I.
INTRODUCCIÓN
El ácido desoxirribonucleico o mejor conocido como “ADN” es la molécula que
transporta la información genética para el desarrollo de un organismo, está presente en
casi todo organismo. El ADN está formado por dos cadenas que se enrollan entre sí,
formando una forma de escalera de caracol, por esto se le conoce como forma de
doble hélice. Cada hebra tiene una estructura hecha por grupos de azúcar como la
desoxirribosa y el fosfato. A estos azúcares se les unen cuatro bases como la adenina,
la citosina, la guanina o la timina. Las dos hebras se conectan gracias a enlaces
químicos que ocurren entre las bases antes mencionadas, algunos de estos son los
enlaces de adenina con timina y enlaces de citosina con guanina. La secuencia que
forman las bases a lo largo de la estructura del ADN codifica información biológica
necesaria, por ejemplo, las instrucciones para la formación de proteína o molécula de
ARN. (Ácido desoxirribonucleico, 2024)
Fue por primera vez aislado por el biólogo suizo Frierich Miescher en 1869. Mientras
estudiaba la composición química de los leucocitos o glóbulos blancos, se dió cuenta
de las propiedades de la sustancia y la llamó nucleína. Luego, con la identificación de
su naturaleza acídica se le cambió el nombre a ácido nucleico. Desde su
descubrimiento, el ADN ha sido objeto de estudios exhaustivos debido a su importancia
en la transmisión de características hereditarias, la evolución y el desarrollo de
organismos. En la actualidad, la extracción de ADN es una técnica fundamental en
diversos campos científicos, desde la biología molecular y la medicina hasta la
biotecnología y la criminalidad. (La historia del ADN, s/f)
La extracción de ADN consiste en un proceso por el cual se rompe la membrana celular
y nuclear de las células para liberar el ADN y aislarlo de otros componentes celulares
como las proteínas, lípidos y carbohidratos. Este procedimiento permite que el ADN
pueda ser estudiado en diferentes contextos, como la identificación de organismos, la
clonación, el diagnóstico de enfermedades genéticas, o el análisis forense. Se separa y
purifica el ADN con el fin de estudiarlo, analizarlo o manipularlo, es el punto de partida
para realizar análisis genéticos, aunque solo cuentes con pequeñas muestras o
cantidades de ADN se pueden realizar estudios completos, a la aplicación de los genes
por medio de la reacción en cadena de la polimerasa, este método permite realizar
muchas copias de un trozo de ADN. (Checa, 2020)
La práctica de extracción de ADN tiene varias implicaciones importantes. Primero,
permite comprender de manera tangible la estructura y el papel del ADN en las células.
Además, ofrece una introducción práctica a técnicas que se emplean en laboratorios de
investigación y diagnóstico clínico. El ADN de las frutas o verduras que comemos se
puede utilizar, por ejemplo, para identificar exactamente la especie o la variedad de la
cual proviene la muestra. En la industria de los alimentos el ADN se utiliza para
detectar posibles fraudes o estafas en el caso de que se trate de mezclas de carnes o
pescado, y en vez de estar hecho de eso, este hecho de vegetales o frutas. (Aoiz,
2013)
En la investigación biomédica el ADN se utiliza en el análisis y diagnóstico de pacientes
con enfermedades neurodegenerativas, cáncer y otro tipo de enfermedad. Por otra
parte, se utilizan en el estudio de las causas genéticas de las enfermedades y para el
desarrollo de medicamentos y tratamientos efectivos. Incluso se utiliza en el ámbito
forense para realizar investigaciones, secuenciar genomas, detectar bacterias y virus
en el medio ambiente, o en pruebas de paternidad al comparar 2 muestras genéticas.
Dentro de la paleontología el ADN permite la recopilación de información de antiguos
organismos que estuvieron presentes en un determinado tiempo. (Comunicación
MNCN, 2017)
II. OBJETIVOS
General:
1. Observar el ADN de frutas mediante un proceso sencillo y accesible llevado a
cabo con materiales de uso cotidiano.
Particulares:
1. Conocer la forma de extracción del ADN e identificar cómo influye y actúa cada
material que ayuda en el proceso.
2. Realizar el procedimiento de obtención de ADN con tres frutas diferentes,
evaluando la efectividad del método con cada una de estas.
III. MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales:
● Kiwi
● Plátano
● Fresa
● Detergente líquido de cocina
● Sal
● Tenedor
● Alcohol al 96
● Jugo de piña
● Colador fino
Métodos:
1. Trituración de la fruta: Aplastamos todos los trozos (100 g) con un tenedor para
formar una pasta homogénea. Colocamos dicha pasta en un vaso de precipitado.
2. Preparación de la solución de extracción: Primero pesamos con la balanza 3 g de
sal. Con una probeta preparamos 100 ml de agua destilada y 10 ml de Fairy. A
continuación, lo mezclamos todo en un matraz de Erlenmeyer
3. Detergente + fruta: Vertemos el detergente en el vaso de precipitado que
contiene la fruta y lo mezclamos todo procurando no hacer muchas burbujas.
4. Baño caliente: Ponemos agua a calentar y con un termómetro medimos la
temperatura hasta que alcanzó unos 60º C aproximadamente. Después introducimos el
vaso de precipitados con la mezcla y removimos durante unos 5’ con la ayuda de
una varilla agitadora.
5. Baño frío: Preparamos un recipiente con agua y hielo e introducimos el vaso
de precipitados. Lo dejamos durante 3’ removiendo constantemente.
6. Filtración de la solución: Preparamos un matraz de Erlenmeyer con un colador
encima y vaciamos el contenido del vaso de precipitado. A continuación, preparamos
un embudo con un papel de filtro encima y vertimos la solución obtenida
anteriormente recogiendo el líquido en un tubo de ensayo.
7. Solución + zumo de piña: Con una pipeta Pasteur tomamos 1 ml de jugo de piña y
lo añadimos a 5 ml del extracto en un tubo de ensayo. Dejamos que actuara el jugo en
la solución de 2’.
8. Solución + alcohol: Sacamos el alcohol del agua fría y preparamos en un tubo
de ensayo aproximadamente el mismo volumen de alcohol que de la solución.
9. Observación del ADN: Vertimos muy lentamente el alcohol en el tubo de ensayo
con la solución. Al cabo de pocos segundos observamos las capas bien diferenciadas.
Encima de todo estaba el alcohol, y debajo se encontraban los restos celulares de la
fruta y los otros componentes de la solución.
Todos estos pasos se repitieron con cada fruta utilizada hasta conseguir los resultados
deseados.
IV. RESULTADOS Y PREGUNTAS
Resultados:
1. Resultados obtenidos con la fresa:
En este experimento, la extracción de ADN resultó como se esperaba. Al finalizar el
proceso, se observó una mezcla bien separada en tres capas. En el fondo, los restos
de la fresa y detergente formaban una capa de color rojizo opaco. Sobre ella, la capa
media era más clara, con un aspecto más opaco.
Residuos de la fresa:
Lo más notable se encontraba en la capa superior, donde el alcohol transparente
formaba una capa separada, sobre la cual se podía ver partes más claras, o sea, el
ADN. El mismo aparecía como una masa fibrosa, blanquecina y con una textura
viscosa, flotando en el alcohol. Una cantidad de ADN extraído fue visible en la capa de
alcohol. Los resultados indicaron que la extracción se realizó correctamente.
1.- Alcohol 2.- ADN
2. Resultados obtenidos con el plátano:
La mezcla resultante mostró una clara separación en dos capas bien diferenciadas. En
la parte inferior, se encontraba una capa de color blanco amarillento con una apariencia
translúcida, compuesta por los restos de la fruta triturada y la solución de jabón. Esta
capa tenía una consistencia más densa y opaca.
Por otro lado, en la parte superior, se veía el alcohol, completamente transparente y
menos denso que la capa inferior. Este alcohol formaba una capa separada que flotaba
por encima de la mezcla de restos de fruta y solución de jabón, permitiendo observar
su claridad. Ocupa la mayor parte del recipiente.
Dentro de esta capa de alcohol, se podían ver unas cuantas partículas blancas
flotando. Estas partículas eran pequeñas y dispersas, lo que indicaba una cantidad
limitada de ADN extraído. La cantidad obtenida fue mínima, por lo que las partículas
blancas eran apenas visibles a simple vista.
3. Resultados obtenidos con el kiwi:
No logramos completar todo el proceso de extracción de ADN, ya que el último paso
que hicimos fue poner la mezcla en el baño frío. Después de triturar la fruta y añadir el
detergente y agua destilada, calentamos la mezcla como se indicaba en las
instrucciones, luego lo pusimos en agua fría, sin embargo no se completó el tiempo de
enfriado, por lo que no finalizamos esta última etapa del experimento.
