Instituto Politécnico Nacional.
Escuela Superior de Ingeniería Química e Industrias
Extractivas.
Departamento de ingeniería química industrial.
“PRACTICAS DE CROMATOGRAFIA DE LIQUÍDOS”
Materia: Laboratorio de técnicas de separación.
Profesora: Yair Cruz Narváez.
Alumno: Ángel Gabriel Catzoli Contreras.
Boleta: 2021320208
Fecha: 21 de octubre, 2024
Grupo: 3IV7B Semestre: 25-1
1
ÍNDICE:
Contenido
PRÁCTICA 1: “Partes del equipo HPLC”................................................................................3
OBJETIVO:......................................................................................................................... 3
MARCO TEÓRICO:............................................................................................................. 3
METODOLOGÍA:................................................................................................................ 4
RESULTADOS:................................................................................................................... 4
CONCLUSIONES:............................................................................................................... 4
PRÁCTICA 2: “Encendido, purga y estabilización”...............................................................4
OBJETIVO:......................................................................................................................... 4
MARCO TEÓRICO:............................................................................................................. 5
METODOLOGÍA:................................................................................................................ 5
RESULTADOS:................................................................................................................... 5
CONCLUSIONES:............................................................................................................... 5
PRÁCTICA 3 y 4: “Validación de parámetros”......................................................................6
OBJETIVOS:....................................................................................................................... 6
MARCO TEÓRICO:............................................................................................................. 6
METODOLOGÍA:................................................................................................................ 7
RESULTADOS:................................................................................................................... 7
CONCLUSIONES:............................................................................................................. 10
Práctica 5: “Extracción en fase sólida”.............................................................................. 11
OBJETIVOS:..................................................................................................................... 11
MARCO TEÓRICO:........................................................................................................... 11
METODOLOGÍA:.............................................................................................................. 11
RESULTADOS:................................................................................................................. 12
CONCLUCIONES:............................................................................................................. 12
BIBLIOGRAFÍA:................................................................................................................... 13
2
PRÁCTICA 1: “Partes del equipo HPLC”
Fecha de realización: 26 de agosto, 2024
OBJETIVO:
Identificar y comprender la función de cada uno de los componentes principales del sistema
de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), incluyendo la bomba, inyector, columna,
detector y sistema de procesamiento de datos (Software), así como aprender los principios
básicos de su funcionamiento y participación en la separación y análisis de muestras
líquidas.
MARCO TEÓRICO:
3
RESULTADOS:
4
CONCLUSIONES:
Se conocieron las diferentes partes del HPLC y cómo funcionan. Se identificaron elementos
importantes como la bomba, la columna y el detector, y se explicó el papel que cada uno
tiene en el análisis de muestras. Al aprender sobre estas partes, se pudo ver lo crucial que es
cada componente para que el equipo funcione bien.
PRÁCTICA 2: “Encendido, purga y estabilización”
Fecha de realización: 2 de septiembre, 2024.
OBJETIVO:
Realizar correctamente el encendido, purga y estabilización del sistema de cromatografía
líquida de alta resolución (HPLC), con el propósito de comprender la importancia de cada
paso en la preparación del equipo para análisis cromatográficos, asegurando un rendimiento
óptimo y el correcto funcionamiento del sistema.
5
MARCO TEÓRICO:
METODOLOGÍA:
Enlace del video: [Link]
RESULTADOS:
CONCLUSIONES:
Se realizaron los procesos de encendido, purga y estabilización del HPLC, aprendiendo a
encender el equipo y a eliminar burbujas de aire del sistema. Una vez que el equipo estuvo
listo, se observaron los ajustes necesarios para un análisis efectivo. Se habló sobre los
perfiles isocráticos, donde se usa un solvente con la misma composición durante todo el
proceso, lo que facilita la separación de compuestos.
6
PRÁCTICA 3 y 4: “Validación de parámetros”
Fecha de realización: 09 de septiembre, 2024.
OBJETIVOS:
Realizar la validación de los parámetros de operación del sistema HPLC, mediante el uso de
estándares de benceno y tolueno, con el propósito de asegurar el correcto funcionamiento
del equipo en la detección y cuantificación de estos compuestos diferentes aplicaciones
analíticas.
MARCO TEÓRICO:
7
METODOLOGÍA:
Enlace del video: [Link]
RESULTADOS:
Condiciones del experimento 1: Isocrático.
Metanol: 80% Agua: 20%
Flujo: 1mL/min
λ = 248 nm
t= 10 min
zq= 1 min
Condiciones del experimento 1: Isocrático.
Metanol: 80% Agua: 20%
Flujo: 1mL/min
λ = 230 nm
8
t= 10 min
zq= 1 min
Condiciones del experimento 3
Metanol: 90% Agua: 10%
Flujo: 1mL/min
λ = 248 nm
tc= 10 min
zq= 1 min
paso: 2 min
9
Cálculos
Tiempo de retención:
t R , A=3.084 min
t R , B =3.242min
t R , C =3.546 min
t M =2.3 min
w=1.6 min
Resolución:
( t R )B −( t R ) A
Rs=
W
3.242 min−3.084 min
Rs= =0.0987
1.6 min
3.546 min−3.242 min
Rs= =0.1900
1.6 min
Plato teórico:
10
( )
2
tR
N=16
W
( )
2
3.084 min
N A =16 =59.4441 platos
1.6 min
( )
2
3.242 min
N B=16 =65.6910 platos
1.6 min
( )
2
3.546 min
N C =16 =78.5882 platos
1.6 min
CONCLUSIONES:
Se validaron parámetros en HPLC utilizando diferentes mezclas de metanol y agua, junto con
estándares de benceno y tolueno. Se notó que cambiar la composición del solvente afecta la
separación de los compuestos, lo que permitió ajustar las condiciones para mejorar la
claridad y el tiempo de análisis. Esto resalta la importancia de verificar los parámetros para
obtener resultados precisos y confiables.
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Práctica 5: “Extracción en fase sólida”
Fecha de realización: 07 de octubre, 2024.
OBJETIVOS:
Llevar a cabo el tratamiento adecuado de una muestra coprológica utilizando una bomba de
vacío de líquidos, con el fin de optimizar la extracción y preparación de la muestra para
análisis posteriores, garantizando la eliminación de impurezas y una manipulación eficiente.
MARCO TEÓRICO:
METODOLOGÍA:
Enlace del video: [Link]
12
RESULTADOS:
CONCLUCIONES:
El análisis de muestras coprológicas mediante HPLC permite identificar compuestos de
manera precisa. El uso de la bomba de vacío en la filtración es esencial para eliminar sólidos
de la muestra, asegurando un análisis eficiente y resultados confiables al evitar
obstrucciones en la columna del HPLC. Esto mejora la calidad y precisión del proceso
cromatográfico.
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BIBLIOGRAFÍA:
Cela, R., Lorenzo, R. A., & Casais, M. del C. (2002). Técnicas de separación en
Química Analítica. Síntesis, S. A.
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