“Año del Bicentenario, de la consolidación de nuestra Independencia, y de la conmemoración de las
heroicas batallas de Junín y Ayacucho”
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN
MARCOS
(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)
FACULTAD DE INGENIERIA GEOLÓGICA, MINERA, METALÚRGICA Y GEOGRÁFICA
ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE INGENIERIA GEOLÓGICA
Curso: Biología para ciencias e ingeniería
Tema: Extracción de pigmentos celulares
Informe de laboratorio 9
DOCENTE:
Biol. Noblecilla Huiman, Maggie Carolina
INFORME DE PRÁCTICA 09
EXTRACCIÓN DE PIGMENTOS CELULARES
NUMERO
- DE GRUPO: N°3 Turno: 4pm a 6pm , los lunes
Nombres y apellidos de integrantes:
Perry Haro, Nicolás Mario
Quin Uchuypoma, Nnhya
Rodríguez Rupay, Aracely Melissa
Soto Obregón, Jack Bryan
Torres Silvano, Yazumi Zaori
1) Introducción
La permeabilidad celular es crucial para comprender cómo las células interactúan con su
entorno y mantienen la homeostasis. La membrana plasmática, formada por una bicapa de
fosfolípidos y proteínas, actúa como una barrera selectiva, regulando el paso de sustancias y
manteniendo el equilibrio interno necesario para las funciones vitales.
El modelo del mosaico fluido describe la membrana como una estructura dinámica donde los
fosfolípidos y las proteínas se mueven libremente, lo que permite a la célula responder a
cambios ambientales y regular el paso de sustancias selectivamente. Los mecanismos de
transporte incluyen la difusión simple, la difusión facilitada y el transporte activo.
La ósmosis, un tipo de difusión especial, implica el movimiento de agua a través de una
membrana
- semipermeable desde una región de mayor concentración de agua a una de menor
concentración, manteniendo así el equilibrio hídrico en las células.
2) Analice y complete según las actividades desarrolladas durante la práctica
a) Actividad 1: Procedimiento de extracción de pigmentos
- Esquematice todo el proceso de extracción mediante imágenes.
-
Quite las nervaduras de las hojas Una vez bien picadas las hojas, añada al envase el Con el empleo de un
y colóquelas en un tazón por alcohol poco a poco y simultáneamente vaya embudo y papel filtro,
separado. triturando, continúe echando el alcohol, hasta un vierta el contenido filtrado
Corte las hojas de las plantas en máximo de 50ml hasta obtener un líquido de color en un vaso.
pedazos muy pequeños en el verde intenso o del color que se obtenga de las
tazón de cerámica o mortero. hojas diferentes.
Distribuya la solución obtenida Espere hasta que el solvente
en una placa Petri y coloque haya viajado hasta el extremo
un pedazo de papel filtro, de superior del papel antes de
unos 10 x 4 cm. retirar el cromatograma de la
placa petri. (observe las
diferentes formas de
resultados).
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- Registre el tiempo de avance de cada banda de los resultados, mediante dibujo o fotografía
cuántas bandas o zonas de distintos colores se pueden distinguir en las hojas de las dos plantas
empleadas.
Espinaca Rabanito
04:10 minutos 03:50 minutos
Se observan 3 Se observan 3 zonas
zonas de distintos de distintos colores
colores
- Interpretar los resultados comparando con el patrón de bandas obtenido con la posición de bandas
referenciales de los pigmentos patrón (clorofila, xantofila, carotenos)
Espinaca Rabanito
Comparando el patron de Las hojas de rabanito
banda, se puede contienen más clorofila
observar que tiene más que carotenos, similar a
clorofila que carotenos, otras hojas verdes. Esto se
lo que se puede ver tanto puede confirmar
en su color verde visualmente por su color
intenso. verde intenso.
- Señale qué pigmento representa cada extracto de hojas y
explique las razones de los colores para cada pigmento.
[Link]:
Clorofila: La espinaca es conocida por su alto contenido en
clorofila, específicamente clorofila a y clorofila b, que le dan
su color verde intenso.
2. Hoja de rabanito:
Clorofila: Las hojas de rabanito también contienen clorofila,
lo que les da su color verde.
Carotenoides: Las hojas de rabanito pueden contener
carotenoides como el beta-caroteno, que también
contribuyen al color y tienen funciones antioxidantes.