Preguntas:
1. ¿Por qué se tiene que triturar la fruta?
Triturar la fruta rompe las paredes celulares, liberando por consiguiente a las células.
Este paso es esencial para exponer los componentes internos y facilitar la liberación
del ADN durante el proceso de extracción.
2. ¿Cuál es la función del detergente en el proceso?
El detergente rompe las membranas celulares y nucleares de las células de la fruta, ya
que están compuestas principalmente de lípidos (grasas). Esto permite que el ADN
quede libre dentro de la solución.
3. ¿Qué función tiene el uso de baños fríos y calientes durante la extracción?
El baño caliente acelera la disolución de las membranas celulares y favorece la
liberación del ADN. El baño frío, por su parte, detiene las reacciones enzimáticas que
podrían degradar el ADN, preservándolo para su posterior observación.
4. ¿Cuál es la función de la piña en la extracción?
El jugo de piña contiene bromelina, una enzima proteolítica que degrada las proteínas
que podrían estar unidas al ADN. Esto facilita la separación del mismo, dejándolo más
puro y visible.
5. ¿Qué acción tiene la sal en el proceso?
La sal ayuda a neutralizar las cargas negativas del ADN, lo que permite que las
moléculas del ADN se agreguen y sean más fáciles de precipitar en la interfase entre el
alcohol y la solución acuosa.
6. ¿Por qué se tiene que usar alcohol en la extracción?
El ADN no es soluble en alcohol, especialmente a bajas temperaturas. Al añadir alcohol
frío, el ADN se precipita y se vuelve visible como filamento blancos en la interfase entre
el alcohol y la solución acuosa. Esto hace posible su separación y observación.
V. DISCUSIÓN
Algunos factores que pudieron haber afectado en la práctica de extracción que pudimos
recopilar son el tiempo que se calentó la mezcla de la fruta con el detergente y el agua
destilada. Un tiempo de calentamiento diferente al necesario puede haber afectado la
eficacia de la ruptura celular y, por lo tanto, la liberación de ADN. Otro factor importante
es el grado de concentración del alcohol utilizado. En este experimento se empleó
alcohol al 70%, mientras que las instrucciones recomendaban utilizar alcohol al 96% de
concentración. La concentración más baja puede haber limitado la precipitación del
ADN, ya que no tenía la concentración necesaria. Además, el tiempo que la mezcla
estuvo expuesta al calor también podría haber sido un factor. Si el calentamiento no fue
el adecuado, es posible que las células no se rompieran de manera óptima, lo que
resultaría en una menor cantidad y calidad de ADN obtenido.
Otro factor que pudo haber influido en los resultados del experimento fue el tiempo de
espera que dejamos la mezcla antes de añadir el alcohol. Es posible que no se haya
dado el tiempo suficiente para que el detergente rompiera adecuadamente las
membranas celulares. Según la bibliografía y las instrucciones que utilizamos de
referencia, el tiempo de espera recomendado era mayor. Además, las cantidades que
usamos en la mezcla también podrían haber afectado la extracción. Utilizamos una
cantidad de detergente que quizás no fue suficiente para descomponer completamente
las membranas celulares de la fruta. Por último, el hecho de que el baño en frío no
estuviera suficientemente bajo en temperatura también puede haber influido en los
resultados. La temperatura del alcohol es importante para lograr la separación del ADN.
Si el alcohol no se mantuvo a una temperatura suficientemente baja, la precipitación del
ADN podría haberse visto afectada, resultando en una menor cantidad de material
genético visible, como fue en nuestro caso.
VI. CONCLUSIONES
1. Estefanía. Al realizar la práctica, todos los pasos se realizaron correctamente,
por lo que logramos el objetivo planteado, la extracción de ADN se cumplió y
pudimos observar el material genético de las frutas (kiwi, fresa y plátano). Sin
embargo, la calidad del ADN extraído tuvo dependencia de factores como la
precisión en la temperatura y el cuidado durante la manipulación de los
reactivos, eso provocó que en una de las extracciones no se detallara muy bien
la prueba, pero en términos generales, el procedimiento fue el adecuado para
obtener un resultado satisfactorio.
