¿CÓMO SE USA LA BIOTECNOLOGÍA EN LA CIENCIA FORENSE?
Los científicos forenses necesitan
identificar a víctimas de delincuentes, las empresas de biotecnología
tienen que detectar genes específicos e insertarlos en organismos
como bacterias, ganado o granos, y las empresas biomédicas
y los médicos requieren detectar alelos defectuosos e, idealmente,
concebir los medios para repararlos o insertar en sus pacientes
alelos de funcionamiento normal.
La reacción en cadena de la polimerasa (RCP), desarrollada por
Kary Mullis de la Cetus Corporation en 1986, puede usarse para
producir cantidades ilimitadas de copias de segmentos seleccionados
de ADN. Además, la RCP puede usarse para amplificar ciertos
segmentos del ADN.
Por sí misma, la ADN polimerasa
no sabe dónde empezar a copiar una hebra de ADN. Cuando se
desenrolla la doble hélice de ADN, las enzimas ponen primero en
cada hebra un pequeño segmento de ARN complementario, llamado
“iniciador” o “cebador”. La ADN polimerasa reconoce esta
región “cebadora” o “iniciadora” del ARN como el lugar para comenzar
a replicar el resto de la hebra del ADN.
En un pequeño tubo de ensayo, el ADN se mezcla con los
cebadores, nucleótidos libres y una ADN polimerasa especial que
opera a las altas temperaturas utilizadas en la RCP (esta ADN
polimerasa fue aislada por primera vez en microbios que viven
en géiser.
La RCP consiste en los siguientes pasos
[Link] tubo de ensayo se calienta entre 90 y 95 _C.
Las temperaturas elevadas rompen los enlaces
por puente de hidrógeno entre las bases complementarias,
separando al ADN en hebras simples.
2. La temperatura se reduce aproximadamente a 50 _C
, lo que permite a los dos cebadores formar
pares de bases complementarias con las hebras originales
de ADN.
3. La temperatura se eleva a entre 70 y 72 °C. La ADN polimerasa usa los nucleótidos
libres para
elaborar copias del segmento del ADN acotado por los
cebadores.
4. El ciclo se repite, normalmente de 30 a 40 veces, hasta que
se hayan terminado los reactantes.
La RCP sintetiza ADN en progresión geométrica (1 → 2
→ 4 → 8, etc.), de modo que 20 ciclos de RCP hacen alrededor
de un millón de copias y poco más de 30 ciclos dan mil millones.
Cada ciclo tarda pocos minutos, así que la RCP
puede producir miles de millones de réplicas de un segmento de
ADN en una tarde, partiendo —si fuera necesario— de una única
molécula de ADN. En ese momento, el ADN está disponible para
fines forenses, de clonación, de reproducción de organismos transgénicos
y muchos otros propósitos de la biotecnología.