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homogéneos), disposición de la hoja vertical, margen estrecho.

Informe de laboratorio #1 - Extracción de ADN con células de cebolla

Andrea Lachman, Ana Lucia De León, Sarah Tedman y Jose G. Arosemena.

Resumen. El ADN es una molécula que contiene toda la información genética de un

organismo, siendo considerado el método más importante de la biología molecular. En el
informe presentado se describen los esfuerzos realizados para extraer ADN de las
cebollas utilizando métodos simples y económicos en un laboratorio escolar. La cebolla es
un modelo ampliamente utilizado en la investigación biológica debido a su alto contenido
de ADN y a su accesibilidad para el cultivo. El objetivo de este experimento es mostrar de
manera práctica y didáctica cómo se puede extraer el ADN de las cebollas y explicar los
principios científicos que se encuentran detrás de cada paso del proceso.

Palabras clave: ADN, células, descomposición, filamentos y pared celular.

Introducción

El ADN es el material genético que contiene la información hereditaria de los seres vivos.
Descubierto por Rosalind Franklin en una fotografía por la difracción de rayos X, pero
publicado finalmente por Francis Crick y James Watson. Para estudiar y manipular el ADN,
es necesario extraerlo de las células en las que se encuentra. En este informe se
describirá el proceso de extracción de ADN a partir de células de cebolla.

Las células de la cebolla son una fuente conveniente y fácilmente accesible de ADN para
una investigación. El proceso de extracción de ADN implica la ruptura de las células de
cebolla y la eliminación de los componentes celulares no deseados para obtener el ADN
puro. Pero, ¿por qué es importante? La obtención de ADN, es el punto de partida para la
mayoría de análisis genéticos; incluso contando con pequeñas cantidades de ADN, es
posible amplificar genes específicos. Finalmente, en este informe se detallarán los
materiales y métodos utilizados en la extracción de ADN de células de cebolla, así como



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los resultados obtenidos y su interpretación.

Materiales

• Dos vasos químicos pequeños

• Un vaso químico grande
• Una cuchara
• Un cuchillo de cocina
• Un colador
• Una tabla de cortar
• Un mondadientes
• 1/4 de una cebolla mediana
• 2 cucharas de jabón líquido para fregar
• 2 cucharaditas de sal
• 40 mL de agua
• 80 mL de taza de alcohol para uso externo
• 1 portaobjetos
• 1 cubreobjetos
• Microscopio

Métodos

1. Como primer paso, se toma ¼ de una cebolla y se pica finamente, para luego ser
machacada hasta tener una especie de puré con la ayuda de un mortero y se añade a
un tazón.
2. Ya vertida la cebolla en el tazón, se le agrega una capa de jabón líquido para lavar
platos hasta cubrir la cebolla. Revolver esta mezcla suavemente para evitar crear
burbujas.
3. Después que la mezcla esté más o menos uniforme, se deja reposar por unos 5 a 10
minutos.
4. A continuación, se busca otro tazón pequeño con 40 mL de agua y se le añaden dos
cucharaditas de sal. Luego de diluir la sal en el agua, se agrega a la mezcla de la
cebolla suavemente evitando la creación de burbujas. Dejar reposar por 10 a 15
minutos.
5. Transferir la mezcla a un frasco con un colador, para evitar que caigan residuos de
cebolla. Luego, se deben quitar las burbujas que se hayan formado con ayuda de una

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cuchara.
6. Finalmente, se le agregan 80 mL de alcohol a la mezcla ya colada, poniendo el vaso
con una pequeña inclinación. Dejar reposar hasta que ocurran cambios.
7. Luego, se empezarán a ver pequeños filamentos de ADN en la doble capa creada por el
alcohol. Tomar un mondadientes y remover estos filamentos.
8. Los filamentos tomados se pondrán en un portaobjetos con unas pequeñas gotas de
agua. Cubrirlo con el cubreobjetos para poder analizar la muestra bajo el microscopio.

Resultados

Nuestro proyecto resultó en la liberación de ADN por medio de las células de una cebolla.
Cada ingrediente tuvo distintas funciones en el experimento, el jabón y la sal agregadas a
la cebolla (imagen 1 y 2), rompen algunas partes de la célula, y así los orgánulos quedan
expuestos. Como podemos ver en la imagen 3, el alcohol crea una doble capa en la que
el ADN flota, esto se debe a que el alcohol disuelve todas las demás partes de la célula, a
excepción del ADN.

Por otro lado, al momento de poner esta sustancia en la placa para colocarla en el
microscopio, ver la imagen 4. Finalmente, podemos observar en las imágenes 5 y 6 los
filamentos del ADN extraído por medio de la cebolla.

Discusión

En nuestro proyecto se utilizaron ciertos ingredientes que fueron claves para extraer el
ADN, entre estos el jabón líquido para fregar, el alcohol, la sal y la cebolla; a continuación
se explicará qué función cumplió cada una en relación a los resultados que obtuvimos.
Primero estaremos hablando sobre el ADN, como ya mencionamos, el ADN es el material
genético que contiene la información hereditaria de los seres vivos. Está formado por
nucleótidos (A, T, G, C), un azúcar de 5 carbonos (desoxirribosa) y un fosfato.

