón. Aunque las dificultades técnicas de estudio de la genética del
ratón (comparada, por ejemplo, a la genética de las levaduras o Drosophila) son
inmensas, se han identificado varias mutaciones que afectan al desarrollo del
ratón. Más importantes aún son, los recientes avances en la biología molecular
que han permitido la producción de ratones transgénicos, en los que se han
introducido genes mutantes específicos en la línea germinal del ratón, por lo
que sus efectos en el desarrollo u otros aspectos de la función celular pueden
ser estudiados en el contexto del animal completo. La manejabilidad del ratón
como modelo del desarrollo humano se corresponde con el hecho de que las
mutaciones en genes homólogos dan lugar a defectos del desarrollo similares
en ambas especies; el piebaldismo es un ejemplo claro (Fig. 1.22).

Instrumentos de la biología celular

Como en todas las ciencias experimentales, la investigación en biología celular
depende de los métodos de laboratorio que se puedan utilizar para estudiar la
estructura y función celulares. Muchos avances importantes sobre el funciona­
miento de las células han conducido directamente al desarrollo de nuevos mé­
todos de investigación. La apreciación de los instrumentos experimentales dis­
ponibles para el biólogo celular resulta por tanto crítica para entender el estado
actual y futuro de las direcciones de este área de la ciencia que se mueve con
tanta rapidez. Algunos de los métodos generales importantes de la biología ce­
lular están descritos en secciones siguientes. Otros avances experimentales,
que incluyen los métodos de la bioquímica y de la biología molecular, se discuti­
rán en capítulos posteriores.
 Capítulo 1 • Visión global de la célula e investigación celular • 21

Microscopía ópticn

Debido a que la mayoría de las células son demasiado pequeñas para ser ob­
servadas a simple vista, el estudio de las células ha dependido primordialmente
del uso del microscopio. Es más, el descubrimiento real de las células surgió del
desarrollo del microscopio: Robert Hooke fue el primero que acuñó el término
de «célula» siguiendo sus observaciones de una pieza de corcho con un simple
microscopio óptico en 1665 (Fig. 1.23). Utilizando un microscopio que ampliaba
los objetos hasta 300 veces su tamaño real, Antony van Leeuwenhoek, en 1670
y años posteriores, fue capaz de observar diferentes tipos de células, incluyen­
do esperma, glóbulos rojos, y bacterias. La propuesta de la teoría celular plan­
teada por Matthias Schleiden y Theodor Schwann en 1838 debe tomarse como
el nacimiento de la biología celular contemporánea. Los estudios microscópicos
de tejido vegetal por Schleiden y los de tejido animal por Schwann condujeron a
la misma conclusión: Todos los organismos están compuestos por células. Más
Figura 1.23
tarde, se reconoció que las células no se forman de novo sino que emergen Estructura celular del corcho. Una re­
únicamente por la división de las células preexistentes. Por tanto, la célula con­ producción de un dibujo de Robert Hooke
siguió su actual reconocimiento como la unidad fundamental de todos los orga­ de una lámina de corcho examinada con
nismos vivos debido a las observaciones realizadas con el microscopio óptico. un microscopio óptico. Las «células» que
Hooke observó fueron en realidad las pa­
El microscopio óptico continúa siendo un instrumento básico para los biólo­ redes celulares que quedan cuando las
gos celulares, que con mejoras técnicas permiten la visualización de los deta­ células han muerto hace tiempo.
lles aumentados de la estructura celular. Los microscopios ópticos contemporá­
neos son capaces de aumentar los objetos hasta unas mil veces. Dado que la
mayoría de las células se encuentran entre 1 y 100 ¡,m de diámetro, pueden ser
observadas en el microscopio óptico, como pueden ser también algunos de los
orgánulos subcelulares, como el núcleo, los cloroplastos, y las mitocondrias.
Sin embargo, el microscopio óptico no es lo suficientemente poderoso para ob­
servar pequeños detalles de la estructura celular, cuya resolución -la capaci­
dad de un microscopio para distinguir objetos separados por pequeñas distan­
cias- es mucho más importante que el aumento. Las imágenes se pueden
aumentar tanto como se desee (por ejemplo, mediante la proyección en una
pantalla grande), pero tal aumento no incrementa el nivel de detalle que se
puede observar.
El límite de resolución del microscopio óptico es aproximadamente de 0.2 pm;
dos objetos separados por menos de esta distancia aparecen como una única
imagen, en lugar de distinguirse una de otra. Esta limitación teórica de la mi-

