UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO NUEVA ESPARTA
UNIDAD DE CURSOS BÁSICOS
DEPARTAMENTO DE MEDICINA
INFORME DE LABORATORIO
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS, LÍPIDOS Y
PROTEÍNAS
Presentado por:
- Roxanyel Martínez C.I: 31.745.983.
- Gabriela Gómez C.I. 31.257.378.
- Dismary Torres C.I: 31.649.119.
Al curso de Laboratorio de Biología II (1521)
Prof. Noyerling Lanza.
Guatamare, 27 de Mayo del 2024.
INTRODUCCIÓN
El concepto de carbohidrato se forma a partir de dos términos: carbono e
hidrato. Un carbohidrato, por lo tanto, es un hidrato de carbono. Los hidratos son
aquellas sustancias que contienen agua (H2O). El carbono, por su parte, es un
elemento químico. Los carbohidratos, en definitiva, son sustancias orgánicas
compuestas por oxígeno, hidrógeno y carbono. También llamados glúcidos, los
carbohidratos son biomoléculas (moléculas que constituyen a un ser vivo) que están
formadas mayormente por átomos de carbono y de hidrógeno. El oxígeno es el
elemento presente en menor cantidad. La función de los carbohidratos, que
presentan enlaces covalentes que resultan difíciles de romper, es aportar energía.
Dicha energía puede ser utilizada de manera inmediata o almacenada para un uso
posterior. Ciertos carbohidratos también actúan como elementos estructurales,
formando parte de las paredes celulares (Pérez y Gardey, 2021).
Es posible diferenciar entre distintas clases de carbohidratos. Los más
simples reciben el nombre de monosacáridos, como la glucosa y la ribosa. Estos
carbohidratos tienen una única molécula. Los disacáridos (la lactosa, la sacarosa),
por su parte, están compuestos por dos monosacáridos. También existen los
oligosacáridos, que tienen entre tres y nueve moléculas de monosacáridos, y los
polisacáridos, con más de diez monosacáridos (Pérez y Gardey, 2021).
Los lípidos son conjuntos de moléculas orgánicas constituidas
primordialmente por átomos de carbono, hidrógeno y oxígeno (en menor medida), y
otros elementos como nitrógeno, fósforo y azufre. Los lípidos son moléculas
hidrófobas (insolubles en agua), pero son solubles en disolventes orgánicos no
polares, como bencina, benceno y cloroformo. Los lípidos forman parte vital de la
alimentación de los seres vivos ya que muchas vitaminas no pueden asimilarse
excepto que estén en presencia de ciertos lípidos. Además, muchos ácidos grasos
resultan indispensables para el metabolismo animal. Al mismo tiempo, ciertos lípidos
forman el tejido adiposo (conocido comúnmente como grasa), que cumple un rol de
soporte, protección y almacenamiento energético de suma importancia para el
organismo animal (Álvarez, 2024).
Proteína es una noción que deriva de la lengua griega y que permite nombrar
a un cierto tipo de sustancia que se halla en las células. Se trata de un biopolímero
compuesto por aminoácidos que aparecen encadenados. Estos aminoácidos, a su
vez, se forman por enlaces peptídicos. Entre los componentes de las proteínas, se
encuentran el nitrógeno, el hidrógeno, el oxígeno y el carbono. Otros componentes
son variables y dependen de la proteína en cuestión. Debido a las funciones que
desarrollan, las proteínas son imprescindibles para la existencia de la vida. Hay
proteínas que contribuyen a proteger el organismo, otras se encargan de la
regulación del metabolismo, entre otros (Pérez; Gardey, 2023).
Las proteínas, los carbohidratos y los lípidos son las moléculas de la vida, La
siguiente práctica tiene como objetivos:
● Realizar diferentes experimentos, donde se identifique, las
características de los carbohidratos.
● Identificar los lípidos y proteínas mediante pruebas químicas
● Identificar aminoácidos y proteínas por medio de métodos basados en
reacciones químicas.
METODOLOGÍA
PARTE A
IDENTIFICACIÓN DE LOS CARBOHIDRATOS
Ejercicio N°1: Test de Azúcares Reductores.
