UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA
FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS, BIOQUÍMICAS Y
BIOTECNOLÓGICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
CURSO: FARMACOGNOCIA II-PRÁCTICAS-GRUPO-10
INFORME: NRO 06
TEMA: DITERPENOS
ALUMNAS:
Herrera Choquetico, Ana María
Huamani Mamani, Maribel Ruth
Medina Mamani, Andrea Georgina
DOCENTE:
Celia Choquenaira Quispe
Arequipa – Perú
2024
DITERPENOS
(Planta: Stevia rebaudiana, Stevia)
RESUMEN:
Los diterpenos son compuestos con C20 derivados del metabolismo del 2E, 6E,
10Egeranilgeranilpirofosfato (GGPP), presentes en insectos, organismos marinos y
especialmente en vegetales. En cuanto a los materiales necesarios para llevar a cabo este
proceso, se requieren diversos utensilios como probetas, vasos, Erlenmeyer, pipetas, placa de
cromatografía de capa fina, capilares de vidrio, embudos, papel filtro, cuba de desarrollo
cromatográfico, entre otros. Las muestras usadas para este procedimiento incluyen a la estevia
en hojas y comercial. El procedimiento para el análisis cromatográfico de los diterpenos de la
Stevia incluye la pulverización de hojas de Stevia, su mezcla con metanol, digestión a reflujo,
filtrado y concentración del extracto. Posteriormente, se realiza el análisis cromatográfico de
muestras como el extracto metanólico y muestras comerciales de Stevia. Se aplican los extractos
en placas cromatográficas, se dejan secar y se desarrollan con una fase móvil. La detección se
realiza observando las placas bajo una lámpara de luz UV de 254 nm. En la evaluación de las
manchas cromatográficas, se busca identificar compuestos como el esteviósido y el rebaudiosido
A, que presentan factores de retención (rf) aproximados de 0.2 y 0.3 respectivamente. Además,
se pueden observar zonas correspondientes a flavonoides, compuestos lipofílicos y clorofila en
el extracto metanólico.
INTRODUCCIÓN:
Los diterpenos son un grupo extenso de compuestos vegetales con una estructura básica de 20
carbonos que se derivan del ácido mevalónico o desoxixilulosa fosfato. Estos compuestos se
generan a partir de un tetraprenol llamado pirofosfato de geranil geranilo, que a su vez se
produce mediante la prenilación del pirofosfato de farnesilo. La stevia (Stevia rebaudiana),
perteneciente al género Stevia de la familia Asteraceae y nativa de la región tropical de
Sudamérica, se cultiva desde hace años por sus propiedades edulcorantes y su bajo contenido
calórico. Considerada una planta medicinal, estudios indican que puede tener efectos
beneficiosos en la diabetes tipo II debido a sus glucósidos edulcorantes sin calorías. Su capacidad
edulcorante es 30 veces mayor que la del azúcar, llegando hasta 200-300 veces en extracto. Las
hojas de la stevia contienen altos niveles de desteviosido y rebaudiosida A, sus principales
principios activos. Los extractos de S. rebaudiana son ricos en glucósidos esteviol diterpenos,
siendo el esteviósido y el rebaudiosido A los compuestos claves responsables de la edulcoración,
acompañados por pequeñas cantidades de otro esteviol glucósidos.
