Control Microbiano y Métodos Efectivos
Control Microbiano y Métodos Efectivos
Esterilización: Es la eliminación o la destrucción de todas las formas de vida microbiana incluidas las endosporas.
El calor es el método más común para destruir microorganismos. Un agente que produce esterilización se
denomina esterilizante.
Esterilización comercial: Aplicación de calor limitado para destruir las endosporas de Clostridium botulinum,
bacteria que puede producir una toxina mortal en alimentos enlatados.
Desinfección: Control dirigido a la destrucción de microorganismos perjudiciales (no formadores de endosporas),
que no es lo mismo que la esterilidad completa. La desinfección puede efectuarse con sustancias químicas,
radiación ultravioleta, agua en ebullición o vapor. En la práctica, se aplica un desinfectante para tratar una
superficie inerte o una sustancia. Ejemplos: ácido fénico, formaldehido, cloro, bicloruro de mercurio. En leche se
realiza la pasteurización. Se aplica la desinfección en pisos, ropa, vajillas.
Antisepsia: Son aquellas sustancias que destruyen o inhiben microorganismos específicamente en contacto con
el cuerpo humano. Se aplica para designar las técnicas que impiden el acceso de todas las bacterias no deseables
en el campo de trabajo o de observación. Asepsia, ausencia de gérmenes infecciosos en tejidos vivos.
Desgerminacion: Eliminación de microorganismos de un área limitada, como la piel alrededor de sitio de
inyección. Se trata sobre todo de eliminación mecánica más que la muerte de la mayor parte de los microbios
aplicando un algodón embebido en alcohol.
Sepsis: Degradación, descomposición o putrefacción, indica contaminación bacteriana. Es el estado tóxico o de
enfermedad que resulta del crecimiento de microorganismos perjudiciales en tejidos vivos.
Microbicida – germicida – biocida: Los nombres de los tratamientos que producen la muerte directa de los
microorganismos llevan el sufijo –cida, que significa muerte. Biocida o germicida, mata microorganismos.
Fungicida o micocida mata a los hongos, viricida, inactiva a los virus.
Microbiostasis – bacteriostasis – fungistaticos: Sus nombres llevan el sufijo –stàtico o – stasis, que significa
detener o estabilizar como en bacteriostasis, una vez eliminado el agente bacteriostático podría reanudarse el
crecimiento. Ejemplo, la desecación, temperaturas muy bajas, soluciones hipertónicas.
Saneamiento: Tratamiento destinado a disminuir los recuentos microbianos en utensilios de comida y bebida
hasta niveles de seguridad de salud pública y minimizar las posibilidades de transmisión de un usuario a otro. Se
aplica para el cuidado diario de equipos, plantas de alimentos, en los restaurantes.
Agentes antimicrobianos: Son los que interfieren el crecimiento y la actividad de los microorganismos, se refiere
a la inhibición del desarrollo.
Agentes terapéuticos: Son los que se utilizan en el tratamiento de enfermedades infecciosas
Temperatura: un aumento de la temperatura con otro agente químico acelera la destrucción de los
microorganismos. La temperatura está en relación inversa al tiempo.
Tiempo: se debe conceder un tiempo de contacto suficiente para que pueda producirse cualquiera de las
reacciones físicas o químicas.
Concentración: su eficacia no está relacionada linealmente sino exponencialmente, cuanto más concentrado es
más rápida y segura es su acción.
pH: la acción letal ò toxica de agentes nocivos es incrementada por el aumento en la concentración de
hidrogeniones.
Características del medio:
Las propiedades físicas y químicas del medio de cultivo o de las sustancias que contienen en el que habitan
los microorganismos tienen gran influencia en la velocidad y eficacia de la destrucción microbiana.
El calor es más eficaz en un medio ácido que en un medio alcalino.
La consistencia del material acuoso influye marcadamente en la penetración del agente.
Las concentraciones altas de carbohidratos aumentan la resistencia térmica de los organismos.
La presencia de materia orgánica reduce notablemente la eficacia de un agente químico antimicrobiano
por inactivar o proteger al microorganismo.
Humedad: Las reacciones químicas necesarias para la acción de algunos desinfectantes son facilitados por la
presencia de agua. Es probable que la resistencia de las endosporas bacterianas al calor sea causada por su
estado de deshidratación.
Clase de microorganismos: Las especies de microorganismos difieren en la susceptibilidad a los agentes físicos y
químicos. Las células vegetativas en desarrollo son más susceptibles que las endosporas las cuales son muy
resistentes porque son capaces de sobrevivir en condiciones físicas o químicas muy adversas.
Estado fisiológico de las bacterias: Las células jóvenes por tener un intenso metabolismo son más vulnerables
que las células envejecidas, de menor actividad metabólica. Un agente químico no afectará a las células que no
estén en desarrollo.
Cantidad de microbios: Cuantos más microbios haya al comienzo del tratamiento más tiempo consumirá eliminar
la población completa.
Características microbianas:
Las bacterias gramnegativas suelen ser más resistentes que las grampositivas a los desinfectantes y
antisépticos.