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- Tomando los resultados de las hojas verdes y no verdes, discuta las razones de las diferencias
encontradas.
HOJAS DE RABANITO HOJAS DE ESPINACA
Pigmento HOJAS DE RABANITO HOJAS DE ESPINACA
Clorofila a Menor concentración Mayor concentración
Clorofila b Menor concentración Mayor concentración
Carotenoides (β-
Presencia variable Alta concentración
caroteno)
Xantofilas Presencia variable Menor concentración
3) Resuelve el siguiente cuestionario
- ¿Cuáles son las razones por las cuales se emplea alcohol en esta práctica?
1. Solubilidad: Los pigmentos fotosintéticos como la clorofila son insolubles en agua pero solubles en
solventes orgánicos como el alcohol etílico y la acetona. Esto significa que el alcohol puede disolver
eficazmente estos pigmentos, facilitando su extracción de las membranas celulares de las hojas.
2. Capilaridad: En técnicas como la cromatografía, el alcohol actúa como un solvente que asciende por
capilaridad en un material poroso (como el papel), llevando consigo los pigmentos que se separan según su
tamaño y solubilidad.
3. No Polaridad: El alcohol tiene una polaridad baja, lo que le permite interactuar con los pigmentos no
polares y separarlos de otros componentes celulares que pueden ser más polares y por lo tanto menos
solubles en alcohol.
4. Volatilidad: El alcohol se evapora rápidamente a temperatura ambiente, lo que facilita la concentración
de los pigmentos después de su extracción y permite que se sequen rápidamente si se utilizan en
cromatografía.
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- ¿Qué otros métodos se utilizan para separar pigmentos?
Cromatografía en Capa Fina (TLC)
-La cromatografía en capa fina es una técnica de separación donde los componentes de una
mezcla se distribuyen entre dos fases: una fase móvil (solvente) y una fase estacionaria (placa de
sílica gel o aluminio). Es un método sencillo, rápido y económico, adecuado para la separación y
análisis de pigmentos.
Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC)
-La cromatografía líquida de alta eficacia es una técnica avanzada que utiliza una columna llena
con material adsorbente y una bomba para pasar el solvente (fase móvil) a alta presión. Es
especialmente útil para separar, identificar y cuantificar los componentes de mezclas complejas,
como pigmentos, con gran precisión y eficiencia.
Electroforesis en Gel
-La electroforesis en gel es una técnica que separa moléculas según su tamaño y carga eléctrica
mediante la aplicación de un campo eléctrico. Los pigmentos se cargan y se mueven a través de
un gel (generalmente de agarosa o poliacrilamida), permitiendo su separación y análisis.
- Explique las diferencias entre distancias y tiempos de la cromatografía de las plantas
En la distancia, se mide físicamente en unidades de longitud (cm o mm) de preferencia en una placa
o papel en cromatografía en capa fina (TLC). Respecto a los tiempos las unidades de tiempo (S o
minutos) en cromatografía de gases (GS) o líquida (HPLC).
El mas común en técnicas como TLC y cromatografía en papel, donde se observa la separación en
un medio estacionario plano. Predominante en técnicas instrumentales como HPLC y GC, donde l a
separación ocurre en una columna y los compuestos se detectan en diferentes tiempos. Las
diferencias y cómo se aplican es esencial para interpretar correctamente los resultados
cromatográficos y para seleccionar la técnica adecuada según los objetivos del análisis.
- Mencione entre 5 a 10 plantas (indicando nombre común, nombre científico, importancia)
comestibles (entre verduras y frutas diferentes a los mostrados en la clase) que contengan
carotenoides (carotenos y xantófilas).
importancia: ricas en alpha y beta-criptoxantina, que se convierten en vitamina A en
1. (Nombre común) Zanahorias (Nombre científico) Daucus carota
el cuerpo.
2. (Nombre común) Espinaca (Nombre científico) Spinacia oleracea importancia: alta en luteína y zeaxantina, beneficiosas para la salud ocular.
importancia: Buena fuente de betacriptoxantina y otros carotenoides que apoyan la
3. (Nombre común) Naranjas (Nombre científico) Citrus sinensis
salud inmunológica y reducen el riesgo de enfermedades crónicas.
