MITOSIS EN CÉLULAS DE RAÍZ DE CEBOLLA
La mitosis (del griego mitos, hebra) es un proceso que ocurre en el núcleo de las célu-
las eucarióticas y que precede inmediatamente a la división celular, consistente en el
reparto equitativo del material hereditario (ADN) característico. Este tipo de división
ocurre en las células somáticas y normalmente concluye con la formación de dos nú-
cleos separados (cariocinesis), seguido de la partición del citoplasma (citocinesis), para
formar dos células hijas.
La mitosis completa, que produce células genéticamente idénticas, es el fundamento
del crecimiento, de la reparación tisular y de la reproducción asexual.
Fases del ciclo celular
El ciclo celular es el proceso que ocurre desde que se origina una célula hasta que se
divide. Comprende una serie de fases :
-Fase G1: la célula crece, fabrica orgánulos, enzimas, etc, y se encuentra en un estado
metabólicamente activo.
-Fase S: la célula duplica su material genético.
-Fase G2: continua la actividad metabólica y comienzan a acontecer los cambios ultra-
estructurales que conducirán a la división celular.
-Fase M: fase de separación del material genético en las células hijas. Pueden ocurrir
dos procesos:
-Mitosis: las dos células hijas son genéticamente idénticas. Da lugar a la renova-
ción celular y al crecimiento. Se trata de CELULAS SOMÁTICAS. Estas células son diploi-
des, porque contienen dos cromosomas de cada tipo.
-Meiosis: a partir de 1 célula madre se forman cuatro células hijas genética-
mente diferentes entre sí y a las de la madre, con la mitad de material genético que la
célula progenitora. Se trata por tanto de células haploides porque contienen un cro-
mosoma de cada tipo. Están destinadas formar gametos o CÉLULAS REPRODUCTORAS,
que se combinarán con otra del sexo opuesto para dar lugar a la formación de la pri -
mera célula diploide de un ser vivo o zigoto.
La mitosis
La mitosis comprende las siguientes etapas:
-Profase: esta primera etapa, el material cromosómico llamado cromatina se condensa
y aparece gradualmente como barras cortas y los cromosomas pueden comenzar a
observarse con el microscopio.
Cada cromosoma presenta dos mitades llamadas cromátidas, idénticas, de manera que
cada una está destinada a ir una de las células resultantes de la mitosis. A medida que
los cromosomas se hacen más visibles ocurren dos eventos dentro de la célula, la
membrana del núcleo y una porción contenida en él llamada nucléolo se desintegran y
aparece una nueva estructura tridimensional en forma de balón de futbol americano
denominada huso mitótico. Consiste de microtúbulos que se extienden por la célula.
Las fibras del huso mitótico guían a los cromosomas en sus movimientos durante la
mitosis
-Metafase: es la segunda etapa de la mitosis durante la cual los pares de cromátidas se
mueven hacia el centro o ecuador de la célula. Las cromátidas se disponen en una fila
en el centro del huso mitótico.
-Anafase: las dos cromátidas que forman cada cromosoma se van separando, hacia los
dos polos de las células hijas.
-Telofase: las cromátidas han llegado a los polos, y los cromosomas se van
descondensando.
-Citocinesis: última fase del proceso en la que tiene lugar la división del citoplasma
rodeado de membrana en las dos células hijas resultantes.
PROFASE
METAFASE
ANAFASE
TELOFASE
Observación de las fases de la mitosis en cebolla
MATERIALES
Microscopio Frasco lavador
Portaobjetos Mechero
Cubreobjetos Tijeras
Lanceta estéril Papel de filtro
Pipeta pasteur Vaso de precipitados
Aguja enmangada Vidrio de reloj
Pinzas
Palillos Orceína acética A y B
Bulbos de ajo y cebolla
Metanol : ácido acéti-
co 1:1
1. PREPARACIÓN DE LA ORCEÍNA
Orceina A
2 g orceina
45,8 ml acético glacial
8,3 ml HCl 1M
45,8 ml agua destilada
Mezclar en agitación hasta ebullición, dejar 2 min ebullición
Reposar 24 h y filtrar
Orceina B
2 g orceina
50 ml acido acético
50 ml agua
Mezclar en agitación hasta ebullición, dejar 2 min ebullición
Reposar 24 h y filtrar
BASE QUÍMICA DE LA TINCIÓN
La orceína es un colorante básico que tiñe a la cromatina y a los cromosomas de un
color morado. Tiene afinidad por el ADN ya que se une a la carga negativa del
esqueleto de fosfatos del ADN.
2. TÉCNICA
1. Llenar un vaso de precipitados con agua y colocar un bulbo de cebolla sujeto
con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el
agua. Al cabo de 3-4 días aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de
unos 3 o 4 cm de longitud.
2. Cortar con las tijeras unos 2-3 mm del extremos de las raicillas y depositarlo en
un vidrio de reloj en el que se han vertido 2-3 ml de fijador y fijar 10’.
3. Retirar el fijador y añadir unas gotas de orceína acética A durante 8-10’.
4. Tomar el vidrio de reloj por los bordes con una pinza y calentar suavente a la
llama de un mechero, evitando ebullición y esperar a que emita vapores te-
nues.
5. Tomar con las pinzas dos o tres raicillas, colocándolas sobre un portaobjetos y
añadir unas gotas de orceina B, esperar 2’.
6. Separar con un cutter el ápice de las raicillas del resto, unos 2-3 mm, y retirar
el fragmento de raíz sobrante.
7. Colocar el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con el mango de una
aguja enmangada dar unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que
la raíz quede extendida.
8. Sobre la preparación colocar unas tiras de papel de filtro, 5 o 6. Poner el dedo
pulgar sobre el papel de filtro en la zona del cubreobjetos y hacer una suave
presión, evitando que el cubre resbale. Si la preparación está bien asentada no
hay peligro de rotura por mucha presión que se realice.
9. Observar al microscopio.
10.
ACTIVIDAD 1: PREPARACIÓN DE LOS COLORANTES
Prepara 50 ml de cada una de las dos soluciones de orceína
ACTIVIDAD 2: LOCALIZACIÓN DEL ÁREA RADICULAR DONDE TIENE LUGAR LA MITOSIS
Observa la preparación y con el objetivo de 10x haz un esquema del ápice de la raíz
indicando en qué zona observarías las células en mitosis.
ACTIVIDAD 3: RECONOCIMIENTO Y OBSERVACIÓN DE LAS DIFERENTES FASES DE LA
MITOSIS
Identifica y dibuja las diferentes fases de la mitosis
Fase S1 Profase
Metafase Anfase
Telofase Citocinesis