En una gradilla se ubicaron siete tubos de ensayo, a los cuales se les añadió
2 ml de reactivo de Benedict. Posteriormente, se agregaron 0,1 ml de 6 azúcares
diferentes a cada uno: glucosa al primero, lactosa al segundo, sacarosa al tercero,
maltosa al cuarto, fructosa al quipues, están presentes en todos los seres vivos
tanto unicelulares como pluricelulares y presentan funciones específicas dentro de
la célula.
nto y almidón al sexto. Al séptimo tubo sólo se le añadió agua destilada, siendo este
el tubo control o blanco. Luego de esto, con un agitador se mezcló la solución de
todos los tubos y fueron colocados en un baño de agua hirviendo durante unos
minutos.
Ejercicio N°2: Test de yodo.
Se aplicó yodo o reactivo Lugol a un papel filtro colocado en una cápsula de
Petri, el cual estaba dividido en seis partes iguales identificadas con los tipos de
azúcar a utilizar: glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa, almidón y fructosa.
Posteriormente, se añadió una gota de cada azúcar en el espacio correspondiente y
se dejó secar para realizar comparaciones.
Ejercicio N°3: Degradación de polisacáridos.
Cuatro tubos de ensayo situados en una gradilla, fueron rotulados con las
letras A, B, C y D. Se les añadieron 2 ml de solución al 1% de almidón a cada uno.
Después, se apartaron los tubos A y C, mientras que los tubos B y D se calentaron a
aproximadamente 80ºC durante 30 minutos, pasado dicho tiempo, se dejaron
enfriar. Posteriormente, a los tubos A y B se les añadió 1 ml de reactivo de Benedict
y se colocaron en agua hirviendo mientras se agitaban constantemente.
Ejercicio N°4: Degradación de sacarosa.
En un tubo de ensayo se agregó 0,1 ml de solución de sacarosa, luego
fueron añadidas 10 gotas de ácido clorhídrico (HCL) para romper o degradar la
sacarosa, se esperó 5 minutos y posteriormente se le echó 3 ml de solución alcalina de
hidróxido de sodio (NaOH), luego se le echó 1 ml de reactivo de Benedict.
IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS Y PROTEÍNAS.
PARTE A
Identificación de lípidos.
Ejercicio N°1: Solubilidad.
Se tomaron 5 tubos de ensayo y se rotularon del 1 al 5 en el primero se
colocaron 2 ML de agua, en el segundo 2 ML de alcohol, en el tercero 2 ML de
kerosene, en el cuarto 2 ML de acetona, y en el quinto 2 ML de gasolina, en cada
tubo se le agregaron 2 gotas de aceite de maíz y luego se agitaron.
Ejercicio N°2: Prueba de solubilidad para 2 lípidos diferentes (Aceites y
mantecas).
Posteriormente se tomaron 2 tubos de ensayo y luego se rotularon con la
letra A y B, al tubo A y B se le añadieron 2 ML de acetona, al tubo A se le agregó
aceite y al B mantequilla, después se agitó y se dejó reposar, por último se le agregó
el agua destilada a ambos tubos.
Ejercicio N°3: Prueba de Glicerol.
Seguidamente se tomaron 2 tubos de ensayo que se rotularon como A y B en
la cual se le añadieron a ambos tubos un gramo de bisulfato de potasio, al tubo A se
le agregó cera de abeja y al tubo B, 5 gotas de aceite de maíz y luego se
procedieron a calentar ambos tubos con un mechero de alcohol.
Ejercicio N°4: Digestión (Hidrólisis) de gases.
Luego en 2 tubos de ensayo rotulados como A y B se le incorporaron 2 ML de
crema de leche a cada uno, al A se le agregó 2 ML de pancreatina y al tubo B se le
añadió 2 ML de agua destilada luego a cada tubo se le colocó una cinta de pH y se
procedieron a colocar en un beaker con agua a 40°C por 30 minutos.
Identificación de Proteínas.
Ejercicio N°5: Identificación de proteínas por formación de color (Reacción
Xantoproteica).
En un tubo de ensayo se le colocó 1 ML de albúmina de huevo previamente
preparado más 5 gotas de ácido nítrico. Luego se sumergió en un beaker con agua
a 60ºC por 5 minutos después se sacó y se dejó reposar en agua a temperatura
ambiente y al final se le añadió hidróxido de amonio al 1%.
