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Tinción de Gram y Ziehl-Neelsen en Microbiología

El documento presenta información sobre diferentes bacterias y su visualización mediante la tinción de Ziehl-Neelsen o Gram. Describe las características de Mycobacterium, Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Staphylococcus epidermidis y Streptococcus pneumoniae y cómo se ven al microscopio utilizando diferentes técnicas de tinción.
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Tinción de Gram y Ziehl-Neelsen en Microbiología

El documento presenta información sobre diferentes bacterias y su visualización mediante la tinción de Ziehl-Neelsen o Gram. Describe las características de Mycobacterium, Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Staphylococcus epidermidis y Streptococcus pneumoniae y cómo se ven al microscopio utilizando diferentes técnicas de tinción.
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UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER

Autores:

HUARANCA PEREZ, KARIN NAYELI

CHAVEZ ALIAGA, YADHIRA ABIGAIL

LEIVA OBISPO, MARIA LUISA KARIN

Docente:

Dra. Susan Celina Lopez Gonzales de Diaz

Curso:

Microbiología e inmunología aplicada a la estomatología

Lima - Perú

2023
INTRODUCCIÓN

Una de las características más importantes de los microorganismos es su capacidad para


presentar la tinción o también no hacerlo. Esto permite diferenciarlos en Gram positivos y
Gram negativos.

Los microorganismos que son gram positivos tienen una pared celular gruesa compuesta
peptidoglicano, lo que les permite absorber y mostrarnos un color púrpura.
Los microorganismos gram negativos tienen en su estructura una pared celular delgada
compuesta por una capa externa de lipopolisacáridos y una capa intermedia de
peptidoglicanos. No retienen la tinción de cristal violeta, pero sí la tinción con el contraste de
safranina, apareciendo de color rosa al osbservar en el microscopio.

La técnica de Ziehl - Neelsen se utiliza para identificar bacterias ácido - alcohol resistentes,
como las del género Mycobacterium, que causan enfermedades como la tuberculosis. Esta
técnica utiliza fucsina básica y calor para atravesar la pared celular lipídica y teñir el ácido
micólico, probocando a las bacterias ácido - alcohol que son resistentes aparezcan de color
rojo brillante a la vista en el microscopio.
MYCOBACTERIUM- ZIEHL NEELSEN

Son bacilos Gram positivo, ácido-alcohol


resistentes, con un tamaño entre 0,2-0,7
x 1-10 micras (µm), ligeramente
curvados, aerobios estrictos, inmóviles,
no formadores de esporas ni cápsulas y
de crecimiento lento.

Comparten una característica pared


celular, más gruesa que la de muchas
otras bacterias, hidrofóbica, cerosa, y
rica en ácidos micólicos/micolatos.
Además, su pared celular proporciona
una contribución sustancial a la
resistencia de este género de bacterias.

La temperatura óptima de crecimiento varía ampliamente según la especie desde 25


ºC a más de 40 °[Link] especies de Mycobacterium se adaptan fácilmente al
crecimiento en sustratos muy simples, utilizando amoníaco o aminoácidos como
fuentes de nitrógeno y glicerol como fuente de carbono en presencia de sales
minerales.

En este caso se puede observar en el microscopio a un Mycobacterium con la


técnica de coloración Ziehl Neelsen. Está tinción se basa en colocar carbol-fucsina y
calentar la preparación ligeramente para solubilizar las ceras, lípidos y otros ácidos
grasos de la pared celular para que permita el paso libre del colorante, el cual tiene
una enorme afinidad por los ácidos micólicos presentes en la pared. Al enfriar con
agua, los componentes de la pared vuelven a solidificar, resistiendo la acción
abrasiva del alcohol-ácido, donde el azul de metileno se utiliza como contratinción
para que las bacterias se tiñen de azul.
NEISSERIA MENINGITIDIS - ZIEHL NEELSEN

Neisseria meningitidis o meningococo es


una bacteria Gram-negativa,
oxidasa-positiva, aeróbica, que
microscópicamente aparece como
diplococos.
La bacteria se transmite de persona a
persona a través de gotículas de las
secreciones respiratorias o de la garganta.
La propagación de la enfermedad se ve
facilitada por el contacto estrecho y
prolongado (besos, estornudos, tos,
dormitorios colectivos, vajillas y cubiertos
compartidos) con una persona infectada. El
periodo de incubación medio es de 4 días,
pero puede oscilar entre 2 y 10 días.

Los síntomas más frecuentes son rigidez de nuca, fiebre elevada, fotosensibilidad,
confusión, cefalea y vómitos. Incluso cuando se diagnostica tempranamente y recibe
tratamiento adecuado, un 5 a 10% de los pacientes fallece, generalmente en las
primeras 24 a 48 horas tras la aparición de los síntomas.

Se puede observar en el microscopio la bacteria Neisseria meningitidis con la


coloración de Ziehl Neelsen siendo un método de tinción que permite un diagnóstico
rápido.
NEISSERIA GONORRHOEAE - GRAM NEGATIVA

