MICROBIOLOGÍA BUCAL, G-01

UNIVERSIDAD CATÓLICA
NORDESTANA (UCNE)

CULTIVOS ORALES

SUSTENTANTES:

Grupo #1
 Brunilda García (2019-0776)

 Oldanely Paulino (2019-0588)

 Victoria Veloz (2019-0749)
Docente:
Dra. DISNALDA E. MELO GILBERT
TRABAJO FINAL
 INTRODUCCIÓN

Un cultivo es un método mediante el cual, se pueden multiplicar los microorganismos

(Bacterias, hongos, virus, y demás), que, a su vez, se ve favorecido por medios óptimos (que
pueden ser líquidos, sólidos, o semisólidos), y demás condiciones, que ayudan en el proceso
de proliferación.

Los cultivos, son de gran importancia para las ciencias de la salud, y la odontología no es la
excepción, ya que mediante estos es posible llevar a cabo un diagnóstico preciso y eficaz,
ante la presencia de alguna patología, asea oral o no. Básicamente, mediante los cultivos se
pueden detectar cuáles son los causantes de ciertas afecciones en el organismo, y, asimismo
crear métodos de prevención de las mismas, como es el caso de las vacunas y los fármacos.

En el presente trabajo de investigación, trataremos algunos temas relacionados con los

cultivos orales, los cuales son de mucha importancia para nosotros como estudiantes de
odontología, porque nos permiten conocer los distintos microorganismos que pueden
presentarse en los distintos ecosistemas que componen la cavidad bucal. Los temas a tratar
son 4: Cultivo de placas dentales; Cultivo de secreción pulpar; Cultivo de caries dentales; y
Cultivo de secreción gingival.
 CULTIVO DE PLACAS DENTALES

Términos Generales:

La placa dental es una comunidad microbiana compleja que se encuentra en la superficie de

los dientes, embebida en una matriz de origen bacteriano y salival. Es una película
transparente e incolora, adherente al diente, compuesta por bacterias diversas y células
descamadas, dentro de un matriz de mucoproteínas y mucopolisacáridos.

La formación de la placa dental es el resultado de una serie de procesos complejos que

involucran una variedad de bacterias y componentes de la cavidad bucal del hospedero. Estos
procesos comprenden en primer lugar la formación de la película adquirida sobre la
superficie del diente; seguido de la colonización por microorganismos específicos adheridos
sobre la película adquirida; y finalmente la formación de la matriz de la placa.

En el desarrollo de la Placa Dental se requieren dos procesos adhesivos:

1-Las bacterias deben adherirse a la superficie de la película y estar bien ligadas para resistir
las fuerzas de autoclisis y la acción mecánica del cepillado dental.

2-Las bacterias deben crecer y adherirse unas con otras para permitir la acumulación de
placa.

Clasificación de la placa:
La placa dental se clasifica según su localización en supragingival y subgingival, según sus
propiedades en adherente y no adherente, y por su potencial patógeno en cariogénica y
periodontopatogénica.

 Placa Dental Supragingival: se encuentra en las superficies dentales y está constituida

predominantemente por flora bacteriana sacarolítica Gram positiva, en las cuales se
encuentran microorganismos cariogénicos; sin embargo, es posible que esta placa se
extienda hasta el fondo del surco gingival y entre en contacto con la encía, recibiendo la
denominación de placa marginal.

 Placa Dental Subgingival: se encuentra por completo dentro del surco gingival o de los
sacos periodontales, y está constituida principalmente por flora bacteriana proteolítica
Gram negativa en la cual se encuentran microorganismos periodontopatogénicos.

Cultivo de placa dental:

Es el conjunto de método mediante el cual se permite el crecimiento y desarrollo de los

diferentes microorganismos que conforman la placa dental.

¿Cómo se realiza?

Las muestras microbiológicas se toman de

las localizaciones a evaluar (en este caso la
placa presente en la superficie dental ya sea
sub o supragingival) mediante hisopos
estériles. Éstas se trasladan, y se diluyen e
inoculan en diferentes medios de cultivo
selectivos y enriquecidos, según el origen de
la muestra.

Las placas se incuban en la atmósfera

adecuada durante el tiempo preciso,
momento en el que se estudian las placas en las que se buscan las colonias morfológicamente
sospechosas.

Posteriormente se aíslan e identifican mediante técnicas microscópicas y bioquímicas, como

son las tinciones y el antibiograma.

MICROORGANISMOS QUE PUEDEN CRECER EN ESTE TIPO DE CULTIVO

En la placa supragingival predomina una flora grampositiva (cocos y bacilos) formada

fundamentalmente por S. sanguis, S.
gordinii, S. oralis, A. viscosus, A.
naeslundii, y especies de Eubacterium,
variando a medida que nos dirigimos
hacia zonas más profundas,
predominando aquí los anaerobios
facultativos como Actinomyces, bacilos
anaerobios gramnegativos como
Eikenella corrodens o Haemophylus, y
también bacterias anaerobias estrictas
como Eubacterium y Veillonella.