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

Figura 1.24
Apertura numérica. La luz se enfoca en
la muestra mediante la lente condensado­
ra y se recoge en la lente del objetivo del
microscopio. La apertura numérica esta
determinada por el ángulo del cono de la
luz que entra en el objetivo de la lente ( ,:) y
por el índice de refracción del medio (nor­
malmente agua o aceite) entre la lente y la
muestra.
22 • Sección 1 • Introducción

croscopía óptica está determinada por dos factores -la longitud de onda (J.) de
la luz visible y el poder de captación de luz de las lentes del microscopio (apertu­
ra numérica, AN) -de acuerdo con la siguiente ecuación:
., 0,61 i.
Resoluc1on = ----;¡¡:¡-

La longitud de onda de la luz visible es de 0,4 a 0,7 11m, por lo que el valor de i..
se calcula en 0,5 pm para el microscopio óptico. La apertura numérica puede pre­
verse como el tamaño del cono de luz que entra en la lente del microscopio des­
pués de pasar a través de la muestra (Fig. 1.24). Esto se obtiene de la ecuación
AN= ,, sen 'l
donde r1 es el índice de refracción del medio a través del cual la luz viaja entre la
muestra y la lente. El valor de 1¡ para el aire es de 1,0, pero puede aumentar hasta
un máximo aproximado de 1,4 utilizando una lente inmersa en aceite para ver la
muestra a través de una gota de aceite. El ángulo , corresponde a la mitad de la
✓.

anchura del cono de luz recogido por la lente. El valor máximo de 'Y. es de 90 , en
el que el sen :x = 1, por lo que el valor más alto de la apertura numérica es de 1,4.
El límite teórico de resolución del microscopio óptico se puede por tanto
calcular de la siguiente forma:
, 0,61 X 0,5
Resolucion = -- = 0,22 ,,m
1, 4
Los microscopios capaces de llegar a este nivel de resolución se consiguieron
fabricar a finales del siglo diecinueve; no se pueden esperar en estos aspectos
nuevas mejoras de la microscopía óptica.
Rutinariamente se utilizan diferentes tipos de microscopía óptica para estu­
diar varios aspectos de la estructura celular. El más simple es el microscopio
de campo luminoso, en el que la luz pasa directamente a través de la célula y
en el que la habilidad para distinguir las diferentes partes de la célula depende
del contraste que se obtiene de la absorción de la luz visible por los componentes
celulares. En muchos casos, las células se tiñen con tintes que reaccionan con
proteínas y ácidos nucleicos para resaltar el contraste entre las diferentes partes
de la célula. Antes de teñir, las muestras son normalmente tratadas con fijadores
(como el alcohol, ácido acético, o formaldehído) para estabilizar y conservar sus
estructuras. El examen de los tejidos fijados y teñidos mediante el microscopio

Figura 1.25
Micrografía de campo luminoso de teji­
do teñido. Sección de un tumor renal be­
nigno. (G. W. Willis/Servicío de Fotografía
Biológica.)
24 • Sección 1 • Introducción

(B)

