Microscopio

1. Definición
Es un instrumento que tiene como finalidad la observación de estructuras mediante un
sistema de lentes que permiten su aumento, los cuales no pueden ser vistos por el alcance
ocular del ser humano.
El poder de resolución del ojo humano es de aproximadamente 1000 micrómetros, lo cual
es limitado. Es por ello que se desarrolló este invento para suplir esa importante necesidad
y favorecer en el avance de la ciencia.
2. Partes
Un microscopio consta de dos partes: sistema óptico y sistema mecánico
a. Sistema óptico:
- Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.
- Objetivo: Lente situada cerca del espécimen que amplía su imagen.
- Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre el espécimen.
- Diafragma o iris: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
- Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

b. Sistema mecánico: Se subdivide en dos partes: sistema de soporte o estativo y

sistema de ajuste.

o Sistema de soporte o estativo:

- Pie: Es la base del microscopio o brazo, une el pie con el tubo
- Tubo: En sus extremos se encuentran alojados oculares y objetivos
- Platina: Es una placa horizontal que sostiene las preparaciones a
observar.

o Sistema de ajuste:
- Anillo: Ajuste de los oculares
- Tornillo de ajuste: Tenemos al macrométrico que aproxima el enfoque y el
micrométrico que consigue el enfoque correcto
- Tornillo de elevación del condensador: Se utiliza para aumentar la
iluminación o para reducirla.
- Palanca de cierre del diafragma: se emplea para reducir o aumenta el
valor de entrada de luz.
- Regulador de intensidad de lámpara.
 3. TIPOS DE MICROSCOPIO

1. Microscopios según el sistema de iluminación

1.1. Microscopio óptico

Este tipo de microscopio permite ver la muestra mediante luz visible a través de un foco de
luz que apunta en dirección a la muestra. Esta luz es conducida por medio del objetivo y del
ocular lo cual permite la formación de la imagen en la vista del observador. El máximo
aumento que se obtiene con este microscopio es de alrededor de 1500x.
Su característica principal es que la luz visible va a permitir la observación de la muestra,
mediante un haz de luz que ilumina el objeto, lo atraviesa y este es conducido hacia el ojo
del humano que observa con el sistema de lente una ampliada imagen.
Este microscopio demuestra su eficacia en diferentes campos de la ciencia donde la
organización y estructura microscópica es muy trascendental, como en el área de la
química, física, geología y sobretodo en la biología. Su uso en el laboratorio es muy
importante permitiendo emitir diagnósticos, diferenciar estructuras cristalinas, pigmentos
lípidos, proteínas, etc
1.2. Microscopio electrónico
A diferencia del microscopio óptico la muestra se ilumina a través de electrones, los cuales
impactan contra la muestra dentro de una cámara de vacío de modo que no es posible
observar muestras biológicas vivas. Su principio de funcionamiento se basa en capturar los
electrones dispersados u omitidos por la muestra y así poder reconstruir una imagen. La
ventaja principal de este tipo de microscopio es que puede obtenerse un nivel de aumento
muy superior al del resto de microscopios. Tienen mayor resolución que el microscopio
óptico.
Los dos tipos de microscopio electrónicos principales son el microscopio electrónico de
barrido y el microscopio electrónico de transmisión.
La característica de este microscopio es que se utiliza el haz de electrones en lugar de rayos
de luz, dado que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz
por ende pueden mostrar estructuras mucho más pequeñas. Las lentes son
electromagnéticas.
La principal función del microscopio electrónico de transmisión es estudio de los metales,
minerales y el estudio de las células a nivel molecular. Siendo así un papel muy importante
en la industria de la metalurgia. A su vez se utiliza en la microbiología, para observar la
estructura de los virus. También es usado en la anatomía patológica, para diagnosticar
partiendo de la ultra estructura celular.
 1.3. Microscopio de luz ultravioleta
La iluminación de la muestra es a través de la luz ultravioleta, la cual tiene una longitud de
onda más corta que la luz visible utilizada en los microscopios ópticos. La ventaja principal
es que puede alcanzarse una resolución mejor que con luz visible y su contraste obtenido en
la muestra es distinto que en los microscopios ópticos, pudiéndose observar muestras que
aparecen transparentes si son observadas con luz visible.
La imagen en estos microscopios no puede ser vista directamente a través de los oculares,
sino que se observa en pantallas de fluorescencia o digitales.
Estos microscopios se utilizan en todo tipo de campos entre los que destacan las
aplicaciones en la industria farmacéutica y en la producción de materiales semiconductores.
También se emplea en ciencia forense para el análisis de ADN, drogas y estudios de
evidencias.
1.4. Microscopio de luz polarizada (microscopio petrográfico)
Este microscopio es en realidad un tipo de microscopio óptico al que se la han añadido dos
polarizadores, lo que significa que la onda de luz utilizada para observar la muestra tiene
una dirección de oscilación concreta. Este tipo de microscopio es muy útil para observar
estructuras cristalinas de rocas y minerales.
Mediante el microscopio de luz polarizada es posible obtener información respecto a la
estructura a nivel molecular. Se utiliza para el estudio de células vivas. Gracias a este
microscopio se obtienen datos referidos a la anisotropía.
Este tipo de microscopio se usa para poder identificar sustancias cristalinas (minerales) o
fibrosas (como el citoesqueleto), sustancia amiloide, asbesto, colágeno, cristales de uratos,
queratina, sílice, polen, etc.
1.5. Microscopio de fluorescencia
Son aquellos que utilizan las propiedades de fluorescencia para generar una imagen de la
muestra, permitiendo observar sustancias que emiten luz propia cuando son iluminadas con
una longitud de onda determinada. Para ello la muestra es habitualmente iluminada con una
lámpara xenón o con una lámpara de vapor de mercurio. Estos microscopios incorporan
además filtros de luz para aislar la luz correspondiente a la muestra
La fluorescencia es un fenómeno que implica la absorción y la emisión de una pequeña
gama de ondas de luz por una molécula fluorescente conocida como un fluoróforos. Son
numerosas las aplicaciones como, por ejemplo: el marcaje de moléculas en células y
tejidos para su caracterización e identificación, el Estudio de células normales y
patológicas, estudios inmunológicos. mineralogía.
 2. Microscopios según el número de lentes