Entre las bacterias de la placa

bacteriana subgingival encontramos
cepas similares a las presentes en la placa supragingival, que tienen capacidad para adherirse
a superficies duras, pero además se detectan especies que son capaces de adsorberse al
epitelio de los tejidos blandos, tales como Actinobacillus, actinomycetemcomitans,
Porphyromona gingivalis, Prevotella melaninogénica, Capnocytophaga oochracea,
Fusobacterium y otros.

PRIMEROS COLONIZADORES:

 Streptococcus sanguis: es un habitante normal de la boca humana sana, especialmente de

la placa dental, donde modifica el ambiente para que sea menos acogedor para otras cepas
de Streptococcus que provocan la caries, como Streptococcus mutans. por lo general, está
 presente en la placa supragingival.

 Actinomyces viscosus: Son bacilos filamentosos, G+, anaerobios. Se localizan en la

placa dental supragingival y cubren las lesiones cariosas de la superficie de la raíz de los
dientes. Cuentan con un poder acidogénico al producir ácido láctico. Posee fimbrias
implicadas en la capacidad de adhesión.

 Streptococcus mitis: Es un coco gram positivo, anaerobio facultativo, presente por lo

general, en la placa supragingival.

 Streptococcus mutans: es una bacteria Gram positiva, anaerobia facultativa, acidófila

(vive en medio de pH bajo), acidogénica (metaboliza los azucares a ácidos), y acidula
(sintetiza ácidos a pesar de encontrarse en un medio de tales condiciones), que recibe
energía a través de fermentación del ácido láctico. Es un alfa hemolítica, es decir, que
aparece verde en una placa de agar sangre. Generalmente se encuentra presente en la
placa supragingival, siendo la bacteria que tiene más influencia en el desarrollo de la
caries dental.

 Streptococcus oralis: presente por lo general, en la placa supragingival.

 Actinomyces naeslundii: presente en la placa supragingival.

MICROORGANISMOS SECUNDARIOS:

 Streptococcus Parasanguis.
 Streptococcus gordonii.
 Neisseria spp.
 Prevotellas spp.
 Fusubacterium spp.
 Candida albicans.

MEDIOS DE CULTIVO FAVORABLES

 Agar Sangre: es un medio enriquecido, diferencial, usado para aislar microorganismos y
detectar su actividad
hemolítica. Algunos de los
microorganismos de la placa
dental que crecen en este
medio son: el Streptococcus
mutans que presenta una
hemolisis alfa, es decir,
presenta halos verdosos (oxidación de la hemoglobina de los glóbulos rojos a
metahemoglobina en el medio); el S. mitis, que también presenta alfa hemolisis
(hemolisis parcial); el S. Salivarius que presenta gamma hemolisis (sin hemolisis); etc.

 Agar Sabouraud: se utiliza para el cultivo

de todos los hongos. En el caso de los
microorganismos presentes en la placa
dental, en este tipo de medio crece la
cándida albicans, la cual presenta colonias
lisas, suaves, húmedas y de color y aspecto
cremoso. Estas colonias tienen un tamaño
que oscila entre 1,5 y 2 m.m. de diámetro,
con
aspecto de levadura, de consistencia blanda y
rápidamente proyectan filamentos hasta la
profundidad del agar. Después de 4-5 días se
percibe un olor característico de levadura.

 Agar Macconkey: es un medio de cultivo selectivo

y
diferencial para bacterias diseñado para
aislar selectivamente bacilos Gram
negativos y entéricos y diferenciarlos sobre
la base de la fermentación de la lactosa.
 Caldo de Tioglicolato: favorece el crecimiento de anaerobios, aerobios, microaerófilos y
microorganismos exigentes.

 Agar Mueller Hinton: es un medio estándar utilizado para la prueba de sensibilidad de

bacterias aerobias de rápido crecimiento o anaerobias facultativas.

Tratamientos utilizados: La placa bacteriana se puede eliminar por medios físicos, bien a
nivel supragingival (por medio del cepillado y profilaxis dental), bien a nivel subgingival (por
medio de raspado y alisado radicular, o cirugía periodontal).

En cuanto al método de siembre, este puede realizarse por agotamiento o dilución, y por
estrías.

CULTIVO DE SECRECIÓN PULPAR

La pulpa es un tejido blando de origen mesenquimatoso con células especializadas, los

odontoblastos, que se colocan periféricamente en contacto directo con la matriz dentinal.