2. Abiud. La extracción de ADN en las frutas tiene un procedimiento relativamente
sencillo que permitió visualizar el material genético de manera tangible. A través
de un proceso de maceración, mezclado con detergente y sal, se pudieron
romper las membranas celulares y liberar el ADN. Posteriormente, al añadir el
alcohol frío, el ADN se precipitó en forma de hilos visibles a simple vista. El
resultado fue positivo y ayudó a entender mejor la estructura celular y
componentes del ADN.
3. Lyssa. Tras realizar la práctica se llegó a un resultado bastante bueno, ya que se
pudo extraer el ADN de todas las frutas, con el único inconveniente de que una
de las muestras no fue tan visible como las demás. Esto pudo deberse a
factores como el tiempo en el baño María, la temperatura o concentración del
alcohol, etc. De haber tenido un poco más de organización y tiempo estoy
segura de que el resultado hubiera sido completamente perfecto.
4. Tomás. Tras realizar la práctica y extracción de ADN de las diversas frutas
considero que se cumplió el objetivo, ya que logramos sacar las muestras
correctamente. Sin embargo, esto conllevó algunas complicaciones en cuestión
de tiempo debido a que, pese a ser un proceso corto, se tenía que repetir por
cada fruta e hizo que tardáramos más de lo esperado; sumando el tiempo de
espera en lo que se desocupaba el equipo que requeríamos en el momento
provocó que una de las muestras de ADN no terminara por apreciarse del todo.
5. Diego. Al dejar reposar las diferentes muestras se iba apreciando poco a poco la
separación del ADN, en forma de pequeños hilos que se apreciaban sin
necesidad de un microscopio. Cumplimos los objetivos y el resultado fue exitoso
en los primeros dos casos, mas en el último tuvimos algunas complicaciones
debido a que el tiempo para realizar la práctica se nos estaba agotando, por lo
que tuvimos que trabajar con más presión y no logramos que transcurriera el
tiempo estipulado para cada fase del experimento. Esto ocasionó que la última
muestra no se apreciara tan bien como las anteriores, sin embargo, con un poco
más de tiempo y preparación seguramente hubiéramos podido conseguir un
resultado un poco mejor.
6. Gustavo. En esta práctica se logró separar la mezcla en dos capas: una inferior
compuesta por los restos de fruta y jabón, y otra superior de alcohol. En la capa
de alcohol se podían ver algunas partículas blancas flotando, lo que confirma
que sí se extrajo el ADN. Esto también permitió observar cómo las diferentes
densidades de los líquidos provocan su separación en capas. Sin embargo, el
ADN obtenido fue difícil de ver a simple vista. En general, se pudieron cumplir
los objetivos de la práctica, con algunos ajustes en el procedimiento o en las
cantidades de los materiales utilizados, se podrían haber obtenido una mayor
cantidad de ADN, lo que facilitaría su observación.
7. Sofía. Después de haber realizado la práctica y extraer el ADN, considero que
se realizó correctamente. Logramos separar la muestra de ADN de las frutas,
aunque no pudimos acabar todas de la misma manera y tuvimos algunos
problemas al momento de filtrar debido a que este no dejaba caer mucho
material y solo pudimos usarlo una vez, no contábamos con muchos utensilios y
teníamos que esperar nuestro turno para poder calentar la mezcla o limpiar las
herramientas para usarlos de nuevo. Por lo tanto, gracias a las prisas y al tiempo
limitado, el ADN no se pudo ver tan claramente en todas las muestras llevadas a
cabo.
VII. REFERENCIAS
Aoiz, G. (27 de septiembre del 2013). Descubre el ADN de las frutas que comemos.
Digital CSIC. [Link]
Cervantes, J. (Octubre del 2023). Obtención de ácido desoxirribonucleico (ADN) útil
para análisis genético, a partir de uñas recortadas. Revista Médica Herediana.
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#:~:text=La%20obtenci%C3%B3n%20de%20%C3%A1cido%20desoxirribonucleico,Ingl
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Checa, A. (30 de enero del 2020). Extracción del ADN. Conogasi.
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Comunicación MNCN. (27 de abril del 2017). Museo Nacional de Ciencias Naturales.
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Merino, J., Gallego, R. & Ochoa, J. (Enero del 2019). Extracción de ADN con material
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Recursos para la Educación. Centro de Estudios Científicos. (s/f). La historia del ADN.
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Virtual Lab. (s/f). El ADN de las fresas.
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