Los virus sin envoltura suelen ser más resistentes que los que presentan envoltura a los desinfectantes y
los antisépticos.
1) Destrucción por:
Calor.
Agentes químicos (desinfectantes).
Radiaciones (rayos X – LUV).
Agentes mecánicos.
2) Separación:
Filtración.
Centrifugación a alta velocidad.
3) Inhibición:
Bajas temperaturas.
Desecación.
Combinación de bajas temperaturas y desecación.
Presión osmótica elevada (jarabes, salmuera).
Productos químicos y fármacos: colorantes como la eosina azul de metileno, farmacoquimioteràpicos (sulfas
y antibióticos).
1) CALOR: El calor destruye a los microorganismos mediante la desnaturalización de las enzimas, es decir, los
cambios resultantes de la estructura tridimensional de estas proteínas producen su inactivación. Ejemplo,
ciertas vitaminas o algunos antibióticos en solución podrían ser inactivados por el calor. Muchos materiales de
laboratorio u hospitalarios como las sondas de goma y de látex, se alteran con el calentamiento repetido.
También hay consideraciones económicas, puede ser menos costoso utilizar material plástico desechable y
preesterilizado que lavar y esterilizar repetidamente el material de vidrio.
Punto de muerte térmica (PMT): Es la temperatura más baja necesaria para causar la muerte de todas las
bacterias en una suspensión líquida particular en 10 minutos. Otro factor que se debe considerar en la
esterilización es el tiempo requerido, que se expresa como:
Tiempo de muerte térmica (TMT): El menor tiempo necesario para que todas las bacterias de un cultivo
líquido mueran a una temperatura determinada. Tanto el PMT como el TMT son guías útiles que indican la
intensidad del tratamiento requerido para destruir a una población dada de bacterias. Un tercer concepto
relacionado con el grado de resistencia bacteriana al calor es:
Tiempo de reducción decimal (TRD o valor D): Es el tiempo en minutos, en el que se destruye el 90% de la
población de bacterias a una temperatura determinada.
Calor húmedo a alta temperatura combinado con un alto grado de humedad. El calor húmedo destruye a los
microorganismos sobre todo por la coagulación de proteínas (desnaturalización), que es causada por la
rotura de los enlaces de hidrógeno que mantiene la estructura tridimensional. Este proceso de coagulación
es familiar para quien haya observado cómo se cocina la clara del huevo.
Calor seco por:
a) Cocimiento prolongado en el horno (calor indirecto): -˃Esterilización por aire caliente. Los objetos que
se van esterilizar por este método se colocan en una estufa a una temperatura de alrededor de 180º C
durante cerca de 2 horas para asegurar la esterilización. Lapso más prolongado y temperatura más
elevada en comparación con el calor húmedo. Se utiliza este método para esterilizar cristalería,
matraces, placas de Petri, balones los cuales deben estar completamente secos y acondicionados, los
cuales se colocan en aparatos denominados hornos o estufas. También se puede esterilizar aceites
minerales, vaselina, talco. No se pueden esterilizar por este método sustancias volátiles, soluciones con
agua – alcohol.
b) Incineración completa (calor directo): El calor seco mata por los efectos de la oxidación. Uno de los
métodos más sencillos de esterilización por calor seco es el flameado. Este método se utiliza muchas
veces en el laboratorio de microbiología para esterilizar asas de siembra, calentando el alambre al rojo
vivo. Se utiliza un principio similar en la incineración, una forma eficaz de esterilizar y desechar
recipientes de cartón, bolsas y ropa contaminados. El calor seco es un método de esterilización
relativamente ineficaz porque el aire y otras sustancias son malas conductoras del calor y a menor
contenido de agua menor la facilidad de coagulación de proteínas.
3) EBULLICIÓN: Causa la muerte de las formas vegetativas de las bacterias patógenas, de casi todos los virus y de
los hongos en unos 10 minutos. Algunas endosporas bacterianas pueden resistir a las temperaturas de ebullición
durante más de 20 horas. Por consiguiente, la ebullición, no siempre es un método de esterilización confiable.
Se puede emplear la ebullición para esterilizar instrumentos y utensilios, para higienizar los biberones, jeringas.
Agujas para inyecciones.
4) PASTEURIZACION: Louis Pasteur descubrió un método para prevenir el deterioro de la cerveza y del vino,
utilizando un calentamiento leve que resultaba suficiente para destruir a los microorganismos que causaban el
problema de deterioro particular sin alterar de modo notorio el sabor del producto. Se aplicó el mismo principio
a la leche para producir lo que hoy se denomina leche pasteurizada. El objetivo de la pasteurización de la leche
es eliminar los microorganismos patógenos, también disminuye la cantidad de otros microorganismos, lo que
prolonga la buena calidad de la leche en condiciones de refrigeración. Muchas bacterias relativamente
resistentes al calor (termodùricas) sobreviven a la pasteurización pero es poco probable que causen
enfermedades o el deterioro de la leche refrigerada. Otros productos, como el helado, el yogur y la cerveza,
tienen sus propios tiempos y temperaturas de pasteurización. Hay varias razones que explican estas variaciones,
el calentamiento es menos eficaz en los alimentos que son más viscosos y la presencia de grasas puede tener un
efecto protector sobre los microorganismos.