La pulpa constituye un sistema microcirculatorio cuyos componentes vasculares más grandes

son las arteriolas y las vénulas. Ninguna arteria o vénula entra o sale de la pulpa. El tejido
pulpar está protegido en su parte externa por el esmalte y la dentina y la dentina a nivel
coronal, a nivel radicular por la dentina y cemento.
Cuando algún agente externo genera una lesión a estos tejidos puede comprometer la
integridad de la pulpa y ocasionar cambios inflamatorios o degenerativos a nivel de este
tejido que puede variar en magnitud y severidad. La caries dental es la razón fundamental por
la que la pulpa se ve afectado por procesos infecciosos, aunque también se pueden producir
colonizaciones bacterianas a través de los márgenes de obturación o por fracturas dentarias,
así mismo, los procesos periodontales pueden ser el camino por el que lleguen bacterias a la
pulpa.

Pulpitis:

La pulpitis hace referencia a un estado

inflamatorio de la pulpa que puede ser
agudo o crónico y en distintas formas
evolutivas según criterios clínicos o
histopatológicos.

La gran variedad anatómica y tisular

existente en la cavidad oral, entre otros
factores, hace posible la convivencia de
diferentes ecosistemas microbianos, cada
uno con características metabólicas y
nutricionales específicas y todos ellos conviviendo dentro de un delicado equilibrio
ecológico.

Cultivo de secreción pulpar:

Es el conjunto de método mediante el cual se permite el crecimiento y desarrollo de los

diferentes microorganismos presentes en la cavidad pulpar.

¿Cómo se realiza?

Lo primero que debe realizarse es la asepsia del conducto, pero antes tienen que haber ciertas
características antes de tomar la muestra como son:
  Haber concluido el tratamiento químico - mecánico, si se va a hacer un control
microbiológico antes de obturar la endodoncia
 Silencio clínico, si se va a hacer un control microbiológico antes de obturar la
endodoncia.
 Conducto vacio, sin medicación intraconducto mínimo 72 horas antes de la toma de
muestra.
 Debe ser tomada antes de administrar antimicrobianos al paciente.

Luego de verificar lo anteriormente dicho, se procede a seguir con los siguientes pasos:

1. Aislamiento absoluto.

2. Retirar la curación
superficialmente con fresa, sin
irrigación, dejando la porción
más profunda intacta.

3. Retirar el resto de la
curación con la cureta para
dentina evitando que caigan
restos dentro de la cavidad.

4. Pincelado antiséptico de la
zona.

5. Retirar el tapón de algodón del conducto.

6. Re-esterilizar la pinza de algodón, tomar el cono de papel para introducirlo en el conducto

dentario, hasta el foramen apical, dejándolo 10 segundos como mínimo.

7. El tubo de transporte se tiene con la mano izquierda y con la derecha es retirada la punta
absorbente con la pinza estéril.

8. Flamear el borde del tubo de ensayo sobre el mechero de alcohol.

9. Dejar caer dentro del tubo el cono de papel absorbente.

10. Flamear nuevamente el borde del tubo de ensayo

11. Colocar el tapón al tubo de ensayo.

12. Quitar todo el oxígeno que se encuentra en el tubo de ensayo.

Transporte:

 Trasladar la muestra rotulada, preservándola a una temperatura anaerobios

(temperatura ambiente), aerobios (incubadora 37°C).
 Trasportarlo al laboratorio clínico dentro de la primera hora de la recolección.

Tiempos de incubación:

 De 24 a 72 horas para anaerobiosis y aerobios, depende de la especie que se quiera

aislar.
 24 horas para el antibiograma, resultados a las 96 horas como máximo.

El estudio microbiológico de muestras intraconducto permite establecer el diagnóstico

etiológico de diferentes enfermedades infecciosas. Por tal motivo es importante garantizar la
calidad en la obtención de la muestra y la información que debe acompañarla durante el
proceso que comienza en la fase previa al análisis, que incluye la preparación, la obtención y
el transporte, lo cual concluye en el análisis de la muestra.

MICROORGANISMOS QUE PUEDEN CRECER EN ESTE TIPO DE CULTIVO

Las bacterias Gram positivas e inmóviles son predominantes en el cultivo de este tipo de
secreciones, como son:
  Lactobacilos  Porphyromonas

 Propionibacterias  Treponema

 Actinmyces  Actinomyces

 Fusobacterium  Streptococcus

 Prevotella  Peptostreptococcus

 Bacilos Gram positivos Y Gram negativos anaerobios estrictos no esporulados.

MEDIOS DE CULTIVO FAVORABLES

Los medios empleados para el cultivo de secreción pulpar son:

 Agar Sangre

 Agar Chapman o Manitol salado

 Caldo de tioglicolato

 Agar GMC (OCFAT)

 Agar Sabouraud

 Agar MacConkey o EMD.

CULTIVO DE CARIES DENTALES

CULTIVO DE SECRECIÓN GINGIVAL
CONCLUSIÓN
 BIBLIOGRAFÍA

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