TRABAJO PRÁCTICO N4

BIOENERGÉTICA Y CINÉTICA ENZIMÁTICA

AÑO 2022

OBJETIVOS
- Comprender el alto grado de orden existente en la célula así como la
necesidad de energía para generar y mantener el mismo.
- Relacionar esa necesidad energética con la ingesta y oxidación de los
alimentos por medio de reacciones catalizadas enzimáticamente.

UNIDAD DE CONOCIMIENTO
CONOCIMIENTOS PREVIOS REQUERIDOS: Nociones básicas de equilibrio
químico. Nociones elementales de cinética química. Trabajos prácticos de pequeñas
moléculas y macromoléculas.

TEMARIO
Bioenergética: Universo, sistema y entorno. Sistemas cerrados y abiertos. La célula
como un sistema abierto. Distintos tipos de energía: interconversión entre ellas. El
calor como una forma de energía degradada. Conceptos de entropía (S) y energía
libre (G). Unidades. Reacciones endergónicas y exergónicas. Relación entre G y
G, y entre G y Keq. G’ definición. Criterios de espontaneidad de las
transformaciones. Reacciones acopladas.
Velocidad de Reacción: Definición de velocidad de reacción. Unidades. Estado
activado y energía de activación. Reacciones reversibles e irreversibles. Factores
que modifican la velocidad de reacción. Catalizadores inorgánicos y biológicos.
Diferencias entre ellos.
Enzimas: Definición de enzimas. Centro activo y centro alostérico o regulador.
Características de las enzimas y de la catálisis enzimática. Nociones de cinética
enzimática. Km y Vmáx: Conceptos y unidades. Actividad enzimática: efectos del pH
y temperatura. Regulación de la actividad: inhibidores competitivos y no
competitivos. Cofactores enzimáticos: inorgánicos y orgánicos (coenzimas).

VOCABULARIO ESPECÍFICO DEL TEMA

Universo, sistema, energía, entorno, entropía, entalpía, calor, energía interna,
energía libre, endotérmica, exotérmica, endergónico, exergónico, catalizador,
velocidad de reacción, equilibrio químico, trabajo, estado activado, energía de
activación, reversibilidad, cinética, inhibidor, alosterismo, cofactor, sitio activo, sitio
alostérico, feedback, apoenzima, holoenzima.

BIBLIOGRAFÍA
- Karp, G. “Biología Celular y Molecular”. 6ª Edición. Ed. McGraw-Hill
Interamericana. 2010.
- Becker W.M y col. “El mundo de la célula” Ed. Pearson – 2007 - - Blanco, A.
“Química Biológica”. 8a Edición. Editorial El Ateneo. 2015
- Alberts, B. et al. “Biología molecular de la célula”, Editorial Omega. 6ta Ed. 2014.

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 CUESTIONARIO GUÍA DE ESTUDIO

1. a) Defina universo, sistema abierto, cerrado y entorno. Realice un esquema

donde se puedan visualizar estos conceptos.
UNIVERSO: sistema + entorno.

SISTEMA ABIERTO: porción del universo aislada real o imaginariamente que

vamos a someter a estudio, en este caso intercambia energía y materia con
su entorno.

SISTEMA CERRADO: intercambia energía, pero no materia. ENTORNO:

todo el resto del universo que rodea a mi sistema

b) ¿Qué tipo de sistema representa una célula? ¿Por qué?

La célula es un sistema abierto ya que intercambia energía y materia.

2. a) Defina delta G y delta G prima. ¿Cómo se vinculan? ¿En qué unidades se

expresan?

b) Defina S e indique en qué unidades se expresa.

c) ¿Qué entiende por espontaneidad de una transformación?

Se entiende por espontaneidad de una transformación a transformación que
ocurre
por si sola sin la necesidad del aporte de fuerzas externas y acerca al sistema al
equilibrio.
En toda transformación espontánea la energía libre del sistema disminuye hasta
alcanzar el equilibrio donde la energía es la mínima posible en las condiciones de
presión y temperatura dadas.
d) ¿Cómo debe ser G del sistema y S del universo para que una reacción sea
espontánea?

