República Bolivariana de Venezuela
Universidad de los Andes
Facultad de Ciencias
Departamento de Química
Laboratorio de Química Orgánica 1
Práctica № 08 CROMATOGRAFÍA DE COLUMNA
Br. Eliana Lobo
CI 26444570
Prof. Luis Rojas
Observaciones experimentales
Al adicionar etanol a la pasta de tomate y agitar, la solución se tornó amarillo mostaza
al exprimir el exceso de etanol de la pasta de tomate dicha pasta paso a ser de un color intenso
rojo
Durante la preparación del extracto de zanahoria al agregar CH2Cl2 y agitar la solución se tornó
naranja fuerte
La zanahoria era inicialmente de naranja claro luego de agregar diclorometano se coloro naranja
pálido
Al añadir la mezcla de concentrado de zanahoria y tomate el pigmento amarillo fue el primero
en bajar luego el rojo
figura 2 (foto de columna)
Tabla de resultados
A continuación se presentan los datos correspondientes obtenidos y calculados de la experiencia
Tabla 1. Tabla de extractos usados
Zanahoria pesada (2,07 ± 0,01g)
Solvente usado en la zanahoria 10 ml de CH2Cl2
Pasta de tomate pesada (2,55 ± 0,01g)
Solvente usado con la pasta de tomate 20 ml etanol para deshidratar y 20 ml de Ch2CL2
para extraer
Masa de silica usada en la columna (3,00 ± 0,01) g
Tamaño de la columna (13,6 ± 0,1 ) cm
Tabla 2. Valores de Rf calculados para Licopeno y B-caroteno
Color de pigmento Rf calculados
Rojo 0,15
Amarillo 0,51
Figura 3 Colores de los pigmentos Figura 4. Extracción de los
pigmentos
A continuación, se muestran los espectros obtenidos durante la practica
Espectros teóricos reportados por la bibliografía
Análisis y Discusión de resultados
La extracción de los pigmentos vegetales licopeno y β-caroteno se realiza previa deshidratación de los
tejidos vegetales. Dichos tejidos presentan un alto contenido de agua que debe ser extraído para
permitir la penetración total del solvente sobre la muestra vegetal y extraer el material soluble de
interés. Durante la cromatografía de columna, se evidenció que el β-caroteno se desplaza más rápido
que el licopeno, ya que el β-caroteno posee una menor polaridad y una mayor solubilidad en la fase
móvil utilizada en el proceso (9,5:0,5 éter de petróleo y CH2Cl2). Es decir, tiempos de retención más
cortos requieren una fase móvil de menor polaridad y, por ende, mayor velocidad.
Seguidamente, se realizó la cromatografía en capa delgada (TLC), y se obtuvieron los valores reflejados
en la Tabla 2. En cuanto al pigmento extraído de la pasta de tomate y la zanahoria, el licopeno presenta
una movilidad relativa Rf teórico de 0,15. Al utilizar el mismo disolvente en el laboratorio, se obtuvo el
mismo valor durante la experiencia. Cada compuesto tiene un valor Rf teórico único bajo ciertas
circunstancias cromatográficas, y este valor, junto con los espectros UV-VIS, resulta útil para la
identificación y determinación de la pureza de un compuesto en cromatografía. Esto establece que se
separó correctamente el licopeno de la pasta de tomate.
En cuanto al Rf del β-caroteno, no se encontraron fuentes teóricas para comparar. Sin embargo,
basándonos en los resultados de la TLC, se observa una separación de las manchas sin cola y con un Rf
equivalente para la muestra del extracto de zanahoria sola, en comparación con la muestra que contiene
el licopeno y el β-caroteno.
Al observar los resultados obtenidos para el espectro del pigmento rojo, se aprecia que los picos son
característicos del licopeno, mostrando similitud con el espectro reportado en la bibliografía, donde los
picos se encuentran entre 400 y 500 nm. Este resultado se asocia con la pureza del compuesto extraído,
concluyendo que se separó correctamente el licopeno mediante la cromatografía de columna.
En el espectro para el pigmento amarillo, de igual manera, se pueden observar los picos característicos
correspondientes al β-caroteno, encontrando una gran similitud entre el espectro teórico reportado y el
experimental. Además, concuerda con el color amarillo característico del β-caroteno, estableciendo que
se realizó correctamente la extracción del β-caroteno de la zanahoria mediante la cromatografía de
columna.
Conclusiones
Se logro separar el b-caroteno y licopeno de sus fuentes de origen natural y se comprobó
mediante espectro uv-vis la pureza de los mismos
Se estableció haciendo uso de la TLC la eficiencia de la separación por cromatografía de columna
haciendo comparación de sus Rf y analizando la separación y forma de sus manchas
Bibliografía
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