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´´DETERMINATION OF SEED VIABILITY ´´ Determinación de la viabilidad de las
semillas
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Renzo Tarrillo Villanueva
National University of Trujillo
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PRACTICE REPORT
´´DETERMINATION OF SEED VIABILITY ´´
Determinación de la viabilidad de las semillas
Renzo Tarrillo Villanueva
• Universidad Nacional de Trujillo
Corresponding author: renzotarrillo30@[Link]
Published: 25 Enero 2022.
1. INTRODUCCION Se basa sobre el principio que todo tejido vivo
contiene enzimas deshidrogenasas (respiración)
Las semillas que permanecen vivas y son capaces activas que catalizan reducciones químicas.
de germinar cuando las condiciones ambientales
son adecuadas, se dice que son viables. Al entrar en contacto el cloruro o bromuro de 2,
3, 5 - Trifeniltetrazolio con las células vivas de la
Para evaluar y cuantificar la viabilidad se pueden semilla se reduce en una sustancia roja estable y
realizar diferentes tipos de test, entre los que no difundible, el trifenil - formasan. Esto hace
destacan: ensayos de germinación, test del posible distinguir entre las partes vivas y las
tetrazolio y radiografía con rayos X (Pérez & Pita, muertas en una semilla; se observa, las células
2001). viables completamente teñidas de rojo y las
Para la realización del ensayo de germinación, células muertas sin teñir.
las semillas se disponen sobre papel de filtro Por último, el ensayo de radiografía con rayos X
humedecido con agua destilada, en placas Petri; es rápido y no destructivo. En las radiografías
incubándose, en cámaras de germinación con que se obtienen se pueden diferenciar entre
control de temperatura e iluminación. La semillas sin embriones (semillas vanas), de las
emergencia de la radícula es el criterio que se que tienen un embrión bien formado; así como
utiliza para determinar si una semilla ha distinguir si en el embrión existen
germinado expresándose los resultados malformaciones o algún tipo de daños:
obtenidos como porcentaje de semillas mecánicos, por insectos, etc (Pérez & Pita,
germinadas (porcentaje de viabilidad). 2001).
Así mismo, la determinación de la viabilidad por El objetivo del presente informe es: determinar
medio del Tetrazolio, se presenta como una a corto plazo la capacidad de germinación que
herramienta útil para estimar rápidamente la presentan las semillas utilizando cloruro o
capacidad germinativa de las semillas. bromuro de 2,3,5-Trifeniltetrazolio.
1 Universidad Nacional de Trujillo
2. MATERIALES Y METODOS 3. Para cada tratamiento, realizar un corte
longitudinal a cada semilla de tal manera que
resulten dos mitades exactamente iguales. Tener
Material Vegetal
cuidado de hacer el corte a nivel del embrión.,
- Semillas de Zea mays “maíz”
haciendo uso de una pinza y bisturí.
Material de Laboratorio 4. Colocar las mitades de las semillas de cada
tratamiento en placas Petri rotuladas
- Solución de Cloruro o Bromuro de 2,3,5-
adecuadamente indicando el correspondiente
Trifeniltetrazolio (0.5%).
tratamiento.
- Placas Petri
- Discos de papel de filtro 5. Agregar a cada placa Petri 5 ml de una solución
- Navajas o Bisturí de cloruro o bromuro de 2,3,5-Trifeniltetrazolio
- Pinzas al 0.5 % y cuidar que la solución quede en
contacto con la superficie cortada de la semilla.
- Papel aluminio
- Agua destilada 6. Colocar las placas en la oscuridad durante 30
- Vasos de precipitación minutos.
- Una cocina 7. Transcurrido este tiempo, observar la
coloración rojiza que aparece a nivel del embrión
PROCEDIMIENTO
cuando una semilla es viable.
1. Seleccionar semillas de Zea mays “maíz” y 8. Registre e interpretar sus resultados y
conformar 2 grupos de 20 semillas cada uno. expresarlos en porcentajes.
2. Un grupo hervir las semillas en agua destilada NOTA: El embrión es el único que colorea en
por tres minutos, otro grupo de semillas se todas sus partes si están vivas.
procede a imbibirlas en agua destilada.
3. RESULTADOS
Tabla 1. Potencial germinativo en semillas de Zea mays “maíz” mediante la prueba del 2, 3, 5-
Trifeniltetrazolio.
