LABORATORIO CLÍNICO
Universidad de Cuenca
Facultad de Ciencias Médicas
Carrera de Laboratorio Clínico
Técnicas parasitológicas
Segundo Ciclo
Tema: Métodos de concentración, método de Ritchie
Alumnos:
Ayala Joel (G1)
Guerrero Erick (G2)
Quintuña Danna (G3)
Tutor: Lic. José Mauricio Baculima Tenesaca
Periodo Académico: marzo 2023 – agosto 2023
Fecha de Entrega: 29 de marzo de 2023
Métodos de concentración, método de Ritchie
Introducción
Una de las características principales dentro de un laboratorio, es el análisis de
diferentes compuestos biológicos, sin embargo, dentro de estos destacan las muestras de
heces o muestras fecales, y es en esta parte donde el uso adecuado de técnicas de
laboratorio permitirá que, el profesional pueda determinar de una manera correcta la
presencia de estructuras parasitarias de manera microscópica, ya que en algunos casos
estos parásitos no se observan de manera macroscópica.
Las técnicas de concentración permitirán que el profesional realice un correcto
reconocimiento de las diferentes formas parasitarias dentro de la materia fecal, por
motivos de que en caso de no realizar dichas técnicas, la detección de parásitos suele ser
difícil, pero al momento de aplicar las diferentes técnicas, se observará en su mayoría la
presencia de estructuras parasitarias, en caso de que existiesen, sin embargo el realizar
las técnicas conlleva un proceso sistematizado las cuales conllevan al éxito del análisis
y su detección.
Objetivo General
Describir el método de concentración de Ritchie y su importancia en el diagnóstico de
parásitos
Objetivos específicos
● Comprender de manera efectiva la importancia del uso de los métodos de
concentración en laboratorio.
● Describir las ventajas y desventajas de los métodos de concentración con énfasis
en el método de Ritchie.
● Ejecutar de manera correcta el método de Ritchie de manera práctica con base a
la teoría que se impartirá.
Marco Teórico
Indicar cuál es la función de la formalina y del éter
Las técnicas de concentración en laboratorio, son un tema de amplio tratado, sin
embargo, su importancia radica en que estas se usan principalmente para el análisis de
una muestra fecal, manteniendo el enfoque en el análisis de parásitos, su procedimiento
básicamente se basa en el poder separar los restos de la materia fecal de aquellos
parásitos que podrían encontrarse dentro de dicha muestra. (1)
Teóricamente hablando, el método de concentración se refiere al análisis y detección
netamente de microorganismos parasitarios, estas técnicas muchas veces resultan ser
efectivas en el ámbito de analizar y emitir un resultado, ya que separa los desechos
fecales que pudieron no ser digeridos en el intestino delgado, de los parásitos que se
encuentren en la muestra, por medio de un estado de sedimentación, lo cual se refiere al
hecho de que se queden aquellos parásitos suspendidos en el fondo debido a su densidad
mayor que a los restos alimenticios, que bien pueden ser compuestos lipídicos.(1)
Dentro de laboratorio clínico se maneja de manera común el método de Ritchie, también
conocido como método de “centrifugación con formol-éter”, la cual es una técnica
eficiente y adecuada para el hallazgo de parásitos o enteroparásitos, en especial la
observación de huevos o quistes de helmintos en una muestra fecal.
El método de concentración más conocido es el de Ritchie, este es el más común para la
observación de quistes y ooquistes de protozoos así como huevos y larvas de helmintos,
este procedimiento requiere del uso de muestra o muestras de heces, y se tendrá que
seguir un procedimiento descrito en el libro de Parasitosis Humanas de Botero, el cual
que se describe a continuación:
- En caso de que la muestra de heces esté sólida o dura se deberá agregar una
muestra isotónica, la cual deberá ser 10ml en la muestra sólida.
- Después de haber mezclado se deberá conseguir una muestra líquida.
- Esta será pasada por una gasa húmeda doblada por la mitad, donde pasarán 10ml
de la muestra en un tubo de centrífuga de 15ml.
- Este tubo con la muestra se centrifuga 2 minutos de 1500 a 2000 revoluciones
(cabe recalcar que para el uso de la centrífuga se deberá colocar un tubo con la
misma cantidad en la contraparte de donde se colocó el tubo con la muestra).
- Se podrá observar que la muestra fecal ha quedado sólida, se observará un
sedimento, con una parte superficial o sobrenadante, que deberá ser decantada o
retirada en un solo movimiento.
- Del resultado el sedimento sólido deberá ser diluido en una solución salina para
realizar el mismo proceso de centrifugación y decantación ya mencionado.