2
e) ¿Para decidir si una reacción es espontánea o no en una célula debemos tener en
cuenta el valor de G o G?
Debemos tener en cuenta el valor del G.

f) Defina G ’. En biología ¿qué G usamos?

3. Dada la reacción A → B donde GA es mayor que GB:

a) ¿Qué puede decir respecto de la espontaneidad de la reacción A → B y B → A?

a1- En condiciones estándar. Justifique.

a2-En condiciones celulares. Justifique.

b) ¿Cómo debería ser la concentración de B respecto de la de A para que la

reacción B → A tenga lugar en condiciones celulares?

3
c) Teniendo en cuenta su respuesta al item b) ¿por qué cree usted que en la célula
sólo son reversibles aquellas reacciones con un G próximo a cero?
Porque no se producen variaciones extremas en las concentraciones de la
mayoría
de las sustancias presentes.

4. a) Represente gráficamente los cambios de energía libre en el curso de una

reacción.

b) Defina estado activado y energía de activación.

ESTADO ACTIVADO: estado en el cual la probabilidad de que se rompan o formen
nuevos enlaces en muy alta. Una vez que alcanzan el estado activado rápidamente
se transforman en producto.
ENERGÍA DE ACTIVACIÓN: es la energía necesaria para que un mol de reactivos
alcance el estado activado

c) ¿Qué entiende por velocidad de reacción química? ¿En qué unidades se mide?

d) ¿De qué depende y cómo puede modificarse la velocidad de una transformación?

La velocidad de una transformación depende del tiempo que tarden las
partículas
en alcanzar el estado activado.
Cuanto mayor sea la Ea más tardarán las moléculas en alcanzar el Ea y menor
será

4
 la velocidad.
FACTORES QUE MODIFICAN LA VELOCIDAD DE UNA REACCIÓN:
Aumentar la frecuencia de colisiones:
incrementando la energía cinética de los reactivos: aumentando la temp.
incrementando la concentración de reactivos.
Disminuir la Ea:
Adicionando un catalizado

5. a) ¿Qué son las enzimas? ¿Todas son proteínas? Fundamente.

Las enzimas son: catalizadores especialmente eficaces, ya que disminuyen la
energía
de activación, aún más que los catalizadores inorgánicos.
No, no son todas proteínas, aunque si la mayoría. Los ribosomas no son de
este origen.
b) ¿En qué se diferencian las enzimas de los catalizadores inorgánicos?

c) ¿De qué manera las enzimas aceleran la velocidad de una reacción biológica?

d) ¿Cómo se denomina al sitio donde se une el sustrato?

Se denomina SITIO ACTIVO

¿Qué características estructurales posee?

Está formado por cadenas lateras de aminoácidos con características
complementarias a la estructura del sustrato. Ej: si el sustrato tiene carga positiva
(S+) los restos de aminoácidos que vamos a encontrar en el sitio activo van a tener
carga negativa, es decir predominaran los aminoácidos ácidos. Contrariamente si
S- → los restos de aminoácidos que tendremos serán básicos).
Si el sustrato es hidrofóbico, las cadenas laterales de los restos de aminoácidos que
vamos a encontrar constituyendo el sitio activo van a ser cadenas laterales de
aminoácidos hidrofóbicos.

¿Sus aminoácidos deben ser contiguos en la estructura primaria de la enzima?

5
Si

e) ¿Cómo se modificaría el gráfico de los cambios de energía libre vs. coordenada

de reacción en presencia de un catalizador? Grafíquelo.

6- a) ¿Qué características particulares presentan las enzimas reguladoras?

Son capaces de cambiar de conformación por la unión de ligandos y
modificar
su capacidad catalítica.
b) ¿Qué tipo de enzimas reguladoras conoce?