Ejercicio N°6: Diferencia de longitud de las cadenas.
Se tomaron 2 tubos de ensayo y se rotularon como A y B, al tubo A se le
añadió yema de huevos y al tubo B, 3 ML de albúmina de huevo, luego se le
agregaron a ambos tubos 2 ML de hidróxido de sodio y por último se le incorporaron
cuatro gotas de sulfato de cobre concentrado.
RESULTADOS
PARTE A
IDENTIFICACIÓN DE LOS CARBOHIDRATOS
Ejercicio N°1: Test de azúcares reductores.
Según la observación del cambio de color al ser calentados, se pudo
determinar que los azúcares reductores presentes fueron la glucosa, la lactosa, la
maltosa y la fructosa, ya que dieron resultado positivo en la prueba de Benedict.
Todos estos azúcares mostraron un cambio de coloración de azul a marrón ladrillo,
con la excepción de la fructosa, que presenta un tono marrón-naranjoso. Por otro
lado, la sacarosa y el almidón no tuvieron cambio de color, lo que indica que no
contienen amoniaco libre y por ende son considerados azúcares no reductores. En
la siguiente imagen se puede visualizar los colores que adoptaron los azúcares al
ser calentados (Fig.1).
Figura N°1: Visualización de los azúcares reductores y no reductores.
Ejercicio N°2: Test de yodo
Se logró visualizar que el único espacio con algún cambio visible fue con el
almidón, obteniendo un color azul-violeta intenso, esto debido a que el yodo se
introduce en el interior de la hélice de almidón haciendo que cambien las
propiedades de absorción de la luz, de forma que se obtiene dicha coloración
violeta, indicando la presencia de polisacárido. En la siguiente imagen se observa el
único cambio realizado en el test (Fig.2).
Figura N°2: Visualización del cambio ocurrido en el test del yodo.
Ejercicio N°3: Degradación de polisacáridos
Después de la adición del reactivo de Benedict y el calentamiento, el tubo A
tuvo una coloración verdosa oscura, mientras que el B tuvo una coloración azul
verdosa más clara, lo que indica la presencia de azúcares reductores en ambos. La
diferencia en la intensidad de la coloración está relacionada con la cantidad relativa
de azúcares reductores presentes en cada muestra. Por otro lado, la ausencia de
coloración en los tubos C y D sugiere que el tratamiento al que fueron sometidas no
permitió la formación de azúcares reductores (Fig.3).
Figura N°3: Visualización de coloración de tubos A, B, C y D en la
degradación de polisacáridos.
Ejercicio N°4: Degradación de sacarosa
Tras la degradación de la sacarosa con solución alcalina de hidróxido de
sodio (NaOH), se observó un cambio de coloración en la prueba de Benedict. La
solución presentó una coloración azul oscuro, lo que no concuerda con el cambio
esperado hacia tonos amarillentos o anaranjados que indicarían la presencia de
azúcares reductores, esto debido a que no se realizó el proceso de calentamiento
en baño maría durante los 5 minutos indicados. En la siguiente imagen se puede
observar el color que tomó la solución en la prueba de Benedict.
Imagen Nº 4: Coloración de solución de sacarosa en la prueba de Benedict.
PARTE B
Identificación de Lípidos
Ejercicio N°1: Solubilidad
Se detectó la solubilidad de los lípidos en diferentes solventes, donde se
corroboró que los lípidos son sustancias solubles en solventes orgánicos no polares,
se contempló una solubilidad total en el kerosene y gasolina en vista de que son
solventes orgánicos, una solubilidad parcial en la acetona y el alcohol y una
insolubilidad en el agua.
Tabla N°1. Identificación de solubilidad de lípidos en distintos solventes.