Espejo dicroico

Luz fluorescenle

Lente del ob¡et,vo

L--...J
10¡,m
Figura 1.28
Microscopía de fluorescencia. (A) La
luz pasa a través de un filtro de excitación
para seleccionar la luz de la longitud de san tanto en células fijadas o vivas. La tinción fluorescente es una molécula que
onda (por ej., azul) que excita el tinte fluo­ absorbe la luz a una longitud de onda y emite luz a una segunda longitud de
rescente. Después un espejo dicroico onda. Esta fluorescencia se detecta mediante la iluminación de la muestra con
desvía la luz excitada hacia la muestra. una luz de una longitud de onda que excita al tinte fluorescente, usándose más
La luz fluorescente emitida por la mues­
tarde filtros apropiados para detectar la longitud de onda específica que emite el
tra (por ej., verde) pasa a través de un
espejo dicroico y un segundo filtro (el fil­ tinte. La microscopía fluorescente se puede utilizar para estudiar una gran va­
tro barrera) para seleccionar la luz de lon­ riedad de moléculas dentro de las células. Una de las aplicaciones más frecuen­
gitud de onda emitida por el tinte. (8) Mi­ tes es la señalización de anticuerpos con tintes fluorescentes dirigidos contra
crografía fluorescente de un pulmón de una proteína específica, de manera que se pueda determinar la distribución
tritón en el que el ADN está teñido de
azul y los microtúbulos en el citoplasma intracelular de la proteína.
de verde. (Conly S. Rieder/Biological Un avance reciente importante en la microscopía de fluorescencia ha sido el
Photo Service.) empleo de la proteína verde fluorescente (GFP: green fluorescent protein)
de las medusas para visualizar proteínas en el interior de células vivas. La GFP
puede fusionarse con cualquier proteína de interés mediante métodos estándar
de ADN recombinante, y la proteína marcada con GFP puede a continuación
introducirse en células y detectarse por microscopía de fluorescencia, sin nece­
sidad de fijación y tinción de las células tal y como se necesitaría para la detec­
ción de proteínas mediante el uso de anticuerpos. Gracias a su versatilidad, el
uso de GFP está muy extendido en biología celular, y ha sido empleada para
seguir la localización y movimientos de una amplia variedad de proteínas en el
interior de células vivas (Figura 1.29).

Figura 1.29
Microscopía de fluorescencia de una proteína mar­
cada con GFP. Una proteína mitocondrial fusionada
con GFP fue introducida en células humanas en cultivo y
visualizada por microscopía de fluorescencia. (Cortesía
de 8D Biosciences Clontech.}
 Ca p í t u I o 1 • V is i ó n g I o b a I de I a e é I u I a e i n ves t i g a e i ó n e e I u I a r • 25

Figura 1.30 Enfocada

Microscopía confocal. Un punto de luz es enfocado en la muestra a una distancia deter­ la luz alcanza
minada, y la luz fluorescente emitida se recoge en un detector. Antes de alcanzar el detec­ el detector
tor, la luz fluorescente emitida por la muestra debe pasar a través de una apertura confo­
cal situada en el punto en que la luz emitida desde la distancia elegida de la muestra se Abertura
enfoca. Como resultado, solamente se detecta la luz enfocada emitida desde la distancia conlocal
elegida del espécimen.

Fuera de foco
la luz no
La microscopía confocal combina la microscopía fluorescente con el análi­ alcanza el
detector
sis electrónico de la imagen para obtener imágenes tridimensionales. Un peque­
ño punto de luz, normalmente producido por un láser, se enfoca en la muestra a
una profundidad determinada. La luz fluorescente emitida se recoge utilizando un
detector, como una video cámara. Antes de que la luz emitida alcance el detector, fluorescente
esta debe atravesar el agujero de una aguja (llamado apertura focal) situada pre­ em1trda
cisamente en el punto donde la luz emitida desde la profundidad elegida de la
Enfocada
muestra es enfocada (Fig. 1.30). Por tanto, solamente la luz emitida desde el
Fuera de loco
plano de enfoque es capaz de alcanzar el detector. El barrido a lo largo de la
muestra genera una imagen del plano de enfoque en dos dimensiones, una ima­ Muestra
gen mucho más detallada que la obtenida con la microscopía fluorescente habi­
tual (Fig. 1.31). Además, es posible fundir una serie de imágenes obtenidas a
distintas profundidades para reconstruir una imagen tridimensional de la muestra.
La microscopía de excitación multifotónica es una alternativa a la micros­
copía tridimensional que también puede aplicarse a las células vivas. La muestra
se ilumina con una luz de una longitud de onda tal que la excitación del tinte
fluorescente requiera la absorción simultánea de dos o más fotones (Fig 1.32). La
probabilidad de que los dos fotones exciten simultáneamente al tinte fluorescente
solamente es importante en el punto de la muestra en el que el láser está enfoca­
do, de tal manera que la fluorescencia sólo se emite desde el plano de enfoque de
la luz. Esta potente excitación automáticamente proporciona una solución tridi­
mensional, sin necesidad de que la luz emitida atraviese la apertura de una aguja,
como en la microscopía confocal. Además, la localización de la excitación reduce
el daño de la muestra, permitiendo imágenes tridimensionales de células vivas.