- Al sedimento restante se agregaran 10 ml de formol al 10%, que deberá ser
agitado de manera vigorosa para una homogenización correcta, posterior a esto
se dejará reposar 5 minutos.
- Pasado el reposo se agregarán 3ml de éter, se tapará el tubo, y se agitará de
manera vigorosa durante 30 segundos, luego de esto se procederá a destapar el
tubo.
- Se centrifugará el tubo a 1500 revoluciones por 2 minutos. (1)
Pasado este proceso se obtendrá un resultado de sedimentación o concentración que se
espera encontrar en la muestra recolectada, dentro del resultado se observarán 4 capas
que se han formado pasada la centrifugación, estas se explican en la Tabla 1.
Capas formadas posterior a la centrifugación
Éter Se observará de manera superficial, una capa transparente
que contiene el éter, la cual queda de manera superficial
debido a su densidad baja.
Restos La segunda capa que podemos encontrar serán los restos
Fecales fecales los cuales pueden resultar de restos no digeridos
(alimentos) como compuestos lipídicos o carbohidratos.
Formol En la tercera capa, la que ocupará una mayor cantidad de
espacio en el tubo, será el formol.
Sediment Por último, la capa que encontraremos al fondo será
o pequeña, y de sedimento, la cual contendrá los huevos,
quistes y larvas de helmintos.
Tabla 1 Capas formadas posterior a la centrifugación
En los resultados ya antes demostrados, las primeras 3 capas deberán ser decantadas o
retiradas, como resultado se obtiene el sedimento, que podrá ser mezclado con un poco
del líquido que baje por las paredes del tubo, estas pueden ser observadas a través del
microscopio ya sea en fresco o en caso de que quiera ser coloreada se podrá colocar
Lugol, sin embargo su recolección no se basa solo en el decantamiento, ya que existe
una alternativa en el caso de su recolección que se basa en la introducción de una pipeta
Pasteur hasta llegar al sedimento, y extraer una gota del mismo, para realizar la
observación en fresco o Lugol como ya se había mencionado. (2)
Las ventajas que presenta radican en que en el análisis de heces frescas los quistes de
protozoos en la mayoría de ocasiones no se deforman, por lo que su análisis es verídico,
pero a pesar de que puede ser un proceso complejo, su importancia depende del
procedimiento y a la hora de elaborar un resultado, donde casi no contiene márgenes de
error que otros métodos.(3)
Su mayor desventaja es que los huevos no fértiles de algunos parásitos como los áscaris
llegan a flotar, por lo que al momento de la decantación llegan a ser descartados de la
muestra y no pueden ser detectados.(3)
El método de Ritchie se considera como uno de los más certeros y efectivos dentro de
laboratorio, pero existe otra técnica que se desarrolla de la misma manera, pero su
nombre es la “técnica simplificada con formol - éter”(1), su proceso es como su nombre
menciona, más sencillo, más rápido y se desarrolla de la siguiente manera:
- En un tubo se colocarán cantidades iguales de formol al 10% y de solución
salina isotónica.
- Al tubo se agrega 1 gm de materia fecal para poder mezclar y homogenizar con
las sustancias ya antes puestas.
- Se filtrará la sustancia resultante por una gasa doble, hacia un tubo de
centrifugación.
- Se agregarán 3ml de éter en el tubo con el filtrado, se tapará y se agitará para
homogenizar, luego se destapará de manera cuidadosa.
- Centrifugar el tubo a 2000 revoluciones por 2 minutos.
- El resultado será la obtención de las 4 capas ya antes mencionadas, y al igual
que al anterior se deberá decantar o retirar las 3 primeras.
- Como resultado se podrá estudiar el sedimento fecal contaminado con parásitos.
La ventaja que más destaca dentro de este procedimiento es mucho más rápida que la
normal, por lo que se podrá analizar más muestras de diferentes pacientes, con la misma
efectividad, por lo que la obtención de resultados será mucho mayor, mientras que su
desventaja se asemeja a la de Ritchie.
Indicar los materiales que se usan o hemos usado en la práctica
Conclusiones
- Se puede concluir que, dentro de los análisis de laboratorio en el ámbito
parasitario, el uso de técnicas de concentración facilita el estudio y detección de
los mismos dentro de una muestra.
- Como se ha comprobado de manera teórica, el método de Ritchie resulta ser el
más utilizado debido a los resultados que emite donde casi siempre resultan ser
correctos, independientemente de la complejidad que conlleva su uso resulta
efectivo.
- Por último, el método de Ritchie a pesar de ser el más utilizado conlleva
complejidad, por lo que al realizar un método simplificado ampliará el análisis
de muestras con la misma efectividad de resultados.