6
 6. a) Defina velocidad enzimática y mencione tres posibles unidades para
expresarla.

La velocidad enzimática es la velocidad a la que una enzima cataliza una reacción

específica. Puede expresarse en diversas unidades, entre las que se incluyen:

1. Unidades de concentración por tiempo (por ejemplo, moléculas de sustrato

convertidas por segundo).
2. Unidades de actividad enzimática (por ejemplo, unidades de katal, donde 1
katal es igual a la transformación de 1 mol de sustrato por segundo).
3. Unidades arbitrarias definidas por el investigador, como porcentaje de
conversión por unidad de tiempo.

b) Realice un gráfico en donde se observe como varía la velocidad de reacción en

función de la concentración de reactivos para una transformación catalizada
enzimáticamente.

7
c) ¿A qué se denomina Km y Vmáx y en qué unidades se expresan ambos
parámetros?

d) ¿Cómo se puede modificar la actividad de una enzima en función de:

d1) Variación de pH;
Cambiar el pH puede alterar la carga de los
residuos de aminoácidos en el sitio activo de
la enzima, afectando su estructura y, por lo
tanto, su actividad.
d2) Variación de temperatura.
Aumentar la temperatura puede aumentar la
actividad enzimática hasta cierto punto (la
temperatura óptima), después de lo cual las
altas temperaturas pueden desnaturalizar la
enzima.
d3) Presencia de un inhibidor competitivo.
Competirá con el sustrato por la unión al
sitio activo de la enzima, disminuyendo su
actividad.
d4) Presencia de un inhibidor no competitivo.
Se une a un sitio alostérico en la enzima,
cambiando su conformación y disminuyendo
su actividad
7. a) ¿Para qué necesita la célula energía? ¿Cómo la almacena y en qué
moléculas?
La célula necesita energía para realizar diversas funciones, como síntesis de
macromoléculas, transporte activo, movimiento celular, etc. Almacena energía
en moléculas como el ATP (adenosín trifosfato) y el NADH (nicotinamida).
adenina dinucleótido reducido).
b) ¿Qué es un trabajo biológico? ¿Qué necesita la célula para realizarlo?
Trabajo biológico: Es cualquier proceso que la célula realiza para mantener su
homeostasis y llevar a cabo sus funciones vitales. Para realizarlo, la célula
necesita energía en forma de ATP.
c) ¿La energía consumida por la célula es igual, mayor o menor a la estrictamente
requerida para realizar los trabajos biológicos? ¿Por qué?
Es mayor que la estrictamente necesaria para realizar los trabajos biológicos, ya
que parte de la energía se disipa en forma de calor debido a la eficiencia limitada
de los procesos biológicos y las pérdidas energéticas asociadas.

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 PROBLEMAS DE APLICACIÓN
En esta sección, hemos incluido problemas que relacionan los temas
estudiados en este TP con problemáticas de importancia médica, identificados
con el símbolo:

Al final de algunos de estos problemas encontr ará un texto breve

identificado como “Lectura complementaria” que brinda una breve explicación
sobre el tema biomédico que se desarrolla en el mismo. Su lectura no resulta
indispensable para la resolución del problema pero brinda información útil para su
futura formación como médico tanto generalista como especialista.

1. Es bien conocido que con el tiempo las cosas abandonadas a su suerte pasan a
quedar desordenadas: los edificios se derrumban, los organismos muertos se
descomponen, etc. Esta tendencia general se halla expresada en la Segunda Ley de
la Termodinámica, que afirma que “En toda transformación espontánea la entropía
del universo aumenta”. De acuerdo con esto responda:
a) En un sistema aislado, ¿qué ocurrirá con el grado de desorden del mismo en
una transformación espontánea? Justifique.
En un sistema aislado, el grado de desorden, o entropía, aumentará en una
transformación espontánea. Esto se debe a que la Segunda Ley de la
Termodinámica establece que la entropía del universo, que incluye cualquier sistema
aislado, tiende a aumentar con el tiempo. En otras palabras, en ausencia de
intervención externa, los sistemas tienden hacia estados de mayor desorden.
b) En una célula la entropía disminuye con el tiempo, esta situación ¿contradice
a la segunda ley de la termodinámica? Justifique se respuesta.
La disminución de la entropía en una célula con el tiempo no contradice la Segunda
Ley de la Termodinámica. Aunque la entropía de la célula en sí puede disminuir, esto
ocurre a gastos del aumento de entropía en el entorno, como el ambiente
circundante y el metabolismo de la célula. La célula mantiene su organización
interna y funciones mediante el gasto de energía y la realización de procesos
metabólicos que generan desorden en su entorno.