Microscopía clcctró11ica
Debido a la limitada resolución del microscopio óptico, el análisis de los detalles
de la estructura celular ha necesitado una técnica de microscopía mucho más
poderosas, llamada microscopía electrónica, que fue desarrollada en los años

Figura 1.31
Micrografía confocal de células humanas. Microtúbulos y filamen­
tos de actina aparecen teñidos con colorantes fluorescentes rojo y ver­
de, respectivamente. (K. G. Murti/ Visuals Unlimited.)
26 • Sección 1 • Introducción

Figura 1.32
Microscopía por excitación de dos fo­ Fluoroforo
tones. Se requiere la absorción simultá­
nea de dos fotones para excitar el tinte
fluorescente. Esto sólo sucede en el punto o <p
de la muestra donde se enfoca la luz, de
tal forma que la luz fluorescente sólo se
emite desde la distancia elegida de la
muestra.

Excitación de dos folones Fotón

1930 y aplicada por primera vez a muestras biológicas por Albert Claude, Keith
Porter y George Palade en los años 1940 y 1950. El microscopio electrónico
puede alcanzar una resolución mucho mayor que la obtenida con el microsco­
pio óptico puesto que la longitud de onda de los electrones es menor que la de la
luz. La longitud de onda de los electrones en un microscopio electrónico puede
ser de hasta 0,004 nm -alrededor de 100.000 veces más corta que la longitud
de onda de la luz visible-. Teóricamente, esta longitud de onda puede alcanzar
una resolución de 0,002 nm, pero tal resolución no ha podido obtenerse en la
práctica, puesto que no solo está determinada por la longitud de onda sino tam­
bién por la apertura numérica de la lente del microscopio. La apertura numérica
es un factor limitante para la microscopía electrónica puesto que las propieda­
des inherentes de las lentes electromagnéticas limitan sus ángulos de apertura
alrededor de 0,5 grados, correspondientes a aberturas numéricas de solo 0,01.
Por tanto, bajo condiciones óptimas, el poder de resolución del microscopio
electrónico es aproximadamente de 0,2 nm. Además, la resolución que se puede
obtener con muestras biológicas está limitada por la falta de contraste inherente.
En consecuencia, en muestras biológicas el límite práctico de resolución para el
microscopio electrónico es desde 1 a 2 nm. Aunque esta resolución es mucho
menor que la predicha por la longitud de onda de los electrones, representa una
mejora de más de cien veces del poder de resolución del microscopio óptico.
En el estudio de las células se utilizan dos tipos de microscopía electrónica
-transmisión y barrido. En principio, la microscopía electrónica de transmi­
sión es similar a la observación de células teñidas con sales de metales pesa­
dos, que proporcionan contraste mediante los electrones dispersos. Un haz de
electrones pasa a través de la muestra y se enfoca para formar una imagen en
una pantalla fluorescente. Los electrones que chocan con un ión de metal pesa­
do cuando pasan por las muestra se reflejan y no contribuyen a la imagen final,
de tal forma que las zonas teñidas de la muestra aparecen oscuras.
Las muestras que se van a analizar por microscopía de transmisión de elec­
trones se pueden preparar con tintes positivos o negativos. En la tinción positi­
va, las muestras de tejido se cortan en secciones finas y se tiñen con sales de
metales pesados (como el tetróxido de osmio, acetato de uranilo, y citrato de
plomo) que reaccionan con lípidos, proteínas, y ácidos nucleicos. Estos iones
de metales pesados se unen a gran variedad de estructuras celulares, que apa­
recen oscuras en la imagen final (Fig. 1.33). Los procedimientos de tinción posi­
5¡,m tiva también se pueden utilizar para identificar macromoléculas específicas
dentro de las células. Por ejemplo, los anticuerpos marcados con metales pesa­
Figura 1.33 dos densos en electrones (como partículas de oro) se utilizan con frecuencia
Tinción positiva. Micrografía de trans­
para determinar la localización subcelular de proteínas específicas con el mi­
misión de electrones de un glóbulo blanco
teñido positivamente. (Don W. FawceWi­ croscopio electrónico. Este método es similar al uso de anticuerpos marcados
suals Unlimited.) con tintes fluorescentes en la microscopía fluorescente.
28 • Sección 1 • Introducción

