INTRODUCCIÓN:

La cromatografía, una técnica analítica que ha perdurado y evolucionado a lo largo

del tiempo, se ha convertido en un pilar esencial en numerosos campos científicos
e industriales. Su impacto abarca desde la identificación de compuestos en la
industria farmacéutica hasta la detección de contaminantes en el medio ambiente
y la garantía de calidad en la industria alimentaria. Este ensayo se adentrará en
los principios fundamentales, los tipos y las aplicaciones de la cromatografía,
destacando su importancia en el mundo científico actual.

DESARROLLO:

La cromatografía es un método de separación de mezclas complejas, que es

ampliamente utilizado en diversas ramas de la ciencia. Se puede utilizar para
cuantificar, identificar y separar los componentes de una mezcla. Para ello emplea
el principio de la retención selectiva, que consiste en el distinto comportamiento de
los componentes de una mezcla sobre un soporte específico (como un papel, un
gas, un líquido, una resina) y una fase líquida o gaseosa que fluye a través del
soporte.

De esa manera, la cromatografía emplea diversas técnicas que aprovechan las

diferencias en la velocidad de retención de cada componente, y puede separarlos,
identificarlos y cuantificarlos.

En muchos casos es clave la adsorción (diferente de la absorción, que está

referida a la difusión de un componente desde una fase hasta otra), concepto que
se refiere al proceso por el que las partículas son retenidas sobre una superficie.
De acuerdo a la diferencia de velocidades de adsorción sobre un soporte y a la
afinidad por este soporte de los componentes de la mezcla, podrán separarse para
luego ser cuantificados o identificados.

En general, todos los tipos de cromatografía dependen de una serie de

instrumentos, compuestos químicos y determinada tecnología. Debido a ello, es
importante conocer algunos conceptos para poder entender el funcionamiento de
las técnicas cromatografías:

 FASE ESTACIONARIA. Es una sustancia que se mantiene inmóvil

mientras se ejecuta la cromatografía.
 FASE MÓVIL. Es la sustancia que se mueve durante la cromatografía.
Puede ser un líquido o un gas. La muestra que contiene el analito se
administra en la fase móvil.
  ANALITOS. Son las sustancias que se van a separar, cuantificar y/o
identificar utilizando la cromatografía, es decir, son las sustancias que se
van a analizar.
 MUESTRA. Es la mezcla que se va a analizar. Puede estar constituida por
uno o varios analitos, y otros componentes que pueden no ser de interés,
de los que serán separados los analitos.
 TIEMPO DE RETENCIÓN. Es el tiempo que demora un analito en pasar
desde la columna o sistema por donde pase la fase móvil, hasta el detector
(equipo que puede dar una señal de detección utilizando alguna propiedad
del analito).
 SELECTIVIDAD. Es la capacidad de diferenciar cada componente en la
mezcla.
 ELUYENTE. También se refiere a la fase móvil cuando sale de la columna
cromatográfica.

El método cromatográfico consiste en inocular una muestra en una fase

estacionaria o fase móvil (dependiendo del tipo de técnica cromatográfica). Luego,
si por ejemplo, la fase móvil es la que contiene la muestra, pasa a través de una
fase estacionaria determinada.

La separación de los analitos dependerá de la afinidad de cada uno de los

componentes tanto por la fase estacionaria como por la fase móvil. Dependiendo
de su naturaleza, algunas sustancias tenderán a moverse con la fase móvil y otras
a permanecer sobre la fase estacionaria.

PRINCIPIOS BÁSICOS DE LA CROMATOGRAFÍA

La cromatografía se basa en la separación de componentes de una mezcla

mediante la interacción diferencial con dos fases: una fase estacionaria y una fase
móvil. La capacidad de distribución selectiva de estos componentes permite su
identificación y cuantificación.

TIPOS DE CROMATOGRAFÍA

Dependiendo de la tecnología utilizada, de la naturaleza del soporte (fase

estacionaria) y de la sustancia móvil (fase móvil), se pueden diferenciar los
siguientes tipos de cromatografía:
 CROMATOGRAFÍA EN PAPEL. La fase estacionaria está formada por una
tira de papel de filtro. La muestra a analizar se coloca en forma de gota
sobre un extremo del papel. Luego se sumerge la tira de papel en un
recipiente donde se encuentra la fase móvil, teniendo en cuenta que el
extremo donde está colocada la muestra quede en la parte de abajo del
papel. La fase móvil asciende por capilaridad arrastrando consigo la
muestra y separando cada componente según su afinidad por la fase
estacionaria. Este tipo de cromatografía se emplea principalmente cuando
cada componente de la muestra tiene un color diferente, entonces se puede
ver el despliegue de colores sobre el papel para identificarlos.
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA. El funcionamiento de esta técnica es
parecido al de la cromatografía en papel, pero en este caso la fase
estacionaria se construye depositando una resina polar (casi siempre sílica
gel), sobre una placa de vidrio o aluminio. Se coloca cierta cantidad de la
muestra a 1cm del borde inferior de la placa. Luego se sumerge esta placa,
teniendo en cuenta que el extremo que contiene la muestra debe quedar
hacia abajo, en un recipiente que contiene la fase móvil. La fase móvil
asciende por capilaridad separando los componentes de la muestra.
CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA. La fase estacionaria se coloca dentro
de una columna que puede ser de vidrio o acero inoxidable, entre otros
materiales. La fase móvil puede ser líquida o gaseosa. La muestra se
coloca en el extremo superior de la columna y se deja descender con la
fase móvil utilizando la gravedad. De este modo, la cromatografía en
columna se puede clasificar como:
CROMATOGRAFÍA SÓLIDO-LÍQUIDO. La fase estacionaria es sólida y la
móvil es líquida.
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDO-LÍQUIDO. Ambas fases son líquidas.
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDO-GAS. La fase estacionaria es líquida y la
móvil es gaseosa.
CROMATOGRAFÍA SÓLIDO-GAS. La fase estacionaria es un sólido y la
móvil es gaseosa.