4. (Nombre común) Col rizada (Nombre científico) Brassica oleracea importancia: llena de luteína y zeaxantina.
importancia: Alta en betacaroteno, el cual es crucial para la salud ocular y el
5. (Nombre común) Calabazas (Nombre científico) Cucurbita pepo
sistema inmunológico, además de proporcionar beneficios antioxidantes.
6. (Nombre común) Albaricoques (Nombre científico) Prunus armeniaca importancia: buena fuente de beta-criptoxantina y vitamina A.
7. (Nombre común) Mangos (Nombre científico) Mangifera indica importancia: ricos en beta-criptoxantina y vitamina A.
importancia: altos en beta-criptoxantina y alfa-criptoxantina, que son importantes
8. (Nombre común) Pimientos (Nombre científico) Capsicum annuum
antioxidantes y ayudan en la protección celular.
importancia: Rico en licopeno, un carotenoide con propiedades antioxidantes
9. (Nombre común) Tomates (Nombre científico) Solanum lycopersicum potentes que pueden reducir el riesgo de enfermedades cardiovasculares y ciertos
tipos de cáncer.
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CONCLUSIONES:
La extracción revela la diversidad de pigmentos presentes en las hojas, incluyendo clorofilas
y carotenoides, cada uno con roles específicos en la fotosíntesis y en la protección contra el
estrés ambiental.
Los métodos de separación de pigmentos, como la cromatografía en capa fina (TLC), la
cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) y la electroforesis en gel, ofrecen una variedad
de enfoques que permiten abordar diferentes necesidades analíticas. La elección del método
adecuado depende de factores como la naturaleza de los pigmentos, la complejidad de la
muestra y los requisitos de precisión y resolución del análisis.
Estas técnicas no solo son fundamentales en la investigación científica para el análisis y la
identificación de pigmentos en muestras biológicas, químicas y ambientales, sino que
también tienen aplicaciones prácticas significativas en industrias como la farmacéutica,
alimentaria y cosmética. La capacidad de separar y analizar pigmentos de manera eficaz
permite un control de calidad más riguroso y el desarrollo de productos innovadores.
Una variedad de plantas ricas en carotenoides en la dieta puede ofrecer múltiples beneficios
para la salud, desde mejorar la visión y fortalecer el sistema inmunológico hasta proporcionar
efectos antioxidantes y antiinflamatorios.
Las distancias se usan principalmente en técnicas como la cromatografía en capa fina (TLC)
para calcular el factor de retención (RfR_fRf), mientras que los tiempos se emplean en
técnicas instrumentales como la cromatografía líquida (HPLC) y de gases (GC) para identificar
compuestos mediante el tiempo de retención (tRt_RtR).
La cromatografía en capa fina (TLC) es útil para análisis rápidos y visuales de mezclas
complejas, mientras que la cromatografía líquida (HPLC) y de gases (GC) proporcionan una
identificación y cuantificación más precisa de los compuestos, basada en tiempos de
retención específicos lo cual permite un mejor analisis.
Al realizar la práctica pudimos observar como los diferentes colorantes vegetales de la
espinaca y el rabanito se separó, y con ello nos permitió identificar los distintos componentes
de cada uno de los pigmentos vegetales.
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4) Bibliografía consultada
Dobado, J.A. (2024). Separación de pigmentos de hojas de espinaca (cromatografía de espinaca).
Química en línea.
Pavia, DL, Lampman, GM, Kriz, GS y Engel, RG. (1999). Aislamiento de clorofila y pigmentos
carotenoides de espinacas. Introducción a las técnicas de laboratorio orgánico: un enfoque a
microescala (3ª ed.).
Ghosh, P., et al. (2022). El papel de los disolventes en la extracción de pigmentos vegetales.
Revista de pigmentos naturales, 3(4), 45-59.
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Poole, C. F. (2019). Thin-Layer Chromatography: Mass Spectrometric Detection in Pharmaceutical
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Snyder, L. R., Kirkland, J. J., & Dolan, J. W. (2010). Introduction to Modern Liquid Chromatography.
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Krinsky, N. I., & Johnson, E. J. (2005). Acciones de los carotenoides y su relación con la salud y la
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Coordinación de Estudios Generales – Facultad de Ciencias Biológicas