Ahora, como primer ingrediente a mencionar, la cebolla y el por qué del mortero. Sin la
cebolla no tendríamos una fuente para extraer el ADN, ya que esta extracción ocurre
mediante las células eucariotas, en este caso una vegetal. Las células de plantas, hongos
y bacterias, contienen una pared celular rígida, esto determina cómo se debe romper
dicha pared para llegar a los orgánulos necesarios para la extracción. Ya que la pared

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celular es más dura en esta célula, es necesario utilizar un método mecánico para
romperlas, como una batidora o un mortero. Cabe aclarar que el proceso de romper la
pared celular, se le conoce como lisis.

Por otra parte, estaremos detallando la función del jabón de fregar. El ADN se encuentra
localizado principalmente en el núcleo celular, pero, en los organismos eucariotas,
también está en las mitocondrias de animales, plantas y hongos, y en los cloroplastos de
las plantas. Estos tres compartimentos celulares también están delimitados por
membranas grasas, por lo que hace que el jabón de fregar se una sustancia adecuada
para descomponerlas, ya que este ayuda a descomponer lípidos.

Finalmente, el alcohol y la sal. El ADN tiene una carga negativa debido a los grupos
fosfato de su estructura, y esta carga el ctrica es lo que lo hace soluble. Cuando se a ade
sal a la muestra, los iones de sodio (NaCl) con carga positiva son atra dos por las cargas
negativas del ADN, neutralizando la carga del ADN. Esto permite a las mol culas de ADN
unirse en vez de repelerse entre s . La adici n de alcohol precipita el ADN, ya que es
insoluble en altas concentraciones de sal y alcohol. El ADN precipitado forma unas finas
hebras blancas y visibles en el l mite de separaci n de la fase de alcohol, mientras que el
resto de las sustancias permanecen disueltas. Estas pequeñas hebras blancas, fueron
nuestro objetivo, y después de realizarlo acorde a los métodos y con los materiales
adecuados, se convirtió en nuestro resultado.

Conclusión

En conclusión, el proceso de extracción de ADN es fundamental en el campo de la

biología molecular y nos permite obtener muestras de material genético, que a lo largo de
los años nos ha ayudado a evolucionar en esta rama científica.

A través de este experimento, descubrimos que es posible extraer ADN utilizando

materiales y equipos de laboratorio comunes, como lo son la cebolla, la sal, el alcohol y el
jabón para fregar, y que siguiendo los pasos necesarios logramos cumplir nuestra meta
que era poder ver mediante un microscopio, material genético.

Es importante destacar que la calidad y cantidad del ADN extraído puede verse afectada
por factores como la técnica de extracción utilizada y el tiempo de espera, como lo

í
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ó
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podemos observar en los experimentos de algunos otros grupos en el laboratorio. Por lo
tanto, recalcamos la importancia de seguir las indicaciones, y ser cuidadosos con las
medidas, el tiempo y la manipulación que se utiliza en este experimento.

Anexos

Imagen 1 Imagen 2 Imagen 3

Imagen 4 Imagen 5 Imagen 6

1. ¿Para que se utilizó el etanol en esta técnica?

• El etanol se utiliza ya que el ADN es insoluble en altas concentraciones de este y
de sal.

2. ¿Cuál es la función del jabón?

• Se utiliza para romper las paredes celulares, como las membranas plasmáticas y
las membranas nucleares, así dejando libres las moléculas de ADN.

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3. ¿Cómo se puede determinar qué es lo que se obtuvo mediante esta técnica es ADN y
no proteínas u otras sustancias?
• Realmente apreciar el ADN, se utiliza un microscopio. Dependiendo de la calidad
de éste se podría observar con más detalle.

4. Ilustre el experimento de Hershey y Chase (1952), para demostrar que el ADN era la
clave de la herencia.
• Hershey y Chase aprovecharon que las proteínas y el ADN tienen una composición
química diferente: el ADN contiene átomos de fósforo (P) pero no de azufre (S),
mientras que las proteínas, por su parte, no contienen fósforo (P), salvo en ciertas
ocasiones puntuales, pero sí contienen azufre (S).
• Tanto el fósforo como el azufre presentan formas no-radioactivas y radiactivas,
llamadas isótopos. El P-32 y el S-35 son isótopos radioactivos.
• Hershey y Chase concluyeron que el ADN, y no la proteína, se inyectaba en las
células del hospedero y constituía el material genético de los fagos.

5. Explique brevemente en qué consiste el modelo de ADN de Watson y Crick y cómo

contribuyó al desarrollo de la ingeniería genética.
• Las dos cadenas de la doble hélice de ADN se mantienen unidas por enlaces de
hidrógeno entre los nucleótidos. Gracias a esto se entendió la función del ADN,
como se copia y como la célula utiliza la información para crear proteínas.

6. Describe un método utilizado para extraer el ADN de la sangre.

• Se debe lisar o romper nuestras células para extraer el ADN y todos los
componentes celulares libres. Se debe degradar las proteínas principalmente las
unidas al ADN y las del citoplasma usando proteasa K. Posteriormente se debe
precipitar con etanol y/o centrifugación.

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Tabla 1
Observaciones Observaciones
Logramos ver como el jabón, la sal y el Es importante no crear burbujas para que el
agua se juntaban con la pasta de la cebolla. campo sea más visible.
Imagen 1 Imagen 2

Tabla 2
Observaciones Observaciones
Logramos ver algunos filamentos del ADN Los filamentos que se observaban eran
en distintas placas, tuvimos un pequeño blancos (casi transparentes), largos y
problema con unas burbujas. delgados.
Imagen 5 Imagen 6

Literatura citada

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