Por otro lado, atendiendo al tipo de interacción del analito entre las fases
estacionarias y móviles, tenemos los siguientes tipos de cromatografía:

CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN. En este tipo de cromatografía la

fase estacionaria es un sólido, mientras que la fase móvil es un líquido. La
sustancia que forma la fase estacionaria puede ser alúmina (Al2O3), sílice
(SiO2) o resinas de intercambio iónico (matrices que tienen sitios
electrostáticamente activos, debido a lo que el analito se retiene en ellas
por interacción electrostática). La fase móvil puede estar formada por un
 solvente o una mezcla de solventes. Algunos componentes de la mezcla
serán retenidos con mayor fuerza que otros, de esta forma ocurre la
separación.
CROMATOGRAFÍA DE PARTICIÓN. Se da cuando la separación de los
analitos de la mezcla se produce por diferencias de sus solubilidades o
polaridades entre la fase estacionaria y la fase móvil, siendo ambas fases
líquidos inmiscibles. La tecnología de las fases estacionarias ha avanzado y
ya existen variedades de líquidos embebidos en sólidos y resinas que se
utilizan con este fin. En este sentido existen dos tipos de cormatografía
dependiendo de la polaridad de la fase estacionaria y la fase móvil:
En fase normal. La fase estacionaria es polar y la fase móvil es
apolar.
En fase reversa. La fase estacionaria es apolar y la fase móvil es
polar.
CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO. Cuando la fase
estacionaria es sólida y posee grupos funcionales ionizables, es decir, con
carga, que son capaces de intercambiar su carga con el analito. Puede
clasificarse en:
1.1.1. CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO CATIÓNICO. La fase
estacionaria contiene grupos funcionales cargados negativamente, por
lo que retiene cationes (cargados positivamente).
1.1.2. CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO ANIÓNICO. La fase
estacionaria contiene grupos funcionales cargados positivamente, por
lo que retiene aniones (cargados negativamente).
CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN MOLECULAR. La fase estacionaria
es un material poroso a través del que eluyen los analitos, dependiendo de
sus tamaños. En este tipo de cromatografía no existe ningún tipo de
interacción física o química entre los analitos y la fase estacionaria. Los
analitos de mayor tamaño eluyen primero, es decir, no son retenidos en la
fase estacionaria. Mientras que los analitos de menor tamaño quedan
atrapados en los poros de la fase estacionaria y van saliendo de ella a
medida que se pasa la fase móvil (líquida).

APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFÍA

1. Industria Farmacéutica: La HPLC se utiliza para analizar y cuantificar

compuestos en medicamentos, garantizando la calidad y la seguridad.
2. Ciencia Ambiental: La cromatografía permite detectar y cuantificar
contaminantes en muestras de suelo, agua y aire, contribuyendo a la gestión
ambiental.
3. Industria Alimentaria: La HPLC y la GC son herramientas cruciales para la
identificación de aditivos, contaminantes y compuestos nutricionales en
alimentos, asegurando la calidad y la seguridad alimentaria.

Desarrollos Recientes

Los avances tecnológicos han llevado a mejoras significativas en la

cromatografía. La cromatografía de líquidos de ultra alta resolución (UHPLC)
y la cromatografía de gases de alta resolución (HRGC) ofrecen una mayor
eficiencia y resolución en el análisis, permitiendo la separación de
componentes más complejos y la obtención de resultados más precisos.

CONCLUSIONES

La cromatografía no solo ha resistido la prueba del tiempo, sino que ha florecido y

se ha diversificado, adaptándose a las necesidades cambiantes de la ciencia y la
industria. Su capacidad para proporcionar información detallada sobre la
composición de sustancias químicas la convierte en una herramienta invaluable. A
medida que la tecnología continúa avanzando, es probable que la cromatografía
evolucione aún más, abriendo nuevas posibilidades para la investigación y la
innovación. Explorar el mundo de la cromatografía es sumergirse en un viaje
fascinante de separación y análisis, revelando los misterios de las mezclas y
desentrañando las complejidades de la química moderna.