Tubos Solventes Lípidos Solubilidad Polaridad
Tubo 1 2 ml Agua 2 gotas Aceite Insoluble Polar
de maíz
Tubo 2 2 ml Alcohol 2 gotas Aceite Parcialmente Polar
de maíz soluble
Tubo 3 2 ml Kerosene 2 gotas Aceite Solubles Apolar
de maíz
Tubo 4 2 ml Acetona 2 gotas Aceite Parcialmente Polar
de maíz soluble
Tubo 5 2 ml Gasolina 2 gotas Aceite Solubles Apolar
de maíz
Ejercicio N°2: Prueba de solubilidad para 2 lípidos diferentes (Aceites y
Mantecas).
En el tubo A de la mezcla de la acetona y el aceite se disolvió por completo,
quedando una solución homogénea, en el tubo B la mezcla de acetona y la
mantequilla se observó también una mezcla homogénea, luego se dejó reposar y se
le agregó agua destilada a los tubos A y B, y se pudo notar una mezcla totalmente
soluble, en el tubo A se ve líquido y el B se ve más concentrado.
Tabla N°2. Identificación de lípidos según su solubilidad.
Tubos Solvente Lípidos Solvente
Tubo A 2 ml Acetona Aceite 1 ml Agua
destilada
Tubo B 2 ml Acetona Mantequilla 1 ml Agua
destilada
Ejercicio N°3: Prueba de Glicerol.
En el tubo A, al calentar bisulfato de sodio KHSO4 y cera de abeja, se pudo
notar un olor a esperma de vela y en el tubo B se pudo notar un olor a aceite muy
quemado.
Tabla N°3. Reconocimiento de olor de la acroleína en diferentes lípidos.
Tubos Solvente lípidos
Tubo A 1 g de bisulfato de cera de abeja
potasio
Tubo B 1 g de bisulfato de 5 gotas de aceite de
potasio maíz
Ejercicio N°4. Digestión (Hidrólisis) de gases.
En el tubo A que tiene crema de leche y pancreatina, se agitaron. Luego se
colocó en un beaker a 40°C por 30 minutos, al cual se le colocó una cinta de pH
para detectar algún cambio en la acidez con la muestra del tubo A. En la cual no se
nota ninguna diferencia debido a que las cintas de pH probablemente estaban
vencidas.
Tabla N°4. Identificación de la acidez del pH en líquidos con diferente
solución y solvente.
Tubos Lípidos Solución Solvente
Tubo A 2 ml crema de 2 ml de
leche pancreatina
Tubo B 2 ml crema de 2 ml de agua
leche destilada
Identificación de Proteína
Ejercicio N°5: Identificación de proteínas por formación de un color
(Reacción Xantoproteica).
Cuando la albúmina de huevo más el ácido nítrico agregado al tubo de
ensayo la cual se sometieron a altas temperaturas e inmediatamente se rompió la
albúmina y cambió su coloración a una amarillenta lo que quiere decir que dio
positiva (Fig.5).
Figura N°5: Tubo de ensayo con la albúmina de huevo y ácido nítrico.
Ejercicio N°6: Diferencias de longitud de las cadenas.
Hubo un cambio de coloración en el tubo A de la yema de huevo que tomó un
color marrón claro la cual tiene presencia de polipéptidos de cadena corta, y el tubo
B de la albúmina de huevo se colocó un color violeta, lo que significa que tiene
presencia de proteína por lo tanto tiene cadena larga.
Tabla N°5. Diferenciación a lo largo de las proteínas de los problemas.
Tubo Solución Sustancia Sustancia
Tubo A 3 ml de yema de 2 ml hidróxido de 4 gotas de sulfato
huevo al 1% sodio de cobre
Tubo B 3 ml de albúmina 2 ml de hidróxido 4 gotas de sulfato
de huevo de sodio de cobre
Discusión
En el test de los azúcares reductores gracias a las temperaturas a las que
fueron sometidos, se identificaron cuales eran los azúcares reductores y los que no.
Este carácter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reacción
redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de cobre (Prueba de Benedit). Las
soluciones de esta sal tiene color azul. Tras la reaccion con el glucido reductor se
forma oxido de cobre de color rojo. De este modo el cambio de color (rojo o naranja)
indica que el glucido presente es reductor. Si por el contrario no ha cambiado de
color o adoptado un tono azul/verdoso, el glucido no es reductor. (Flores, 2018).