En el tratamiento de pasteurización clásico de la leche: se exponía a una temperatura de 63ºC durante 30 minutos. La
mayoría de los procedimientos de pasteurización utilizados en la actualidad emplean temperaturas mayores de 72ºC,
pero sólo durante 15 segundos, conocido como “pasteurización de corta duración a alta temperatura” (high –
temperature short- time), HTST, se aplica mientras la leche fluye continuamente por un intercambiador de calor.
Además de eliminar a los patógenos la pasteurización HTST reduce el número total de bacterias para que la leche se
conserve bien con refrigeración.
La leche también puede esterilizarse mediante temperaturas ultraelevadas (ultra- high- temperature, UHT) para que se
pueda conservar sin refrigeración. Para ello la leche cae en una película delgada a través de una cámara que contiene
vapor sobrecalentado y alcanza 140ºC en menos de un segundo, luego se enfría en una cámara de vacío, donde se
elimina el vapor
5) FILTRACIÓN: Es el pasaje de un líquido o de un gas a través de un material similar a un cedazo con poros lo
suficientemente pequeños como para retener los microorganismos. Se crea un vacío en el frasco receptor, la
presión del aire ejerce fuerza sobre el líquido. La filtración se utiliza para esterilizar materiales termosensibles,
como enzimas, vacunas, soluciones de antibióticos y algunos medios de cultivo. En los comienzos de la
microbiología se utilizaban filtros cilíndricos de porcelana no vitrificada para filtrar los líquidos a través de las
paredes del filtro absorbían las bacterias, los patógenos desconocidos que pasaban a través de los filtros se
denominaban virus filtrables. En los últimos años los filtros de membrana, compuestos por sustancias como
ésteres de celulosa o polímeros plásticos, se han convertido en una herramienta de uso frecuente en la industria
y en el laboratorio, con poros de diferente espesor. Se dispone de filtros con poros de apenas 0.01 micras, un
tamaño que puede retener los virus e incluso algunas moléculas proteicas grandes. Algunos quirófanos y salas
para pacientes quemados reciben aire filtrado para disminuir la cantidad de microbios de transmisión aérea. Los
filtros de control de partículas suspendidas de alta eficiencia (high – efficiency particulate air, HEPA) eliminan
todos los microorganismos de más de 0,3um de diámetro.
Tipos de filtros:
Filtros de Seitz – Asbesto. Berkefeld – Tierra de diatomea.
Chamberland – Pasteur -- Porcelana. Fibra de vidrio poroso.
Millipor -- Membrana de celulosa.
6) RADIACIONES: La radiación tiene varios efectos sobre las células, lo que depende de su longitud de onda, de su
intensidad y de su duración. La radiación que causa la muerte de los microorganismos es de dos tipos: ionizante
y no ionizante.
Radiaciones ionizantes: rayos gamma, rayos X, haces de electrones de alta energía, tienen una longitud
de onda más corta que las radiaciones no ionizantes, menor de 1nm. Por ende transportan mucha más
energía. Los rayos gamma son emitidos por ciertos elementos radiactivos, el cobalto y los haces de
electrones son producidos por electrones acelerados hasta altas energías en máquinas especiales. Los
rayos X producidos por máquinas de un modo similar a la producción de haces de electrones, tienen una
naturaleza semejante a la de los rayos gamma. El principal efecto de la radiación ionizante es la
ionización del agua, que forma radicales hidroxilos altamente reactivos. Estos radicales reaccionan con
componentes celulares orgánicos, en especial el DNA. La radiación ionizante, en especial los haces de
electrones de alta energía, se utilizan para la esterilización de productos farmacéuticos, y materiales
dentales y médicos desechables, como jeringas plásticas, guantes de cirugía, materiales de sutura y
catéteres.
Radiaciones no ionizantes: tienen una longitud de onda mayor que las ionizantes. El mejor ejemplo de
radiación no ionizante es la luz ultravioleta (LUV), lesiona el DNA de las células expuestas porque forma
enlaces entre bases de pirimidina adyacentes, por lo general timinas, en las cadenas de DNA. Estos
dímeros de timina inhiben la replicación correcta del DNA durante la reproducción celular. La longitud
de onda más eficaz para eliminar a los microorganismos es de alrededor de 260 nm o 2600ºA, estas
longitudes de onda son absorbidas en forma específica por el DNA de la célula. La LUV también se utiliza
para controlar los microbios del aire. En las habitaciones de los hospitales, las enfermerías, los
quirófanos y las cafeterías suelen encontrarse lámparas de LUV o germicidas. La principal desventaja de
LUV como esterilizante radica en que no es muy penetrante de modo que para que los microorganismos
mueran deben estar expuestos directamente a los rayos, Los microorganismos protegidos por sustancias
sólidas como papel, vidrio y tela no resultan afectados. Otro problema es que la LUV puede dañar los
ojos de las personas y una exposición prolongada puede provocar quemaduras y cáncer de piel. La luz
solar contiene algo de radiación UV pero las longitudes de onda más cortas son eliminadas por la capa
de ozono de la atmósfera. El efecto antimicrobiano de la luz solar se debe casi por completo a la
formación de oxígeno monoatómico en el citoplasma. Mucho de los pigmentos producidos por las
bacterias los proporcionan frente a la luz solar.
