LABORATORIO DE ANALISIS CLINICO CÓDIGO:
COLCAPIRHUA LACC- MP - 03
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS
VERSIÓN : 01
PROCEDIMIENTOS DEL ÁREA INMUNO-SEROLOGIA REVISIÓN: 00
PROTEINA C REACTIVA PCR (HUMAN) Página 1 de 3
1. OBJETIVO
Determinar en forma cualitativa la proteína C reactiva en suero mediante la prueba rápida de
aglutinación en látex.
2. CAMPO DE APLICACIÓN
Área de inmuno-serologia
3. RESPONSABLE
Bioquímicos (as) en cargo laboratorio clínico.
4. DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO:
Fundamento:
La prueba PCR se basa en la reacción inmunológica entre la proteína C reactiva de la muestra del
paciente o suero control y el correspondiente anticuerpo anti- PCR humano, que recubre las partículas
de látex. Una reacción positiva es indicada por una marca y visible aglutinación de las de látex. Una
reacción positiva es indicada por una macada y visible aglutinación de las partículas de látex en el
área de la lámina.
La prueba PCR se basa en la reacción inmunológica entre la Proteína C reactiva del paciente o suero
control y el correspondiente anticuerpo anti- PCR humano
Una reacción Positiva es indicada por una marca y visible aglutinación de las partículas de látex.
Muestra:
La muestra a usarse es cuero libre de contaminación, hemolisis y fuertemente lipemicos: obtenido por
la punción venosa o capilar de la tradicional.
Equipos:
Rotor automático entre 100-120 r.p.m. centrifuga y reloj.
Reactivos
El reactivo CRP Látex PCR en suspensión mezclada con partículas de poliestireno (inerte).
Recubierta con anticuerpos mono específicos anti humano PCR.
Suero control Positivo y control Negativo, y buffer glicina NaCI, listos para usar.
Materiales:
Micropipetas, tips, laminas con áreas de fondo oscuro o placa de vidrio de de fondo negro y
aplicadores.
ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:
DRA. NOHEMY DÁVILA TORRICO DR. JOSE SERGIO QUISPE QUINTEROS DR. JOSE SERGIO QUISPE QUINTEROS
FECHA: 01 01 2017 FECHA: 01 01 2017 FECHA: 01 01 2017
DIRECCIÓN: Av. Blanco Galindo Km. 8 Barrio Canadá TELF. 4269375 (EMERGENCIA)
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Procedimiento
Determinación Cualitativa
Atemperar reactivos y muestras y homogeneizar el reactivo suavidad.
En una placa de vidrio de fondo negro poner:
Colocar en la lámina:
CONTROL POSITIVO CONTROL NEGATIVO DESCONOCIDO
Muestra 40 ul 40 ul 40 ul
Reactivo PCR (látex) 1 gota 1 gota 1 gota
Mezclar con un aplicador desechable, procurando extender la mezcla en forma circular por
toda la superficie interior del círculo.
Agitar la tarjeta a 100 r.p.m. durante 2 minutos. Mezclar la placa de atrás hacia delante por 2
minutos o colocar en rotor a 100rpm
Pasado este tiempo observar la presencia de aglutinación, bajo luz artificial.
La aglutinación indica un contenido de PCR de más de 6 mg/l en la muestra sin diluir.
En este caso se debe realizar la prueba semi-cuantitativa, para saber el título de la muestra
Determinación Semi-cuantitativa:
Realizar las respectivas diluciones de la muestra de acuerdo al siguiente esquema:
DILUCIÓN PROCEDIMIENTO CONCENTRACIÓN (mg/L)
1/2 40ul sol. Fisiológica + 40ul suero 12
1/4 80ul sol. Fisiológica + 40ul suero 24
1/8 120ul sol. Fisiológica + 40ul suero 48
1/16 160ul sol. Fisiológica + 40ul suero 96
1/32 200ul sol. Fisiológica + 40ul suero 192
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1/64 240ul sol. Fisiológica + 40ul suero 384
A partir de la disolución ¼ realizar la disolución en tubo y tomar solo 40ul de la respectiva dilución.
Una vez realizando el mismo proceder de la misma forma como en la determinación cualitativa
expresar los resultados de acuerdo al título de la dilución correspondiente en mg/l.
Interpretación de resultados:
En caso positivo aparece una aglutinación visible macroscópicamente.
Leer el título en la última dilución que presenta una aglutinación visible. Multiplicar el título por el factor
de conversión 6 y reportar el resultado en mg/l
Procesar simultáneamente control positivo y negativo.
Calculo de resultados:
La concentración aproximada de PCR en la muestra del paciente es calculada como sigue: Leer el
título en la última dilución, que presente una aglutinación visible.
Multiplicar el titulo por el factor 6.
Y reportar el resultado en mg/l
PCR=Titulo de laUltima Dilucion∗Factor ( 6 )
Ejemplo: Titulo 1/16=concentración de PCR
16X6 = 96 mg/L.
Valores de referencia:
Negativo
Positivos mayores a 6 mg/l.
FORMULARIOS Y REGISTROS
Cuadernos de área
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