Es un diplococo Gram negativo de


tamaño que fluctúa entre 0,6 y 1 µm de
diámetro, siendo el tamaño promedio de
0,8 µm de diámetro. Los
microorganismos se visualizan al
microscopio óptico como diplococos
intracelulares, dentro de los neutrófilos.
Los humanos son los únicos
hospedadores naturales del gonococo,
el cual se transmite por vía sexual
(anales, vaginales u orales).
Puede causar infecciones en los
genitales, el recto y la garganta. Una
mujer embarazada con gonorrea puede
transmitirla a su bebé durante el parto,
algunos hombres con gonorrea no presenten ningún síntoma. Sin embargo, los
hombres que presentan síntomas pueden tener sensación de ardor al orinar,
secreción de color blanco, amarillo o verde del pene y dolor o inflamación en los
testículos. Los síntomas en las mujeres pueden ser muy leves o inespecíficos y se
pueden confundir con otro tipo de infección.
Estos síntomas comprenden dolor o sensación de ardor al orinar, aumento de la
secreción vaginal y sangrado vaginal entre períodos.
Mediante un cultivo es el método estándar para el diagnóstico. Las técnicas de
amplificación de ácidos nucleicos basadas en PCR se caracterizan por su rapidez y
por tener una sensibilidad similar a la del cultivo pero mayor especificidad.
También se puede realizar el diagnóstico visualizando al microscopio una tinción de
Gram pero la sensibilidad no llega al 50%.
El tratamiento de la gonorrea es complicado debido a la capacidad de N.
gonorrhoeae de desarrollar resistencia a los antimicrobianos. Actualmente se está
recomendando una tratamiento combinado de dos antimicrobianos con diferentes
mecanismos de acción (por ejemplo, cefalosporina y azitromicina) para mejorar la
eficacia del [Link] con uretritis asintomática, o en muestras cervicales
o rectales.
STAPHYLOCCUS EPIDERMIDIS - ZIEHL NEELSEN

El Staphylococcus epidermidis es una

bacteria gram positiva que está

presente de manera natural en la piel y

forma parte de la microbiota normal de

la superficie corporal, sin causar daño

al organismo, cuando se mantiene en

equilibrio. Es considerado una agente

oportunista, pues suele causar

infecciones nosocomiales, es decir,

que ocurren cuando la persona se encuentra hospitalizada, debido a que puede

crecer fácilmente en dispositivos médicos y prostéticos, entrando de esta forma al

torrente sanguíneo y ocasionando síntomas como fiebre, dolor de cabeza y malestar

general. Para detectar esta bacteria, el médico deberá solicitar algunos exámenes

de diagnóstico, como la prueba de la coagulasa o un hemocultivo, por ejemplo, de

manera de iniciar el tratamiento adecuado lo más pronto posible. Si la infección por

Staphylococcus epidermidis no es controlada a tiempo, es posible que la bacteria

ocasiona una sepsis, es decir, una infección generalizada que se propaga por todo

el cuerpo a través del torrente sanguíneo, así como un shock séptico, poniendo la

vida de la persona en riesgo.


STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE - GRAM POSITIVO

Streptococcus pneumoniae es un tipo


de bacteria que puede provocar
infecciones en varias partes del cuerpo
como en los pulmones, la sangre y el
revestimiento del cerebro. También se
le reconoce como neumococo.
Se transmite por gotitas respiratorias al
toser o estornudar, también se puede
transportar por la nariz y la garganta
sin causar enfermedad.

La prevención para esta bacteria es la


vacuna antineumocócica conjugada
(PCV) o la vacuna antineumocócica
polisacárida (PPV).

Se puede observar en el microscopio haciendo uso de una técnica de tinción de


Gram. Al realizar esta técnica, las bacterias se tiñen de morado oscuro o violeta y se
pueden ver como pequeñas esferas o cocos que forman unas cadenas bajo el
microscopio.
El Streptococcus pneumoniae se caracteriza por presentar una cápsula alrededor de
la célula, que se va a notar a través de una técnica de tinción especial llamada
tinción de cápsula. La cápsula aparecerá mostrando una zona clara alrededor de la
célula que no se tiñe y le confiere a la bacteria la capacidad de resistir la fagocitosis
por parte del sistema inmunológico.

Sabemos que es gram positivo debido a la composición de su pared celular. Está


compuesta principalmente de peptidoglicano, una molécula que le confiere rigidez y
protección contra la lisis (destrucción) osmótica.
Cuando se realiza la tinción de Gram, las bacterias se tiñen con cristal violeta y
luego se lavan con alcohol-acetona. En esta bacteria como contiene peptidoglicano
en su pared celular por ende retiene el colorante cristal violeta, esto va a provocar
que se le otrogue un color violeta intenso al observar en el microscopio.
Además cabe destacar que su pared contiene ácido teicoico y lipoteicoico, que son
moléculas que se unen al cristal violeta la cual van a contribuir a su tinción.
CONCLUSIÓN:

Las láminas en microbiología son una herramienta esencial para el estudio de


microorganismos y su identificación. Las técnicas de tinción de Gram permiten diferenciar
los microorganismos en Gram positivos y Gram negativos, debido a que nos va ayudar a la
identificación y tratamiento de enfermedades infecciosas. La técnica de tinción de
Ziehl-Neelsen es importante para la identificación de bacterias ácido-alcohol resistentes.
REFERENCIAS:

● [Link]. [citado el 26 de abril de 2023]. Disponible en:

[Link]

ocos-grampositivos/infecciones-por-neumococos

● Ejercicio. • Introducción [Internet]. [Link]. [citado el 26 de abril de 2023].

Disponible en:

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Morfolog%C3%ADa_y_Tinci%C3%[Link]

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● Graterol R Oswaldo A, Barreto E Michel E, Ramos Nidian A, Fernández F

Sandra, Da Mata J Omaira J, Angulo José A. Diseño del Kit de Tinción Ziehl

Neelsen del Instituto Nacional de Higiene “Rafael Rangel”. INHRR [Internet].

2016 Dic [citado 2023 Abr 26] ; 47( 1-2 ): 18-26. Disponible en:

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● Garcia Apac, Coralith; Pardo Valdespino, Juan; Seas Ramos, Carlos (citado

2003 octubre4)

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00400012
● Germán Pardi, María Fernanda Pérez, Aura Pacheco, Magdalena Mata de

Henning. Caracas 2004.

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0011

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