7) BAJAS TEMPERATURAS: El efecto de las bajas temperaturas sobre los microorganismos depende del
microorganismo en particular y de la intensidad de la aplicación. La temperatura habitual de refrigeración de 0º
a 7ºC, la actividad metabólica de la mayoría de los microorganismos es tan reducida que no pueden
reproducirse ni elaborar toxinas. La refrigeración habitual tiene un efecto bacteriostático. Las bacterias
patógenas por lo general no crecen a las temperaturas del refrigerador, con una excepción importante, el
microorganismo causante de la listeriosis. Las temperaturas por debajo del punto de congelación lograda
rápidamente tienden a mantener inactivos a los microorganismos pero no necesariamente los eliminan.
8) DESECACION: En ausencia de agua, una condición conocida como desecación, los microorganismos no pueden
crecer ni reproducirse pero pueden permanecer viables durante años. Después, cuando vuelven a disponer de
agua, pueden recuperar su capacidad de crecimiento y división. Esta propiedad se utiliza en el laboratorio
cuando se conservan los microorganismos mediante liofilización o (congelación – desecación), la suspensión de
microorganismos se congela rápidamente a temperaturas que varían de -54 a -72ºC y el agua se elimina por
vacío elevado (sublimación). Mientras se produce el vacío el recipiente se sella fundiendo el vidrio con un
soplete a alta temperatura. El residuo pulverulento que contiene los microorganismos sobrevivientes puede
guardarse durante años. Los microorganismos pueden reconstituirse en cualquier momento mediante la
hidratación con un medio nutritivo líquido adecuado.
9) PRESION OSMOTICA: La utilización de altas concentraciones de sales y azúcares para conservar los alimentos se
basa en los efectos de la presión osmótica. Las altas concentraciones de estas sustancias crean un ambiente
hipertónico que determina que el agua abandone la célula microbiana. La presión osmótica elevada tiene el
efecto de eliminar el agua necesaria de una célula. Cuando un microorganismo se encuentra en una solución
que tiene una concentración de mayor de solutos que la de la célula, el ambiente es hipertónico respecto a la
célula, el agua celular atraviesa la membrana plasmática y se difunde hacia una zona de mayor concentración de
soluto. Esta pérdida osmótica de agua causa Plasmólisis o reducción del citoplasma. La importancia de este
fenómeno radica en que el crecimiento de célula se inhibe, en consecuencia, el agregado de sales o azúcares a
una solución y el aumento consiguiente de la presión osmótica pueden utilizarse para conservar alimentos. El
pescado salado, la miel y la leche condensada endulzada se conservan en gran medida por este mecanismo, las
concentraciones elevadas de sal o azúcar producen la salida de agua en las células microbianas presentes y por
consiguiente evitan su crecimiento. Plasmóptisis: Las células experimentan cambios drásticos cuando se les
coloca en un medio hiposmòtico o hipotónico. Hay tendencia al paso de grandes cantidades excesivas de agua al
citoplasma, Se crea una hipertensión. Las células experimentan Plasmóptisis, es decir, las paredes celulares se
rompen y sale el material citoplasmático.
Los agentes químicos se utilizan para el control del crecimiento microbiano tanto en tejidos vivos como en objetos
inanimados. Son pocos los agentes químicos que logran la esterilidad, la mayor parte de ellos reducen las poblaciones
microbianas a niveles seguros o eliminan las formas vegetativas de los patógenos. Un problema frecuente en la
desinfección es la selección de un agente. No existe un desinfectante único que sea apropiado para todas las
circunstancias.
Actividad antimicrobiana: grupo de microorganismos contra los que actúa de manera eficaz el desinfectante a
baja concentración.
No ser tóxico a las personas y animales.
Naturaleza del material que se va desinfectar: si hay materia orgánica que puede interferir sobre la actividad del
desinfectante.
De fácil adquisición y aplicación: muy importante es si el desinfectante puede entrar en contacto con facilidad.
Solubilidad: siempre se lo debe diluir exactamente según las indicaciones del fabricante.
Estabilidad durante el almacenamiento.
