Materia:

Procesos Biológicos

Práctica #5
Diálisis y Transporte a través de la Membrana

Docente:
Mariana Ponce Mendoza

Integrantes del Equipo:

Valeria Pérez García
Graciela Alondra Romero de la Vega
Luis Eduardo Haros De Jesús
María José Magaña Cacho
Diálisis y transporte a través intracelulares delimitados por una membrana.
Sin embargo, para aprovecharse de esta
de la membrana barrera las células ha tenido que desarrollar
Resumen sistemas para transportar moléculas
En esta práctica de laboratorio elaboramos un hidrosolubles e iones a través de sus
tubo de colodión esto para observar el membranas de forma específica y así poder
transporte a través de la membrana y si esta incorporar los nutrientes esenciales, excretar
logra pasarla o no. También con el uso del los productos residuales del metabolismo y
microscopio observamos lechuga, espinaca, regular las concentraciones intracelulares de
bugambilia y lavanda, con el fin de poder iones.
observar las propiedades de su membrana. Las células utilizan proteínas transmembrana
para transportar iones inorgánicos y pequeñas
Palabras clave: Diálisis, microscopio, moléculas orgánicas hidrosolubles a través de
observar, difusión, membrana. la bicapa. Con tiempo suficiente, casi cualquier
molécula abarca difundiendo a través de una
Introducción bicapa lipídica libre de proteína a favor de su
La diálisis es el proceso de separar las gradiente de concentración. Sin embargo, la
moléculas en una solución por la diferencia en velocidad de difusión varía en gran medida,
sus índices de difusión a través de una dependiendo en parte del tamaño de la
membrana semipermeables. Es una técnica molécula y, sobre todo, de su solubilidad
común de laboratorio, y funciona con el mismo relativa en aceite. En general, cuanto menor es
principio que la diálisis médica. Típicamente es la molécula y cuanto más soluble en aceite (es
una solución de varios tipos de moléculas es decir, tanto más hidrófoba o no polar) es más
puesta en un bolsa semipermeable de diálisis, rápidamente difunde a través de la bicapa. Las
como por ejemplo, en una membrana de la moléculas pequeñas no polares, como el
celulosa en poros y, el bolso sellado. El bolso Oxígeno y el Dióxido de Carbono, se disuelven
de diálisis sellado se coloca en un envase con con facilidad en las bicapas lipídicas y, por lo
una solución diferente, o agua pura. Las tanto, se difunden con rapidez a través de
moléculas lo suficientemente pequeñas como ellas. Las moléculas pequeñas polares pero no
para pasar a través de los poros (a menudo cargadas, como el agua o la urea, también
agua, sales y otras moléculas pequeñas) difunden a través de una bicapa, aunque
tienden a moverse hacia dentro o hacia afuera mucho más despacio. Por el contrario, las
del bolso de diálisis en la dirección de la bicapas lipídicas son muy impermeables a
concentración más baja. Moléculas más todas las moléculas cargadas (iones), por muy
grandes (a menudo proteínas, ADN, o pequeñas que sean: la carga y el elevado
polisacáridos) que tienen dimensiones grado de hidratación de tales moléculas les
significativamente mayores que el diámetro del impiden penetrar en la fase hidrocarbonada de
poro son retenidas dentro del bolso de la la bicapa. Así, las bicapas lipídicas sintéticas
diálisis. Una razón común de usar esta técnica son 109 veces más permeables al agua que
puede ser para quitar la sal de una solución de los iones, incluso a los de tamaño reducido
proteína. La técnica no distinguirá como el Na+ o el K+. Como las bicapas
efectivamente entre proteínas. lipídicas sintéticas, las membranas celulares
Debido a su interior hidrofóbico, la bicapa de permiten el paso por simple difusión del agua y
una célula impide el paso a la mayoría de las las moléculas no polares. Sin embargo, las
moléculas polares. Esta función de barrera membranas celulares también son permeables
permite a la célula mantener en su citosol a diversas moléculas polares que atraviesan
ciertos solutos a concentración distintas en el con gran lentitud las bicapas lipídicas