2. Los siguientes datos corresponden a la reacción A B:

• la transformación de la sustancia A en la sustancia B (y viceversa) se produce
cuando las moléculas alcanzan una energía de 12 Kcal/mol.
• GA es de 9 Kcal/mol y GB es de 8,8 Kcal/mol
a) Realice el gráfico de nivel energético vs coordenada de reacción.
b) Calcule los valores de Ea y G de la transformación de A en B y los de B en A.

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c) ¿Cuál de las dos transformaciones es más rápida?
A
d) Si le afirmásemos que en la célula ambas transformaciones (A →B y B → A)
pueden ser espontáneas ¿qué nos diría?
QUE NO PODRIAMOS SABERLO YA QUE NO NOS HA DADO LAS
CONDICIONES EN LAS QUE SE ENCUENTRA LA CELULA PARA NOSOTROS
AFIRMAR SI LAS TRANSFORMACIONES PUEDEN SER ESPONTANEAS
e) ¿Cree usted que ésta será una reacción reversible?
SON REACCIONES REVERSIBLES PORQUE LOS RESULTADOS DE AMBAS
DELTAG ESTAN CERCA DE 0
f) ¿Cuál de las dos sustancias (A ó B) predominará en el equilibrio?
LA B PORQUE ES MENOR Y SE ENCUENTRA CERCA DE 0

3. Analice la siguiente frase y responda:

“La transformación X→Y cuyo G = 3 Kcal/mol puede llevarse a cabo en una célula
si se acoplase a una reacción A→B con G < 0 o si existiese una enzima capaz de
catalizarla"
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a) ¿La frase es completamente cierta? (SI / NO). Justifique.
La frase es parcialmente cierta. Es cierto que una transformación con un cambio
de energía libre positivo (∆G > 0) puede llevarse a cabo en una célula si se acopla
a una reacción con un cambio de energía libre negativo (∆G < 0) o si se cataliza
mediante una enzima. Sin embargo, la afirmación de que el ∆G de la reacción
acoplada debe ser menor a 0 para que la transformación X→Y pueda ocurrir en la
célula no es del todo precisa. El ∆G de la reacción acoplada debería ser negativo,
pero no necesariamente menor a 0
b) ¿Qué valor deberá tener el G de la reacción acoplada para que la frase sea:
b1- Parcialmente cierta
Para que la frase sea parcialmente cierta, el valor del ∆G de la reacción acoplada
debería ser negativo, pero no necesariamente menor a 0. Un valor del ∆G negativo
implicaría que la energía liberada por la reacción A→B es suficiente para impulsar la
transformación X→Y, incluso si X→Y tiene un ∆G positivo.
b2-. Completamente falsa
Para que la frase sea completamente falsa, el valor del ∆G de la reacción acoplada
debería ser positivo. Esto significaría que la energía requerida para la reacción A→B
es insuficiente para impulsar la transformación X→Y, incluso con el acoplamiento
4. Los ácidos grasos y la glucosa sufren un proceso denominado “activación” antes
de ser degradados o almacenados:
➢ R-COOH + HS-CoA →R-CO-S-CoA + H2O G = 7,52 Kcal/mol
➢ Glucosa + Pi → glucosa – 6 – P + H2O G = 3,30 Kcal/mol
a) ¿Qué puede decir respecto a la espontaneidad de ambas reacciones?
QUE NO SON ESPONTANEAS PORQUE SON ENDERGONICAS YA Q
AGARRAN ENERGIA
b) ¿Con cuál de las siguientes reacciones acoplaría a las anteriores activaciones
para que el proceso acoplado sea espontáneo en condiciones estándar?
ATP + H2O → ADP + Pi G = -7,30 Kcal/mol
ATP + H2O → AMP + PPi G = -10,0 Kcal/mol