La desinfección es un proceso gradual, por lo tanto para ser eficaz un desinfectante podría requerir varias horas
de contacto con la superficie por tratar
1) FENOL Y DERIVADOS FENOLICOS: Lister fue el primero en utilizar fenol (ácido carbólico) para controlar las
infecciones quirúrgicas en el quirófano. En la actualidad rara vez se lo utiliza como antiséptico o desinfectante
debido a sus efectos irritantes sobre la piel y a su olor desagradable. En concentraciones por encima del 1%
tiene un efecto antibacteriano importante. Los derivados del fenol, denominados fenòlicos, contienen una
molécula de fenol alterada químicamente para reducir sus cualidades irritantes o para aumentar su actividad
antibacteriana en combinación con un jabón o un detergente. Los derivados fenòlicos ejercen su actividad
antimicrobiana al lesionar las membranas que contienen lípidos, lo que determina la pérdida del contenido
celular. Una propiedad útil de los fenòlicos como desinfectantes es que permanecen activos en presencia de
compuestos orgánicos, son estables y persisten durante períodos prolongados después de su aplicación. Uno de
compuestos fenòlicos utilizados con más frecuencia que forma parte de un grupo de sustancias químicas
denominadas cresoles. Un cresol importante es el O–fenilfenol, el principal componente de la mayoría de las
fórmulas de Lysol.
2) BISFENOLES: Son derivados del fenol que contienen dos grupos fenòlicos unidos por un puente. Un bisfenol, el
hexaclorofeno, componente de la loción phisoHex, utilizada para el control microbiano de procedimientos
quirúrgicos y hospitalarios. Se utiliza con frecuencia para controlar infecciones en las salas de neonatología. Otro
bisfenol que se utiliza mucho es el Triclosàn, un componente de los jabones antibacterianos y al menos de una
pasta dentífrica. El triclosan inhibe una enzima necesaria para la biosíntesis de ácidos grasos, que afecta sobre
todo la integridad de la membrana plasmática. Es eficaz contra bacterias grampositivas, también contra hongos
y bacterias gramnegativas con excepción de la Pseudomonas aeruginosa, bacteria gramnegativa muy resistente
al Triclosàn.
3) BIGUANIDAS: La clorhexidina es miembro del grupo de las biguanidas. Se utiliza con frecuencia para control
microbiano en la piel y las mucosas. Combinada con un detergente o alcohol se usa para el lavado quirúrgico de
las manos y la preparación prequirùrgica de la piel de los pacientes. Un nuevo producto, Avagard, que combina
clorhexidina y etanol, persiste durante alrededor de seis horas. Es aceptado por la FDA como un antiséptico
anhidro para el lavado prequirùrgico. Una ventaja es su fuerte afinidad por la unión a la piel o las mucosas, así
como su baja toxicidad. Su efecto destructor se relaciona con el daño que causa a la membrana plasmática
mediante el bloqueo de una enzima necesaria para la síntesis de lípidos.
4) ALCOHOLES: Son eficaces para eliminar bacterias y los hongos pero no las endosporas y los virus sin envoltura.
El mecanismo de acción del alcohol suele ser la desnaturalización de las proteínas, pero también puede alterar
las membranas y disolver muchos lípidos, entre ellos el componente lipìdico de los virus con envoltura. La
ventaja de los alcoholes es que actúan y luego se evaporan con rapidez sin dejar residuo alguno. Cuando se frota
la piel antes de administrar una inyección, la principal acción antiséptica proviene de un simple barrido de la
suciedad y los microorganismos junto con las secreciones cutáneas oleosas. Son antisépticos poco satisfactorios
cuando se aplican sobre una herida. Producen la coagulación de una capa de proteínas debajo de la cual
continúan proliferando. De los alcoholes más utilizados son el etanol y el isopropanol. La concentración óptima
recomendada de etanol es del 70%, el etanol puro es menos eficaz que las soluciones acuosas (alcohol mezclado
con agua) porque la desnaturalización requiere de agua. El isopropanol, vendido como alcohol para fricciones, es
algo superior al etanol como antiséptico y desinfectante, además es menos volátil, menos costoso y más fácil de
obtener que el etanol. El etanol y el isopropanol también se utilizan para aumentar la eficacia de otros agentes
químicos.
5) HALOGENOS: En particular el yodo y el cloro, son agentes antimicrobianos eficaces, tan solo en forma de
ingredientes en compuestos inorgánicos u orgánicos.
YODO: El yodo es uno de los antisépticos más antiguos y eficaces, actúa contra toda clase de bacterias
muchas endosporas, diversos hongos y algunos virus. El yodo altera la síntesis de proteínas y las
membranas celulares, al parecer por la formación de complejos con los aminoácidos y los ácidos grasos
insaturados. El yodo está disponible como tintura, una solución acuosa – alcohólica y como yodòforo,
una combinación de yodo y una molécula orgánica, a partir de la cual el yodo se libera lentamente. El
preparado comercial más común es Betadine, que una yodopovidona. La povidona es un yodòforo
activo de superficie que mejora la acción humectante y actúa como un reservorio de yodo libre. Los
derivados del yodo se utilizan sobre todo para la desinfección de la piel y el tratamiento de heridas.
CLORO: El cloro, como gas o en combinación con otras sustancias químicas, se utiliza mucho como
desinfectante. Su acción germicida está determinada por el ácido hipocloroso (HOCl) que se forma
cuando el cloro se agrega al agua.
