UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA
FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERÍAS BIOLÓGICAS Y QUÍMICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
INFORME DE PRÁCTICA II
ERITOGRAMA I: HEMATOLOGIA VETERINARIA
CURSO:
LABORATORIO CLÍNICO
DOCENTE:
MGTER. JORGE LUIS ZEGARRA PAREDES
ALUMNOS:
ANA BELÉN MARROQUÍN DELGADO
AREQUIPA – PERÚ
2020
ERITOGRAMA I: HEMATOLOGIA VETERINARIA
INTRODUCCIÓN
La Hematología es la rama de la medicina veterinaria, que estudia los elementos formes de la
sangre, los precursores en médula ósea y los analitos químicos plasmáticos relacionados,
abarcando un análisis estructural, funcional y la determinación de concentraciones de estos
elementos.
El hemograma es un examen en hematología que proporciona información sobre la
concentración y algunas características morfológicas de los diferentes tipos celulares
sanguíneos. Actualmente se dispone de una amplia variedad de equipos que ofrecen gran
cantidad de parámetros hematológicos. Muchos de estos equipos han sido desarrollados para
realizar hemogramas en la propia clínica o consultorio veterinarios.
OBJETIVOS
El objetivo de la presente práctica es tener conocimiento de cómo realizar un frotis
sanguíneo de manera correcta y diferenciar las técnicas de tinción.
Identificar los tipos células sanguíneas y sus respectivas características.
MARCO TEORICO
Frotis sanguíneo
Para realizar un correcto procedimiento de frotis sanguíneo, se necesita sangre con EDTA,
laminas portaobjetos, pipeta Pasteur y aceite de inmersión.
1. Primero extraemos con una pipeta pasteur, la muestra de sangre del tubo con EDTA.
Fig. 1 Muestra de sangre en tubo EDTA
Fuente: [Link]
2. Se debe colocar una gota de sangre en un extremo del portaobjetos. El tamaño de la
gota es importante: si es demasiado grande crea un extendido muy largo o muy grueso
y si es demasiado pequeña a menudo forma un extendido corto o delgado. (1)
Fig. 2 Gota de sangre en el extremo del portaobjetos
Fuente: [Link]
3. Sostener el portaobjetos extensor (frotadora) con firmeza a un ángulo de 30-45º y
llevar hacia atrás hasta tocar la gota de sangre, dejando que ésta se esparza en todo el
ancho del portaobjetos. (1)
Fig. 3A Angulo correcto al sostener el portaobjetos
Fuente: [Link]
Fig. 3B La sangre se extiende en toda la superficie
Fuente: [Link]
4. Empujamos hacia delante hasta el final del portaobjetos para crear el extendido. Es
importante que toda la gota se incluya en el extendido.
Fig. 4 Frotis completo
5. Deja Fuente: [Link]
secar el frotis al
aire antes de comenzar el
pro- ceso de tinción.
Fig. 5 Frotis de sangre correcto
Fuente: [Link]
Técnicas de tinción
Tinción de Giemsa
El Colorante de Giemsa (constituido por una mezcla de azul de metileno, eosina y varios azures
en dilución acuosa): 1.0g del colorante en polvo, 66mL de metanol absoluto y 66mL de glicerol.
Se debe disolver el colorante con el glicerol, adicionar el metanol, mezclar bien y dejar a
temperatura ambiente de 7-14 días (maduración). Filtrar antes de su empleo. (2)
1. Primero la muestra sumergimos la porta objetos en metanol absoluto y dejamos
actuar de 3-4 minutos.
Fig. 6 Frotis sanguíneos con metanol
‘ Fuente: [Link]
2. Sumergirlo verticalmente en una solución de Giemsa preparada extemporalmente a
partir de 1 volumen de la solución colorante más 9 volúmenes de solución tampón
(pBs, pH 6.8) o bien en agua desionizada.
Fig. 7 Preparación teñida mediante la técnica de inundación-decantación
Fuente: [Link]
3. Esperar durante 10-20 minutos.
4. Luego lavar con agua destilada por ambos lados y no apuntar el agua directamente
donde está la preparación
5. Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol para
eliminar cualquier resto de colorante.
6. Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión.