líquido extracelular y en el líquido intracelular y sintéticas, tales como iones, azúcares,
en cada uno de los compartimientos aminoácidos, nucleótidos y muchos
metabolitos celulares. Unas proteínas de adyacentes se pueden comunicar
membrana, que reciben el nombre de intercambiando material. Además, la
proteínas de membranas biológicas. Cada membrana plasmática desempeña un papel
proteína está destinada al transporte de una clave en las interacciones célula-célula y en la
clase particular de moléculas como (iones, señalización transmembrana.
azúcares o aminoácidos) y con frecuencia
únicamente de una cierta especie molecular de Las membranas también forman
la clase (Monge, 2010). compartimentos especializados dentro de la
Las membranas son estructuras dinámicas célula. Dichas membranas intracelulares
complejas compuestas de lípidos, proteínas y ayudan a dar forma a muchas de las
moléculas que contienen carbohidratos. La estructuras morfológicamente distinguibles
estructura básica de todas las membranas es (orgánulos); por ejemplo, mitocondrias, retículo
la bicapa lipídica. Esta bicapa está formada endoplásmico (ER), Golgi, gránulos
por dos láminas de fosfolípidos, en las que los secretores, lisosomas y el núcleo. Las
grupos de cabeza polar hidrófilos se alejan membranas localizan enzimas, funcionan
entre sí, y se exponen al entorno acuoso en como elementos integrales en el acoplamiento
las superficies interior y exterior de la excitación-respuesta, y proporcionan sitios de
membrana. Las colas no polares hidrofóbicas transducción de energía como en la
de estas moléculas están orientadas una hacia fotosíntesis de las plantas (cloroplastos), y en
la otra, en la dirección del centro de la la fosforilación oxidativa (mitocondrias).
membrana. Los canales iónicos dependientes Los cambios en los componentes de la
de ligandos o de voltaje se emplean a menudo membrana pueden afectar el balance hídrico y
para mover moléculas cargadas (Na+, K+, el flujo de iones, y por tanto muchos procesos
Ca2+, etc.) a través de las membranas hacia dentro de la célula. Las deficiencias o
abajo de sus gradientes electroquímicos. Las alteraciones específicas de ciertos
moléculas grandes pueden entrar o salir de las componentes de la membrana (p. ej.,
células a través de mecanismos tales como la causadas por mutaciones en genes que
endocitosis o la exocitosis. Estos procesos a codifican las proteínas de membrana)
menudo requieren la unión de la molécula a un conducen a una variedad de enfermedades.
receptor, que proporciona especificidad al En resumen, la función celular normal depende
proceso. en forma crítica de membranas normales
Las membranas son estructuras dinámicas y (Anthony Weil).
altamente fluidas compuestas por una bicapa
lipídica y proteínas asociadas. En el caso de El reactivo de Benedict está compuesto por:
las membranas plasmáticas, estas forman sulfato cúprico, citrato de sodio y carbonato
compartimientos cerrados alrededor del anhidro de sodio. Funciona como una reacción
de oxidación que nos ayuda al reconocimiento
citoplasma para definir los límites celulares. La
de azúcares reductores, es decir, aquellos
membrana plasmática tiene permeabilidad
compuestos que presentan su OH anomérico
selectiva y actúa como barrera, manteniendo
libre; como por ejemplo la glucosa, lactosa o
así las diferencias de composición entre el maltosa, en la reacción de Benedict, se puede
interior y el exterior de la célula. La reducir el Cu2+ que presenta un color azul, en
permeabilidad molecular selectiva de la un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por
membrana se genera a través de la acción de el sulfato de cúprico) es capaz de reducirse
transportadores específicos y canales iónicos. por efecto del grupo aldehído del azúcar
La membrana plasmática también intercambia (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se
material con el entorno extracelular por observa como un precipitado rojo ladrillo
exocitosis y endocitosis, y existen áreas correspondiente al óxido cuproso (Cu2O), que
especiales de unión de membrana –uniones precipita de la solución alcalina con un color