Los edulcorantes, en su mayoría concentrados en hojas, son glucósidos de diterpeno sintetizados
en la ruta del ácido giberelico a partir del mevalonato. El glucósido es un polvo cristalino blanco
los científicos lo llaman una molécula noble, debido a que el producto es 100% natural, no tiene
calorías, las hojas pueden utilizarse en su estado natural y solo son necesarios cantidades
pequeñas del producto, gracias a su gran poder edulcorante. Recientemente se ha reportado su
actividad antiácida, cardiotónica, anticaries, propiedades anti-rotavirus, efecto
antihiperglicémicos e insulinotrópicos que ayudan al tratamiento de diabetes mellitus tipo 2 y
como estimulante en la secreción de insulina actuando sobre las células B DEL páncreas
METODOLOGÍA
MATERIALES Y REACTIVOS:
FASE ESTACIONARIA: Placas de sílica Gel Merck F 254
FASE MÓVIL: Cloroformo 65
Metanol 25
Agua 10
➢ Capilares
➢ Cuba de Cromatografía
➢ Lampara de luz UV
➢ Etanol
➢ Papel Filtro
➢ Morteros
➢ Probetas de 100ml
➢ Vasos de 250ml
➢ Vasos de 600ml
➢ Erlenmeyer de 250ml
➢ Pipetas
➢ Pipetas de 10ml
➢ Pipetas de 5ml
➢ Embudos
➢ Sistema de reflujo
➢ Pulverizador de líquidos
PROCEDIMIENTO:
[Link] 5g de hojas de stevia y mezclamos con 40ml de metanol
[Link] la mezcla en un equipo de digestión a reflujo y someteos a calor por 20 minutos a
ebullición continua
[Link] por papel y volvemos a someter a calor hasta obtener 15 mL de extracto. Hacemos
el mismo procedimiento para ambas muestras (hojas de estevia y estevia comercial)
4. Para preparar la silica gel cortamos una placa de 7 x 3 y la marcamos con lápiz para hacer
aplicaciones de muestras. Las aplicaciones las realizamos en carriles de 1 cm de ancho y debemos
dejar espacios de 1 cm entre aplicaciones.
5. Depositar la fase móvil en la cuba de desarrollo cromatográfico y cerrar herméticamente.
Sembramos en la placa de silica gel unas 10 veces, en un lado sembramos la muestra de hojas y
en el otro lado la muestra comercial. La placa con las aplicaciones completamente secas, las
colocamos en la cuba de desarrollo.
6. Luego dejamos reposar al aire libre y finalmente las colocamos en las cámaras de UV para
observar.
Calcular el Factor de Retención:
Rf= Distancia Recorrida
Distancia Inicial
➢ Hojas stevia comercial
Rf=2.2 = 0.4 Rf = 2.3 =0.41
4.5 4.5
Rf =3.1= 0.56
4.5
Rf= 4.2 = 0.7
Rf= 5.4= 0.98 4.5
4.5
RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
Los estándares purificados del steviol, steviósido y rebaudiósido A presentaron valores Rf de 0,4;
0,50 y 0,98, respectivamente, sin embargo, al observar la cromatografía de nuestros extractos.
Como resultado obtuvimos flavonoides, compuesto lipofílico. Rebaudiosido A (RF: 03)
CONCLUSIONES:
Con la práctica realizada se pudo conocer, los extractos de la stevia rebaudiana obtenidas de
diferentes presentaciones y analizadas cromatograficamente, muestran una notable diferencia
en la presencia de compuestos diterpénicos, las hojas secas de esta planta revelaron una alta
concentración de estos compuestos, esteviósidos y rebaudiósidos, indicándonos una mejor
capacidad edulcorante que las demás presentaciones las cuales posiblemente tenga
adulteraciones en su proceso de producción.
BIBLIOGRAFÍA:
➢ Rebaudiana, S. (n.d.). (Bert.) Bertoni. UNA REVISIÓN. [Link]. Retrieved April 30, 2024,
from [Link] [Link]
➢ Vázquez-Baxcajay, L., Robledo-Paz, A., Muratalla-Lúa, A., & CondeMartínez, V. (2014).
Micropropagación de Stevia rebaudiana Bertoni y detección de steviósidos. Bioagro-,
26(1), 49–56. [Link] ci_arttext&pid=S1316-
33612014000100006
➢ Salvador-Reyes, R., Sotelo-Herrera, M., & Paucar-Menacho, L. (2014). Study of Stevia
(Stevia rebaudiana Bertoni) as a natural sweetener and its use in benefit of the health.
Scientia Agropecuaria, 5(3), 157–163. [Link]
014.03.06