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𝐔𝐍𝐈𝐕𝐄𝐑𝐒𝐈𝐃𝐀𝐃 𝐍𝐀𝐂𝐈𝐎𝐍𝐀𝐋 𝐃𝐄 𝐉𝐀𝐄𝐍
𝐂𝐀𝐑𝐑𝐄𝐑𝐀 𝐏𝐑𝐎𝐅𝐄𝐒𝐈𝐎𝐍𝐀𝐋 𝐃𝐄 𝐓𝐄𝐂𝐍𝐎𝐋𝐎𝐆Í𝐀 𝐌É𝐃𝐈𝐂𝐀
𝐂𝐔𝐑𝐒𝐎 𝐃𝐄 𝐈𝐍𝐓𝐑𝐎𝐃𝐔𝐂𝐂𝐈Ó𝐍 𝐀 𝐋𝐀 𝐓𝐄𝐂𝐍𝐎𝐋𝐎𝐆Í𝐀 𝐌É𝐃𝐈𝐂𝐀
“HEMOGRAMA”
𝐏𝐑𝐄𝐒𝐄𝐍𝐓𝐀𝐃𝐎 𝐏𝐎𝐑:
𝐕𝐈𝐂𝐓𝐎𝐑 𝐇𝐔𝐆𝐎 𝐏𝐔𝐈𝐂𝐀𝐍 𝐑𝐈𝐌𝐀𝐏𝐀
𝐃𝐎𝐂𝐄𝐍𝐓𝐄:
𝐅𝐄𝐑𝐍Á𝐍𝐃𝐄𝐙 𝐆𝐔𝐄𝐑𝐑𝐄𝐑𝐎 𝐑𝐎𝐁𝐄𝐑𝐓 𝐌𝐀𝐍𝐔𝐄𝐋
𝐉𝐀𝐄𝐍-𝐏𝐄𝐑Ú
𝟐𝟎𝟐𝟐
I. INTRODUCCIÓN
El hemograma es uno de los exámenes de laboratorio solicitado con
mayor frecuencia y forma parte del estudio básico requerido para
orientación diagnóstica y evaluación de los pacientes.
La vigencia de este examen se ha mantenido desde la introducción de los
clásicos índices eritrocitarios descritos por Wintrobe en los años 30,
evolucionando con la automatización de los recuentos celulares
desarrollada por Coulter en los años 50 y la incorporación de nuevos
parámetros como amplitud de distribución eritrocitaria (ADE/RDW) y
plaquetaria (ADP/PDW) entregados actualmente por autoanalizadores de
última generación.
II. OBJETIVOS:
Objetivo General:
➢ Identificar todos los elementos necesarios para realizar una lectura
correcta del hemograma completo y saber como es que se realiza.
Objetivos específicos:
➢ Determinar y analizar los valores normales a tener en cuenta de las
células sanguíneas.
➢ Observar y identificar cuales son los factores influyentes en el
hemograma que modifica los valores normales de las células
sanguíneas.
➢ Tener una noción científica de como se realiza el extendido y saber
que células sanguíneas se toman en cuenta en el hemograma.
III. MATERIALES
✓ Lamina porta objetos
✓ Capilar
✓ Plastilina, jabón
✓ Cartilla para leer el hematocrito
✓ Micro pipeta
✓ Puntera color amarillo,
✓ Puntera color azul
✓ Tubos de ensayo de 5 ml
✓ Reactivo de Turk
✓ Oxalato de amonio 1%
✓ Reactivo de Gruite
✓ Aceite inversión
✓ Tuvo con sangre EDTA
✓ Microscopio
IV. PROCEDIMIENTO.
Homogenizamos el tubo de EDTA que contiene la muestra de sangre de
8 a 10 veces tomamos un capilar y procedemos a llenarlo por la parte por
donde no está la tira roja colocamos una gota de sangre del capilar en una
lámina realizamos nuestro extendido inmediatamente (dejamos secar)
tomamos el capilar para sellarlo por un extremo con plastilina y lo
volvemos a sellar con un poco de jabón llevamos el hematocrito a la
micro centrifuga y centrifugamos a 10,000RPM por 5 minutos.
Lectura de la hemoglobina y el hematocrito:
Luego de haber dejado centrifugar el hematocrito procedemos a dar
lectura con ayuda de la cartilla Según cuánto sea la medida del
hematocrito vamos a lograr obtener la hemoglobina.
¿Por qué necesito una prueba de hematocrito?