Referencias Bibliográficas
1. Botero D, Restrepo M. Parasitosis Humana. 5ta edición. Medellín: Panamericana;
2015.
2. Girars, [Link] de parasitología. Técnicas de laboratorios de Atención Primaria de
Salud y para el Diagnóstico de las enfermedades Infecciosas Desatendidas. 3ra
edición. 2014. Honduras. Disponible en: [Link]
3. Medios auxiliares para el diagnóstico de las parasitosis intestinales. Washington,
D.C.: Organización Panamericana de la Salud; 2020. Licencia: CC BY-NC-SA 3.0
IGO. Disponible en: [Link]
Rúbrica: TRABAJO ESCRITO
Presentación del trabajo escrito (Word) en versión digital. Puntaje
Destreza 1 punto 0.5 puntos 0 puntos 0.75
Actitudinal Presenta el primer Presenta el primer No presenta el primer
borrador para su revisión, borrador para su borrador
bajo las normas ya revisión, no cumple
establecidas con las normas
establecidas
0.75 punto 0,5 puntos 0,10 puntos 0.75
1.1 Presenta el trabajo 1.2 Presenta el 1.3 Presenta el trabajo
inicial y final corregido a trabajo inicial y final inicial y final corregido
la hora y fecha corregido con algo con retraso a la hora y
establecida, cuida la de retraso a la hora fecha establecida,
ortografía, sintaxis y y fecha establecida, cuida la ortografía,
utiliza las normas cuida la ortografía, sintaxis y utiliza
Vancouver sintaxis y utiliza Normas Vancouver en
Normas Vancouver menos del 60% del
en el 80% del documento.
documento.
0.75 punto 0,5 puntos 0,0 puntos 0.75
2.1 El documento 2.2 El documento 2.3 El documento
entregado detecta menos entregado detecta entregado detecta más
o hasta del 15% de plagio entre 16 y 20% de del 21% de plagio
plagio
Destreza 0.75 punto 0,5 puntos 0,25 puntos
Cognitiva 3.1 Título, Introducción y 3.2 título, 3.3 Título, Introducción 0.75
objetivos del tema Introducción y y objetivos del tema
cumple las características objetivos del tema cumple menos del 50%
indicadas luego de lo cumple un 70% luego de los indicado
sugerido. luego de lo indicado
1.75 puntos 1 punto 0,5 puntos
4.1 Considera el 100% de 4.2 Considera el 80% 4.3 Considera menos
los aspectos científicos en de los aspectos del 50% de los 1.5
el marco teórico, científicos en el aspectos científicos en
redacción estructurada y marco teórico el marco teórico),
lógica, información redacción redacción estructurada
actualizada, conclusión y estructurada y y lógica, información
bibliografía. lógica, información actualizada, conclusión
actualizada, y bibliografía.
conclusión y
bibliografía.
Subtotal 5p 4.5
Nombre: Ayala Joel
EXPOSICIÓN: desenvolvimiento durante la exposición y estructura de diapositivas. Puntaje
Destreza 1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos 2
Procedimental/ 6.1 Excelente 6.2 Buena 6.3 Aceptable
Actitudinal presentación personal, presentación presentación personal,
saludo a los participantes, personal, saludo a saludo a los
presentación de los los participantes, participantes,
integrantes y el tema, presentación de los presentación de los
entonación y lenguaje integrantes y el integrantes y el tema;
corporal. tema; entonación y entonación y lenguaje
lenguaje corporal. corporal.
2 puntos 1 punto 0,25 puntos 2
7.1 Excelente 7.2 Buen 7.3 Aceptable
conocimiento y conocimiento y conocimiento y
preparación del tema; se preparación del preparación del tema;
expresa con solvencia, tema; se expresa no se expresa con
fluidez y confianza; con solvencia, solvencia, fluidez y
cuantioso vocabulario fluidez y confianza; confianza; limitado
científico pertinente al considerable vocabulario científico
tema. vocabulario pertinente al tema.
científico pertinente
al tema.
1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos 0.75
8.1 Contesta a todas las 8.2 Contesta a casi 8.3 Contesta a algunas
preguntas generadas todas las preguntas preguntas generadas
argumentando las generadas argumentando las
respuestas. argumentando las respuestas.
respuestas.