c) ¿Cuál sería el valor del G de los procesos acoplados?

DELTAG0=3,30-7,30= -4
DELTAG0=7,52-10.0= -2.48

5. La glucosa es la principal fuente de energía para la mayoría de las células. Para

liberar la energía almacenada en esta molécula, las células aeróbicas la oxidan
completamente en presencia de oxígeno hasta CO 2 y H2O (proceso denominado
combustión en química y respiración celular en biología).
C6(H2O)6 + 6O2 → 6CO2 + 6H2O
a) ¿Cree Ud. qué el G de esta reacción variará si el proceso se lleva a cabo en
un sólo paso o en múltiples pasos? Justifique su respuesta.
NO VA A VARIAR PORQUE SOLO NOS IMPORTA EL PROCESO INICIAL Y EL
PROCESO FINAL OSEA LO QUE ESTA INTERMEDIO DEBE PASAR SI O SI
b) Si bien este proceso de combustión es muy exergónico, la glucosa puede
permanecer durante años en contacto con el oxígeno de la atmósfera sin
transformarse en CO2 y H2O. b1- ¿A qué se debe esto? A QUE SE NECESITA
MUCHA ENERGIA DE ACTIVICACION PARA LLEGAR A ESE ESTADO ACTIVADO

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POR ESO TENEMOS A LAS ENZIMAS QUE SE ACOPLAN PARA AUMENTAR LA
VELOCIDAD DE ESTOS PROCESOS
b2- Si la combustión ocurre en el interior de una célula (respiración celular) ¿la
velocidad del proceso será la misma? Justifique. ¿Y el G?
NO, EL PROCESO SERA MAS RAPIDO PORQUE DENTRO DE LAS CELULAS YA
SE ENCUENTRAN ENZIMAS QUE ACELERAN ESA REACCION Y EL DELTA G NO
SE PUEDE VER AFECTADO SEGUIRA SIENDO EL MISMO PORQUE LAS
ENZIMAS SOLO AFECTAN LA ENERGIA DE ACTIVACION.

6. La lactosa es la principal fuente de energía de los lactantes. Para su absorción

debe ser hidrolizada en el intestino delgado por la enzima lactasa, situada en
células del borde en cepillo. En los mamíferos, esta enzima muestra su máxima
actividad en el momento del nacimiento y durante el período de lactancia para
declinar tras el destete a menos de una décima parte de la capacidad funcional
máxima.
a) ¿Qué representa la lactosa para la lactasa? ¿Cómo se denomina la región
donde ocurre la reacción química que transforma la lactosa en sus productos?
LA LACTOSA ES EL SUSTRATRO Y EL REACTIVO LA LACTASA, INTERACTUAN
EN EL SITIO ACTIVO
b) Para estudiar la cinética de la lactasa incubó homogenado de mucosa
intestinal de lactante (obtenida por biopsia) con concentraciones crecientes de
lactosa registrando la velocidad (v0) de aparición de productos. Los resultados
obtenidos se muestran en la siguiente tabla:
[Lactosa] v0
(mM) I. ¿Qué parámetros cinéticos puede obtener a partir
(M/min)
de los datos de la tabla?
0 0,0 LA CONCENTRACION DE SUSTRATO QUE SE
10 7,0 AUMENTA EN CANTIDAD Y COMO ESTO AFECTA A
20 10,0 LA VELOCIDAD MAXIMA DE LA REACCION POR
MINUTO.
30 13,0
II. Realice el gráfico de velocidad (vo) en función de la
50 16,0 concentración de sustrato y ubique en el mismo los
100 19,8 parámetros referidos en el ítem I.
150 20,0
200 20,0