Cloro + Agua ----------- Ión Hidrógeno + Ión Cloruro + Acido hipocloroso
Acido hipocloroso ----------- Ión Hidrógeno + Ión hipoclorito
El ácido hipocloroso es un agente oxidante fuerte que impide el funcionamiento del sistema enzimático celular. El ácido
hipocloroso es la forma más eficaz del cloro porque es neutro respecto de su carga eléctrica y se difunde con igual
rapidez que el agua a través de la pared celular. Debido a su carga negativa el ión hipoclorito no puede entrar
libremente en la célula. Una forma líquida de gas cloro comprimido se usa ampliamente para la desinfección del agua
potable, el agua de las piscinas y las aguas residuales. Varios compuestos de cloro son desinfectantes eficaces:
Las soluciones de hipoclorito de calcio, se usan para desinfectar los equipos empleados para los
productos lácteos y los utensilios de cocina utilizados en los restaurantes.
Otro compuesto del cloro, el hipoclorito de sodio (NaOCl), se emplea como desinfectante y blanqueados
domésticos y como desinfectante en los establecimientos de productos lácteos y de procesamiento de
alimentos así como en los sistemas de hemodiálisis
Dióxido de cloro es una forma gaseosa del cloro que a veces se utiliza para desinfectar zonas,
principalmente para eliminar las endosporas de la bacteria causante del carbunco
Las cloraminas, otro grupo de compuestos del cloro, están formadas por cloro y amoníaco. Compuestos
muy estables que liberan cloro durante períodos prolongados. Se utilizan como agentes desinfectantes,
antisépticos o higienizantes. Para higienizar la cristalería y los utensilios de cocina y para tratar equipos
utilizados en la elaboración industrial de productos lácteos y de alimentos. El amoníaco suele mezclarse
con el cloro en los sistemas de tratamiento de aguas para formar cloraminas, para controlar los
problemas de sabor y de olor causados por la reacción del cloro con otros compuestos nitrogenados del
agua.
6) METALES PESADOS Y SUS COMPUESTOS: Varios metales pesados, como la plata, el mercurio y el cobre pueden
ser germicidas o antisépticos. Los iones de estos metales se combinan con los grupos sulfhidrilo existente en las
proteínas celulares para producir su desnaturalización.
La plata se utiliza como antiséptico en una solución de nitrato de plata al 1%. Anteriormente se exigían
el tratamiento de los ojos de los recién nacidos con unas gotas de nitrato de plata para protegerlos
contra la infección ocular conocida como oftalmia gonocócica neonatal, que los lactantes podían haber
contraído en su paso por el canal de parto. En los últimos años, los antibióticos han reemplazado al
nitrato de plata para este propósito. Se ha renovado el interés en la plata como agente antimicrobiano.
Los apósitos impregnados con plata que liberan lentamente iones de plata son muy útiles cuando las
bacterias con resistencia a los antibióticos representan un problema. Una combinación de plata con
sulfadiazina, la sulfadiazina argèntica, está disponible como crema tópica para su uso en quemaduras.
La surfacina, un antimicrobiano para aplicar sobre superficies, contiene yoduro de plata no hidrosoluble
en un polímero transportador y es muy persistente.
Los compuestos inorgánicos de mercurio como el cloruro mercúrico, tienen un espectro de actividad
muy amplio y su efecto es sobre todo bacteriostático. En la actualidad su uso es limitado por su
toxicidad, su acción corrosiva y su falta de eficacia en presencia de materia orgánica.
El cobre, en la forma de sulfato de cobre y otros aditivos, se utiliza sobre todo para destruir las algas
verdes que crecen en reservorios, depósitos, estanque de reservas, piscinas y peceras. La capacidad de
cantidades muy pequeñas de metales pesados, de ejercer actividad antimicrobiana se conoce como
acción oligodinàmica (oligo significa poco). Este efecto puede observarse cuando se coloca un disco
estéril impregnado de plata o cobre sobre una placa de Petri inoculada con un microorganismo.
Cantidades muy pequeñas de metal se difunden desde el disco e inhiben el crecimiento de la bacteria a
cierta distancia alrededor de ella.
7) AGENTES TENSIOACTIVOS: Disminuyen la tensión superficial entre las moléculas de un líquido. Estos agentes
incluyen los jabones y los detergentes.
Jabones: El jabón tiene escaso valor como antiséptico, desempeña una importante función en la
eliminación mecánica de los microorganismos mediante el frotamiento. La piel normalmente contiene
células muertas, polvo, sudor seco, microbios y secreciones oleosas de las glándulas sebáceas. El jabón
rompe la película de grasa en gotìculas diminutas, un proceso denominado emulsificaciòn, y el agua y el
jabón juntos levantan la grasa emulsionada y detritos los arrastran cuando se retira la espuma. En este
sentido los jabones son buenos desgermizantes.
Higienizantes ácidos – aniònicos: Los higienizantes tensioactivos son muy importantes en la limpieza de
los utensilios y los equipos de las industrias lácteas. Su capacidad limpiadora se debe a la parte con carga
negativa (anión) de la molécula, que reacciona con la membrana plasmática. Son atóxicos, no corrosivos
y de acción rápida.