(30 MIN EN 2,3,5 TRIFENILTETRAZOLIO)
N° DE SEMILLAS
TRATAMIENTO % DE VIABILIDAD
VIABLES
Semillas
17 85%
imbibidas
Semillas
0 0%
hervidas
2 Universidad Nacional de Trujillo
❖ Calculando % de viabilidad:
20 − − − − − − − 100%
17 − − − − − − − 𝑋
17(100%)
𝑋= = 85%
20
4. DISCUSION
• Una investigación similar ocurre en
• Se presentó una cantidad de 17 Trujillo, Perú con el "cacao" puesto que
semillas viables de aquellas que usaron presenta semillas recalcitrantes (no
el tratamiento de hidratación sobreviven en condiciones de sequedad
(imbibidas), esto representa el 85% de o frío cuando son conservadas ex situ),
viabilidad del total de 20 semillas donde se propuso como objetivo de
agrupadas en este tratamiento (Doria, investigación determinar el lapso de
2010). viabilidad de las semillas de Theobroma
cacao L. (Malvaceae) "cacao" en
• Se presentó una cantidad de 0 condiciones de Laboratorio (López et al.,
semillas viables las cuales usaron el 2018).
tratamiento de ebullición (hervidas),
esto representa el 0% de viabilidad del
total de 20 semillas agrupadas en este 5. CONCLUSIONES
tratamiento (Doria, 2010).
Se logró determinar a corto plazo la capacidad de
germinación que presentan las semillas de Zea
• La viabilidad de las semillas depende
mays utilizando cloruro o bromuro de 2,3,5-
de las condiciones externas
Trifeniltetrazolio.
(temperatura, iluminación, etc) e
internas (enzimas, humedad, genotipo, Alguna recomendación sería utilizar el método
etc) que presente durante la de Tetrazolio en semillas de Persea Americana
germinación (Pérez & Pita, 2001). ´´palta´´ y Mangifera indica ´´mango´´ ya que es
más rápido y fácil de usar, donde podamos
• La coloración rojiza es debido a la verificar si son semillas viables y posteriormente
reacción del Tetrazolio con las enzimas puedan germinar adecuadamente en el sustrato
del embrión, las cuales indican presencia requerido, puesto que son de uso comercial por
de tejidos vivos, contrario a lo que pasa su importancia agronómica.
con tejidos muertos tornándose incoloro
(Pérez & Pita, 2001).
• Las enzimas se desnaturalizan por las
altas temperaturas presentadas en las
semillas hervidas (Soriano, 2022).
3 Universidad Nacional de Trujillo
6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ANEXOS
Pérez, F., & Pita, J. (2001). Viabilidad, vigor,
longevidad y conservación de semillas. SALJEN:
Madrid.
López Medina, S. E., Mostacero León, J., Gil
Rivero, A. E., López Zavaleta, A., & De la Cruz
Castillo, A. (2018). Lapso de viabilidad de
semillas de Theobroma cacao L.(Malvaceae)"
cacao" en condiciones de laboratorio, La
Libertad, Perú. Arnaldoa, 25(2), 481-488.
Doria, J. (2010). Generalidades sobre las
semillas: su producción, conservación y
almacenamiento. Cultivos tropicales, 31(1), 00-
. de semillas.
Fig. 1. Corte longitudinal
00.
González Vera, M. J., Zanatta Aumonde, T.,
Meneghello, G. E., Noguez Martins, A. B.,
Aquino, Y., & Peña, P. (2019). Protocolo de
análisis de viabilidad de semillas de chía
mediante test de tetrazolio. Revista mexicana de
ciencias agrícolas, 10(7), 1481-1489.
Zuluaga, M. S., Acciaresi, H. A., & Chidichimo, H.
O. (2004). Comparación de la viabilidad de las
semillas obtenidas por medio de las técnicas de
extracción física por lavado y de germinación.
Planta Daninha, 22, 225-229.
Bidwell, R. G. S. (1993). Fisiología vegetal (No.
968-463-015-8. 02-A4 LU. FT-FSG. 3.). AGT.
Vozzo, J. A., Patel, R., & Terrel, A. (2000). Fig. 2. Uso de Tetrazolio en semillas cortadas.
Determinación de la viabilidad de las semillas de
Juglans nigra a través de imágenes obtenidas
usando tomografía computarizada y resonancia
magnética. In In: Salazar, Rodolfo, coordinador.
II Simposio sobre avances en la produccion de
semillas forestales en America Latina—
memorias; 1999 octubre 18-22; Santo Domingo,
Republica Dominicana. Turrialba, Costa Rica:
CATIE: 163-167..
Fig. 3. Reacción del embrión con Tetrazolio.
4 Universidad Nacional de Trujillo
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