gap– a través de las cuales las células rojo-naranja, a este precipitado se lo considera
como la evidencia de que existe un azúcar las moléculas podrán llegar, mientras que las
reductor (Simoni et al. 2002). moléculas que no pasen por la membrana se
quedarán en el medio donde se encontraban,
Planteamiento del problema
realizando así una filtración.
Mostrar el correcto transporte de membrana y
En la siguiente prueba, la solución salina y la
que puede pasar si esto no se cumple
absorción del agua con el papel filtro harán
correctamente.
que el medio sea muy hipertónico y provocará
Para lograr observar de manera correcta las
la salida de agua que se encontraba dentro de
hojas, se deben tomar muestras
la célula y se encogerá, al momento de
agregar el agua destilada la célula volverá a su
Numerosas moléculas pueden atravesar sin
estructura normal y puede llegar hasta
dificultad la membrana, pero hay otras a las
hincharse.
que, por su composición, no les es fácil
Método
hacerlo. El transporte de las sustancias a
Se tomaron muestras de lechugas, para
través de la membrana se realiza por
posteriormente con un bisturí realizar cortes
movimientos de entrada y salida de moléculas.
hasta obtener una capa delgada de la lechuga
La importancia de estos movimientos radica y poder observar en el microscopio en
en que permiten eliminar los desechos e diferentes aumentos.
ingresar nutrientes para el correcto De igual forma se tomaron muestras del tallo
funcionamiento de la célula. (Rojas Mendoza) de una espinaca, con el bisturí cortamos hasta
conseguir un corte delgado y colocarlo en el
Justificación portaobjetos para visualizar en el microscopio
La diálisis es un proceso de separación de en 5x, 10x, 40x.
moléculas basado en la diferencia de difusión Por último se tomó una muestra de bugambilia,
de las moléculas pasando a través de una se obtuvo una muestra pequeña que de igual
membrana que permita este paso molecular. manera colocamos en el microscopio y
Esto hará que la concentración de glucosa y visualizamos en los aumentos adecuados, 5x,
solución salina se separen por medio de una 10x y 40x.
membrana que se interponga.
El hecho de que la célula se encuentre en un Para la segunda parte de la práctica se amarró
medio con ciertas características hará que esta un extremo del tubo de colodión introduciendo
cambie su estructura y funciones dependiendo 5 ml de solución salina de glucosa al 5% y
del medio, por ejemplo, si el medio es otros 5 ml de solución salina al 0.9%, una vez
hipotónico la célula se hincha, y si el medio es esto se cerró firmemente del otro extremo y se
hipertónico esta se encoge. (Cynthia C. colocó dentro de un vaso de precipitado con
Rodriguez, 2019). agua destilada; se dejó así por 30 minutos.
Después del tiempo de espera, se tomaron
Objetivos dos gotas del agua que se contenía en el vaso
El objetivo de la práctica es observar las de precipitados, colocándolas en un
propiedades de las membranas biológicas y su portaobjetos con nitrato de plata. De la misma
medio de transporte, lograr el uso correcto de manera se tomaron otros 5 ml sobre un tubo
los microscopios, para la correcta observación. de ensayo, adicionando 2 ml de reactivo de
Benedict.
Hipótesis
La mezcla de las 2 sustancias que Resultados
agregaremos (solución salina y solución de
glucosa) se separarán gracias al método de PRIMER EXPERIMENTO
diálisis, que se consigue colocando una
membrana que dé paso a otro medio al cual
Foto 1. Muestra de lechuga visualizada a 5X.
En esta muestra se pueden observar el Foto 3. Muestra de lechuga visualizada a 40X.
conjunto de células de una hoja de lechuga. En la foto 3 no se logró enfocar de manera
Por el objetivo tan pequeño se observan de correcta nuestra muestra, pero al menos sí
muy poco tamaño pero, sí se pueden lograr pudimos observar agrandadas las células de la
identificar. De igual manera en las nervaduras misma. Identificando que en los bordes de
(las líneas uniformes de color amarillo) cada una de ellas se presenta una tonalidad
también se pueden delimitar las células verde con más intensidad.
presentes.