Compuestos de amonio cuaternario: Los agentes tensioactivos más utilizados son los detergentes
catiónicos, en especial los compuestos de amonio cuaternario. Su capacidad limpiadora se debe a la
porción con carga positiva de la molécula, el catión. Su nombre proviene del hecho de que son derivados
del ión amonio tetravalente. Los compuestos de amonio cuaternario presentan una fuerte actividad
bactericida contra las bacterias grampositivas, son algo menos activos contra bacterias gramnegativas.
También son fungicidas, amebicidas y viricidas. No destruyen endosporas ni las micobacterias. Su modo
de acción químico es que afectan la membrana plasmática. Alteran la permeabilidad de la célula y
provocan la pérdida de constituyentes citoplasmáticos esenciales, como el potasio. Dos compuestos de
amonio cuaternario muy utilizados son: Cloruro de benzalconio (Zephiran) y el cloruro de cetilpiridinio
(Cepacol). Presentan una fuerte acción antimicrobiana y son incoloros, inodoros, insípidos, estables,
fácilmente solubles y atóxicos, salvo en concentraciones elevadas.
8) ALDEHIDOS: Los aldehídos se encuentran entre los antimicrobianos más eficaces. Entre ellos se encuentran El
formaldehido y el glutaraldehìdo. Inactivan las proteínas mediante la formación de enlaces covalentes entre
varios de sus grupos funcionales (- NH2, - OH, - COOH y –SH). El formaldehido gaseoso es un desinfectante
excelente. Se utiliza con más frecuencia como formol, una solución acuosa de formaldehido al 37%. El formol se
ha utilizado para conservar muestras biológicas, embalsamar cadáveres e inactivar bacterias en la preparación
de vacunas. El glutaraldehìdo es una sustancia química relacionada con el formaldehido que resulta menos
irritante y más eficaz. Se utiliza para esterilizar instrumentos clínicos, como equipos de respiración. Cuando se lo
usa en solución al 2% (Cidex) es bactericida, tuberculicida y viricida en 10 minutos y esporicida en 3 a 10 horas.
Es uno de los desinfectantes líquidos que puede ser considerado un agente esterilizante.
9) ESTERILIZANTES QUIMICOS GASEOSOS: Son sustancias químicas que se utilizan en una cámara hermética
(similar a un autoclave). Un gas adecuado para esta técnica es el óxido de etileno. Su actividad depende de la
desnaturalización de las proteínas, los hidrógenos lábiles de las proteínas, como –SH, -COOH, -OH, son
reemplazados por grupos alquilo (alquilación) como –CH2CH2OH.
El óxido de etileno elimina todos los microorganismos y sus endosporas pero requiere un tiempo de
exposición de 4 a 18 horas. Es tóxico y explosivo en su forma pura, por lo que suele mezclarlo con un gas
inerte como el dióxido de carbono o el nitrógeno. Debido a su capacidad de esterilizar sin calor, los
gases como el óxido de etileno también son muy utilizados para tratar instrumentos y equipos médicos.
El óxido de propileno y la beta –propiolactona también se utilizan para esterilización gaseosa. Una
desventaja de todos estos gases es la sospecha de que pueden ser carcinógenos, en especial la B-
propiolactona. Dado este riesgo, estos gases pueden ser reemplazados por la esterilización gaseosa por
plasma.
Este método emplea vapores de peróxido de hidrógeno sujeto a radiofrecuencias o radiación por
microondas para producir radicales libres radiactivos
10) PEROXIGENOS: Ejercen su actividad antimicrobiana al oxidar los componentes celulares de los microbios
tratados. Como el ozono, el peróxido de hidrógeno y el ácido peracètico.
El ozono es una forma de oxígeno altamente reactiva que se genera cuando el oxígeno pasa a través de
descargas eléctricas de alto voltaje. Se utiliza para complementar el cloro en la desinfección del agua
porque ayuda a neutralizar los sabores y los olores.
El peróxido de hidrógeno es un antiséptico que se encuentra en la mayoría de las casas y en las salas de
suministros de los hospitales. No es un buen antiséptico para las heridas abiertas. Es degradado con
facilidad a agua y oxígeno por la acción de la enzima catalasa, presente en las células humanas. El
peróxido de hidrógeno es eficaz en la desinfección de objetos inanimados. Los agentes oxidantes son
útiles para la irrigación de heridas profundas, en las que el oxígeno liberado las convierte en un medio
que inhibe el crecimiento de las bacterias anaerobias.
El ácido peracètico es uno de los esporicidas químicos líquidos disponibles más eficaces y se lo considera
un esterilizante. Es eficaz contra las endosporas y los virus en 30 minutos y destruye las formas
vegetativas de las bacterias y a los hongos en menos de 5 minutos. Tiene varias aplicaciones en la
desinfección de equipos para el procesamiento de alimentos y de uso médico debido a que no deja
residuos tóxicos y prácticamente no es afectado por la presencia de materia orgánica.