III. ¿Con qué características de la enzima se asocian dichos parámetros?

Justifique su respuesta

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Los parámetros cinéticos obtenidos están asociados con las características de la
enzima, principalmente con su afinidad por el sustrato y su capacidad catalítica.
La 𝑉𝑚𝑎𝑥Vmax está relacionada con la cantidad máxima de producto que puede ser
formado por la enzima cuando está saturada de sustrato. En este caso, una
𝑉𝑚𝑎𝑥Vmax mayor indica una mayor cantidad de enzima activa disponible para
catalizar la reacción.
El 𝐾𝑚Km refleja la afinidad de la enzima por su sustrato. Un valor más bajo de
𝐾𝑚Km indica una mayor afinidad de la enzima por la lactosa. En este caso, una
𝐾𝑚Km más baja implicaría que la enzima tiene una alta afinidad por la lactosa y
necesita menos sustrato para alcanzar la mitad de su velocidad máxima.

c) Si repite el experimento desarrollado en el ítem b) cuando el individuo ha

alcanzado el estado adulto ¿Qué modificaciones espera encontrar en los parámetros
cinéticos? Justifique su respuesta.

Vmax: Podría ser mayor en adultos debido a un mayor contenido de enzima lactasa
en el tejido intestinal o a una mayor eficiencia catalítica de la enzima debido al
desarrollo y maduración del sistema digestivo.
Km: Podría ser menor en adultos, lo que indicaría una mayor afinidad de la enzima
lactasa por la lactosa en comparación con los lactantes. Esto podría ser el resultado
de una adaptación del sistema digestivo a una dieta más diversa y rica en lactosa a
medida que el individuo crece.
Estas modificaciones reflejarían los cambios en la actividad enzimática y la fisiología
intestinal que ocurren durante el desarrollo desde la infancia hasta la edad adulta
7. En la siguiente figura se representa la relación entre el pH y la actividad catalítica
de tres enzimas: la pepsina (P), la tripsina (T) y la fosfatasa alcalina (F)

AE P F
T

AE: actividad enzimática

3 5 7 9 11 pH

a) Explique para una enzima en particular ¿a qué se debe la variación de la

actividad catalítica en función del pH en cada región de la curva? A QUE TENIENDO
UN PH OPTIMO SE PUEDE VARIAR A UN MEDIO ACIDO O BASICO DEBIDO A
QUE LA ENZIMA CAMBIA SU INTERACCION CON EL SUSTRATRO

b) Si el pH sanguíneo es 7,3 ¿qué enzimas podrían presentar actividad en el

plasma?
LA TRIPSINA ES LA UNICA QUE TIENE MAYOR ACTIVIDAD PORQUE ESTA
CERCA DEL PH 7,3 Y UN POCO CERCA LA FOSFATASA ALCALINA

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c) Siendo 37°C la temperatura óptima para la tripsina, realice un gráfico de la
variación de la actividad enzimática vs temperatura. Describa qué sucede en cada
región de la curva.

8. La glucosa llega a los tejidos periféricos transportada por la sangre e ingresa a

las células a través de una proteína transportadora. En el citosol es fosforilada a
glucosa-6-P evitando que pueda escapar de ella.
En células hepáticas existen dos enzimas
capaces de catalizar la reacción:

Glucosa + ATP → glucosa – 6 – P + ADP

- Hexoquinasa (presente en todos los tejidos)

- Glucoquinasa (localizada en hepatocitos y en

células de los islotes pancreáticos)

a) En la figura de la derecha se muestra el

gráfico de actividad enzimática vs [glucosa] para
ambas enzimas hepáticas. También puede
observarse el rango de concentración de glucosa
en ayunas.
a1- ¿Cuál de las enzimas tiene mayor afinidad por
la glucosa? Justifique.
HEXOQUINASA PORQUE SU KM ES MENOR Y
ESO LA HACE TENER MAS AFINIDAD
a2- ¿Cuál es más efectiva en la catálisis en
condiciones de ayuno?
HEXOQUINASA PORQUE SU ACTIVIDAD
ENZIMATICA ES MAS RAPIDA AL ESTAR EN 0
a3- ¿Qué sucederá en condiciones postprandiales?