Foto 4. Muestra del tallo de espinaca a 5X

Foto 2. Muestra de lechuga visualizada a 10X.
En esta muestra se puede observar que en
En la foto 2 se puede visualizar de mejor
algunas partes no se pueden visualizar células
manera las limitaciones de cada una de las
de color verde (cloroplastos). Las células se
células. Con este objetivo fue con el que mejor
pueden diferenciar pero no demasiado bien
pudimos observar, sobre esta, en especial se
debido al tamaño pequeño del objetivo.
pueden diferenciar el color verde y se va
aclarando.
 vagamente las limitaciones de cada una de las
células.

Foto 5. Muestra del tallo de espinaca a 10X

De igual manera, en esta muestra ya se logran
Foto 7. Muestra de la nervadura de la lechuga a
visualizar de mejor manera las células que
5X
contienen los cloroplastos. La particularidad
En esta imagen podemos observar una
que encontramos en esta muestra fue que,
muestra delgada. Visualizamos que en esta,
como se puede observar, las células con una
no se muestran tonalidades verdes,
tonalidad verde se encontraron en los
simplemente se delimitan las células
costados de la muestra y en el centro no se
presentes.
encontraban estas.

Foto 8. Muestra de la nervadura de la lechuga a

Foto 6. Muestra del tallo de espinaca a 40X 10X
En esta foto notamos que con este objetivo por La ventaja que tuvo esta muestra es que nos
alguna razón no pudimos enfocarlo agrandó el campo visual y pudimos observar
correctamente, sólo se pueden diferenciar
de una mejor manera las limitaciones de las se vé totalmente diferente que como a las
células. anteriores. También es posible visualizar las
nervaduras del pétalo.

Foto 9. Muestra de la nervadura de la lechuga a

40X Foto 11. Muestra del pétalo de una bugambilia a
Con este objetivo no se pudieron apreciar bien 10X
las células debido a que no contábamos con Como se puede observar, esta muestra es de
aceite de inmersión, pero de igual manera muy buena calidad, algunas tienen una cierta
podemos comparar el cambio de tamaño de tonalidad más intensa que otras. En lo
las células. particular, a nuestro equipo fue una de las
muestras que más nos sorprendió ver.

Foto 10. Muestra del pétalo de una bugambilia a

5X Foto 12. Muestra del pétalo de una bugambilia a
La docente nos recomendó observar las 40X
células de diferentes estructuras, es por eso Al igual que las pasadas, esta muestra no se pudo
que elegimos esta muestra. Como se observa, observar correctamente.
 Foto 15. Muestra del pétalo de lavanda a 40X
En esta foto se notan más los puntos de color
Foto 13. Muestra del pétalo de lavanda a 5X morado más grandes que se plasman en la
La diferencia con este pétalo es muy evidente tonalidad del pétalo.
debido al color. En este pétalo están presentes
tonalidades verdes cerca de las nervaduras y
moradas en la mayor parte del pétalo.

Foto 16. Muestra de la hoja de lavanda a 5X

Con esta muestra se puede observar que sólo
Foto 14. Muestra del pétalo de lavanda a 10X en las partes de la nervadura de la hoja tienen
Con la visualización de la muestra más de una tonalidad verde y las demás partes de la
cerca, se pueden observar puntos de color hoja son de color blanco.
morado en las células.
 Foto 19. Bolsa de colodión
Foto 17. Muestra de la hoja de lavanda a 10X Para poder separar la bolsa de colodión fué
En esta muestra se observan las células de un necesario dejarla aproximadamente 1 minuto
tamaño mayor y se diferencian cada una de bajo agua en un vaso de precipitado y así
ellas. poder seguir con el experimento.