(A) (B)

Figura 1.36
Separación por congelación. (A) La se­
paración por congelación divide la bicapa
lipídica, dejando las proteinas embebidas
en la membrana asociadas a una de las
dos partes de la membrana. (B) Micrografía
de las membranas plasmáticas de dos cé­
lulas adyacentes separadas por congela­
ción. Las proteínas que cubren la bicapa
aparecen como partículas intermembrano­
sas (flecha). (Don W. Fawcett/Photo Re­
searchers, lnc.)

El segundo tipo de microscopía electrónica, a microscopía electrónica de

barrido, se utiliza para obtener una imagen tridimensional de las células (Fig.
1.37). En la microscopía electrónica de barrido el haz de electrones no pasa a
través de la muestra. En su lugar, la superficie de la célula se recubre de un
metal pesado, y se utiliza un haz de electrones que barre toda la muestra. Los
electrones aislados o emitidos por la superficie de la muestra se recogen para
generar una imagen tridimensional a la vez que el haz de electrones se mueve a
lo largo de la célula. Debido a que la resolución de la microscopía electrónica de
barrido solo es de unos 1 O nm, su uso está restringido al estudio de células
completas en lugar de suborgánulos celulares o macromoléculas.

Separación subcelular
Aunque el microscopio electrónico ha permitido una observación detallada de la
estructura celular, la microscopía en exclusiva no resulta suficiente para definir
las funciones de los numerosos componentes de las células eucariotas. Para
contestar muchas de las preguntas que atañen a la función de los orgánulos
celulares, ha sido necesario aislar a los orgánulos de las células eucariotas de
forma que puedan utilizarse para estudios bioquímicos. Normalmente esto se
realiza mediante la centrifugación diferencial -un método desarrollado por Al­
bert Claude, Christian de Duve, y sus colegas en los años 1940 y 1950 para sepa­
rar los componentes de las células de acuerdo con sus tamaños y densidades.
El primer paso en la separación subcelular es la rotura de la membrana
plasmática bajo condiciones que no destruyan los componentes internos de la
célula. Se utilizan diferentes métodos, que incluyen la sonicación (exposición a
sonidos de alta frecuencia), reducción en un homogeneizador mecánico, o el
tratamiento con una batidora de alta velocidad. Todos estos procedimientos
rompen la membrana plasmática y el retículo endoplasmático en pequeños
fragmentos mientras que dejan a otros componentes de la célula (como el nú­
cleo, lisosomas, peroxisomas, mitocondria, y cloroplastos) intactos.
Figura 1.37
Microscopía electrónica de barrido. Mi­
La suspensión de las células rotas (llamado lisado u homogeneizado} se
crografía electrónica de barrido de un ma­ fracciona en sus componentes mediante una serie de centrifugaciones en una
crófago. (David PhillipsNisuals Unlimited.) ultracentrífuga que procesa las muestras a una alta velocidad (más de