Su profesional de la salud puede solicitar una prueba de hematocrito
como parte de un control de rutina o para monitorear su salud si está
siendo tratado por cáncer o tiene una afección. Su profesional de la salud
también puede pedir esta prueba si tiene síntomas de un trastorno de los
glóbulos rojos como anemia o policitemia vera
Un nivel de hematocrito más bajo de lo normal puede ser signo de:
✓ Su cuerpo no tiene suficientes glóbulos rojos (anemia). Hay
muchos tipos de anemia que pueden ser causados por diferentes
afecciones
Su cuerpo está produciendo demasiados glóbulos blancos, lo cual
puede ser causado por:
✓ Enfermedad de la médulo ósea
✓ Ciertos tipos de cancer, incluyendo leucemia, linfoma, mieloma
múltiple o cánceres que se extienden a la médula ósea de otras
partes del cuerpo
Un nivel de hematocrito que es más alto de lo normal puede ser un signo
de :
Su cuerpo está produciendo demasiados glóbulos rojos, lo cual puede ser
causado por:
✓ Enfermedad pulmonar
✓ Enfermedad cardíaca congénita
✓ Insuficiencia cardíaca
✓ Policitemia vera
Si sus niveles de plasma están demasiado bajos, puede ser causado por:
✓ Deshidratación, la causa más común de niveles altos de
hematocrito
✓ Shock
VCM HCM CHCM
Se obtiene por la adaptación de la fórmula de Wintrobe, donde el hematocrito
manual es sustituido por el hematocrito automatizado, que se calcula por
medio de la multiplicación del VCM por el número de eritrocitos divididos
por 10: CHCM = Hb x 100 / (VCM x GR/10).
Procedimiento de leucocitos y plaquetas
Leucocitos
Rotulamos dos tubos de ensayo uno para glóbulos blancos y otro para las
plaquetas con la ayuda de una micropipeta de 100 a 1000 y una puntera color
azul aspiramos 380ul de reactivo de Turk y llevamos al tubo de glóbulos
blancos seguidamente agregamos 20ul de la sangre de la muestra a analizar
se debe homogenizar la sangre y el reactivo de Turk y se deja reposar por 10
minutos.
Llenas la cámara Neubauer con el contenido del tubo que preparaste los
glóbulos blancos deben estar debidamente homogenizados antes de proceder
al llenado de la cámara llevas al cámara al microscopio y observas con el
objetivo de 10X se debe de leer 4 campos la sumatoria de las lectura de los
4 campos de debe multiplicar por 50 para obtener el resultado
Plaquetas
Rotulamos dos tubos de ensayo uno para glóbulos blancos y otro para las
plaquetas con la ayuda de una micropipeta de 100 a 1000 y una puntera color
azul aspiramos 380ul de Oxalato de Amonio al 1% y llevamos al tubo de
glóbulos blancos seguidamente agregamos 20ul de la sangre de la muestra a
analizar se debe homogenizar la sangre y el oxalato de amonio y se deja
reposar por 10 minutos.
Llenas la cámara Neubauer con el contenido del tubo que preparaste los
Plaquetas deben estar debidamente homogenizados antes de proceder al
llenado de la cámara procedemos a sedimentar las plaquetas en un paño
húmedo por 10 minutos luego de trascurrir el tiempo de sedimentación de
las plaquetas procedemos a dar lectura en el microscopio luego de haber
enfocado en el objetivo de 10X enfocas con el objetivo de 40X y das lectura
a las 5 campos la sumatoria de las lectura de los 5 campos de debe multiplicar
por 1000 para obtener el resultado Agregamos una gota de aceite de
inmersión entre el cuerpo y la cola para proceder a leer
TÉCNICA PARA EXTENDIDOS SANGUÍNEOS EN CUBREOBJETOS:
Esta técnica se prefiere para obtener la mejor definición y distribución
celular posible. Se realiza de la siguiente manera:
1. Colocar en el centro del cubreobjetos una gota de sangre de unos 2 mm de
diámetro, aprox.
2. Inmediatamente, colocar un segundo cubreobjetos sobre el primero, en
una posición rotada de 900 respecto al primero, de tal modo que los ángulos
puedan ser fácilmente cogidos entre los dedos pulgar e índice de la mano
libre. Los dos cubreobjetos estarán formando una “estrella de ocho picos”.
3. La sangre se extenderá de inmediato como una delgada película uniforme;
enseguida que ha dejado de extenderse, los cubreobjetos se separan
suavemente por un movimiento de deslizamiento en el mismo plano, sin
separar las superficies. Si no se eleva ningún cubreobjetos, aparecerá una
fina y uniforme extensión de sangre en cada uno de ellos. El grosor de la
extensión dependerá únicamente de la cantidad de sangre aplicada, por lo
que es muy importante calcularla bien.