Foto 20. Bolsa de colodión con solución salina

y solución de glucosa
Foto 18. Muestra de la hoja de lavanda a 40X Después cerramos un extremo del tubo y
En esta imagen se puede ver la degradación agregamos 5 ml de solución salina al 0.9% y 5
del color de las células entre la nervadura y la ml de solución glucosada al 5%, luego
hoja. cerramos el otro extremo y en un vaso de
precipitado con agua destilada lo sumergimos
SEGUNDO EXPERIMENTO por 30 minutos.
 Foto 23. Resultados del tubo de ensayo
Lamentablemente no logramos obtener el
resultado que se esperaba ya que el color
Foto 21. Tubo de ensayo con reactivo Benedict
debió cambiar a rojo ladrillo y en nuestra se
Tomamos 5 ml del agua del exterior del tubo
torno un color azul blanquecino.
de colodión, para luego agregar 2 ml de
reactivo Benedict.
Análisis de resultados
PRIMER EXPERIMENTO
Lo que observamos en todas las muestras son
las diferentes células que se encuentran en
una hoja y que actúan en conjunto para poder
darle forma y estructura, además de cumplir
con sus funciones de metabolismo y
protección.
Lo que observamos en la primera muestra se
trata de una hoja de lechuga, las células de
esta son esféricas y verdes, esto último explica
que existe la presencia de cloroplastos, estos
contienen clorofila dentro lo que les da el tono
verde.
La segunda muestra que observamos fue el
tallo de la espinaca, lo que vimos fueron
células alargadas y ordenadas de forma lineal
casi uniforme, había células con mayor
Foto 22. Tubo de ensayo con reactivo Benedict tonalidad verde que otras, lo que muestra más
calentándose
cantidad de cloroplastos en unas partes.
Después calentamos ligeramente el tubo para
La tercera muestra fue la nervadura de una
observar si este obtiene un color rojo ladrillo.
hoja de lechuga, la nervadura de la lechuga no
tiene mucha tonalidad verde, se ve casi
transparente, esto mismo observamos en el
microscopio. Solamente vimos las limitaciones
de las células que se veían transparentes.
En la cuarta muestra fue una que más nos 4. ¿Qué se demuestra en el experimento con
llamó la atención y fue la hoja de una
bugambilia, aquí las células estaban muy el tubo de colodión, ¿Por qué actúa el
juntas y en desorden, además de que se veían colodión como una membrana?
muy pigmentadas por betalaína, el pigmento
que le da ese color rosa. Actúa como membrana porque permite el paso
La quinta muestra fue un pétalo de hoja de del agua, pero retiene los sólidos suspendidos
lavanda, no pudimos observar con claridad y otras sustancias.
esta muestra, pero si logramos ver su
coloración morada en algunas células. 5. Explica por qué se hace la prueba del
Y por último observamos la hoja de la planta benedict después de introducir el tubo de
de lavanda, lo peculiar aquí fue que las
inervaciones en esta hoja eran de un verde colodión.
intenso, no como las demás que se veían
Para poder observar si hay presencia de
transparentes. Eso nos dio a entender que los
glucosa.
cloroplastos se concentran mayormente en sus
inervaciones. 6. ¿Explica cuál es la finalidad del sistema

Preguntas después de la práctica de utilizar una membrana de diálisis para

1. Menciona dos ejemplos de difusión en la purificación de proteínas?

distintos medios. La finalidad con este procedimiento es poder

separar las moléculas dependiendo de su
- El perfume de las flores en un sitio tamaño.
cerrado.
- El humo que desprenden los Conclusión
automóviles en el tráfico. Las plantas están constituidas por muchas
2. ¿Qué otros factores, además de la células, estas células pueden adaptar un color,
forma y ordenamiento distinto según la función
concentración del soluto, afectan la para la que están destinadas.
Además, con el segundo ejercicio se trató de
velocidad de difusión?
de simular la difusión de la solución de glucosa
● La temperatura y sodio a través del tubo de colodión hacia el
● El tamaño de la molécula involucrada agua destilada, con ello fue que se utilizó el
● La distancia que necesitan viajar las reactivo de Benedict, ya que este es un
moléculas. identificador de azúcares reductores.
● Barreras que se pueden encontrar.

3. Investiga que tipos de moléculas pasan a Referencias

Monge, Diaz. (2010). Fisiología de la
través de la membrana en forma pasiva, membrana semipermeable. Fragilidad
Osmótica.
compara sus características con su
Anthony Weil, P. (n.d.). Membranas: estructura
función dentro de las células. y función. [Link]. Retrieved
September 10, 2022, from
Las moléculas polares sin carga también [Link]
atraviesan la bicapa lipídica, si su tamaño es .aspx?bookid=2743&sectionid=230056253
suficientemente reducido. Este es el caso del
Simoni, Robert D. Hill, Robert L. Vaughan,
agua, de CO₂, la urea y el etanol que difunden
rápidamente a través de la bicapa lipídica. Martha. (2002). Solución de Benedict, un
reactivo para medir azúcares reductores: la
química clínica de Stanley R. Benedict. Vol. 16.
pp. 10 – 11. Revista de Química Biológica