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TENDRE MAS GLUCOSA EN LA SANGRE

b) A diferencia de la glucoquinasa, la hexoquinasa no es específica para glucosa

(también puede fosforilar D-Manosa y D-Fructosa). Observe los gráficos A y B y
determine si:
I. la glucosa es el sustrato preferencial de la enzima II.
la fructosa es el sustrato preferencial de la enzima III.
ambos son igualmente preferenciales.
Justifique su elección.
LA GLUCOSA COMO TIENE MENOR KM VA A SER MAS AFIN A LA HEXOQUINASA

9. E es una enzima citosólica hepática que cataliza la reacción A→ B. Los

compuestos X y Z están presentes en sustancias hepatotóxicas y ambos son
inhibidores de esta enzima.
Para caracterizar a la enzima E de hígado de rata y para clasificar el tipo de
inhibición ejercida por X y Z se realizaron los siguientes experimentos:
I- Se incubó una cantidad fija de E con concentraciones crecientes de A y se
determinó la cantidad de B generada a los 60 segundos.
II- Se repitió el protocolo I en presencia de una pequeña cantidad de X
III- Se repitió el protocolo I en presencia de una pequeña cantidad de Z Los
resultados fueron:

[A] uM nmoles de B / minuto

Experimento I Experimento II Experimento III
2 33,33 11,11 26,67
4 50,00 20,00 40,00
8 66,67 33,33 53,33
16 80,00 50,00 64,00
512 99,22 96,97 79,38
4096 99,90 99,61 79,92
36000 99,99 99,96 79,99
100000 100,00 99,98 80,00
1000000 100,00 100,00 80,00

a) Indique el valor de Km y Vmáx obtenido en cada uno de los experimentos.

Experimento 1 KM 50- VMAX 100 CANTIDAD 4um
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 Experimento 2 KM50- VMAX 100 CANTIDAD 16um
Experimento 3 KM40- VMAX 80 CANTIDAD 4um
b) ¿Qué tipo de inhibidores son X y Z? Justifique su respuesta.
X ES UN INHIBIDOR COMPETITIVO PORQUE ME MODIFICO EL KM PERO NO
LA VELOCIDAD MAXIMA.

Z ES UN INHIBIDOR NO COMPETITIVO PORQUE MODIFICO LA VELOCIDAD

MAX, PERO NO EL KM.
c) ¿Espera que X y/o Z sean estructuralmente similares a A?
NO PORQUE EL EXPERIMENTO LOS USO EN DIFERENTES CANTIDADES
PARA OBTENER DIFERNETES RESULTADOS
d) Si repite el experimento I poniendo el doble de enzima E ¿qué valores de Km y
Vmáx espera encontrar?
CUANDO AGREGAMOS MAS ENZIMAS LOS VALORES DE KM NO SE
MODIFICAN, PERO SI LOS DE VELOCIDAD MAX

10. a) El colesterol celular proviene de dos fuentes (Figura):

1- Incorporación de colesterol plasmático por captación mediada por un receptor

de membrana de lipoproteínas que lo transportan en el plasma (LDL plasmáticas).
2- Síntesis endógena a través de una ruta multienzimática conocida como vía del
mevalonato. El principal punto de regulación de esta vía es la reacción catalizada
por la enzima H (HMG-CoA reductasa).