2.1. Microscopio simple

Este microscopio permite observar de forma aumentada la imagen de un objeto. Este tipo
de microscopio dispone de un solo lente y es más habitualmente conocido como lupa.
Durante el siglo XVII, Antonie van Leeuwenhoek lo utilizó. Es el microscopio más básico,
tiene poco alcance.
Los microscopios simples o lupas son también muy utilizadas entre los coleccionistas de
monedas, relojería, dermatología, etc
2.2. Microscopio compuesto
Este tipo de microscopio utiliza dos sistemas de lentes alineados; el primero situado en el
objetivo y el segundo en el ocular lo que permite la producción de una imagen ampliada
Se emplean para examinar las células de una muestra de sangre o un tejido. Hay una clase
especial de microscopios compuestos, los que se llaman lupas binoculares, que se usan para
ampliar modestamente (de 4 a 40 veces en general) y para manipular objetos pequeños y
opacos iluminados desde el lado del observador, tales como insectos, flores, joyas o el
molde inicial de una moneda.

3. Microscopios según la transmisión de la luz

3.1. Microscopio de luz transmitida
Para esta clase de microscopios es necesario preparar la muestra cortándola en láminas muy
finas. La muestra se ilumina desde debajo la platina. La preparación de la muestra hace que
esta sea semitransparente y parte de la luz pueda atravesarla y llegar al objetivo para ser
observada posteriormente a través del ocular. En general este es el sistema de iluminación
más utilizado entre los microscopios ópticos.
Sirve para muestras de preparados poco complejos, translúcidos, finos y con mucho
contraste como los tejidos vegetales, parásitos y células coloreadas. Hay varios tipos de este
microscopio básico que pueden incluirse en diferentes estudios de laboratorios para
soluciones sencillas.
3.2. Microscopio de luz reflejada
En este caso la luz ilumina la muestra y parte de esta es reflejada y dirigida al objetivo. De
este modo es necesario iluminar la muestra desde la parte superior de la platina. Este tipo
de microscopía es utilizada para examinar materiales opacos como pueden ser estructuras
metálicas, materiales cerámicos, etc. Existen microscopios ópticos que permiten los dos
tipos de iluminación de modo que es posible observar tanto muestras semitransparentes
como opacas. Este tipo de microscopio se usa para poder identificar sustancias cristalinas
(minerales) o fibrosas (como el citoesqueleto), sustancia amiloide, asbesto, colágeno,
cristales de uratos, queratina, sílice, polen, etc.
4. Microscopios según el número de oculares