1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos 1
9.1 En todos los 9.2 En casi todos los 9.3 En algunos
materiales didácticos materiales materiales didácticos
utiliza palabras clave, didácticos utiliza utiliza palabras clave,
diagramas, gráficos, palabras clave, diagramas, gráficos,
resumen explicativo diagramas, gráficos, resumen explicativo
(creatividad), en el resumen explicativo (creatividad), Utiliza el
tiempo establecido (30 (creatividad), utiliza tiempo de manera
min como máximo) y el tiempo inadecuadamente
logra discutir todos los adecuadamente, (termina muy pronto o
aspectos de su trabajo. pero al final tiene no logra terminar su
que cubrir algunos presentación el tiempo
tópicos con prisa. asignado)
Subtotal 5 4.75
Total 5 4.6
Nombre: Quintuña Danna
EXPOSICIÓN: desenvolvimiento durante la exposición y estructura de diapositivas. Puntaje
Destreza 1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos
Procedimental/ 6.1 Excelente 6.2 Buena 6.3 Aceptable 0.5
Actitudinal presentación personal, presentación presentación personal,
saludo a los participantes, personal, saludo a saludo a los
presentación de los los participantes, participantes,
integrantes y el tema, presentación de los presentación de los
entonación y lenguaje integrantes y el integrantes y el tema;
corporal. tema; entonación y entonación y lenguaje
lenguaje corporal. corporal.
2 puntos 1 punto 0,25 puntos 1.5
7.1 Excelente 7.2 Buen 7.3 Aceptable
conocimiento y conocimiento y conocimiento y
preparación del tema; se preparación del preparación del tema;
expresa con solvencia, tema; se expresa no se expresa con
fluidez y confianza; con solvencia, solvencia, fluidez y
cuantioso vocabulario fluidez y confianza; confianza; limitado
científico pertinente al considerable vocabulario científico
tema. vocabulario pertinente al tema.
científico pertinente
al tema.
1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos 0.5
8.1 Contesta a todas las 8.2 Contesta a casi 8.3 Contesta a algunas
preguntas generadas todas las preguntas preguntas generadas
argumentando las generadas argumentando las
respuestas. argumentando las respuestas.
respuestas.
1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos 1
9.1 En todos los 9.2 En casi todos los 9.3 En algunos
materiales didácticos materiales materiales didácticos
utiliza palabras clave, didácticos utiliza utiliza palabras clave,
diagramas, gráficos, palabras clave, diagramas, gráficos,
resumen explicativo diagramas, gráficos, resumen explicativo
(creatividad), en el resumen explicativo (creatividad), Utiliza el
tiempo establecido (30 (creatividad), utiliza tiempo de manera
min como máximo) y el tiempo inadecuadamente
logra discutir todos los adecuadamente, (termina muy pronto o
aspectos de su trabajo. pero al final tiene no logra terminar su
que cubrir algunos presentación el tiempo
tópicos con prisa. asignado)
Subtotal 5 3.5
Total 5 4
Nombre: Guerrero Erick
EXPOSICIÓN: desenvolvimiento durante la exposición y estructura de diapositivas. Puntaje
Destreza 1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos
Procedimental/ 6.1 Excelente 6.2 Buena 6.3 Aceptable
Actitudinal presentación personal, presentación presentación personal,
saludo a los participantes, personal, saludo a saludo a los 1
presentación de los los participantes, participantes,
integrantes y el tema, presentación de los presentación de los
entonación y lenguaje integrantes y el integrantes y el tema;
corporal. tema; entonación y entonación y lenguaje
lenguaje corporal. corporal.
2 puntos 1 punto 0,25 puntos 1.75
7.1 Excelente 7.2 Buen 7.3 Aceptable
conocimiento y conocimiento y conocimiento y
preparación del tema; se preparación del preparación del tema;
expresa con solvencia, tema; se expresa no se expresa con
fluidez y confianza; con solvencia, solvencia, fluidez y
cuantioso vocabulario fluidez y confianza; confianza; limitado
científico pertinente al considerable vocabulario científico
tema. vocabulario pertinente al tema.
científico pertinente
al tema.
1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos 1
8.1 Contesta a todas las 8.2 Contesta a casi 8.3 Contesta a algunas
preguntas generadas todas las preguntas preguntas generadas
argumentando las generadas argumentando las
respuestas. argumentando las respuestas.
respuestas.
1 punto 0,5 puntos 0,25 puntos 1
9.1 En todos los 9.2 En casi todos los 9.3 En algunos
materiales didácticos materiales materiales didácticos
utiliza palabras clave, didácticos utiliza utiliza palabras clave,
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(creatividad), en el resumen explicativo (creatividad), Utiliza el
tiempo establecido (30 (creatividad), utiliza tiempo de manera
min como máximo) y el tiempo inadecuadamente
logra discutir todos los adecuadamente, (termina muy pronto o
aspectos de su trabajo. pero al final tiene no logra terminar su
que cubrir algunos presentación el tiempo
tópicos con prisa. asignado)
Subtotal 5 4.75
Total 5 4.62