11) COLORANTES: Los colorantes básicos tiñen intensamente el material nuclear, probablemente combinándose
con los ácidos nucleicos formando sales. El cristal violeta, verde de malaquita, verde brillante, derivados del
trifenil metano, son colorantes básicos intensamente bacteriostáticos especialmente contra bacterias
grampositivas, las bacterias gramnegativas son relativamente poco afectadas o nula su acción. La hipótesis
según la cual los colorantes básicos reaccionan con los ácidos nucleicos queda confirmada por cuanto la
inhibición de la coloración bacteriana se contrarresta añadiendo ácido nucleico o nucleótidos. La inhibición
también puede invertirse transfiriendo bacterias desde un medio que contiene colorante a otro medio que
carece de él, con lo cual las bacterias vuelven a crecer. La reversibilidad de la inhibición por cualquiera de los dos
métodos demuestra que la acción de los colorantes básicos es bacteriostática más que bactericida. Los
colorantes básicos se utilizan para preparar medios de cultivo para facilitar el crecimiento selectivo de bacterias
gramnegativas, como antisépticos de piel y membranas bucales.
VALORACION DE DESINFECTANTES
El método más utilizado para el estudio de un desinfectante es la prueba del coeficiente fenólico en la que se compara la
eficacia de un desinfectante con la del fenol.
Se prepara una serie de diluciones de fenol y del desinfectante de prueba y se inoculan con las bacterias de ensayo
Salmonella typhi y Staphylococcus aureus, se siembran con intervalos de 5 minutos y 10 minutos, se incuban a 37ºC por
48 horas. La mayor dilución del agente que destruya las bacterias después de 10 minutos de exposición, pero no
después de 5 minutos. Se emplea para calcular el coeficiente fenólico mediante la siguiente fórmula:
CF= La más alta dilución del desinfectante que mata en 10 minutos pero no en 5minutos /
La más alta dilución del fenol que mata en 10 minutos pero no en 5 minutos
Si se obtiene que la dilución del fenol es 1:90 y la dilución eficaz máxima de un desinfectante X fuese 1:450, el
coeficiente fenólico de X sería de 5. Un valor superior a 1 significa que el desinfectante es más eficaz que el fenol.
Cuanto mayor sea el valor del coeficiente fenólico, más eficaz será el desinfectante en estas condiciones de ensayo.
a) INHIBICIÓN DE LA SINTESIS DE LA PARED CELULAR: La pared celular de una bacteria consiste en una red
macromolecular denominada peptidoglucano, que se encuentra sólo en las paredes celulares bacterianas. La
penicilina, cefalosporinas, carbapenèmicos (imipenema), monobactàmicos (aztreozam), impiden el
entrecruzamiento (transpeptidaciòn) del peptidoglucano. Vancomicina, cicloserina, bacitracina inhiben otros
pasos en la síntesis de peptidoglucano. La pared celular queda muy debilitada y la célula se lisa. Desventajas:
acción limitada contra bacilos gramnegativos, susceptible a la hidrólisis en el estómago, inactivado por
betalactamasas, hipersensibilidad (anafilaxia)
c) INHIBICIÓN DE LA SINTESIS DE PROTEINAS: En las células procariontes los ribosomas son 70S, presenta una
subunidad 50S y otra 30S. La diferencia en la estructura de los ribosomas explica la toxicidad selectiva de los
antibióticos que afectan la síntesis de proteínas. Entre los antibióticos que interfieren en la síntesis de proteínas
se encuentran:
Amino glucósidos: Constituyen un grupo de antibióticos en los cuales los aminoazùcares están
unidos por enlaces glucosìdicos. Los antibióticos aminoglucòsidos como la estreptomicina,
gentamicina, tobramicina, amikacina, kanamicina , neomicina, espectinomicina, interfieren los pasos
iníciales de la síntesis de proteínas al alterar la morfología de la porción 30S del ribosoma, esta
interferencia bloquea la función del complejo de iniciación y determina la lectura incorrecta del
código genético en el mRNA.
Tetraciclinas: Entre las tetraciclinas tenemos oxitetraciclina (Terramycin), clortetraciclina
(Aureomycin), doxiciclina, minociclina y la tetraciclina propiamente dicha, inhiben la síntesis proteica
de la bacteria al unirse de forma reversible a la subunidad 30S del ribosoma, bloquea la fijación de
tRNA al ribosoma.
2) ANTIBIOGRAMA POR DILUCIÓN (Pruebas de dilución en caldo): La prueba de dilución en caldo es útil para
determinar la CIM y la concentración bactericida mínima (CBM) de un antimicrobiano. Para determinar la CIM se
prepara una serie de concentraciones decrecientes del fármaco en caldo, que después se inocula con la bacteria
en estudio. Los pocillos formados en una placa de plástico, que no muestran crecimiento pueden subcultivarse
en caldo o placa de agar sin el fármaco. Si aparece crecimiento en este medio, el fármaco no era bactericida y se
puede determinar la CBM, la concentración más baja de un fármaco que mata a un microorganismo. La
determinación de la CIM y la CBM es importante porque evita el uso excesivo o erróneo de antibióticos costosos
y minimiza la posibilidad de que se produzcan las reacciones tóxicas que podrían causar dosis más altas que las
necesarias.