Los azúcares reductores son aquellos que poseen su grupo carbonilo (grupo
funcional) intacto entre estos tenemos glucosa, lactosa, fructosa, y que a través del
mismo pueden reaccionar con otras moléculas; los azúcares no reductores al
contrario no poseen su grupo carbonilo libre y entre estos tenemos sacarosa y
almidón. (Moreano, 2015).
En la prueba del yodo, la reacción entre el yodo (presente en el reactivo
lugol) y el almidón, es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro
(generalmente triyoduro, I3–) que se enlazan con el almidón en las hélices del
polímero. En concreto, es la amilosa del almidón la que se une a las moléculas de
yodo, que se visualiza con un color azul oscuro (púrpura) a veces prácticamente
negro. La amilopectina no reacciona apenas con el yodo. No es por tanto, una
verdadera reacción química, sino que se forma un “compuesto de inclusión” que
modifica las propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la coloración azul
violeta. (Aragón, s/f).
En la degradación de polisacáridos, que son grandes moléculas formadas por
la unión de varios monosacáridos, son descompuestos en unidades más pequeñas.
Este proceso puede ocurrir de forma natural a través de la acción de enzimas, como
la amilasa en la degradación de almidón. la prueba de benedict se utiliza para
detectar la presencia de azúcares reductores, como la glucosa, que resultan de la
degradación de almidón, la reacción con este reactivo produce un cambio de color
que indica la presencia de estos azucares.
En cuanto a las temperaturas que fueron sometidos unos de los tubos, se debe a
que la exposición a temperaturas puede alterar tanto las enzimas como la estructura
del almidón, lo que afectaría su capacidad para degradarse y sus propiedades
físicas. (Rovira, 2020).
La degradación de sacarosa con hidróxido de sodio, se conoce como
hidrólisis alcalina. En este proceso la sacarosa se descompone en sus dos
componentes de azúcar simple, glucosa y fructosa, debido a la acción del hidróxido
de sodio (NaOH) en una solución alcalina. El reactivo de Benedict produce un
precipitado de óxido cuproso (de color rojo ladrillo) cuando hay azucares reductores
presentes en la solucion. Este cambio de color es una indicacion visual de la
presencia de azucares reductores como resultado del proceso de hidrolisis alcalina
(Revilla, 2021). Sin embargo, en el experimento realizado presentó una coloración
azul oscuro, lo que indica que no resultó como debía, se estima que fue por falta de
algún procedimiento o por algún mal procedimiento.
Los lípidos se definen como un grupo heterogéneo cuya característica
común es su baja o poca afinidad por el agua y por presentar una gran afinidad y
solubilidad en solventes orgánicos tales como hidrocarburos, cloroformo, benceno y
alcoholes. Los lípidos forman un grupo de sustancias químicamente diversas pero
con una propiedad física común que es la de ser poco o nada solubles en agua, son
hidrofóbicos. Los lípidos, en general, pueden ser disueltos por disolventes
químicamente similares y con propiedades de momento dipolar parecidas a la de los
lípidos. Cabe destacar que hay diferencias remarcables en los distintos tipos de
lípidos que determinan variabilidad en el comportamiento de los mismos en un
solvente o una mezcla de solventes dada. El agua es insoluble en aceite vegetal a
causa de que tiene una densidad diferente a la del aceite, lo que no permite que
estos dos se mezclen. El alcohol es insoluble en agua debido a las diferencias en la
polaridad de las moléculas. El alcohol es una molécula polar, lo que significa que
tiene una carga positiva y otra con carga negativa, lo que permite interactuar con
otras moléculas polares como el agua. El kerosene es soluble en aceite vegetal
debido a que tanto el kerosene como el aceite son sustancias no polares. Las
moléculas de kerosene y aceite comparten similitudes en términos de polaridad, lo
que les permite mezclarse entre sí. La acetona es insoluble en aceite vegetal a
causa de que la acetona es una molécula polar, mientras que el aceite vegetal es
una sustancia no polar. La gasolina es soluble en aceite vegetal puesto que ambas
sustancias son apolares, tanto la gasolina como el aceite vegetal consisten en
moléculas que no tienen cargas eléctricas positivas o negativas significativas, lo que
les otorga una naturaleza apolar (Bagnato, S/F).