A nivel celular el propio colesterol regula procesos que garantizan el mantenimiento

de su homeostasis. Un aumento del contenido de
Acetil-CoA colesterol celular estimula la degradación de la enzima H y
disminuye el número de receptores para LDL. Por el
contrario, una disminución del contenido de colesterol
celular ocasiona un incremento de la síntesis de la
enzima H y de receptores
3-Hidroxi -3-metil -
glutaril -CoA para LDL (por lo tanto
(HMG -CoA)
aumenta la captación de
HMG-CoA
colesterol –LDL desde el
 reductasa  plasma).

Mevalonato

Colesterol
 (intracelular ) 

Endocitosis
 mediada por 
receptor
Colesterol de LDL
(ex tracelular)

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 Para obtener los parámetros cinéticos característicos de la enzima H de hepatocitos
humanos se incubó una cantidad fija de enzima con concentraciones crecientes de
sustrato y se cuantificó la cantidad de producto generado por minuto. Se observó
que tiene un Km de 0,02 mM, concentración a la cual la velocidad (v 0) registrada
corresponde a 60 mmoles/min. ¿Cuál es el valor de Vmáx para esta enzima?
120mmoles/min

b) Las estatinas conforman un grupo de medicamentos

(naturales, semisintéticos y sintéticos) capaces de
reducir los niveles de colesterol sérico por inhibición de la enzima H. En la actualidad
estas son ampliamente utilizadas en el tratamiento de pacientes con
hipercolesterolemia.

Como puede observarse en la figura de la izquierda, todas las estatinas presentan

un componente estructural que es muy similar al mevalonato.

Marque con una (X) cuál/es de los siguientes pares de valores de Km y Vmáx
presentados en la tabla pueden corresponder a los parámetros cinéticos de la
enzima detectados en presencia de algunas de las estatinas.

Km (mM) Vmáx (moles/min)

( ) 1- 0,02 80
( ) 2- 0,02 120
( ) 3- 0,01 100
( ) 4- 0,01 120
( ) 5- 0,04 100
( X 6- 0,04 120
)
( X 7- 0,05 120
)
( X 8- 0,03 120

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)
Justifique su respuesta.
c) Sabiendo que los valores seleccionados e el ítem anterior corresponden a los
parámetros cinéticos registrados en presencia de Simvastatina, Pravastatina y
Lovastatina, respectivamente ¿Cuál de las drogas es más efectiva como inhibidor de
la enzima H?
LA PRAVASTATINA PORQUE TIENE KM 0.05 Y ES MAYOR QUE LAS OTRAS 2
POR TANTO ES MAS AFIN
d) Teniendo en cuenta que todas las estatinas son administradas por vía oral
¿Cree que será necesariamente un mejor medicamento la droga que produzca la
mayor inhibición de la enzima en su ensayo in vitro, o le parece que deberá tener en
cuenta otros factores para su elección como fármaco hipocolesterolemiante de uso
humano?
La inhibición de la enzima en un ensayo in vitro es solo un aspecto de la eficacia de
un medicamento. Si bien es importante tener en cuenta la capacidad de una estatina
para inhibir la enzima HMG-CoA reductasa (la enzima clave en la síntesis de
colesterol), hay otros factores que deben considerarse al elegir un fármaco
hipocolesterolemiante para uso humano.
Por ejemplo, la biodisponibilidad oral, la farmacocinética (cómo el cuerpo absorbe,
distribuye, metaboliza y excreta el medicamento), la seguridad y los posibles efectos
secundarios, así como la eficacia clínica en poblaciones humanas, son factores
críticos a tener en cuenta. Además, la adherencia del paciente al tratamiento también
puede verse afectada por la comodidad de la dosificación y la tolerabilidad del
medicamento.
Por lo tanto, aunque la capacidad de una estatina para inhibir la enzima en un
ensayo in vitro es relevante, no es el único factor determinante para su elección
como fármaco hipocolesterolemiante. Es necesario evaluar una variedad de factores
para tomar una decisión informada sobre qué medicamento podría ser el más
adecuado para el tratamiento de un paciente en particular.

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