4.1. Microscopio monocular

Este microscopio posee un solo ocular. Su desventaja principal es que puede resultar un
poco incómodo si tiene que utilizarse durante largos periodos de tiempo. Por este motivo
los microscopios monoculares no son en general utilizados en ámbitos profesionales. Las
partes básicas de este microscopio son las mismas que en un microscopio óptico básico.
Se recomienda su utilización para observar pequeños animales, partes de plantas como
semillas o materiales como arena, azúcar, tierra, entre otros.
4.2. Microscopio binocular
Estos microscopios disponen de dos oculares. Este es el tipo de microscopio más utilizado
en los laboratorios de investigación. Al tener dos oculares reduce la tensión del ojo, ya que
no hay que cerrar un ojo para observar la muestra, como sucede con los microscopios
monoculares. Con este microscopio se pueden observar imágenes bidimensionales. El
aumento de los microscopios binoculares suele estar entre 4x y 100x.
4.3. Microscopio trinocular
El microscopio trinocular está equipado con dos oculares para observar la muestra además
de un tercer ocular para conectar una cámara, la cual puede conectarse a un ordenador para
ver las imágenes en tiempo real.
5. Microscopios según la configuración de los elementos

5.1. Microscopios digitales

Son aquellos que capturan una imagen digital de la muestra conectando una cámara digital
en lugar del ocular. Normalmente deben conectarse al ordenador para poder visualizarlas.
Los microscopios digitales se conectan a un monitor de PC para mostrar los resultados en
tiempo real y proporcionar imágenes de alta calidad. Se utilizan en la inspección de
pastillas de frenos en automóviles, detección de documentos falsificados en el
cumplimiento de la ley, inspección de pines de conector durante la fabricación, inspección
de uniones por hilos metálicos para semiconductores durante la fabricación, etc
5.2. Microscopio estereoscópico
Es un tipo de microscopio poseen dos oculares que permiten observar la muestra de forma
tridimensional. La imagen de la muestra que llega a cada ocular es ligeramente distinta de
modo que cuando se combinan se consigue el efecto 3D. El aumento es inferior al que se
consigue con un microscopio óptico convencional, sin embargo, los microscopios
convencionales solo permiten una observación bidimensional de la muestra.
Los microscopios estereoscópicos son en general microscopios de luz reflejada. Es decir,
un foco ilumina la muestra y la luz reflejada por la muestra es observada a través de los
objetivos y oculares. Estos microscopios tienen dos lentes distintas para cada ocular así
logra el efecto 3D ya que cada ojo recibe una imagen sensiblemente distinta al otro.
El campo de aplicación de este instrumento es muy amplio electrónica, relojería,
microcirugía, control de calidad de materiales, entre otros.
6. Otros tipos de microscopios

6.1. Microscopio confocal

Este es un tipo de microscopio de fluorescencia. En lugar de iluminar la muestra de forma
global se ilumina punto a punto de forma sucesiva y se reconstruye la imagen al final del
proceso. Este proceso de escaneado de la muestra es similar al que se produce en los
microscopios electrónicos de barrido. Sus usos son muy numerosos principalmente dentro
de la ciencia biomédica: biología celular, biología molecular, fisiología, etc. Dentro de la
ciencia de materiales también encuentra aplicación en la observación de la morfología o los
defectos en sólidos como componentes microelectrónicos, polímeros, resinas, depósitos,
minerales, cerámicas, metales, etc. Así como el estudio de perfiles de superficie y
rugosidad.
6.2. Microscopio de campo oscuro
Esta técnica de microscopía consiste en iluminar la muestra oblicuamente. De este modo
los rayos de luz que llegan al objetivo no provienen directamente del foco de luz sino que
han sido dispersados primero por la muestra. Esta técnica permite ver muestras que de otro
modo no serían visibles debido a su transparencia. También tiene la ventaja que no requiere
teñir la muestra para aumentar su contraste y poder observarla.
6.3. Microscopio de contraste de fases
Este microscopio tiene un sistema óptico que modifica la trayectoria de los rayos de luz.
Permite exagerar ciertas propiedades de las estructuras celulares, acentuando los contrastes
y favoreciendo así su visibilidad. Mediante esta técnica no hace falta utilizar tintes y, por lo
tanto, pueden observarse células vivas
Sirve para observar tejidos y células especialmente vivas. Con este microscopio, el material
denso aparece brillante, mientras que las partes de la célula que tienen una densidad
cercana al agua (citoplasma) aparecen oscuras. El microscopio de contraste de fase, debido
a sus propiedades, se utiliza para exámenes inmediatos (o invivo), este tipo de microscopio
ha desplazado en uso al de campo claro. Cabe destacar como desventaja, el que los objetos
se vean delimitados por un halo o aura brillante alrededor en el caso del contraste de fase
positivo, o por una sombra en el caso del contraste negativo, defecto producido por la
manera de que se producen las imágenes.