4. Secar de inmediato soplando vigorosamente con un pedazo de cartón o
una secadora eléctrica.
5. Identificar la preparación.
VENTAJAS:
1. Se obtiene una distribución celular uniforme.
2. Los frotis tienen gran definición.
3. Se pueden montar 2 ó 3 en un portaobjetos, para su lectura.
DESVENTAJAS:
1. Son difíciles de rotular.
2. Es difícil manipularlos.
3. Se rompen con facilidad.
4. Su conservación es problemática.
5. El proceso de tinción es difícil.
TÉCNICA PARA EXTENDIDOS SANGUÍNEOS EN PORTAOBJETOS:
FROTIS LONGITUDINAL: Estas extensiones son preferidas a las
anteriores porque son más fáciles de manipular, se rompen menos, se rotulan
con facilidad y no requieren montaje. La manera de hacerlas es la siguiente:
1. Colocar una gota de sangre de 2 a 3 mm de diámetro a 1 ó 2
centímetros del borde del portaobjetos, colocando éste en posición
horizontal sobre la mesa de trabajo.
2. Colocar un segundo portaobjetos (extensor) de modo que forme un
ángulo de 300 con el portaobjetos horizontal, con su eje mayor
paralelo a él. El borde más abajo del portaobjetos extensor, que debe
ser liso y regular, se aplica firmemente sobre la superficie del primero,
de manera que la gota de sangre esté por debajo de él. Entonces, el
segundo portaobjetos se desliza lentamente hacia la sangre hasta que
se produzca el contacto, después del cual la sangre se deslizará
uniformemente entre la superficie de contacto de ambos portaobjetos.
3. El portaobjetos extensor es movido rápida y suavemente en dirección
opuesta, manteniendo el contacto y el ángulo entre los dos
portaobjetos. La extensión formada debe ser uniforme y de
aproximadamente la mitad de la longitud de la laminilla. El grosor de
la extensión y del ángulo en que se sitúa éste: a mayor ángulo mayor
grosor, a mayor velocidad, menor grosor.
4. Una vez que la sangre se ha extendido, se procede a secar rápidamente
el frotis, soplando vigorosamente con un cartón o usando una secadora
eléctrica. Esto se hace con la finalidad de evitar el apilamiento de los
eritrocitos (Rouleaux) y de que los leucocitos permanezcan extendidos
sobre el portaobjetos, de lo contrario, tienden a regresar a su forma
original dificultando su observación. Nunca se debe secar soplando
con la boca pues el aire húmedo ocasionaría alteraciones
morfológicas.
VENTAJAS:
1. Son fáciles de manipular, teñir y rotular.
2. Son los más sencillos de realizar.
3. Su conservación es sencilla.
4. Son muy útiles para examinar eritrocitos.
DESVENTAJAS:
1. La distribución de leucocitos no es homogénea pues las células más
grandes, como polimorfonucleares y monocitos, tienden a
acumularse cerca de los extremos.
Coloración de la Lámina
Luego de haber dejado secar la lámina del extendido se procede a la
coloración con grité agregamos colorante a la lámina de nuestro extendido
dejamos reposar por 7 minutos al pasar los 7 minutos agregamos agua
destilada Soplamos hasta que salga un verde metálico y dejamos reposar por
5 minutos. Al pasar los 5 minutos procederemos a lavar la lámina y dejamos
secar para después observar al microscopio.
V. CONCLUSIONES:
➢ El extendido sanguíneo es un estudio que brinda información
precisa acerca de la distribución, morfología normal y patológica
de leucocitos, eritrocitos, y plaquetas.
➢ Permite una mejor distribución celular de muestras provenientes de
pacientes con leucopenias importantes.
➢ Tiene dos formas de lectura, que nos permiten apreciar de manera
rápida y critica las alteraciones. morfológicas de todas las líneas
celulares, determinando anormalidades en forma, tamaño, color e
inclusiones citoplasmáticas, dando una medida cuantitativa y
cualitativa de los elementos que lo conforman.
➢ El conteo de este tipo de células permite confirmar el diagnóstico
de algunas enfermedades, según si estas células están sobre o bajo
el rango normal. También permite detectar respuestas adversas a
diferentes tratamientos.
VI. ANEXOS.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
➢ [Link]
de-hemoglobina/
➢ [Link]
procedures/hematocrit/about/pac-20384728
➢ [Link]
[Link]
➢ [Link]
[Link]