El aceite y la acetona forman una mezcla homogénea a pesar de ser líquidos
con propiedades diferentes debido a que la acetona es capaz de disolver el aceite.
La acetona es un solvente muy efectivo para muchas sustancias apolares, como los
aceites, debido a su estructura molecular. Aunque la acetona es polar, tiene una
región que puede interactuar con las moléculas no polares del aceite, lo que permite
disolverlo y formar una mezcla homogénea. La acetona y la mantequilla pueden
formar una mezcla homogénea a causa de que la acetona es capaz de disolver
algunos componentes de la mantequilla. La mantequilla contiene una combinación
de grasas, agua y proteínas, entre otros componentes. La acetona a pesar de ser
polar, tiene una capacidad de disolver ciertos componentes no polares de la
mantequilla, como las grasas, lo que permite que se mezclen de manera
homogénea (Gomez,2013).
El olor a ‘’esperma de vela’’ que se percibe al calentar la cera de abeja con
bisulfato de potasio se debe a la reacción química que tiene lugar. Cuando la cera
de abeja se calienta con bisulfato de potasio, se produce una descomposición
térmica que genera compuestos volátiles, incluyendo el mercaptano, que es una
sustancia responsable del olor característico mencionado. Al calentar el bisulfito de
potasio con aceite de maíz se produce una reacción química que conduce a la
descomposición térmica del aceite, generado por compuestos volátiles responsables
del olor a aceite quemado. La combinación de calor y la interacción entre los
componentes del bisulfato de potasio y el de aceite de maíz provoca la formación de
compuestos orgánicos volátiles con olores característicos, incluyendo aquellos
asociados con el aceite quemado.
En la identificación de acidez de pH de la crema de leche con la pancreatina
y la de la crema de leche con el agua destilada no se pudo observar ningún
resultado de acidez del pH debido a que probablemente las cintas de medir pH
estaban vencidas.
La albúmina de huevo, una proteína presente en la clara de huevo, al
calentarse con ácido nítrico puede experimentar un proceso conocido como
nitrosación. Durante este proceso, el ácido nítrico reacciona con ciertos grupos
funcionales presentes en la albúmina, formando compuestos nitrosos que pueden
tener coloraciones amarillas. Estos compuestos nitrosos son responsables del
cambio de color observado en la albumina de huevo al ser tratada con acido nitrico.
Este fenómeno es parte de las reacciones químicas que ocurren entre las proteínas
y ciertos compuestos químicos (Fernandez, 2012).
Al mezclar yema de huevo, hidroxido de sodio y sulfato de cobre puede
generar un cambio de color marron a causa de reacciones quimicas que tienen lugar
entre los componentes. la yema de huevo contienen proteínas y lípidos que pueden
reaccionar con el hidróxido de sodio, las proteínas y lípidos de la yema pueden
experimentar cambios, incluyendo la formación de complejos con el sulfato de
cobre, lo que puede resultar en la aparición del color marrón claro. Al mezclar
albúmina de huevo, hidróxido de sodio y sulfato de cobre puede generar un cambio
de color violeta este se debe a las reacciones quimicas que ocurren entre los
componentes. La albúmina de huevo, al reaccionar con el hidróxido de sodio y el
sulfato de cobre, puede formar complejos o compuestos químicos que presentan
esta coloración características. La presencia del hidróxido de sodio puede influir en
la estructura de la proteína de la albúmina, y el sulfato de cobre puede participar en
la formación de estos compuestos con coloración violeta (Rincón,2010).
Conclusión
Se realizaron diferentes experimentos, en donde se identificaron
carbohidratos como los monosacáridos, glucosa, fructosa; disacáridos, sacarosa,
lactosa, maltosa; y polisacáridos, almidón. y sus posibles reacciones con reactivos,
como el reactivo de Benedict y el reactivo Lugol. Al igual que distinguir cuales de
estos eran azúcares reductores y cuáles no.
Mediante pruebas químicas, se lograron identificar la solubilidad de algunos
lípidos, así como la digestión de hidrólisis en gases y la identificación del pH en
líquidos de diferente solución y solvente.
Por medio de reacciones químicas, se observaron las diferencias en la
longitud de las cadenas de algunas proteínas.
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