Fig. 8 Se secan al aire, después de ser teñidas y lavadas
Fuente: [Link]
Tinción de Wright
El colorante de Wright: para 100 mL se requiere de colorante de Wright (0.3g), metanol (97.0
mL) y glicerol (3.0 mL). Disolver en un mortero el colorante con el glicerol. Una vez disuelto se
adiciona el metanol trasvasándolo a un frasco oscuro. Agitar. Filtrar antes de usar. (2)
1. Primero se debe colocar el frotis secado al aire sobre una rejilla o cubeta de tinción
con la sangre hacia arriba.
2. Cubrir completamente el portaobjetos o cubreobjetos con el colorante de Wright gota
a gota. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, para
fijar los glóbulos sanguíneos. El colorante deberá cubrir completamente el
portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes.
Fig. 9 Tinción
Fuente: [Link]
3. Luego se agrega directamente al colorante un volumen igual de amortiguador de
Wright, para evitar la coloración débil. Esperar la formación de brillo metálico. Puede
usarse de igual manera agua desionizada. Dejar actuar de 10-15 minutos.
4. Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un
aspecto rosado al examinarlo a simple vista.
5. Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol para
eliminar cualquier resto de colorante.
6. Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión
Fig. 10 Frotis teñidos secándose
Fuente: [Link]
Células sanguíneas
Eritrocitos
Son discos bicóncavos no nucleados que se tiñen de color rojo o gris rosáceo, con el colorante
de Wright, todas son uniformes en el tamaño (7- 8 mm) y poseen un halo de luz central, el cual
varía entre células dependiendo la vida media. (3)
Fig. 11 Eritrocitos (3)
Plaquetas
Producidas por los megacariocitos en la médula ósea mediante el proceso de fragmentación
citoplasmática, circulan por la sangre y tienen un papel muy importante en la coagulación. Son
los componentes celulares más pequeños de la sangre.
Fig. 12 Plaquetas aglutinación
fuente: [Link]
encontr%C3%[Link]
Leucocitos
Neutrófilo
- Tamaño: 7 a 9 um
- Núcleo: 2-5 lóbulos conectados por filamentos delgados sin cromatina visible
- Granulación: Menos evidente que la de los eosinófilos.
Fig. 13 Neutrófilo (1)
Eosinófilo
- Tamaño: 9 um
- Núcleo: Núcleo con dos lóbulos unidos por un delgado filamento
- Granulación: Granulación de tamaño medio, con fuerte apetencia por la eosina.
Fig. 14 Eosinófilo (1)
Basófilos
- Tamaño: 12 um
- Núcleo: En general dos lóbulos conectados por filamentos delgados sin cromatina
visible.
- Granulación: Los gránulos basófilos son gruesos, tiñen el cito- plasma de color oscuro y
frecuentemente dificultan la observación del núcleo.
Fig. 15 Basófilo (1)
Linfocitos
- Tamaño: 6 a 8 um
- Núcleo: Núcleo esférico que ocupa la mayor parte de la célula
- Granulación: no presentan granulación específica.
Fig. 16 Linfocito (1)
Monocitos
- Tamaño: 9 a 12 um
- Núcleo: Núcleo ovoide, en forma de riñón o de herradura.
- Granulación: Muchos gránulos finos, con frecuencia adoptan el aspecto de vidrio
molido.
Fig. 17 Monocitos (1)
PROCEDIMIENTO
En esta presente práctica se desarrolló de manera semi presencial por medio de la plataforma
virtual de Microsoft Teams, en la cual la utilización de material audiovisual fue vital para el
entendimiento.
Se observó videos sobre como realizar un frotis sanguíneo y diferentes técnicas de tinción que
fueron de Wright y Giemsa.
Finalmente realizamos un formato para llenar, sobre las características de las células
sanguíneas que observamos por medio de un microscopio virtual.
CONCLUSIONES
En conclusión, la presente practica por medio de la Plataforma virtual nos brindó una
solución y mejoramiento en la asimilación del procedimiento para realizar un frotis
sanguíneo de manera correcta y diferenciar las técnicas de tinción.
Es de suma importancia en la medicina veterinaria Identificar los tipos células
sanguíneas y sus respectivas características para lograr detectar diversas
anormalidades que estén relacionadas con alguna enfermedad.
BIBLIOGRAFÍA
1. Carr J, Rodak B. (2017). Atlas de hematología clínica: Editorial medica Panamericana
2. Coloración de Wright y Giemsa (s.f.) Recuperado el 19 de octubre del 2020, de:
[Link]
3. Manual de Hematología (s.f.) Recuperado el 19 de octubre del 2020, de:
[Link]
ANEXO
Trabajo practico